В какие пробирки берут какие анализы крови
Вакуумная пробирка — основной инструмент для забора венозной крови. Она может быть наполнена реагентом, который позволит провести быстрый и точный анализ. В таком случае каждая пробирка имеет колпачок своего цвета. Цветное кодирование соответствует международному стандарту ISO 6710.
Вакуумные пробирки для получения сыворотки (биохимия, серология). Цвет крышечки – коричневый или красный
Сыворотка крови – жидкая часть крови лишенная форменных элементов и некоторых белков (фибрин и др.) в отличие от плазмы, в которой сохраняются все элементы жидкой части крови кроме форменных элементов.
Получение сыворотки крови является результатом двухступенчатого биохимического процесса: свертывания (коагуляции) крови и ретракции (уплотнения) сгустка. Для запуска коагуляционного каскада необходимо наличие внешнего активатора, каковым может служить кремния диоксид, поэтому процесс свертывания крови быстрее происходит в стеклянных пробирках, так как кремния диоксид является базовым материалом стекла или в пластиковых пробирках с активатором свертывания. Активатор свертывания (clot activator) выполнен в виде напыления на внутренней стенке пробирки.
После образования сгустка начинается этап его уплотнения и выделения сыворотки. На практике ретракция сгустка ускоряется центрифугированием пробирок с кровью.
Для получения максимально чистой сыворотки рекомендуется соблюдение трех условий:
1. После забора крови в пробирку в соответствии с инструкцией необходимо осторожно однократно перевернуть пробирку для более полного контакта крови с активатором свертывания;
2. Дождаться завершения процесса свертывания крови в течение 20-30 минут при комнатной температуре и вертикальном положении пробирки;
3. Центрифугировать пробирку со свернувшейся кровью не менее 10 минут с ускорением 1500 G (примерно 3000 об/мин) для максимального выдавливания сыворотки из сгустка. При необходимости допускается центрифугирование с ускорением 4000G c крышечкой и до 12000G без крышечки.
После центрифугирования и полной ретракции сгустка сыворотка располагается над сгустком, но в контакте с ним. Сохраняется опасность загрязнения сыворотки составляющими сгустка при неосторожном обращении с пробиркой (встряхивание, опрокидывание и пр.). Для лучшего очищения сыворотки и более полного разграничения сыворотки и сгустка применяются специальные пробирки, содержащие биологически инертный олефиновый гель. Последний представляет собой тиксотропный кополимер, который тяжелее сыворотки, но легче кровяного сгустка, поэтому после центрифугирования гель в виде тонкой полоски занимает промежуточное положение и служит разделительным барьером. Стабильность такого барьера гарантирована в течение 5-7 дней при хранении пробирки с кровью при комнатной температуре.
Оптимальные сроки сохранности образца крови в данных пробирках составляет при комнатной температуре 6 часов, при хранении в холодильнике (+4ºС) – 24 часа. Повторное центрифугирование пробирок, особенно с гелем, не допускается.
Полученная сыворотка крови применяется для очень широкого спектра лабораторных биохимических, ИФА и иммунологических исследований:
белковый состав, ферменты, гормоны, онкомаркеры, ВИЧ-инфицирование, гепатиты и пр.
Вакуумные пробирки для получения цельной крови или плазмы
Не все анализы в клинике делаются из сыворотки крови. Для многих видов исследований необходима цельная кровь, содержащая форменные элементы, или плазма, освобожденная от клеток крови центрифугированием. С целью получения несвернувшейся крови разработаны пробирки с определенными добавками – антикоагулянтами. На практике используют два вида антикоагулянтов:
ингибиторы (вещества, вызывающие торможение) тромбина. Тромбин является ключевым игроком в коагуляционном каскаде. Он принимает участие в формировании ряда факторов свертывания крови и способствует трансформации фибриногена в фибрин. Добавление биохимических ингибиторов тромбина эффективно активирует антикоагуляционные свойства крови.
связывание (удаление) ионов Ca2+. При прочих равных условиях свертывание крови происходит при активном участии ионов Ca2+. Удаление их является эффективным механизмом сохранения крови в жидком состоянии.
Гепарин. Цвет крышечки – зеленый, светло-зеленый
Гепарин — кислый мукополисахарид с молекулярной массой 4000-40000 – является натуральным антикоагулянтом, присутствующем в любом здоровом организме. Гепарин активирует создание комплексных соединений между антитромбином III и такими факторами свертывания крови, как тромбин, факторы XIIa, XIa, Xa, IXa и VIIa. В таком комплексе факторы свертывания инактивируются необратимо.
