Пробирка для анализа крови на стерильность

Пробирка для анализа крови на стерильность thumbnail

Кровь – уникальный источник информации о состоянии здоровья человека. Её используют при диагностировании практически всех заболеваний. Анализ на стерильность помогает узнать о наличии бактерий в крови, норм содержания различных веществ.

Что такое анализ крови на стерильность

В том случае, если назначили кровь на стерильность, что это такое помогает разобраться врач. Он должен объяснить своему пациенту о плане диагностики и необходимости каждого исследования.

При заражении организма, бактерии могут попадать в кровь и свободно передвигаться по организму, заражая органы и ткани. В крови патогенная микрофлора появляется при нарушении целостности кожи, тканей и сосудов. Это происходит при травмах: порезах, ожогах, царапинах, укусах, открытых переломах и т.д.

Частой причиной заражения крови становится хирургическая операция, некоторые косметические процедуры.

Любая бактерия при определенных благоприятных условиях начинает активно размножаться и образовывает колонию. Воспользовавшись этой особенностью микроорганизмов, ученые используют чашку Петри с питательной средой, в которой из раствора крови вырастают колонии бактерий.

Кровь на стерильность - правила забора, Инвитро, Гемотест, где можно сдать кровь взрослому, ребенку, новорожденному, что показывает анализ, расшифровка

Это позволяет исследовать их вид, особенности и определить метод лечения больного. Если бактерий нет – колония не образовывается, кровь считается стерильной.

В каких случаях назначают

Анализ крови на стерильность помогает узнать о наличии и особенностях бактерий в организме. Это такая процедура, что проводится не только для диагностирования, но и при подготовке к некоторым медицинским манипуляциям.

В каких случаях назначают анализ крови на стерильность:

  1. При заболеваниях, связанных с иммунодефицитом организма, например, при ВИЧ. В этом случае пациент должен знать – кровь на стерильность: что это такое периодическое обследование, которое поможет вовремя диагностировать болезнь, с которой организм самостоятельно справиться не в силах.
  2. При отсутствии эффекта от лечения антибиотиками. С помощью анализа на стерильность удается узнать о чувствительности бактерий к тому или иному антибиотику, подобрать правильное лекарство. Диагностика, как правило, повторяется после приема курса препарата.
  3. Перед и после хирургических вмешательств. Любая операция является риском заражения крови. Особенно это опасно, если в крови уже есть болезнетворные микроорганизмы. После хирургического вмешательства определение стерильности помогает установить отсутствие или наличие бактерий в организме, при необходимости определить стратегию лечения.
  4. После аварий или серьезных травм. Обязательно кровь на стерильность необходимо сдавать при обширных ранах, множественных открытых переломах. Это позволяет определить количество и виды бактерий, а также грибков, которые могут попасть в кровь и привести к заражению.
  5. При разрыве абсцессов, перфорации гнойных образований, некрозах и перитонитах. В этих случаях в полость тела и кровь попадает большое количество гноя с бактериями и грибками.
  6. После сложных абортов и других акушерских манипуляций, при которых возможно заражение стафилококком.
  7. При гнойных заболеваниях ЛОР-органов: тонзиллитах, синуситах и отитах.
  8. При онкологических заболеваниях. В этом случае анализ на стерильность проводится после лазерной или химической терапии. Эти методы лечения снижают иммунную защиту до 0.
  9. При сильной лихорадке, которая держится больше 3 дней.

Какие заболевания можно выявить

С помощью анализа крови на стерильность могут быть диагностированы следующие заболевания:

