Методика проведения общего анализа крови при ручных методах исследования
Как выглядит кровь и что такое кровотечение знают все. А вот информацией, зачем она нужна, обладает далеко не каждый человек. Давайте попробуем разобраться с этим вопросом и рассмотреть в общих чертах методы самых важных и распространенных лабораторных исследований этой единственной жидкой ткани организма.
Оглавление:
Функции крови
Гематологический анализ крови
— Биохимический анализ крови
— Иммунологический анализ крови
3. Бактериологические анализы крови
4. Паразитологические виды исследования крови
5. Исследование системы свёртывания (гемостаза)
6. Анализы крови на онкомаркеры
7. Анализы крови, применяемые для исследования функций органов
8. Анализ крови на беременность
Функции крови
Итак, для чего нужна человеку кровь?
На кровь возложены многочисленные задачи по:
- транспортировке кислорода и углекислого газа;
- доставке различных питательных веществ к клеткам тела;
- выведению вредных и ненужных продуктов обменных процессов,
- регуляции температуры тела;
- защите от болезнетворных организмов;
- поддержке баланса электролитного и кислотно-щелочного равновесия;
- поддержке формы тканей за счет наполнения сосудистого русла.
Вот далеко не полный перечень функций крови у человека. Состоит она из жидкой части – плазмы (60%) и форменных элементов (40%), выполняющих множественные задачи в организме.
Важно: детальное исследование клеток и элементов крови может рассказать врачу об очень многих изменениях в теле человека. Именно поэтому существует большое количество способов анализа крови. Постараемся разобраться с их основным набором.
Забор крови для обследования производится из пальца (капиллярная кровь) или путем внутривенной инъекции. В некоторых случаях проводят исследование крови, излившейся в полость (грудную, брюшную), также проводятся анализы выделений на скрытую кровь (кал, моча, рвотные массы).
Гематологический анализ крови
К этому виду диагностики относится общий (клинический) анализ крови.
С его помощью определяется:
- количество красных кровяных телец (эритроцитов), находящегося в них гемоглобина со всеми его фракциями;
- гематокритный показатель (отношение форменных элементов к объему);
- подсчет лейкоцитов (белых кровяных клеток, играющих защитную роль), лейкоцитарной формулы, по изменению которой можно заподозрить множество заболеваний и патологических состояний;
- количество эозинофилов, позволяющее делать выводы об аллергизации организма и наличия некоторых специфических инфекций.
- число тромбоцитов – увеличение или уменьшение которых указывает на состояние свертывающей системы.
Более подробно клинический анализ крови разобран в статье Общий анализ крови: нормы, расшифровка анализа крови и подготовка к анализу.
Биохимический анализ крови
Это самый информативный вид исследования.
Он позволяет определить у обследуемого:
- уровень содержания глюкозы (анализ крови на сахар), играющий важное значение в диагностике сахарного диабета и других заболеваний с нарушением обмена этого углевода;
- холестерин – обязательный для клеток компонент, входящий в структуру клеточных мембран, выполняющий роль регулятора мембранной проницаемости. Избыточное его количество свойственно атеросклеротическим процессам, приводящим к инфарктам и инсультам. Недостаток его встречается при некоторых наследственных болезнях. Оценивается не только содержание чистого холестерина, но и его транспортных комплексов – липопротеинов;
- триглицериды, повышение которых свойственно при ожирении, или наоборот, голодании, большой кровопотере, анемии, эндокринных расстройствах, болезнях почек, отравлениях и алкоголизме;
- белки, в частности альбумины, повышающиеся при воспалениях, глобулины, часть которых увеличивается при недостатке железа. С-реактивный белок – показатель острой фазы воспалительной реакции. Иммуноглобулины – обнаружение которых свидетельствует о реакциях, связанных с аллергией, белки системы свертывания крови. Появление некоторых видов белков, а также нарушение их соотношения может свидетельствовать о целом ряде заболеваний;
