Ana что это в анализе крови
Антитела к ядерным антигенам (ANA), скрининг
Общая информация об исследовании
Антитела к ядерным антигенам (ANA) – это гетерогенная группа аутоантител, направленных против компонентов собственных ядер. Они выявляются в крови пациентов с разнообразными аутоиммунными заболеваниями, такими как системные заболевания соединительной ткани, аутоиммунный панкреатит и первичный билиарный цирроз, а также с некоторыми злокачественными новообразованиями. Исследование ANA используется в качестве скрининга аутоиммунных заболеваний у пациента с клиническими признаками аутоиммунного процесса (длительная лихорадка неясного генеза, суставной синдром, кожные высыпания, слабость и др.). Такие пациенты при положительном результате анализа нуждаются в дальнейшем лабораторном обследовании, включающем более специфичные для каждого аутоиммунного заболевания тесты (например, анти-Scl-70 при подозрении на системную склеродермию, антитела к митохондриям при подозрении на первичный билиарный цирроз). Следует отметить, что отрицательный результат исследования ANA не исключает наличия аутоиммунного заболевания.
ANA наиболее характерны для пациентов с системной красной волчанкой (СКВ). Они обнаруживаются у 98 % больных ею, что позволяет считать это исследование основным тестом для диагностики СКВ. Высокая чувствительность ANA в отношении СКВ означает, что повторные отрицательные результаты делают диагноз «СКВ» сомнительным. При этом отсутствие ANA полностью не исключает заболевания. У небольшой части больных ANA отсутствуют на момент появления симптомов СКВ, но возникают в течение первого года болезни. У 2 % больных антитела к ядерным антигенам не выявляются никогда. При отрицательном результате анализа у пациента с симптомами СКВ целесообразно провести более специфичные для СКВ лабораторные тесты, в первую очередь на антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA). Выявление анти-dsDNA у пациента с клиническими признаками СКВ трактуется в пользу диагноза «СКВ» даже при отсутствии ANA.
СКВ возникает в результате комплекса иммунологических нарушений, развивающихся в течение длительного времени. Степень дисбаланса иммунной системы с течением болезни постепенно нарастает, что находит свое отражение в увеличении спектра аутоантител. Первый этап аутоиммунного процесса характеризуется наличием генетических особенностей иммунного ответа (например, определенных аллелей главного комплекса гистосовместимости, HLA) при отсутствии отклонений лабораторных исследований. На втором этапе в крови удается выявить аутоантитела, при этом клинических признаков СКВ нет. Антитела к ядерным антигенам, а также анти-Ro-, анти-La-, антифосфолипидные антитела наиболее часто выявляются на этом этапе. Обнаружение ANA ассоциировано с 40-кратным увеличением риска СКВ. Период между появлением ANA и развитием клинических симптомов бывает разным и составляет в среднем 3,3 года. Пациенты с положительным результатом анализа на ANA относятся к группе риска по развитию СКВ и нуждаются в периодическом наблюдении у ревматолога и в лабораторном обследовании. Третий этап аутоиммунного процесса характеризуется появлением симптомов болезни, при этом в крови удается обнаружить наиболее широкий спектр аутоантител, включая анти-Sm-антитела, антитела к двухцепочечной ДНК и рибонуклеопротеину. Таким образом, для получения полной информации о степени иммунологических нарушений при СКВ тест на ANA необходимо дополнять анализом на другие аутоантитела.
Течение СКВ варьируется от стойкой ремиссии до фульминантного люпус-нефрита. Чтобы дать прогноз заболевания, оценить его активность и эффективность лечения, используют различные клинические и лабораторные критерии. Так как ни один из тестов не позволяет однозначно предсказать обострение или поражение внутренних органов, мониторинг СКВ – это всегда комплексная оценка, включающая исследование ANA, а также других аутоантител и некоторых общеклинических показателей. На практике врач самостоятельно определяет набор тестов, наиболее точно отражающих, как изменяется течение заболевания у каждого пациента.
Особый клинический синдром представляет лекарственная волчанка. Она развивается на фоне приема некоторых лекарственных препаратов (чаще всего прокаинамида, гидралазина, некоторых ингибиторов АПФ и бета-блокаторов, изониазида, миноциклина, сульфасалазина, гидрохлортиазида и др.) и характеризуется симптомами, напоминающими СКВ. В крови большинства пациентов с лекарственной волчанкой также удается выявить ANA. При симптомах аутоиммунного процесса у пациента, принимающего эти препараты, рекомендуется анализ на ANA, чтобы исключить лекарственную волчанку. Особенность лекарственной волчанки заключается в исчезновении иммунологических нарушений и симптомов болезни после полной отмены препарата – в это время рекомендуется контрольное исследование ANA, и отрицательный результат подтверждает диагноз «лекарственная волчанка».