Для целей получения плазмы крови в пробирки добавляют литиевую либо натриевую соль гепарина в пропорции к забираемой в пробирку кровью 15-20 МЕ/1 мл, что служит гарантией полной инактивации свертывания крови и не искажает исследуемые параметры. Эритроциты сохраняются в образце крови до 8 часов. Нельзя использовать для проведения анализов образец крови, хранившийся более 48 часов даже в условиях холодильника (+4ºС).
Для получения качественного результата анализа необходимо:
Немедленно после взятия крови осторожно перевернуть пробирку 5-7 раз для лучшего перемешивания крови и гепарина,
Плазма отделяется после центрифугирования. Нормальные скорости центрифугирования – 1000-1500G (2000-3000 об/мин). При необходимости допускается центрифугирование с ускорением 4000G c крышечкой и до 12000G без крышечки.
В клинике пробирки с гепарином применяются, в основном для проведения исследования:
электролитного состава крови,
газового состава крови,
содержания алкоголя в крови.
Не рекомендуется использовать гепарин для: морфологических исследований, так как кислотный характер гепарина способствует обесцвечиванию мазка крови, придавая ему голубоватый оттенок, подсчета лейкоцитов и тромбоцитов, поскольку гепарин стимулирует агрегацию этих клеток крови.
исследований по методике полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Для более чистого разграничения плазмы крови и сгустка применяются специальные пробирки, содержащие кроме гепарина инертный олефиновый гель. Последний представляет собой тиксотропный кополимер, который тяжелее плазмы, но легче форменных клеток крови, поэтому после центрифугирования гель в виде тонкой полоски занимает промежуточное положение и служит разделительным барьером.
Фторид натрия/ЭДТА калия. Цвет крышечки – серый
Добавление фторида натрия и ЭДТА калия в пробирку позволяет предотвратить разрушение глюкозы крови (процесс, называемый гликолизом) и сохранить ее уровень во взятом образце крови.
Фторид натрия и оксалат калия выступают в качестве антикоагулянтов, связывая ионы Са2+ и, кроме того, фторид натрия стабилизирует уровень глюкозы.
Глюкоза разрушается до пирувата и лактата при последовательном осуществлении различных энзиматических реакций. Фторид натрия ингибирует некоторые ферментативные реакции, включая превращение фосфоглицерата в фосфоенолпируватацид, и предотвращает гликолиз.
Для получения качественного результата анализа необходимо:
немедленно после взятия крови осторожно перевернуть пробирку 5-7 раз для лучшего перемешивания крови и антикоагулянта
плазма отделяется после центрифугирования. Нормальные скорости центрифугирования – 1000-1500G (2000-3000 об/мин).
Пробирки с добавлением фторида натрия и оксалата калия используют для проведения определения уровня сахара (глюкозы) в крови. Соотношение компонентов 1/1, общее количество добавляемых реагентов – 4,5 мг/1 мл забираемой в пробирку крови.
Замечания: Фторид блокирует активность уреазы и некоторых других ферментов. Образцы крови из данных пробирок нельзя использовать для прямого определения энзимов. Фторид натрия и ЭДТА калия связывают ион Са2+, заменяя в крови 1 ион кальция на 2 иона натрия или калия. Следствием этого является повышение напряжения ионов в межклеточной жидкости и выкачивание воды из внутриклеточного пространства в межклеточное, сморщивание клеток крови с умеренным «выдавливанием» из эритроцитов гемоглобина. Поэтому видимый гемолиз свойственен образцам крови с данной добавкой.
Глюкоза превращается в лактат в результате комплекса реакций, включающего в себя различные этапы. Фторид ингибирует один их последних этапов разрушения глюкозы, начальные этапы с участием гексокиназы и фосфофруктокиназы блокируются менее эффективно, поэтому можно наблюдать снижение содержания глюкозы в образце крови на 6-7% от первоначального.
После первоначального незначительного снижения уровня глюкозы ее количество остается постоянным при хранении крови в пробирке в течение 8-10 часов при температуре до 25ºС и в течение 2-3 дней в холодильнике (+4ºС).
ЭДТА-К2. Цвет крышечки — сиреневый
Этилендиаминтетраацетат (ЭДТА) является предпочтительным антикоагулянтом для гематологических исследований. ЭДТА и его щелочные соли способны создавать хелатные соединения с ионами кальция с образованием растворимых высокостабильных комплексов. Наиболее эффективная концентрация ЭДТА – 1,2 мг/мл крови. Во всем мире используют три варианта солей ЭДТА: ЭДТА-К3, ЭДТА-К2 и ЭДТА-Na2. Наиболее предпочтительной и рекомендуемой Международной Комиссией по Стандартизации в Гематологии является двукалиевая соль ЭДТА:
ЭДТА-К3 показывает меньшую способность поддержания крови в жидком состоянии, также ЭДТА-К3 влияет на подсчет лейкоцитов, занижая их количество.
