В анализе крови сомнительный сифилис
Расшифровка анализа на сифилис не представляет сложностей для пациента, если врачом было назначено исследование крови на инфекцию с помощью неспецифических тестов. Результаты, полученные с применением иммуноферментных реакций, обычному человеку интерпретировать затруднительно, и поставить правильный диагноз способен только врач.
Какие анализы используются в диагностике сифилиса?
Выявить наличие патогенного возбудителя сифилиса помогают серологические тесты:
- Реакция Вассермана (RW). Основана на связывании комплемента с комплексом антиген-антитело. Для идентификации применяется гемолитическая система. Повышению чувствительности пробы способствует кардиолипиновый антиген. Если значение положительно, на бланке с направлением ставятся кресты. Исследования крови с применением реакции Вассермана в некоторых случаях дают ложное показание.
Если венеролог подозревает наличие у пациента трепонемной инфекции при получении положительного анализа, назначается диагностика с применением других методов.
- Метод микропреципитации (РМПА). Для исследования крови применяются механизмы, аналогичные реакции Вассермана. Этот способ показывает положительные результаты спустя месяц после возникновения у пациента твердых шанкров. При получении сомнительных анализов проводится трепонемный вид исследования крови.
- Способ плазменных реагинов (RPR). Является аналогом RW и используется для осуществления обследования пациентов, не имеющих симптомы инфицирования трепонемами, а также для подтверждения заболевания.
- Иммуноблот. Метод считается сверхточным и высокочувствительным. Исследуется кровь на сифилис этим способом нечасто. Обычно способом иммуноблоттинга изучают биоматериал новорожденных. Результат анализа получают в течение длительного периода, поэтому он не относится к экспресс-диагностикам.
- Реакция пассивной гемагглютинации (РПГ). Этот экспресс-тест позволяет за короткий срок поставить верный диагноз и назначить пациенту полный курс лечения. Микрореакция способна показать положительные результаты через месяц после инфицирования бледной трепонемой. Метод применяется для диагностики первой стадии заболевания, сопровождающейся язвами и высыпаниями.
- Иммуноферментный анализ. Метод с применением реакции антиген-антитело относится к высокочувствительным и применяется для исследования доноров, беременных, подтверждения диагноза при получении положительного результата.
Как расшифровать результат неспецифического обследования
Расшифровка анализа на сифилис, проведенного с помощью неспецифических тестов, может содержать:
- четыре креста (++++), означающих резко положительную пробу;
- три креста (+++) – положительная реакция;
- два креста (++) – слабоположительная проба;
- один крест (+) – отрицательный или сомнительный результат;
- обозначение знаком минус (-) – заболевания нет.
Как понять результаты специфического исследования
При использовании реакции иммуноферментации (ИФА) в крови пациента определяются иммуноглобулины (обозначения IgM, IgA, IgG):
- При выявлении IgA можно говорить о недавнем инфицировании, произошедшем около двух недель назад.
- Обнаружение иммуноглобулинов класса A и M позволяет определить первую стадию заболевания и окончание инкубационного периода.
- Получение сразу трех видов антител класса А, М, G указывает на прогрессирование сифилиса и борьбу организма с инфекцией.
- При выявлении IgG имеет смысл говорить об излечении сифилиса и правильно проведенной терапии.
Результаты тестов могут выражаться в процентах:
- 20% – отрицательно;
- 20-30% – сомнительный;
- 30-50% – слабоположительный;
- более 50% – положительный анализ.
Не всем людям, получившим результаты исследования удается расшифровать числа, представленные в виде отношения. Если в бланке указаны значения 1:2 — 1:800, говорить об инфицировании рано.
У части пациентов, прошедших курс терапии, антитела обнаруживаются в течение длительного периода.
При их росте врач подозревает наличие в организме пациента патогенного возбудителя. Титры снижаются при правильном лечении.
Достоверность анализов
Не всегда лабораторные исследования крови показывают правильный результат. Факторами, влияющими на достоверность результатов, являются беременность, хронические заболевания и аутоиммунные процессы. Показания тестов могут стать ложноположительными при приеме пациентом лекарственных препаратов.