- остаточный азот. Азотемия – повышение содержания встречается при обезвоживании, при болезнях почек, туберкулёзе, сахарном диабете, цирротических изменениях печени, воспалений лёгких;
- ферменты плазмы крови. Аминотрансферазы – аспартатаминотрансфераза (АСаТ), аланинаминотрансфераза (АЛаТ). Активность их нарастает преимущественно при болезнях сердца и печени. Лактатдегидрогеназа (ЛДГ), креатинкиназа – позволяют определять фазу течения инфаркта миокарда. Также диагностическое значение имеют и другие ферменты, более подробно о которых написано в статье о биохимическом анализе крови;
- пигменты. Самый важный среди них – билирубин. Определение его величины позволяет проводить диагностику болезней печени;
- калий — уменьшение содержание этого элемента в крови свидетельствует об обезвоживании, длительном применении мочегонных препаратов, заболеваниях почек, обменных болезнях. Увеличение калия наблюдается при тяжелых травмах, ожогах;
- натрий — снижается в анализе из-за недостаточного поступления с пищей, при обильной потере жидкости, ожогах, потоотделении, поносах, рвоте, приеме мочегонных. Увеличение наступает при сердечных проблемах, повышенном артериальном давлении, почечной недостаточности;
- кальций, фосфаты — отклонение от нормы этих элементов бывает при различных патологиях – нарушениях обмена веществ, рахите, проблемах всасываемости в ЖКТ, почечной недостаточности и т.д.;
- кислотно-щелочное состояние (КОС). По степени изменения этого показателя можно обнаружить состояние алкалоза и ацидоза в организме.
Иммунологический анализ крови
Обнаружение некоторых видов лимфоцитов и иммуноглобулиновых комплексов и анализ крови на антитела позволяют делать выводы о состоянии защитных сил организма. Лимфоциты участвуют в реакциях распознавания чужеродных антигенов (токсинов микроорганизмов и чужеродных веществ), а также в выработке антител (белковых образований, иммуноглобулинов), участвующих в нейтрализации ядов.
Обратите внимание: иммуноглобулины, специфические белки, антитела, находясь на мембранах лимфоцитов, в сыворотке крови и в тканевой жидкости, выполняют функции обезвреживания чужеродных бактерий, вирусов и ядов.
Иммуноглобулины делятся на 5 классов (А,M,G,D,E,).
Каждый класс выполняет присущие ему задачи:
- иммуноглобулин А (Ig A) осуществляет защиту слизистых оболочек;
- иммуноглобулин M (Ig M) характеризует начало патологического процесса;
- иммуноглобулин G (Ig G) появляется как остаточный ответ иммунных сил на болезнетворное начало и может сохраняться повышенным всю жизнь;
- иммуноглобулин Е (IgE) увеличивается при наличии паразитов;
Функции иммуноглобулина D находятся в фазе научного исследования.
Виды основных иммунологических методик исследования крови:
- определение групп крови и резус-фактора;
- определение реактивности (чувствительности) к неспецифическим возбудителям – реакция гемолитической активности (связывания) комплемента, содержания в крови некоторых факторов воспалительных реакций, определение белков острой фазы, разновидностей интерферона. Анализ фагоцитарной способности клеток белой крови;
- анализ специфических иммунных ответов, проводится путем обнаружения разных видов Т и В лимфоцитов, отвечающих за иммунные реакции на клеточном уровне. Также исследуется количественный и качественный состав иммуноглобулинов, принимающих участие в гуморальном виде иммунитета, иммунные комплексы;
- обнаружение С-реактивного белка, ревматоидного фактора и активности антистрептолизина, позволяющих проводить диагностику группы ревматических заболеваний;
- серологические анализы – позволяют осуществлять диагностику сифилиса при помощи реакции микропреципитации (РМП), группы вирусных гепатитов, определения сальмонеллеза, дизентерии, тифа, дифтерии и др. специфических инфекций (реакция пассивной гемагглютинации и связывания комплемента).
Бактериологические анализы крови
Эти виды диагностики предусматривают забор крови и посев ее на различные питательные среды с последующим инкубированием от 10 дней до 6 недель. Результат позволяет обнаружить наличие в крови болезнетворных и условнопатогенных микроорганизмов – стафилококков, стрептококков, клебсиелл, сальмонелл и других бактерий.