различия между ЭДТА-К2 и ЭДТА-Na2 в клиническом плане незначительны и ими можно пренебречь, но ЭДТА-Na2 хуже растворим.
Для получения качественного результата анализа необходимо:
немедленно после взятия крови осторожно перевернуть пробирку 5-7 раз для лучшего перемешивания крови и антикоагулянта;
плазма отделяется после центрифугирования. Нормальные скорости центрифугирования – 1000-1500G (2000-3000 об/мин). При необходимости допускается центрифугирование с ускорением 4000G c крышечкой и до 12000G без крышечки.
Наиболее широко используются пробирки, содержащие 1,95 мг ЭДТА/1мл крови. Они нашли свое применение в таких областях лабораторной практики, как:
гематологические исследования – подсчет клеток крови, определение СОЭ и пр.
ПЦР-исследования (качественные и количественные методики).
Пробирки с образцами крови можно хранить до 6-10 часов при 4ºС, хранение свыше 24 часов не рекомендуется из-за снижения числа эритроцитов и лейкоцитов.
Цитрат натрия. Цвет крышечки — голубой
Цитрат натрия является антикоагулянтом для сбора венозной крови с це6лью проведения исследований коагуляционных свойств крови.
Процесс свертывания крови представляет собой последовательность сложных реакций, в которых результатом первых реакций (с участием активных ферментов) является активация следующих, первоначально неактивных энзимов. Последним активным ферментом в этой цепочке присутствует тромбин, который осуществляет превращение фибриногена в фибрин. Нити фибрина опутывают клетки крови и окончательно формируют кровяной сгусток. Крайне важную роль на этом этапе играют ионы Са2+. Антикоагуляционные свойства цитрата проявляются в формировании комплекса с ионами Са2+ и эффективном удалении их из крови.
Общее исследование свертывания крови определяется временем, необходимым для последовательной активации ферментов, участвующих в коагуляционном процессе. Проводится определение времени активации и количественное измерение различных составляющих коагуляционного каскада, для чего создаются так называемые «обходные пути» добавлением некоторых промежуточных продуктов свертывания.
Наиболее часто используются пробирки с 3,8% или 3,2% раствором цитрата натрия (0,129 моль/л), соотношение цитрата к количеству забираемой крови 1/9.
Для максимально качественного проведения коагулологических исследований рекомендуется соблюдение определенных правил:
нельзя использовать пробирку для взятия крови на коагуляционные тесты первой, сразу после венепункции, так как на результаты может повлиять выделяющийся при пункции тканевой тромбопластин;
венозный жгут во время взятия крови в пробирку должен быть снят;
немедленно после взятия крови пробирку аккуратно переворачивают 5-6 раз для лучшего перемешивания крови и антикоагулянта;
сразу после этого надо проверить количество взятой крови: ее верхняя граница должна быть на уровне голубой полоски на этикетке.
Оптимальными условиями хранения пробирки с образцом крови является температура 20-24ºС и исследование коагуляционных свойств и факторов свертывания крови должно быть проведено в течение 2-х часов с момента взятия крови
Источник
Дмитрий Кандинский / vtomske.ru
Всем нам с детства знакома такая процедура, как анализ крови. Кровь необходима как для простых исследований, так и высокотехнологичных генетических тестов. Человек приходит с утра в больницу, врач забирает небольшое количество биоматериала в пробирку, и через какое-то время мы получаем результат. Что же происходит между этим? Как нам удалось выяснить — много интересного!
***
Чтобы посмотреть за тем, как кровь исследуется и какие тесты с ней можно провести, мы отправились в «Инвитро». 4 октября медицинская компания открыла в Новосибирске новый большой лабораторный комплекс, где будут выполняться более двух тысяч видов тестов для пациентов со всей Сибири и Дальнего Востока. Здесь и прошла наша экскурсия.
Цель материала — показать, что происходит с пробирками крови и другими биоматериалами, когда они отправляются на исследования. Ведь мы, обычные люди, достаточно регулярно обращаемся в лаборатории к специалистам, в чьих руках оказывается наше здоровье. И от того, как проходит процесс исследования, зависит и результат, который мы получим.