Обнаружить наличие сифилиса могут исследования, проведенные с применением реакции Вассермана. К положительным результатам приводят вирусные заболевания (пневмония, туберкулез, малярия), нарушение работы печени, кроветворной системы. В этом случае врач выдает направление на ИФА, РПР.
Анализ РМП выдает ложноположительные значения при ревматоидных процессах, циррозе печени, онкологических заболеваниях, бруцеллезе, мононуклеозе, туберкулезе, лептоспирозе.
Иммуноферментный метод также способен показать ошибочный результат при нарушенном метаболизме у пациента, наличии системных патологий, новорожденных, родившихся от инфицированных матерей. В таких случаях назначаются исследования РМП, РПГА.
Что делать больным
При выявлении у пациентов возбудителей сифилиса или антител к нему назначается курс терапии. Помимо анализов на это венерическое заболевание больной должен пройти рентгенографию, УЗИ. В обязательном порядке проводится биохимическое и общее исследования крови, мочи.
Схему лечения врач подбирает после определения срока инфицирования и стадии болезни. Сифилитический больной должен пройти курс антибиотикотерапии. При выявлении бледных трепонем назначаются препараты пенициллиновой, тетрациклиновой группы, макролиды. Высокой эффективностью в борьбе с бледной трепонемой обладают доксал, цефтриаксон, азитромицин.
При выявлении поздней формы сифилиса используются не только антибиотики, но и лекарственные средства, содержащие висмут, йод, иммуностимулирующие препараты, физиотерапевтические процедуры.
При обнаружении вторичной формы венерического заболевания у беременных назначаются курсы пенициллина. Препарат считается безопасным для плода при условии правильно подобранных дозировок. Если у женщины выявлена ранняя стадия сифилиса, терапия проводится двухкратным введением антибиотика.
Лечение вторичной формы заболевания, обнаруженного своевременно, занимает 1-1,5 месяца. В некоторых случаях терапия продолжается год и более. Поздние стадии сифилиса при отсутствии лечения приводят к серьезным осложнениям. При поражении внутренних органов и формировании мягкотканных опухолей возможна угроза жизни больного.
Правильно интерпретировать полученные результаты анализов может только врач.
При положительных значениях назначаются другие виды исследования, позволяющие поставить правильный диагноз. Своевременное обнаружение сифилиса и правильно назначенная терапия позволяют избежать грозных последствий и полностью вернуть здоровье.
Источник
Ложноположительные (ЛПР) и ложноотрицательные серологические реакции на сифилис
Ложноположительные серологические реакции на сифилис (ЛПР) – это положительные реакции у людей, которые никогда не болели и в момент обследования не болеют сифилисом. То есть специфической инфекции в организме нет и не было, а серологические реакции дают положительный результат.
Ложноположительными, или неспецифическими результатами называют положительные результаты серологических реакций на сифилис у лиц, не страдающих сифилитической инфекцией, и не болевших сифилисом в прошлом.
Ошибочный анализ на сифилис из-за технических причин
ЛПР могут быть обусловлены техническими погрешностями и ошибками при выполнении исследований, а также качеством реагентов. Несмотря на многочисленные достоинства диагностикумов для РПГА, ИФА и РИФ и их модификаций, применяемых для диагностики сифилиса, в отдельных случаях отмечаются недостоверные результаты анализов. Это может быть связано как с недостаточным уровнем квалификации и профессиональной ответственности персонала (так называемые небиологические или технические ошибки), так и с особенностями тестируемых образцов (биологические ошибки).
Ошибки небиологического характера могут возникать на любом этапе проведения исследований: преданалитическом, аналитическом, и постаналитическом т.е. при заборе, транспортировке, хранении биоматериала, использовании хилезной, проросшей сыворотки, при неоднократном замораживании и оттаивании тестируемых образцов, а также при использование диагностикумов с истекшим сроком годности и т.д. В частности, несоблюдение условий и сроков хранения диагностических наборов является причиной снижения чувствительности реакции и получения ложноотрицательных результатов.
Ложноположительные результаты может вызвать контаминация сывороток пациентов, серонегативных в отношении бледной трепонемы, следами сывороток серопозитивных лиц, что может иметь место при приготовлении сывороток.