ANA выявляются у 3-5 % здоровых людей (в группе пациентов старше 65 лет эта цифра может достигать 10-37 %). Положительный результат у пациента без симптомов аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических, клинических и лабораторных данных.
Для чего используется исследование?
- Для скрининга аутоиммунных заболеваний, таких как системные заболевания соединительной ткани, аутоиммунный гепатит, первичный билиарный цирроз и др.
- Для диагностики системной красной волчанки, оценки ее активности, составления прогноза и контроля за ее лечением.
- Для диагностики лекарственной волчанки.
Когда назначается исследование?
При симптомах аутоиммунного процесса: длительной лихорадке неясного генеза, болях в суставах, кожной сыпи, немотивированной утомляемости и др.
При симптомах системной красной волчанки (лихорадка, поражения кожи), артралгий/артрита, пневмонита, перикардита, эпилепсии, поражения почек.
Каждые 6 месяцев или чаще при обследовании пациента с диагнозом «СКВ».
При назначении прокаинамида, дизопирамида, пропафенона, гидралазина и других лекарственных препаратов, ассоциированных с развитием лекарственной волчанки.
Источник
Анализ на антиядерные антитела — часть длительного процесса диагностики системных заболеваний соединительной ткани. При этом сложны и тесты и и их расшифровка.
ANA-скрининг
Какие типы антиядерных антител нужно проверять? Когда следует проводить тест?
Что такое ядерные антитела
Антинуклеарные антитела — это аутоантитела, направленные против компонентов собственных клеточных ядер, например, ДНК и цитоплазмы. Их изучают для выявления аутоиммунных заболеваний, так как они являются маркерами таких патологий.
Интерпретацию результатов анализов на антиядерные антитела затрудняет сложный механизм их образования. Наличие или отсутствие определенного антитела не всегда означает процесс заболевания.
Антиядерные антитела – типы
В медицине выделяется несколько типов аутоантител:
- Антитела к экстрагируемым ядерным антигенам (анти-ENA):
- против ДНК-топоизомеразы I (анти-Scl70);
- против рибонуклеопротеина (анти-РНП);
- против антигена Смита (анти-Sm);
- анти-Mi2 / Mi2;
- анти-Ро (СС-А);
- анти-La;
- анти-jo1;
- анти-PM-SCL;
- анти-Kn;
- Белок, образующий ядро клетки анти-gp-2010 (анти-gp-210);
- Антитела против нативной двухцепочечной ДНК (анти-дсДНК);
- Антиконцентромерные антитела (анти-АСА).
Антиядерные антитела – формирование и механизм действия
Аутоиммунитет — это неправильный ответ иммунной системы на собственные ткани, что приводит к появлению аутоиммунных заболеваний.
Описаны различные механизмы аутоиммунитета, один из которых связан с высвобождением антигенов, скрытых от иммунной системы, например, в результате повреждения воспалительной ткани. В итоге высвобождаются элементы, обнаруженные в ядре клетки, например, ДНК, РНК, гистоны, которые иммунная система начинает распознавать как нечто чужеродное и вырабатывать против них антиядерные антитела.
Патогенез аутоиммунитета
Антиядерные антитела – показания к анализам
Анализы на антиядерные антитела назначаются при сомнительных диагнозах редких заболеваний. К ним, например, относятся: системные заболевания соединительных тканей, аутоиммунный панкреатит, билиарный цирроз, некоторые раковые опухоли.
- Скрининг ANA особенно рекомендуется при симптомах аутоиммунных заболеваний, включая красную волчанку:
- длительная лихорадка с неизвестными причинами;
- суставной синдром;
- высыпания на коже;
- постоянная слабость и др.
- При артралгии/артрите, пневмоните, перикардите, эпилепсии и поражениях почек.
- При подтвержденном диагнозе СКВ (2 раза в год).
- При приеме лекарств: прокаинамида, дизопирамида, пропафенона, гидралазина и т.п..
Артрит
Эпилепсия
При положительном ответе, пациента необходимо обследовать и далее, проводя более специфичные тесты. Например:
- При симптомах системной склеродермии важно выявить анти-Scl-70.
- Для подтверждения билиарного цирроза делают антитела к митохондриям. При этом отрицательный ответ ANA не исключает аутоиммунного заболевания.