  1. Сепсис. Это общее заражение организма, при котором в кровь попадает огромное количество бактерий или грибков. Опасность болезни в том, что с кровью инфекция распространяется по всем органам и приводит к быстрой смерти без лечения.
  2. Менингит. Инфекционное поражение оболочек спинного и головного мозга. Одним из путей заражения бактериальной формой менингита является гематогенной. Кровь переносит инфекцию от воспалительного очага в тканях или органах в мозг.Кровь на стерильность - правила забора, Инвитро, Гемотест, где можно сдать кровь взрослому, ребенку, новорожденному, что показывает анализ, расшифровка
  3. Пиодермия. Тяжелое инфекционное поражение кожи, которое вызывают бактерии кокки. Заражение может возникать из-за маленькой царапины, после чего возбудители распространяются через кровь на другие участки тела.
  4. Эндокардит. Воспалительный очаг во внутренней оболочке сердца. Основной возбудитель стрептококки. Появляется при наличии первичного инфекционного заболевания.
  5. Остеомиелит. Инфекционное заболевание костей и костного мозга, которое сопровождается некрозом и гнойными выделениями. Возбудитель попадает к кости через кровь от инфекционного очага. Реже бактериальное заражение происходит через открытую рану при ее загрязнении.
  6. Туберкулез. Заболевание органов дыхания (реже других систем), которое возникает из-за инфицирования палочками Коха. При посеве на стерильность удается не только определить наличие возбудителя, но и его устойчивость к лекарствам.

Как подготовиться к анализу

От подготовки к анализу во многом зависит результат исследования. Методы подготовки отличаются от того, как проводится исследование: в плановом режиме или экстренно. Плановый забор крови на стерильность проводится при заболеваниях, связанных с иммунодефицитом, при диагностике гнойных заболеваний кожи и туберкулезе. Подготовка к исследованию обычно начинается за несколько дней.

В это время необходимо руководствоваться следующими правилами:

  1. В зависимости от формы лечения болезни антибиотики или иные препараты против инфекции необходимо закончить принимать за 2-5 дней до забора крови. Если лекарства не принимаются, начинать лечение нельзя, в том числе и гомеопатическими препаратами.
  2. За два дня необходимо отказаться от приема жирной, жареной и острой пищи, полностью исключить из рациона алкоголь.
  3. В день сдачи анализа запрещено курить, употреблять любые лекарственные препараты.
  4. Некоторые врачи рекомендуют увеличить потребление жидкости и пищи в день сдачи крови.

Если забор крови происходит в экстренном порядке, при лихорадке, подозрении на сепсис, после сильной травмы или аварии, необходимо придерживаться следующих правил:

  1. У больного кровь необходимо брать в период пика температуры тела– 39-40 градуса. Препараты, которые снижают температуру можно давать только после анализа.
  2. Если больной принимает противомикробные лекарства, их прием нужно приостановить минимум за 12 часов до анализа.
  3. При открытых травмах и авариях сначала берется кровь на стерильность, только потом вводятся антибиотики широкого спектра.

Правила забора крови

От правильности выполнения анализа крови на стерильность напрямую зависит результат исследования.

Кровь на стерильность - правила забора, Инвитро, Гемотест, где можно сдать кровь взрослому, ребенку, новорожденному, что показывает анализ, расшифровкаЧто такое анализ на стерильность и как правильно производится забор крови.

Забор крови осуществляется по следующим этапам:

  1. Анализ берет медсестра, которая должна рассказать про метод забора крови.
  2. Чаще всего для забора крови используется вена в локтевом сгибе или на тыльной стороне ладони. В редких случаях материал берется из пальцев.
  3. Для манипуляции медицинский работник использует только стерильные инструменты. Перчатки и шприц должны быть новыми и утилизироваться сразу же после анализа.
  4. Перед введением иглы кожа тщательно обрабатывается дезинфицирующим раствором в квадрате 5 на 5 см в месте укола.
  5. Объем крови должен быть не менее 10 мл. Чем меньше материала, тем выше риск ложноотрицательного или ложноположительного результата.
  6. При заборе крови нельзя использовать катетер. Он является источником инфекции и может загрязнить материал.
  7. Для точности результата кровь берется с обеих рук с интервалом в полчаса.
  8. Медсестра над пламенем горелки снимает со шприца иголку, а содержимое впрыскивает в пробирку с жидкой питательной средой. Края пробирки обжигаются и закрываются стерильной резиновой пробкой.
  9. Пробирка помещается в термостат с благоприятной для жизнедеятельности бактерий температурой (38-39 градусов) и перемещается в лабораторию.