Существует множество других технических ошибок, приводящих к получению недостоверных (ложноотрицательных и ложноположительных), сомнительных результатов исследования. В некоторых лабораториях не осуществляется внутри- и внешнелабораторный контроль качества исследований на сифилис, что ведет к получению диагностических ошибок и неуверенности врачей-лаборантов в результатах анализа.
Источником ошибок при постановке неспецифических тестов могут быть неиспользование контрольных сывороток, неравномерная концентрация антигена в опыте из-за недостаточного перемешивания ее перед использованием, контаминация образцов и посуды микроорганизмами, нарушение сроков и условий хранения компонентов реакции, нарушение техники взятия крови.
В современных тест-системах в качестве антигена нашли применение рекомбинантные или синтетические пептиды. Первые получили большее распространение. Но при плохой очистке в смесь антигенов T. pallidum попадают белки Escherichia coli, что приводит к ложной серодиагностике сифилиса у больных эшерихиозом или здоровых, в сыворотке которых обнаружены антитела к кишечной палочке.
В определенной степени к диагностическим ошибкам следует отнести и неправильную трактовку результатов исследования.
Острые и хронические ЛПР
Помимо технических ошибок при выполнении тестов, ЛПР могут быть обусловлены и особенностями организма. Условно ЛПР разделяют на острые (<6 месяцев) и хронические (сохраняются более 6 месяцев).
Острые ЛПР могут наблюдаться при беременности и во время менструации, после вакцинации, после недавно перенесенного инфаркта миокарда, при многих инфекционных заболеваниях. Инфекции, при которых могут отмечаться ЛПР — пневмококковая пневмония, скарлатина, инфекционный эндокардит, туберкулез, лепра, венерическая лимфогранулема, шанкроид (мягкий шанкр), лептоспироз и другие спирохетозы, ВИЧ-инфекция, инфекционный мононуклеоз, малярия, ветряная оспа, вирусные гепатиты, паротит, корь, респираторные заболевания, грипп и дерматозы.
Острые ЛПР нестойки, их спонтанная негативация происходит в течение 4-6 месяцев.
Хронические ЛПР возможны при аутоиммунных заболеваниях, системных болезнях соединительной ткани, онкологических заболеваниях, хронической патологии печени и желчевыводящих путей, при сердечно-сосудистой и эндокринной патологии, при заболеваниях крови, при хронических заболеваниях легких, при инъекционном применении наркотиков и др. При большинстве этих состояний выявляют антикардиолипиновые антитела классов IgG и IgM («реагины»).
Хронические ложноположительные реакции могут оставаться позитивными в течение всей жизни.
Хронические ложноположительные реакции могут являться преклиническими проявлениями тяжелых заболеваний. При злокачественных новообразованиях, диффузных болезнях соединительной ткани титр ЛПР может быть очень высоким.
Среди причин хронических положительных реакций выделяют физиологические состояния (пожилой возраст). С возрастом количество ЛПР увеличивается, у женщин они наблюдаются в 4,5 раза чаще, чем у мужчин. В возрастной группе 80-летних лиц распространенность ЛПР составляет 10%.
Причиной ЛПР могут быть частое использование вводимых внутривенно препаратов, частые переливания и инфузии.
Хронические инфекции (туберкулез, лепра, инфекционный эндокардит, малярия), миелома также могут стать причинами ЛПР.
Заражение другими видами спирохет
Ложноположительные реакции трепонемных и нетрепонемных тестов могут наблюдаться при инфекционных заболеваниях, возбудители которых имеют антигенное сходство с бледной трепонемой. Это возвратный тиф, лептоспироз, клещевой боррелиоз, тропические трепонематозы (фрамбезия, беджель, пинта), а также воспалительные процессы, обусловленные сапрофитными трепонемами полости рта и гениталий.
Возбудители эндемических трепонематозов (фрамбезия, пинта, беджель) — это трепонемы, которые обладают родоспецифическими антигенами, сходными с антигенами T.pallidum. В связи с этим антитела, образующиеся к ним, способны вступать в перекрестные взаимодействия с антигеном возбудителя сифилиса.
Россия не является территорией, эндемичной по данной группе заболеваний. Эти инфекции встречаются главным образом, в странах Африки, Латинской Америки и Южной Азии, и случаи заболеваний редки в практике лечебных учреждений.