Паразитологические виды исследования крови
Разработаны для обнаружения в крови простейших – возбудителей малярии, лейшманиоза, токсоплазмоза, возвратного тифа и других паразитических заболеваний, вызывающихся одноклеточными организмами.
Исследование системы свёртывания (гемостаза)
Анализы этой группы важны в хирургии, гинекологии, травматологии, комбустиологии, (медицинская специальность, занимающаяся лечением ожогов), ангиологии (болезни сосудистой системы).
Диагностика свертывания состоит из определения:
- времени сворачиваемости крови, длительности и объема капиллярного кровотечения;
- пробы на ломкость капилляров;
- тромбоцитов, количества, размеров, агрегационно-адгезивных возможностей, тромбоцитарных факторов;
- время плазменной рекальцификации;
- дефицита факторов свертываемости;
- основных физиологических антикоагулянтов.
Также оценивается состояние фибринолиза (способности крови к растворению сгустков). Эти показатели очень важны в практике кардиологии (при инфарктах миокарда), в неврологии (при инсультах головного мозга).
Анализы крови на онкомаркеры
Этими анализами определяются специфические вещества, которые выделяются опухолями. Также онкомаркерами могут выступать клетки, выделяемые нормальными тканями в ответ на наличие онкологического процесса. Чем выше содержание этих веществ, тем вероятнее наличие опухоли.
Важно: онкомарекры могут повышаться и при других болезнях, поэтому не всегда являются главным диагностическим критерием при обнаружении патологии.
При увеличении уровня необходимо проходить дополнительное исследование.
Обратите внимание: онкомаркеров обнаружено большое количество и идут дальнейшие научные разработки, усовершенствование методик определения.
Анализы крови, применяемые для исследования функций органов
При заболеваниях щитовидной железы определяют уровни выработки гормонов. Оценивается содержание трийодтиронина, тетрайодтиронина и тиреотропного гормона. Уровень их показателей помогает в диагностике таких заболеваний как тиреоидиты, диффузный токсический зоб, гипотиреоз и гипертиреоз. Анализы крови на гормоны щитовидной железы являются очень ценными для диагностики этих болезней.
Ниже указаны нормы минимального и максимального уровня гормонов в крови:
| Гормон | Минимальное значение | Максимальное значение |
| Т3 свободный | 2,6 пмоль/л | 5,7 пмоль/л |
| Т3 общий | 1,2 нмоль/л | 2,2 нмоль/л |
| Т4 свободный | 9,0 пмоль/л | 22,0 пмоль/л |
| Т4 общий | 54 нмоль/л | 156 нмоль/л |
| ТТГ | 0,4 мЕд/л | 4 мЕд/л |
| Антитела к тиреоглобулину | 0 Ед/мл | 18 Ед/мл |
| Антитела к тиреоидной пероксидазе | <5,6 Ед/мл | |
| Кальцитонин | 5,5 нмоль/л | 28 нмоль/л |
Для оценки функций яичников применяются анализы оценивающие содержание лютеинизирующего гормона (ЛТ), фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), эстрадиола, прогестерона и пролактина.
Нормы содержания в крови половых гормонов для женщин репродуктивного возраста:
| Показатель | Норма для мужчин | Норма для женщин |
| Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) | 1—11 мМЕ/мл | 1—11,8 мМЕ/мл |
| Лютеинизирующий гормон (ЛГ) | 0,8—8,4 мМЕ/мл | 1—8,8 мМЕ/мл |
| Пролактин | 105—540 мМЕл | 67—726 мМЕл |
| Тестостерон | 5,76 — 28,14 нмоль/л | 0,45 — 3,75 нмоль/л |
| ДГЭА-с | 80—560 мкг/л | 35—430 мкг/л |
| Эстрадиол | 7,63—42,6 пг/мл | 43,8—211 пг/мл |
| Прогестерон | 0,7—4,3 нмоль/л | 5,3—86 нмоль/л |
Нормы содержания в крови половых гормонов для женщин в климактерический период и для детей:
| Показатель | Норма для детей | Норма для женщин (в постменопаузу) |
| Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) | 0,3—6,7 мМЕмл | 31—130 мМЕмл |
| Лютеинизирующий гормон (ЛГ) | 0,03—3,9 мМЕмл | 18,6—72 мМЕмл |
| Пролактин | 91—526 мМЕл | 67—726 мМЕл |
| Тестостерон | 0,1—1,12 нмоль/л | 0,1—1,42 нмоль/л |
| ДГЭА-с | 0,025—1,45 мкг/мл | 0,1—0,6мкг/мл |
| Эстрадиол | 5—21 пг/мл | 5—46 пг/мл |
| Прогестерон | — | — |
Обратите внимание: прогестерон у детей и женщин старше 45 лет не определяется.