В некоторых случаях за полчаса до забора крови больному могут вводить небольшую дозу адреналина. Это приводит к сокращению селезенки и ускорению тока крови. Используется при инфицировании внутренних органов.

Осуществление процедуры у новорожденных детей

Некоторым новорожденным требуется сдать кровь на стерильность. Что это такое, должна знать каждая будущая мама и не пугаться, если врач проводит дополнительные диагностические процедуры сразу же после рождения малыша.

Проведение анализа крови на стерильность может понадобиться в следующих случаях:

  • сразу же после рождения у ребенка поднимается температура выше 39, отсутствуют рефлексы, он постоянно срыгивает и т.д.;
  • роды были преждевременными;
  • во время беременности будущая мама перенесла тяжелые заболевания, которые вызываются стафилококками или стрептококками;
  • присутствует риск внутриутробного заражения;
  • у ребенка есть аномалии развития внутренних органов;
  • при подозрении на омфолит новорождённых – гнойное воспаление пупочной ранки.

Особенность проведения анализа для ребенка заключается в методе забора крови. Пальцы ребенка малы, чтобы взять достаточное количество материала. Поэтому для проведения исследования крови на стерильность применяется венозная кровь или капиллярная кровь из пятки.

Вены ребенка в локтевом сгибе, где проводится процедура забора у взрослых, достаточно малы, их трудно нащупать.

Кровь на стерильность - правила забора, Инвитро, Гемотест, где можно сдать кровь взрослому, ребенку, новорожденному, что показывает анализ, расшифровка

Могут использоваться сосуды других участков тела:

  1. Вены головы.
  2. Вены тыльной стороны ладони.
  3. Вены предплечья.
  4. Вены икр.

Существуют правила при анализе, которые должны знать родители:

  • ребенок должен быть спокоен, не плакать и не истерить. Поэтому лучше взять с собой на анализ погремушку или музыкальную игрушку;
  • в день забора крови рекомендуется при кормлении дать ребенку жидкости немного больше обычного;
  • кожа и конечности малыша должны быть теплыми перед анализом. Поэтому нельзя идти в лабораторию сразу же после улицы. Ребенка нужно разбудить, раздеть и посидеть с ним в помещении 10-15 минут;
  • не рекомендуется делать забор крови спящему или сонному малышу, это может его сильно испугать.

Процесс бактериологического посева

Во время бактериального посева, кровь помещают на питательную культуру, благодаря которой бактерии начинают активно размножаться и «строить» колонии.

В качестве питательных сред могут использоваться следующие вещества:

  • агар из казеина или сыворотки;
  • яичная среда;
  • бульон из агара и крови животных.

Питательная среда может быть двух видов:

  1. Жидкая среда. Используется при небольшом количестве бактерий. В качестве инструмента используются пробирки.
  2. Плотная среда. Используется при большом количестве бактерий и грибков. В качестве инструмента используется чашка Петри. Она представляет собой тщательно стерилизованную стеклянную или пластиковую круглую плоскую чашу.

В питательную среду исследуемый материал помещается с помощью стеклянных или металлических игл, а также специальных приборов, которые называются бактериальной петлей. Для подсчета количества бактерий в крови используется обозначение КОЕ – количество единиц (микроорганизмов) в миллилитре крови, которые способны образовать колонию.

Существуют следующие степени роста:

  1. Первая степень. В плотной структуре колонии отсутствуют полностью, наблюдается их мизерное количество в жидкой среде.
  2. Вторая степень. В плотной среде появляется 5-8 колоний.
  3. Третья степень. В плотной среде можно сосчитать до 100 колоний.
  4. Четвертая степень. В среде насчитывается более 100 колоний микроорганизмов.

Кровь на стерильность - правила забора, Инвитро, Гемотест, где можно сдать кровь взрослому, ребенку, новорожденному, что показывает анализ, расшифровка

При первой и второй степени незначительное количество бактерий может говорить о нарушении правила забора крови и недостаточной стерильности. Приметой загрязнения материала и оборудования может стать и смешенный результат, когда вырастают колонии разных видов бактерий.