Пациента с положительными серологическими реакциями на сифилис, прибывшего из страны с эндемическими трепонематозами, необходимо обследовать на сифилис и назначить противосифилитическое лечение, если оно ранее не проводилось.
Биологическая ложноположительная реакция Вассермана
Начиная с 1938 года, и особенно во время Второй Мировой войны, в США стали широко проводиться скрининговые серологические исследования для выявления сифилиса. Исследователи сопоставили полученные данные и выяснили, что положительная или сомнительная реакция обнаруживалась у людей не имевших клинических и эпидемиологических признаков сифилитической инфекции или контактов по сифилису. Причем такие результаты возникали гораздо чаще, чем предполагалось ранее. Положительные результаты нетрепонемных тестов с липидными или кардиолипиновыми антигенами (VDRL, в тестах Колмера, реакции Кана) были обнаружены у пациентов с различными заболеваниями, но не имеющих признаков сифилитической инфекции. Биологические ложнополжительные результаты были выявлены у пациентов с аутоиммунными, воспалительными и гематологическими заболеваниями.
В русскоязычной медицинской литературе этот феномен получил наименование «биологическая ложноположительная реакция Вассермана» (Б-ЛПРВ), т.к. указанные результаты наблюдались при проведении самого распространенного теста тех времен — реакции Вассермана.
Оказалось, что Б-ЛПРВ может встречаться в двух основных вариантах — остром и хроническом. В первом случае у больных, перенесших какую-либо, но не сифилитическую инфекцию, Б-ЛПРВ исчезает в процессе выздоровления, и длительность ее обнаружения не превышает шести месяцев. Во втором случае Б-ЛПРВ может устойчиво сохраняться в течение многих лет в отсутствие очевидного причинного фактора. В начале 50-х годов было установлено, что наиболее часто хроническая Б-ЛПРВ выявляется при аутоиммунных заболеваниях, особенно СКВ, при которой частота ее обнаружения достигает 30—44%
Ложноположительность нетрепонемных (кардиолипиновых) тестов
Липидные антигены T. pallidum cоставляют значительную часть клетки, однако в организме могут присутствовать и имеющие такое же строение липиды – аутоантигены, образующиеся в результате разрушения органов и тканей (в основном липиды митохондриальных мембран).
Сифилитическая инфекция сопровождается образованием иммунных комплексов и аутоиммунным ответом на кардиолипин, фибронектин, коллаген и мышечную креатинкиназу. В нетрепонемных тестах в качестве антигена используют раствор трех высокоочищенных липидов (кардиолипин, стабилизированный лецитином и холестерином) в этиловом спирте. Кардиолипин не является специфичным компонентом для T. pallidum, а также описан как один из фосфолипидов биомембран человека. Поэтому антитела к этому антигену регистрируют в сыворотке практически при любой альтерации клеток человека в результате инфекций и при некоторых физиологических и патологических состояниях.
Так как антиген, используемый в нетрепонемных реакциях, обнаруживается в других тканях, тесты могут давать положительные результаты у лиц без трепонемной инфекции (1—2 % в общей популяции).
Наиболее частой причиной биологических ложноположительных нетрепонемных тестов является антифосфолипидный синдром — аутоиммунный процесс, встречающийся при заболеваниях соединительной ткани (системной красной волчанке, дерматомиозите, склеродермии).
При использовании нетрепонемных тестов (РМП и ее модификаций) ложноположительные результаты могут быть обусловлены наличием в крови антител к ревматоидному фактору, перекрестно реагирующих антител при аутоиммунной патологии («кресс-реактеры»).
Другими факторами возникновения ложноположительных результатов считаются некоторые хронические бактериальные инфекции (лепра и др.), заболевания вирусной этиологии (инфекционный мононуклеоз), системные болезни соединительной ткани.
Причины также могут заключаться в пожилом возрасте (старше 70 лет), беременности, обширной соматической патологии, нарушениях обмена липидов, иммунодефицитных состояниях различной этиологии, системными хроническими заболеваниями сердца, легких.