- При симптомах СКВ требуется сделать тест на антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA). Наличие анти-dsDNA в сочетании с клиническими признаками болезни подтверждает диагноз, даже при отрицательном ANA.
Конкретных показаний для этих сложных анализов довольно много:
- Подозреваемые заболевания соединительной ткани:
- системная красная волчанка (наличие антител у 95-100% пациентов; специфический маркер заболевания — антитела против дцДНК);
- лекарственная волчанка (95-100% пациентов);
- антифосфолипидный синдром (40-50% пациентов);
- системный склероз (80-95% пациентов, особенно антитела против Scl70);
- полимиозит и дерматомиозит (40-80% пациентов, особенно антитела против Jo1 и против Mi2);
- синдром Шегрена (48-96% пациентов, особенно анти-Ro и анти-La антитела);
- ревматоидный артрит (около 10% пациентов);
- ювенильный идиопатический артрит (менее 10% пациентов);
- синдром Рейно (20-60% пациентов);
- фибромиалгия (15-25% пациентов);
- смешанные заболевания соединительной ткани (95-100% пациентов);
- Оценка активности заболевания и мониторинг эффективности лечения, например, антитела против дцДНК при системной красной волчанке;
- Корреляция наличия антител с появлением специфических симптомов заболевания, например синдрома Шегрена, и наличия антител против Ro и против La;
- Прогнозирование рисков заболеваемости.
Синдром Шегрена
Как проводится анализ на антиядерные антитела
Для выявления антиядерных антител берется кровь из вены на локтевом сгибе.
Методы, используемые для определения антител, очень разные и зависят от типа измеряемого антиядерного антитела.
Это в первую очередь иммунологические методы, такие как:
- ELISA;
- РИА;
- непрямая иммунофлюоресценция;
- метод двойной иммунодиффузии;
- вестерн-блот.
Для выявления антиядерных антител используется двухэтапная диагностика. Сначала проводится скрининг-тест с использованием метода непрямой иммунофлюоресценции, характеризующегося высокой чувствительностью.
Методика заключается в иммобилизации на микроскопном предметном стекле клеток линии HEp-2, полученных из эпителиальных клеток человека. Клетки этой линии имеют в своей цитоплазме и в ядре антигены, связывающие патологические антитела из крови пациента.
После добавления сыворотки пациента на предметное стекло антиядерные антитела связываются со специфическими антигенами и видны под микроскопом благодаря специальным флуоресцентным маркерам.
Преимущество непрямой иммунофлуоресценции заключается в способности дифференцировать типы антител на основе типа флуоресцентного красителя. Например, светящееся гомогенное клеточное ядро означает наличие антител против dsDNA или антител против ssDNA.
Положительный результат скрининг-теста должен быть подтвержден. Для этой цели используются очень специфические иммунологические методы, например вестерн-блот. После обнаружения присутствия и идентификации типа антиядерного антитела определяют его титр, то есть концентрацию сыворотки, при которой можно определить присутствие антител.
Антиядерные антитела – как интерпретировать результат?
Нормальные титры антиядерных антител должны быть ниже 1:40. Если результат скрининг-теста нотрицательный и отсутствуют клинические симптомы, указывающие на заболевание соединительной ткани, диагноз не распространяется на конкретные антитела, например, анти-дцДНК, анти-Sm.
Клинически значимыми титрами у взрослых считаются ≥ 1: 160, а у детей ≥ 1:40.
В случае положительных результатов предлагается интерпретировать результат анализа следующим образом:
- Титр 1: 40-1: 80 – пограничный (слегка положительный). При отсутствии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани повторять тест или проводить контрольный тест не рекомендуется, так как результаты у большинства людей не меняются с годами.
- Титр 1: 160-1: 640 – средне положительный. При отсутствии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани рекомендуется повторить анализ через 6 месяцев.
- Титр ≥ 1: 1280 – высоко положительный. При наличии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани для диагностики заболевания требуется дополнительная специализированная диагностика.
Следует иметь в виду, что серологические тесты на антиядерные антитела являются частью сложного диагностического процесса, и положительный результат всегда следует интерпретировать в контексте клинической картины и появления характерных симптомов заболевания.
Антиядерные антитела с низким титром встречаются у 5% людей из здоровой популяции, и их частота увеличивается с возрастом. В 65 лет — до 37 %. Положительный ответ без симптомов необходимо подтверждать, учитывая дополнительные анамнестические, клинические и лабораторные результаты.
Кроме того, их присутствие обнаруживается при физиологических и патофизиологических состояниях, но в этих случаях антиядерные антитела не имеют диагностического значения.