По словам экспертов, лабораторные исследования включают три основных этапа: преаналитический, аналитический и постаналитический. Заместитель заведующего клинико-диагностической лабораторией ООО «Инвитро-Сибирь» Валентина Андрушкевич рассказала, что первый этап начинается, как ни странно, с мысли: у человека, который решил что-то у себя проверить, или у врача, принимающего пациента. Важную роль играет подготовка к анализам, это влияет на конечный результат. Так, общий анализ крови нужно сдавать натощак, но нельзя голодать свыше 14 часов. Перед каждым исследованием следует внимательно ознакомиться с подготовкой к нему.
И вот, за мыслью следует действие — человек идет в медицинский офис (перед сдачей анализов проконсультируйтесь с врачом). В новом медцентре для клиентов сделали индивидуальные кабинки, чтобы сохранить приватность разговора со специалистом. Также работает электронная очередь.
Сегодня многие медицинские центры при регистрации пациентов используют программу, создающую индивидуальные баркоды, также именуемые штрихкодами. В дальнейшем это позволяет упростить процесс идентификации пациента для приборов, которые проводят распределение пробирок и продолжают исследование. Кроме того, такая процедура необходима для исключения подмены, потери пробирок и быстрого выполнения исследований. После регистрации пациент отправляет в процедурный кабинет.
— Люди по-разному переносят процедуру взятия крови, поэтому в процедурных кабинетах есть как кресло, так и кушетка, — поясняет Валентина Андрушкевич. — Для взятия биоматериала мы используем только одноразовые расходные материалы, для нас это не просто государственный стандарт, это жизненно необходимый момент для наших пациентов. Вакуумные пробирки безопасны для сдающего кровь и позволяют сохранять аналиты (так еще называют биоматериалы) необходимое время для проведения основных и дополнительных тестов.
После того, как кровь оказалась в пробирке, ее отправят дальше — в регистратуру. В данном случае регистратурой называется лаборатория преаналитической подготовки. Здесь отмечают прибывший биоматериал в специальной программе, после чего приборы видят задание на исследование.
Биоматериалы поступают в лабораторию двумя большими потоками. Тот, который берут в процедурном кабинете, уже зарегистрирован и первично обработан. В программе регистратуры фиксируется прибытие аналита, лабораторная информационная система (ЛИС) уже видит задание на исследование. Второй поток — то, что приходит от других медучреждений — партнеров «Инвитро». Сначала происходит регистрация пробирок и баркодирование, присваивается индивидуальный код заказа. Данные с ручного бланка, где врач отметил, какие нужны анализы, переносятся в программу.
— Пробы поступают в лабораторию круглосуточно. Перевозка биоматерила осуществляется всеми доступными видами транспорта. Используются разные температурные режимы доставки, в частности, режим от +2°С до +8°С и режим -20°С. Необходимая температура для сохранности проб обеспечивается специальными сертифицированными термоконтейнерами. Выбор режима хранения и транспортировки каждого биоматериала происходит в соответствии с ГОСТом, — рассказывает Валентина Андрушкевич.
Существует заблуждение, что кровь возить нельзя, но на самом деле это не так. Биоматериал можно перевозить в большинстве случаев. Если анализы не подлежат длительному хранению, то их и не перевозят. Например, материал для спермограммы принимается только в медицинском офисе при лаборатории.
Многие лаборатории на сегодняшний день практикуют выполнение срочных исследований, которые называются cito. По своему опыту могу сказать, что цена на тесты такого формата выше, но результат пациент получит в течение двух-четырех часов. В новой лаборатории пробирки для cito-анализов из процедурного кабинета в регистратуру отправляются пневмопочтой (система перемещения грузов под действием сжатого или, наоборот, разреженного воздуха). Такая посылка прибывает в место назначения меньше чем за десять секунд. Мы сами смогли в этом убедиться.
После всех регистрационных процедур для пробирки наступает аналитический этап исследований, который проходит в разных подразделениях.
Наша первая остановка — лаборатория общеклинических, биохимических и иммунохимических исследований. Помещения и оборудование лаборатории — настоящие роботизированные комплексы. Высокотехнологичное оборудование проводит анализ и выводит результаты в онлайн-режиме в лабораторную информационную систему.
— В зоне гематологии находятся гематологические анализаторы для выявления количественных показателей клеток крови, — показывает Валентина Андрушкевич. — Для точности результата кровь предварительно нужно перемешать, так как она оседает. Этим процессом заведует отдельное вспомогательное оборудование. Перемешивание пробирок происходит перед любыми тестами.