Также распространенным анализом является забор крови на содержание стрессовых гормонов – адренокортикотропного, кортизола, катехоламинов и биогенных аминов.
Анализ крови на беременность
Из современных методов диагностики начальных сроков беременности следует выделить, анализ крови на хгч.
Нормы показателя ХГЧ по неделям беременности представлены в таблице:
| Сроки беременности, акушерские недели | Показатель ХГЧ, мМЕ/мл |
| Небеременные женщины | 0 – 5 |
| Результат сомнительный | 5 – 25 |
| Беременность 3-4 неделя | 25 – 156 |
| Беременность 4-5 неделя | 101 – 4870 |
| Беременность 5-6 неделя | 1110 – 31500 |
| Беременность 6-7 неделя | 2560 – 82300 |
| Беременность 7-8 неделя | 23100 – 151000 |
| Беременность 8-9 неделя | 27300 – 233000 |
| Беременность 9-13 неделя | 20900 – 291000 |
| Беременность 13-18 неделя | 6140 – 103000 |
| Беременность 18-23 неделя | 4720 – 80100 |
| Беременность 23-41 неделя | 2700 – 78100 |
Не менее важным является перинатальный скрининг. Получить больше информации о данном виде исследований крови беременной вы сможете, просмотрев видео-обзор:
Степаненко Владимир, хирург
18,950 просмотров всего, 14 просмотров сегодня
Загрузка…
Источник
Общий клинический анализ крови – это самый распространенный диагностический тест, который назначает пациенту врач. За последние десятилетия технология этого рутинного, но очень информативного исследования проделала колоссальный рывок – она стала автоматической. В помощь врачу лабораторной диагностики, орудием труда которого был обычный световой микроскоп, пришли высокотехнологичные автоматические гематологические анализаторы.
В этом посте мы расскажем, что именно происходит внутри «умной машины», видящей нашу кровь насквозь, и почему ей следует верить. Мы будем рассматривать физику процессов на примере гематологического анализатора UniCel DxH800 мирового бренда Beckman Coulter. Именно на этом оборудовании выполняются исследования, заказанные в сервисе лабораторной диагностики LAB4U.RU. Но для того, чтобы понять технологию автоматического анализа крови, мы разберемся с тем, что видели врачи-лаборанты под микроскопом и как они интерпретировали эту информацию.
Параметры анализа крови
Итак, в крови содержится три вида клеток:
- лейкоциты, обеспечивающие иммунную защиту;
- тромбоциты, отвечающие за свертываемость крови;
- эритроциты, осуществляющие транспорт кислорода и углекислого газа.
Эти клетки находятся в крови в совершенно определенных количествах. Их обуславливают возраст человека и состояние его здоровья. В зависимости от условий, в которых находится организм, костный мозг производит столько клеток, сколько их требуется организму. Поэтому, зная количество определенного вида клеток крови и их форму, размер и другие качественные характеристики, можно уверенно судить о состоянии и текущих потребностях организма. Именно эти ключевые параметры – количество клеток каждого вида, их внешний вид и качественные характеристики – составляют общий клинический анализ крови.
При проведении общего анализа крови производят подсчет количества эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов. С лейкоцитами сложнее: их несколько видов, и каждый вид выполняет свою функцию. Выделяют 5 разных видов лейкоцитов:
- нейтрофилы, нейтрализующие в основном бактерии;
- эозинофилы, нейтрализующие иммунные комплексы антиген-антитело;
- базофилы, участвующие в аллергических реакциях;
- моноциты – главные макрофаги и утилизаторы;
- лимфоциты, обеспечивающие общий и местный иммунитет.