В эту группу входят:
- инфекции, например, туберкулез, сифилис, малярия;
- заболевания печени, например, цирроз печени;
- заболевания легких, например саркоидоз, асбестоз;
- раковые заболевания, например лейкоз, лимфома, рак молочной железы, меланома;
- кожные заболевания, например псориаз, красный плоский лишай;
- состояния после трансплантации органов, например, после пересадка сердца, пересадки почки;
- использование лекарственных средств, например противоэпилептических препаратов, гидралазина, солей лития;
- другие аутоиммунные заболевания, например. тиреоидит Хашимото, болезнь Аддисона, диабет типа I;
- беременность (до 20% беременных).
Лейкоз
Псориаз
Появление различных типов антиядерных антител характеризуется этнической изменчивостью. Например, у людей с кавказским системным склерозом анти-АСА антитела встречаются чаще, а у афроамериканцев и жителей Африки чаще выявляются реактивные антитела к топоизомеразе.
Что может повлиять на результат?
Ложноотрицательные результаты дают уремия и прием лекарств, ассоциированных с развитием лекарственной волчанки.
Источник
Что такое антинуклеарные антитела
Свечение антител в микроскопе
Антинуклеарные антитела — это патологические компоненты иммунной системы, ведущие к возникновению аутоиммунных заболеваний соединительной ткани, таких как системная красная волчанка, синдром и болезнь Шегрена, системная склеродермия.
Антинуклеарные антитела представляют из себя белки-иммуноглобулины, вырабатываемые защитными клетками человеческого тела (лимфоцитами). Из-за сбоя в работе иммунной системы ядра собственных клеток распознаются ею как чужеродные и вредные, что приводит к ошибочной выработке антител к разным компонентам клеточных ядер.
Всего выявлено более 190 компонентов ядра, к которым может вырабатываться патологический иммунный ответ, однако диагностическое значение имеют около 20 из них. К наиболее важным относят антитела к одно- и двуспиральной ДНК, гистонам, нуклеосомам и рибосомальному P-протеину.
Ядро содержится практически в любой клетке человеческого тела, за исключением некоторых кровяных. Оно находится внутри клетки и защищено собственной оболочкой, цитозолем и внешней клеточной мембраной. Антитела находятся во внеклеточной среде и чаще всего не могут напрямую контактировать с ядром, повреждая его. Однако при любом нарушении целостности клеточных оболочек антинуклеарные антитела, если они имеются в организме, способны связываться с компонентами ядра, образуя нерастворимые комплексы. Именно они и являются причиной возникновения разнообразных аутоиммунных заболеваний соединительной ткани.
Механизм образования
Антинуклеарные антитела и рецепторы
В норме собственные клетки организма даже в разрушенном состоянии иммунного ответа не вызывают. Однако сбои в работе иммунной системы наблюдаются постоянно даже у здоровых лиц, и при неблагоприятном стечении обстоятельств иммунитет может сформироваться на любой из компонентов клетки. В организме предусмотрена своеобразная система «отбраковки» патологических антител, в большинстве случаев она срабатывает, антитела уничтожаются, не вызывая болезнь.
Однако в некоторых случаях антинуклеарные антитела возникают в больших количествах и оказываются вовремя не распознаны организмом как патологические. Чаще всего это бывает при обширных солнечных ожогах, когда миллионы клеток кожи оказываются повреждены ультрафиолетом. Ядра погибших клеток оказываются непосредственно во внутренней межклеточной среде организма, где их встречают иммунные клетки — лимфоциты и макрофаги.
ДНК из ядер, гистоновые белки и другие белковые и нуклеиновые компоненты могут быть настолько повреждены ультрафиолетовым излучением, что в некоторых случаях изменяются до неузнаваемости. Именно это и провоцирует иммунные клетки вырабатывать против них антитела, как против чужеродных веществ.
Нормальные значения АНА
Отсутствие антител — вариант нормы
Нормальным значением является полное отсутствие антинуклеарных антител. При скрининговом ИФА-исследовании отрицательный ответ чаще всего записывается с указанием титра (разведения), пример: «Отрицательно, < 1:160». При развернутом иммуноблот-исследовании на антитела к разным компонентам ядра клетки, ответ зачастую записывается для каждого вида антител по отдельности. Например: «АТ к двуспиральной ДНК — отрицательно; АТ к PCNA — отрицательно; АТ к Scl-70 – отрицательно».