Достоинством бактериального посева является возможность проведения антибиотикограммы. Это метод изучения устойчивости бактерий к тем или иным антибиотикам.

Для этого могут применяться следующие методы:

  1. Метод смешенных дисков. В среду с бактериями помещаются диски, пропитанные разными антибиотиками. По зонам задержки роста и уменьшению колонии можно судить о чувствительности микроорганизмов к лекарству.
  2. Е-тест. Методика такая же, как и выше, но вместо дисков используются бумажки с разной концентрацией одного и того же антибиотика.

Точность тестирования

Анализ крови на стерильность оказывается точным в 90-95% случаев. Это зависит от квалификации клиники и работников, соблюдения всех правил забора материала. Если в крови не обнаружены бактерии – она стерильна. Это значит, что заболевания нет. В таких случаях повторного анализа не требуется, так как риска неточности исследования нет.

О неточном анализе приходится говорить, если КОЕ очень низкий, или в анализе обнаружены разные типы бактерий.

Неточный результат анализа крови на стерильность может возникнуть по следующим причинам:

  • недостаточная стерильность при заборе крови и работе с материалом в дальнейшем;
  • низкая квалификация медицинского персонала и работников лаборатории;
  • ошибки при расшифровке результата;
  • употребление медикаментов перед забором крови;
  • нарушение правил транспортировки биологического материала: неправильная температура в термостате или длительная перевозка.

Через сколько времени готов результат

Примерно через 3 дня исследуемый человек может узнать о стерильности своей крови. Уже через несколько суток врачи могут сказать о наличии бактерий и их примерном количестве.

Кровь на стерильность - правила забора, Инвитро, Гемотест, где можно сдать кровь взрослому, ребенку, новорожденному, что показывает анализ, расшифровка

Точный окончательный результат готов примерно через 10 дней. За это время специалисты «выращивают» инфекционных возбудителей в специальных чашках. Также в течение этого срока изучается устойчивость бактерий и грибков к различным антибиотикам.

Где можно сдать кровь на стерильность и стоимость

Анализ крови на стерильность можно сдать практически в любой клинике. Это такое исследование, что должно проводиться в каждом лечебном учреждении при наличии диагностической лаборатории. В бесплатной городской поликлинике проверить кровь на стерильность можно только по направлению от лечащего врача.

Платно без направления можно провести исследование в частных клиника в любое удобное время. Цена в Москве составляет в среднем 1500 рублей за один анализ. Самая минимальная стоимость – 300 рублей.

Она зависит от составляющих анализа:

  • определение количества бактерий и грибков;
  • определение видов инфекционных возбудителей;
  • определение лекарств, к которым устойчивы бактерии и грибки.

Анализ крови на стерильность указывает, что именно находится в организме человека. Это такие исследования, как бак посев мочи, мазок из половых или ЛОР-органов – это возможность более детально изучить заболевание.

Видео об анализе крови на стерильность и правилах забора

Правила забора крови:

Что можно узнать по анализу крови:

Источник

                Департамент  здравоохранения  Воронежской  области

           БУЗ  ВО  «Воронежская  областная  клиническая  больница  №1»

Исследование крови на стерильность

на современном этапе

Информационно-методическое  письмо  для  врачей-бактериологов

   Составители: главный внештатный специалист  по микробиологической диагностике

департамента здравоохранения Воронежской области, заведующий бактериологической лабораторией

БУЗ ВО ВОКБ №1   Е.В. Бондаренко

Врач-бактериолог БУЗ ВО ВОКБ№1 Т.М. Лапа

Воронеж

2015

Кровь — один из наиболее распространенных образцов биоматериала, исследуемых в бактериологической лаборатории. Исследование крови на стерильность является важнейшим методом лабораторного исследования у пациентов с определенными показаниями.

Основные показания для посева крови:

  • Лихорадка (более 38°C)
  • Гипотермия (менее 36°C)
  • Лейкоцитоз
  • Гранулоцитопения

Бактерии проникают в кровь экзогенным (например, при травме) и эндогенным (из очага инфекции) путями.