В свою очередь, нейтрофилы по степени зрелости разделяют на:
- палочкоядерные,
- сегментоядерные,
- миелоциты,
- метамиелоциты.
Процент каждого вида лейкоцитов в их общем объеме называют лейкоцитарной формулой, которая имеет важное диагностическое значение. Например, чем более выражен бактериальный воспалительный процесс, тем больше нейтрофилов в лейкоцитарной формуле. Наличие нейтрофилов разной степени зрелости говорит о тяжести бактериальной инфекции. Чем острее процесс, тем больше в крови палочкоядерных нейтрофилов. Появление в крови метамиелоцитов и миелоцитов говорит о крайне тяжелой бактериальной инфекции. Для вирусных заболеваний характерно увеличение лимфоцитов, при аллергических реакциях – увеличение эозинофиллов.
Помимо количественных показателей, крайне важна морфология клеток. Изменение их обычной формы и размеров также свидетельствует о наличии определенных патологических процессов в организме.
Важный и наиболее известный показатель – количество в крови гемоглобина – сложного белка, обеспечивающего поступление кислорода к тканям и выведение углекислого газа. Концентрация гемоглобина в крови – главный показатель при диагностике анемий.
Еще один из важных параметров – это скорость оседания эритроцитов (СОЭ). При воспалительных процессах у эритроцитов появляется свойство слипаться друг с другом, образуя небольшие сгустки. Обладая большей массой, слипшиеся эритроциты под действием силы тяжести оседают быстрее, чем одиночные клетки. Изменение скорости их оседания в мм/ч является простым индикатором воспалительных процессов в организме.
Как было: скарификатор, пробирки и микроскоп
Забор крови
Вспомним, как раньше сдавали кровь: болезненный прокол подушечки скарификатором, бесконечные стеклянные трубочки, в которые собирали драгоценные капли выжатой крови. Как лаборант одним стёклышком проводил по другому, где находилась капля крови, царапая на стекле номер простым карандашом. И бесконечные пробирки с разными жидкостями. Сейчас это уже кажется какой-то алхимией.
Кровь брали именно из безымянного пальца, на что были вполне серьезные причины: анатомия этого пальца такова, что его травмирование дает минимальную угрозу сепсиса в случае инфицирования ранки. Забор крови из вены считался куда более опасным. Поэтому анализ венозной крови не был рутинным, а назначался по необходимости, и в основном в стационарах.
Стоит отметить, что уже на этапе забора начинались значительные погрешности. Например, разная толщина кожи дает разную глубину укола, вместе с кровью в пробирку попадала тканевая жидкость – отсюда изменение концентрации крови, кроме того, при давлении на палец клетки крови могли разрушаться.
Помните ряд пробирок, куда помещали собранную из пальца кровь? Для подсчета разных клеток действительно нужны были разные пробирки. Для эритроцитов – с физраствором, для лейкоцитов – с раствором уксусной кислоты, где эритроциты растворялись, для определения гемоглобина – с раствором соляной кислоты. Отдельный капилляр был для определения СОЭ. И на последнем этапе делался мазок на стекле для последующего подсчета лейкоцитарной формулы.
Анализ крови под микроскопом
Для подсчета клеток под микроскопом в лабораторной практике использовался специальный оптический прибор, предложенный еще в ХIX веке русским врачом, именем которого этот прибор и был назван – камера Горяева. Она позволяла определить количество клеток в заданном микрообъеме жидкости и представляла собой толстое предметное стекло с прямоугольным углублением (камерой). На нее была нанесена микроскопическая сетка. Сверху камера Горяева накрывалась тонким покровным стеклом.
Эта сетка состояла из 225 больших квадратов, 25 из которых были разделены на 16 малых квадратов. Эритроциты считались в маленьких исчерченных квадратах, расположенных по диагонали камеры Горяева. Причем существовало определенное правило подсчета клеток, которые лежат на границе квадрата. Расчет числа эритроцитов в литре крови осуществлялся по формуле, исходя из разведения крови и количества квадратов в сетке. После математических сокращений достаточно было посчитанное количество клеток в камере умножить на 10 в 12-й степени и внести в бланк анализа.