Пробирки с сиреневыми крышечками отправляются на общий анализ крови. Он выполняется в гематологическим анализаторе Sysmex. В данном случае перемешивание пробирок на отдельном оборудование не требуется, анализатор делает все сам. Результаты анализов сбрасываются в систему, их можно увидеть на мониторе. Но никаких фамилий там нет, только баркоды пациентов и итоги тестов.
Программа сама оценивает итоги согласно заложенным в нее правилам — нормам, которые должны быть. Если анализ нормальный, он автоматически подтверждается системой и сбрасывается дальше в ЛИС. Если образец имеет патологические отклонения, система дает сигнал, и пробирка пойдет на микроскопию.
— В случае выявления патологии готовится мазок крови, и врач будет смотреть его в микроскоп. Специалист скорректирует результат анализа и внесет его в систему, — добавила эксперт.
Напротив гематологических анализаторов располагается оборудование для автоматизированного исследования мочи. Что касается данного исследования, он в целом предусматривает микроскопию осадка мочи. На отдельном аппарате в лаборатории проводится химические исследование биоматериала, а на отдельном оборудовании — именно микроскопия.
— Это высокопроизводительное оборудование, которое позволяет быстро микроскопировать осадки мочи и описывать их — сколько солей, лейкоцитов, эритроцитов. Экспертная оценка здесь присутствует: специалист смотрит на итоги исследований и при наличии патологии будет выполнена дополнительная микроскопия, но уже врачом. Несмотря на технологии, специалист все равно остается во главе угла, — подчеркивает Андрушкевич.
Иногда пациенту требуется сдать кровь на несколько исследований. Конечно, в этом случае его не будут колоть несколько раз и заполнять множество пробирок, хватит одной. Но разные анализы выполняют разные группы приборов. Чтобы пробирка прошла по всем аппаратам, работает специальная программа и робот-сортировщик. К нему пробирки поступают из регистратуры, робот снимает с них крышечку и расставляет по штативам, куда должен пойти образец крови. Когда штатив будет заполнен, он выскочит, и специалист заберет его.
Сортировщик работает очень плавно — на данном этапе кровь встряхивать и перемешивать нельзя — и при этом быстро. Робот помогает как ускорить работу без потери качества, так и обеспечить биобезопасность для медперсонала.
Кстати, для приготовления реагентов в лаборатории используют ионизированную воду — кроме молекул воды в ней больше ничего нет. Пить такую воду нельзя, но она позволяет добиться точного результата при проведении тестов. К каждому прибору вода подводится индивидуально, по трубкам, что позволяет сохранить ее чистоту.
На отдельном этаже в лабораторном комплексе находится ПЦР-лаборатория, где выполняются генетические исследования (выявление предрасположенности к тем или иным заболеваниям, наследственность и так далее) и выявление инфекций. В ней — очень строгие санитарные правила, поскольку диагностика — очень точная и порой хватает несколько сторонних клеток, чтобы повлиять на результат. Поэтому сотрудники медцентра провели для нас виртуальный тур.
ПЦР-лаборатория выполняет от четырех до шести тысяч исследований, выявляет более 50 инфекционных маркеров и свыше 20 генетических маркеров патологии человека. Все помещения лаборатории находятся в особом режиме изоляции, оснащены предбоксами, имеют особый график кварцевая, три изолированные приточно-вытяжные системы. Все операции контролируются через программное обеспечение. Все это позволяет исключить погрешности в результатах.
Как рассказала врач группы по контролю качества лаборатории Екатерина Томзикова, для ряда тестов пока не существуют приборы, которые бы делали исследования автоматически, поэтому специалисты проводят их вручную. Последнее место в нашей экскурсии — лаборатория иммуноферментного анализа.
— В месяц в данной лаборатории выполняется порядка 40 тысяч тестов. Несмотря на то, что это ручные методики, на помощь специалистам приходит свой робот-сортировщик. Здесь мы смотрим гормоны, выполняем тесты на аллергию, большое число аутоиммунных маркеров, — уточнила Томзикова.
Вначале материала я упоминала про три этапа лабораторных исследований. Аналитический подошел к концу. Постаналитика включает в себя консультации пациентов врачами касательно результатов исследований: что они означают, нужно ли обращаться к специалисту.
P.S. Казалось бы, анализ крови, что может быть проще? Но за этими двумя словами скрывается масса операций которую стоит провести, чтобы пациент получил верный результат. Конечно, не стоит забывать и о подготовке к исследованию со стороны самого пациента. А вообще — будьте здоровы и болейте меньше!
Имеются противопоказания, необходимо проконсультироваться со специалистом.
Данный материал не носит коммерческий или заказной характер и выходит в рамках рубрики «Знай город»
Источник