Среди других причин следует отметить онкологические заболевания, туберкулез, энтеровирусные инфекции, вирусные гепатиты, болезнь Лайма, пневмонии, алкоголизм, наркоманию, сахарный диабет, вакцинацию, другие инфекции (малярия, ветряная оспа, корь, эндо- и миокардиты), подагру.
При этих состояниях отмечается развитие иммунологических нарушений, приводящих к аномальной продукции антител, способных перекрестно реагировать и с трепонемными антигенами.
Таблица. Биологические причины ложноположительных реакций при нетрепонемных серологических тестах.
| Острые (<6 месяцев) | Хронические (>6 месяцев) |
|---|---|
| Физиологические состояния: Беременность Вакцинация некоторыми видами вакцин | Физиологические состояния: Пожилой возраст |
| Бактериальные инфекции: Пневмококковая пневмония Скарлатина Инфекционный эндокардит | Бактериальные и другие инфекции: Инфекционный эндокардит Малярия |
| Микобактериальные инфекции: Туберкулез Лепра | Микобактериальные инфекции: Туберкулез Лепра |
| Другие ИППП: Шанкроид (мягкий шанкр) Венерическая лимфогранулема | Заболевания соединительной ткани: Системная красная волчанка |
| Инфекции, вызываемые другими спирохетами: Возвратный тиф Лептоспироз Лайм-бореллиоз | Онкологические заболевания: Миелома Лимфома |
| Вирусные инфекции: ВИЧ Инфекционный мононуклеоз Корь Ветряная оспа Паротит (свинка) Вирусный гепатит | Другие причины: Инъекционная наркомания Множественные переливания крови Сахарный диабет |
Ложноположительность трепонемных тестов
Проблема усугубляется тем, что трепонемные тесты также могут быть ложноположительными. Причинами могут являться аутоиммунные заболевания, коллагенозы, болезнь Лайма, беременность, лепра, герпес, малярия, инфекционный мононуклеоз, опухоли, наркомания. В последние годы для дифференциации ЛПР за рубежом начали активно использовать иммуноблоттинг — один из самых современных методов диагностики сифилиса.
Сохранение антител после успешного лечения
Специфические диагностические реакции длительное время остаются положительными даже после полноценной терапии. После эффективного лечения сифилитической инфекции, у большинства больных титры в нетрепонемных тестах снижаются в 4 раза через 6–12 месяцев после лечения. Однако, при позднем начале терапии, титры даже в нетрепонемных тестах могут сохраняться на прежнем уровне, но никогда не увеличиваться.
Ложноотрицательные результаты анализов
Различные методы диагностики демонстрируют различную чувствительность и специфичность в зависимости от формы и стадии сифилиса. Вероятность ошибочного диагноза возрастает, особенно в случаях латентного, скрытого, сочетанного течения заболевания.
Ложноотрицательные серологические реакции на сифилис могут наблюдаться при вторичном сифилисе вследствие феномена прозоны при тестировании неразведенной сыворотки, а также при обследовании лиц с иммунодефицитным состоянием, например ВИЧ-инфицированных пациентов.
Ложноотрицательные результаты серологических специфичес- ких реакций (РПГА), вызванные биологическими факторами, могут быть обусловлены конкуренцией между специфическими IgM и IgG за связывание с антигеном на поверхности эритроцитов, а также «феноменом прозоны». В последнем случае агглютинация не происходит из-за гиперпродукции антител к бледной трепонеме, поскольку каждый антиген-рецептор на эритроцитах из-за избытка антител связан с одной молекулой агглютинина, что препятствует образованию «решетки». Замена РПГА на TPPA, т.е. эритроцитов на синтетические частицы, видимо, исключит или минимизирует получении ложноотрицательных результатов.
В ИФА такие реакции можно объяснить наличием серонегативной фазы при первичном сифилисе, а при вторичном — иммунной недостаточностью, наличием ВИЧ-инфекции. При получении отрицательного результата серологических исследований на сифилис следует учитывать свойство бледных трепонем проникать и размножаться в различных органах и тканях — поиск возбудителя в лимфе (лимфатических узлах) в ряде случаев приводит к достоверному результату. Целесообразно повторить также анализ образцов, давших положительный результат. Повторное, через 5–7 и более дней, исследование сывороток, как правило, позволяет получить достоверные результаты.
Источник