Лейкоциты считали здесь же, но использовали уже большие квадраты сетки, поскольку лейкоциты в тысячу раз больше, чем эритроциты. После подсчета лейкоцитов их количество умножали на 10 в 9-й степени и вносили в бланк. У опытного лаборанта подсчет клеток занимал в среднем 3-5 мин.
Методы подсчета тромбоцитов в камере Горяева были очень трудоемки из-за малой величины этого вида клеток. Оценивать их количество приходилось только на основе окрашенного мазка крови, и сам процесс был тоже весьма трудоемким. Поэтому, как правило, количество тромбоцитов рассчитывали только по специальному запросу врача.
Лейкоцитарную формулу, то есть процентный состав лейкоцитов каждого вида в общем их количестве мог определять только врач – по результатам изучения мазков крови на стеклах.
Визуально определяя находящиеся в поле зрения различные виды лейкоцитов по форме их ядра, врач считал клетки каждого вида и общее их количество. Насчитав 100 в совокупности, он получал требуемое процентное соотношение каждого вида клеток. Для упрощения подсчета использовались специальные счетчики с отдельными клавишами для каждого вида клеток.
Примечательно, что такой важный параметр, как гемоглобин, определялся лаборантом визуально (!) по цвету гемолизированной крови в пробирке с соляной кислотой. Метод был основан на превращении гемоглобина в солянокислый гематин коричневого цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина. Полученный раствор солянокислого гематина разводили водой до цвета стандарта, соответствующего известной концентрации гемоглобина. В общем, прошлый век
Как стало: вакуумные контейнеры и гематологические анализаторы
Начнем с того, что сейчас полностью поменялась технология забора крови. На смену скарификаторам и стеклянным капиллярам с пробирками пришли вакуумные контейнеры. Использующиеся теперь системы забора крови малотравматичны, процесс полностью унифицирован, что значительно сократило процент погрешностей на этом этапе. Вакуумные пробирки, содержащие консерванты и антикоагулянты, позволяют сохранять и транспортировать кровь от точки забора до лаборатории. Именно благодаря появлению новой технологии стало возможным сдавать анализы максимально удобно – в любое время, в любом месте.
На первый взгляд, автоматизировать такой сложный процесс, как идентификация клеток крови и их подсчет, кажется невозможно. Но, как обычно, все гениальное просто. В основе автоматического анализа крови лежат фундаментальные физические законы. Технология автоматического подсчета клеток была запатентована в далеком 1953 году американцами Джозефом и Уолессом Культерами. Именно их имя стоит в название мирового бренда гематологического оборудования Bеckman&Coulter.
Подсчет клеток
Апертурно-импедансный метод (метод Культера или кондуктометрический метод) основан на подсчете количества и оценке характера импульсов, возникающих при прохождении клетки через отверстие малого диаметра (апертуру), по обе стороны которого расположены два электрода. При прохождении клетки через канал, заполненный электролитом, возрастает сопротивление электрическому току. Каждое прохождение клетки сопровождается появлением электрического импульса. Чтобы выяснить, какова концентрация клеток, необходимо пропустить через канал определенный объем пробы и сосчитать количество появившихся импульсов. Единственное ограничение – концентрация пробы должна обеспечивать прохождение через апертуру только одной клетки в каждый момент времени.
За прошедшие более 60 лет технология автоматического гематологического анализа прошла большой путь. Вначале это были простые счетчики клеток, определяющие 8-10 параметров: количество эритроцитов (RBC), количество лейкоцитов (WBC), гемоглобин (Hb) и несколько расчетных. Такими были анализаторы первого класса.
Второй класс анализаторов определял уже до 20 различных параметров крови. Они существенно выше по уровню в дифференциации лейкоцитов и способны выделять популяции гранулоцитов (эозинофилы + нейтрофилы + базофилы), лимфоцитов и интегральной популяции средних клеток, куда относились моноциты, эозинофилы, базофилы и плазматические клетки. Такая дифференциация лейкоцитов успешно использовалась при обследовании практически здоровых людей.