Бактериемия: Наличие бактерий в крови, подтвержденное результатами посева

  • Транзиторная бактериемия, когда происходит кратковременный выброс в кровь микроорганизмов под действием таких факторов, как физическая нагрузка, перегревание, переохлаждение. Подобные явления протекают обычно бессимптомно.
  • Интермиттирующая бактериемия, когда существует локальный очаг инфекции, например пневмония или внутрибрюшной абсцесс.
  • Продолжающаяся бактериемия проявляется внутрисосудистой

инфекцией, например, инфекционным эндокардитом или септическим тромбофлебитом.

Сепсис – это патологический процесс, в основе которого лежит реакция организма в виде генерализованного (системного) воспаления на инфекцию различной природы (бактериальную, вирусную, грибковую).

В последнее десятилетие в мире отмечается учащение случаев бактериемии и фунгемии. Это связано с развитием инвазивных медицинских вмешательств, старением населения, увеличением количества трансплантаций органов и костного мозга, увеличением количества более вирулентных и трудно поддающихся лечению микроорганизмов, более агрессивной внутрибольничной инфекцией.

Факторы риска, способствующие проникновению бактерий в кровяное русло и развитию бактериемии:

  • внутривенные катетеры
  • катетер мочевого пузыря
  • любые инвазивные процедуры
  • операционные вмешательства
  • нейтропения
  • терапия антибиотиками (эмпирическая), кортикостероидами, цитотоксическая                      

Гемокультивирование является в настоящее время «золотым стандартом» в диагностике септицемии

Принципы микробиологической диагностики

Точный диагноз устанавливается только при обнаружении возбудителей в крови пациентов. Важное условие — своевременный забор пробы. Для проведения анализа используют кровь непосредственно из венозного сосуда. Сбор пробы из постоянного внутривенного или внутриартериального катетеров допускается только в случаях подозрения на наличие катетер-ассоциированной инфекции или отсутствия возможности ее получения венопункцией.

  • Лихорадка и озноб начинается примерно через час после попадания микроорганизмов в кровоток
  • Чаще всего кровь забирается как можно скорее после приступа лихорадки или озноба при подозрении на инфекцию
  • Забор крови должен осуществляться по возможности до назначения антимикробной терапии.

Объем крови – один из наиболее значимых факторов в повышении чувствительности гемокультивирования. Считается, что риск случайной контаминации 1 отдельно взятой пробы крови составляет 3% (0,03).

Тогда вероятность случайной контаминации одновременно 2 проб составляет: 0,03*0,03=0,0009= 0,09%. Поэтому более информативно исследование 2 и более проб каждая объемом не менее 10мл.

Рекомендуемое число отбираемых проб крови в зависимости от предполагаемого заболевания по МУ 4.2.2039-05Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории:

 1) Острый сепсис, менингит, менингококоцемия, остеомиелит, артрит, острая пневмония,  пиелонефрит 2 пробы из двух сосудов или двух участков кровеносного сосуда перед началом антибактериальной терапии

2) Лихорадка неясного генеза 4 сначала 2 пробы из разных кровеносных сосудов (двух участков сосуда), затем через 24-36 ч. еще 2 пробы

3) При подозрениях на наличие эндокардита и вялотекущего сепсиса: при обострении 2 пробы из двух сосудов в течение первых 1 — 2 ч подъема температуры тела (не на пике температуры!)  до начала терапии;  при подостром и вялотекущем течении сначала 3 пробы с интервалом 15 мин. и более. Если все пробы отрицательны, на вторые сутки после посева собирают еще 3

4) у пациентов с эндокардитами, получающими антибиотики, собирают по 2 отдельные пробы в течение трех дней

5) У больных, в комплекс терапии которых включены антибиотики, собирают 6 проб в течение 48 ч; пробы необходимо собирать непосредственно перед введением следующей дозы препарата

6) при лихорадке неясного генеза сначала 2 пробы из разных кровеносных сосудов, затем через 24-36 часов еще 2 пробы

Минимальный набор сред для посева крови согласно положениям Приказа 535:

“Двойная среда” — скошенный во флаконе 1,7-2% питательный агар (150 мл) и 150 мл полужидкой среды, приготовленной на питательном бульоне с добавлением 15 г глюкозы и 0,15 г агара.