Иногда у здоровых лиц обнаруживаются AHA в небольших количествах (слабоположительный результат), что может свидетельствовать о генетической предрасположенности к аутоиммунным заболеваниям. Результат анализа «Сомнительно» может быть вызван наличием антител в очень низкой концентрации, которая находится около пороговых значений чувствительности медицинской тест-системы для анализа. Чаще всего после получения результата «Сомнительно» анализ рекомендуется повторить через 4-5 недель.
Причины повышения ANA
Повышение антител при системной склеродермии
Положительный результат анализа может свидетельствовать о наличии одного или нескольких следующих заболеваний:
- системная красная волчанка,
- лекарственная волчанка,
- синдром или болезнь Шегрена,
- системная склеродермия,
- синдром Шарпа.
Гепатит может стать причиной слабоположительного результата
Слабоположительный результат может быть вызван как наличием вышеперечисленных заболеваний, так и заболеваниями, не связанными с системой иммунитета. Перечислим основные болезни, которые могут его вызвать:
- ревматоидный артрит, в том числе ювенильный (детский),
- первичная легочная гипертензия,
- идиопатический легочной фиброз,
- синдром Рейно (дигитальный васкулит),
- болезнь Крона,
- узелковый периартериит,
- гепатиты различной природы,
- злокачественные новообразования (опухоли),
- некоторые инфекционные болезни (туберкулез, шистосомоз, малярия).
Слабоположительный результат анализа иногда выявляется у здоровых лиц, чаще у женщин в возрасте старше 60 лет.
Показания к исследованию
Показанием для проведения анализа могут быть боли в суставах
Исследование показано при симптомах, не исключающих аутоиммунную патологию соединительной ткани:
- длительно сохраняющаяся повышенная температура тела;
- беспричинное снижение массы тела;
- уменьшение регионарных лимфатических узлов;
- болезненность и скованность в суставах, когда не установлена иная причина патологии;
- боли в мышцах;
- кожная сыпь, особенно на лице в виде «красной бабочки» (нос и щеки рядом с крыльями носа);
- перикардит и плеврит неясной причины;
- изменения в общем и биохимическом анализе крови, когда исключены другие виды патологии.
Также анализ назначается при имеющемся аутоиммунном заболевании для контроля за эффективностью лекарственной терапии.
Подготовка к анализу и методика проведения исследования
Определение антител может быть выполнено в нескольких вариантах
Анализ сдается утром натощак либо в другое время, однако не ранее 5-6 часов после последнего приема пищи. Также желательно не принимать никакие лекарственные средства до взятия крови на исследование.
Существует несколько вариантов проведения анализа, отличающихся по своей точности и возможности количественной оценки концентрации антител.
Скрининговое ИФА-исследование (иммуноферментный анализ) позволяет выявить наличие суммарных антинуклеарных антител и их титра. К плюсам метода относится его относительная дешевизна и возможность выяснить, необходимы ли расширенные исследования. При отрицательном результате анализа дальнейшие исследования чаще не показаны.
Непрямая флуоресцентная микроскопия — это метод, основанный на окрашивании антител специальными веществами, дающими под ультрафиолетовым светом зеленое свечение. Тип и характер свечения позволяет врачу лабораторной диагностики определить, с какими компонентами клетки связались антитела, а также примерно узнать их количество.
Иммуноблот-исследование позволяет определить наличие каждого типа антинуклеарных антител по отдельности. Чаще всего этот анализ назначается после положительного результата другого исследования для уточнения диагноза.
Факторы, влияющие на результат
Лекарственные препараты способны искажать результат
Ложноположительный результат анализа может быть вызван приемом некоторых групп лекарственных препаратов:
- антидепрессанты;
- антиаритмики (бисопролол, биосотал);
- противосудорожные препараты (карбамазепин, фенитоин);
- препараты для лечения атеросклероза (ловастатин, аторвастатин);
- средства для понижения артериального давления.
Прием лекарственных средств желательно ограничить за 1-2 дня до анализа в строгом соответствии с рекомендациями лечащего врача.
Лечение отклонений от нормы
Диагноз и лечение определяет врач
Для лечения аутоиммунных заболеваний соединительной ткани применяются следующие группы препаратов:
- кортикостероиды (позволяют уменьшить иммунный ответ организма и снизить концентрацию патологических антител);
- антифиброзные препараты (уменьшаю явления склерозирования соединительной ткани);
- иммуносупрессивные средства;
- ангиопротекторы (препараты, защищающие сосуды);
- нестероидные противовоспалительные средства.
Стоит заметить, что диагностика данной группы заболеваний сложна и требует ряда дополнительных исследований, кроме выявления антинуклеарных антител и их вида. Диагноз чаще всего не может быть установлен после однократного исследования крови.
Источник