Самыми технологичными и инновационными анализаторами на сегодняшний день являются машины третьего класса, определяющие до сотни различных параметров, проводящие развернутое дифференцирование клеток, в том числе по степени зрелости, анализирующие их морфологию и сигнализирующие врачу-лаборанту об обнаружении патологии. Машины третьего класса, как правило, снабжены еще и автоматическими системами приготовления мазков (включая их окраску) и вывода изображения на экран монитора. К таким передовым гематологическим системам относятся оборудование BeckmanCoulter, в частности система клеточного анализа UniCel DxH 800.
Современные аппараты BeckmanCoulter используют метод многопараметрической проточной цитометрии на основе запатентованной технологии VCS (Volume-Conductivity-Scatter). VCS-технология подразумевает оценку объема клетки, ее электропроводимость и светорассеяние.
Первый параметр – объем клетки – измеряется с использованием принципа Культера на основе оценки сопротивления при прохождении клеткой апертуры при постоянном токе. Величину и плотность клеточного ядра, а также ее внутренний состав определяют с помощью измерения ее электропроводности в переменном токе высокой частоты. Рассеяние лазерного света под разными углами позволяет получить информацию о структуре клеточной поверхности, гранулярности цитоплазмы и морфологии ядра клетки.
Полученные по трем каналам данные комбинируются и анализируются. В результате клетки распределяются по кластерам, включая разделение по степени зрелости эритроцитов и лейкоцитов (нейтрофилов). На основе полученных измерений этих трех размерностей определяется множество гематологических параметров – до 30 в диагностических целях, более 20 в исследовательских целях и более ста специфичных расчетных параметров для узкоспециализированных цитологических исследований. Данные визуализируются в 2D- и 3D-форматах. Врач-лаборант, работающий с гематологическим анализатором BackmanCoulter, видит результаты анализа на мониторе примерно в таком виде:
А далее принимает решение – надо ли их верифицировать или нет.
Стоит ли говорить, что информативность и точность современного автоматического анализа во много раз выше мануального? Производительность машин подобного класса – порядка сотни образцов в час при анализе тысяч клеток в образце. Вспомним, что при микроскопии мазка врачом анализировалось только 100 клеток!
Однако несмотря на эти впечатляющие результаты, именно микроскопия до сих пор пока остается «золотым стандартом» диагностики. В частности, при выявлении аппаратом патологической морфологии клеток образец анализируется под микроскопом вручную. При обследовании больных с гематологическими заболеваниями микроскопия окрашенного мазка крови проводится только вручную опытным врачом-гематологом. Именно так, вручную, дополнительно к автоматическому подсчету клеток, выполняется оценка лейкоцитарной формулы во всех детских анализах крови по заказам, сделанным с помощью лабораторного онлайн-сервиса LAB4U.RU.
Вместо резюме
Технологии автоматизированного гематологического анализа продолжают активно развиваться. По существу они уже заменили микроскопию при выполнении рутинных профилактических анализов, оставив ее для особо значимых ситуаций. Мы имеем в виду детские анализы, анализы людей, имеющих подтвержденные заболевания, особенно гематологические. Однако в обозримом будущем и на этом участке лабораторной диагностики врачи получат аппараты, способные самостоятельно выполнять морфологический анализ клеток с использованием нейронных сетей. Снизив нагрузку на врачей, они в то же время повысят требования к их квалификации, поскольку в зоне принятия решений человеком останутся только нетипичные и патологические состояния клеток.
Количество информативных параметров анализа крови, увеличившиеся многократно, поднимает требования к профессиональной квалификации и врача-клинициста, которому необходимо анализировать сочетания значений массы параметров в диагностических целях. На помощь врачам этого фронта идут экспертные системы, которые, используя данные анализатора, предоставляют рекомендации по дальнейшему обследованию пациента и выдают возможный диагноз. Такие системы уже представлены на лабораторном рынке. Но это уже тема отдельной статьи.
Источник