Среда для контроля стерильности” — стандартная тиогликолевая среда к которой  добавляют 15-20 г дрожжевого экстракта и агар 4,25-5 г на 1 литр к среде добавляют  0,001 г резазурина в качестве индикатора анаэробиоза.

 Необходимое оснащение для взятия крови:

  • Флаконы с питательными средами.
  • 70о  этиловый спирт;
  • 2% или 5% настойка йода
  • венозный жгут
  • резиновые (латексные, виниловые) перчатки
  • спиртовка (только при использовании флаконов со средами, изготовленными в лаборатории)

 Техника получения пробы крови. Сбор проб крови для посева производят 2 человека у постели больного или в процедурной.

— участок кожи над выбранным для пункции сосудом продезинфицировать: обработать кожу тампоном, смоченным 70%-м этиловым спиртом, затем другим тампоном, смоченным 1 — 2%-м раствором йода или другим дезинфектантом, разрешенным к применению для этих целей в установленном порядке, круговыми движениями, начиная от центра, в течение 30 с; подождать, пока высохнет обработанный участок. Не допускается пальпировать сосуд после обработки кожи перед введением иглы;

— при работе с флаконами с двойной средой: стерильным шприцем собрать у взрослых 10 мл крови, у детей — 5 мл; над пламенем спиртовки открыть флакон; внести кровь во флакон из шприца, предварительно сняв иглу; обжечь горлышко и пробку флакона в пламени спиртовки, закрыть флакон пробкой; осторожно, чтобы не замочить пробку флакона, перемешать его содержимое круговыми движениями.

Отобранный материал быстро доставляется в лабораторию.  Образцы крови замораживать нельзя! Микроскопию мазков крови проводят при подозрении на паразитарные инфекции (малярия, трипаносомоз), при бактериальных инфекциях это нецелесообразно, так как единственная бактерия, обнаруживаемая в мазках,-  Borreliarecurrentis. Посевы инкубируют при 37°С с ежедневным просмотром в течении 8 дней. При отсутствии видимого роста со всех сред кроме «двойной среды» среды для контроля стерильности делают высевы на кровяной агар и мазки на 3,5,8 дни. При отсутствия роста дают отрицательный ответ на 9-10 день. При наличии помутнения, образования хлопьев, крошек, необходимо произвести высев из флакона независимо от дня исследования.

Визуальные признаки роста гемокультур при посевах крови

Макроскопические 
изменения среды

Возможные микроорганизмы

Гемолиз

    Стрептококки, стафилококки,

    Listeria spp., клостридии, Bacillus spp.

Помутнение

     Аэробные грам(-) палочки, стафилококки, Bacteroides spp.

Газообразование

    Аэробные грам(-) палочки, анаэробы

Образование пленки

    Pseudomonas spp., Bacillus spp.,

    дрожжевые клетки

Образование хлопьев

    S.aureus

Видимые колонии («дымчатые»)

    Стафилококки, стрептококки

Причины отрицательных результатов:

— Локальная инфекция (защитные силы организма удерживают инфекцию в одном месте)

— Неактуальное время взятия материала (вероятность упустить интермиттирующую бактериемию )

     — Слишком маленький объем полученного материала

— Прием антибиотиков пациентом

 Идентификация выделенных бактерий при бактериемиях:

  • Значимы и часто встречаются — S.aureus, S.pneumoniae, E.coli и др. энтеробактерии, P.aeruginosa, C.albicans
  • Значимы —  S.pyogenes, S.agalactiae, L.monocytogenes, N.meningitidis, N.gonorrhoeae, H.influenzae, B.fragilis группа, Candida spp, Cryptococcus neoformans
  • Контаминанты или нет? (зависит от конкретных случаев)– КОС, зеленящие стрептококки, Propionibacterium acnes, Acinetobacter  calcoaceticus, Clostridium spp., Corynebacterium spp., Bacillus spp

Дополнительные критерии в пользу клинической значимости изолята:

— Быстрое выделение культуры – в течение первых 48 часов

— Выделение монокультуры

— Выделение одного и того же вида микроорганизма в разных пробах

— Выделение одного и того же вида микроорганизма из крови и других локусов

Помимо ручных методов существуют методы автоматизированного культивирования крови, которые являются более современными, более чувствительными. Самая известная  серия бактериологических анализаторов для посева крови на стерильность,- BDBACTEC.

Прибор Bactec предназначен для ускоренного обнаружения бактерий и грибов в клинических образцах крови. Образцы крови отбираются у пациентов и вносятся напрямую в оригинальные флаконы с питательной средой, после чего – по возможности незамедлительно – помещаются в рабочие станции приборов серии BD Bactec™ 9000. Наличие микроорганизмов в крови устанавливается с помощью высокочувствительной флуоресцентной технологии, основанной на индикации СО2, выделяемого в питательную среду растущими и интенсивно делящимися микроорганизмами. С помощью системы BD BACTEC 90% положительных результатов выявляются в первые 24 часа инкубации, что позволяет своевременно начать эмпирическую антибактериальную терапию либо внести изменения в действующую схему лекарственной терапии. Своевременная бактериологическая диагностика бактериемии значительно сокращает частоту возникновения септического шока и увеличивает выживаемость больных.

Флаконы для гемокультивирования выпускаются нескольких видов. Наиболее часто используются следующие:

  • Флаконы со средой для культивирования аэробов
  • Флаконы со средой для культивирования анаэробов

— содержат частицы латекса, адсорбирующие антибиотики из крови, а также способствующие лизису клеток крови и освобеждению внутриклеточных бактерий.

  • Флаконы со средой для культивирования детской крови

— предназначены для исследования малого объема крови до 3 мл, также содержат частицы латекса

  • Флаконы с селективной средой для выявления дрожжей и грибов

— содержат хлорамфеникол и тобрамицин для подавления роста сопутствующих бактерий, лизирующие вещества, способствующие освобождать из лейкоцитов фагоцитированные грибы.

Используется вакуумное взятие крови с использованием системы для забора крови  игла-бабочка. Под действием вакуума кровь втягивается через иглу  BD VacutainerTM  напрямую из вены в пробирки BD VacutainerTM и флаконы BD BactecTM и сразу же смешивается с питательной средой.

Традиционно отбор проб крови осуществляется одномоментно в аэробный (BD BACTEC™ PLUS+ Aerobic/F) и в анаэробный (BD BACTEC™ PLUS+ Anaerobic/F) флаконы. Альтернативный набор складывается из: а) аэробного флакона и дополнительного аэробного; б) анаэробного и/или Mycosis IC/F, и/или Myco F/Lytic флаконов (оба типа флаконов – для культивирования гемокультур грибов).

Оптимальный объем крови для гемокультивирования

  • Дети:
  • Новорожденные         1-2 мл крови/флакон (допустимый для посева объём крови – 0,5-5 мл)
  • Дети                                           2-5 мл/флакон
  • Подростки                               10-20 мл/флакон            
  • Взрослые:

         Одномоментно 20 -30 мл (по 10 мл во флакон) крови 2 или 3 раза в течение 24 ч

 ШАГ 1
  • Продезинфицируйте место венепункции 70%-ным раствором этилового спирта.
  • Круговыми движениями от центра к периферии продезинфицируйте место венепункции 1-10%-ным раствором йода или хлоргексидином
  • Дождитесь полного высыхания антисептика
 ШАГ 2
  • Промаркируйте подготовленные к посеву флаконы того или иного типа (с соответствующей задачам исследования питательной средой), указав на этикетке каждого флакона Ф.И.О. пациента и/или № истории болезни, время отбора пробы крови, № и/или название отделения
  • Удалите пластиковый колпачок и протрите резиновую пробку 70%-ным раствором этилового спирта
 ШАГ 3
  • Используйте  BD Vacutainer®  (367282 / 367284) – набор для отбора проб крови (игла -“бабочка” 21G / 23 /G, зелёная с защитной защелкой; 18-тисантиметровый катетер, Луер-адаптер с клапаном для отбора проб крови, 50 шт/упак.) с  адаптером для флаконов (364815; 250 шт/упак.)
  • Пропунктируйте вену
  • Вставьте флакон в держатель
  • Держите флакон строго вертикально
 
  • В первую очередь засевайте аэробный флакон
  • Под действием вакуума кровь начнет набираться во флакон самостоятельно.
  • Наполните флакон соответствующим количеством крови (в “детские” флаконы – 1-3 мл, [для новорожденных – 0,5-2 мл], во “взрослые” флаконы – 7-10 мл)
  • Извлеките флакон из держателя
  • Вставьте в держатель следующий флакон
 ШАГ 4
  • Приложите сухую стерильную салфетку к месту венепункции
  • Извлеките иглу из вены
  • Транспортируйте флаконы в лабораторию как можно скорее

При правильном заборе крови контаминация составляет не более 2-3 % всех гемокультур. Использование наборов для забора крови BD VacutainerTM существенно снижает степень контаминированности культур.

При наличии роста микроорганизма во флаконе анализатор оповещает персонал лаборатории с помощью световой индикации на передней панели прибора, а также с помощью звуковой индикации. Таким образом, нет необходимости делать высевы из всех флаконов, высев делается целенаправленно из положительного флакона.

Объем исследований и микропейзаж при гемокультивировании в бактериологических лабораториях ЛПУ Воронежской области.

 Общее количество проб крови для исследования на стерильность по Воронежской области составило 12515. В 2013г это число было гораздо меньше: 8406. Доля этих анализов по лечебно-профилактическим учреждениям показана в таблице:

Районные ЛПУ

15,8%

Областные ЛПУ

59,8%

Городские ЛПУ

24,4%

Общее количество положительных высевов из образцов крови по области 1245, что составило 9,95% , в 2013г 808, что составило 9,6%.

ЛПУ

Общее количество

Кол-во положительных анализов

Процент высеваемости

Районные ЛПУ

1987

160

8

Областные ЛПУ

7436

769

10,3

Городские ЛПУ

3092

316

10,2

Микропейзаж выделенных культур:

Наиболее часто из крови выделялись следующие культуры: S. аureus- 165, коагулазоотрицательные стафилококки- 639  (основная масса- S. epidermidis- 478), Enterococcus faecalis- 74, Pseudomonas sp- 59, Klebsiella- 54, E. coli-31, Enterococcus faecium 36. Среди грибов рода Candida чаще всего выделялись C. albicans и C. glabrata.

В небольшом количестве выделялись:  Enterobacter-18, Ps. aeruginosa 20, Acinetobacter 17, Streptococcus spp 20.

В количестве от 2 до 5 выделялись такие культуры, как Str.viridans, Str.   β-haemolyticus, Str pyogenes, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Candida tropicalis, Candida  krusei.

Все бактериологические лаборатории в Воронежской области, за исключением двух, исследуют кровь на стерильность ручными методами. Бактериологические анализаторы «Бактек» имеются в бактериологических лабораториях Воронежской областной клинической больницы №1 и в лаборатории Перинатального центра 1к. В результате анализа микробиологического мониторинга за 2011-2014гг в этих лабораториях отмечается  увеличение количества высеваемости культур микроорганизмов. До использования аппаратной технологии высеваемость микроорганизмов из крови в составляла в 2010-2012гг от 6 до 10%, при исследовании с помощью «BD Bactec 9050» в 2013г- 24,7%, в 2014г-26,9% у взрослых пациентов и у новорожденных в 2013гг 17,5%, в 2014г-20,3%.

Литература

1. «Руководство по медицинской микробиологии» под редакцией А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой, Москва, 2013г

2. «Методы клинических лабораторных исследований». Справочное пособие под редакцией В.В. Меньшикова. Том 3 Клиническая микробиология. М, 2009.

3. «Лаборатория» журнал для врачей №5 2014г

4. «Клиническая микробиология» П.Р. Мари, И.Р. Шей,  краткое руководство, пер с англ., Москва, 2006г

5. Клиническая Микробиология и Антимикробная Химиотерапия
2013, том 15 (4).

Источник