Какие бывают пробирки для забора крови и для каких анализов
Вакуумная пробирка — основной инструмент для забора венозной крови. Она может быть наполнена реагентом, который позволит провести быстрый и точный анализ. В таком случае каждая пробирка имеет колпачок своего цвета. Цветное кодирование соответствует международному стандарту ISO 6710.
Вакуумные пробирки для получения сыворотки (биохимия, серология). Цвет крышечки – коричневый или красный
Сыворотка крови – жидкая часть крови лишенная форменных элементов и некоторых белков (фибрин и др.) в отличие от плазмы, в которой сохраняются все элементы жидкой части крови кроме форменных элементов.
Получение сыворотки крови является результатом двухступенчатого биохимического процесса: свертывания (коагуляции) крови и ретракции (уплотнения) сгустка. Для запуска коагуляционного каскада необходимо наличие внешнего активатора, каковым может служить кремния диоксид, поэтому процесс свертывания крови быстрее происходит в стеклянных пробирках, так как кремния диоксид является базовым материалом стекла или в пластиковых пробирках с активатором свертывания. Активатор свертывания (clot activator) выполнен в виде напыления на внутренней стенке пробирки.
После образования сгустка начинается этап его уплотнения и выделения сыворотки. На практике ретракция сгустка ускоряется центрифугированием пробирок с кровью.
Для получения максимально чистой сыворотки рекомендуется соблюдение трех условий:
1. После забора крови в пробирку в соответствии с инструкцией необходимо осторожно однократно перевернуть пробирку для более полного контакта крови с активатором свертывания;
2. Дождаться завершения процесса свертывания крови в течение 20-30 минут при комнатной температуре и вертикальном положении пробирки;
3. Центрифугировать пробирку со свернувшейся кровью не менее 10 минут с ускорением 1500 G (примерно 3000 об/мин) для максимального выдавливания сыворотки из сгустка. При необходимости допускается центрифугирование с ускорением 4000G c крышечкой и до 12000G без крышечки.
После центрифугирования и полной ретракции сгустка сыворотка располагается над сгустком, но в контакте с ним. Сохраняется опасность загрязнения сыворотки составляющими сгустка при неосторожном обращении с пробиркой (встряхивание, опрокидывание и пр.). Для лучшего очищения сыворотки и более полного разграничения сыворотки и сгустка применяются специальные пробирки, содержащие биологически инертный олефиновый гель. Последний представляет собой тиксотропный кополимер, который тяжелее сыворотки, но легче кровяного сгустка, поэтому после центрифугирования гель в виде тонкой полоски занимает промежуточное положение и служит разделительным барьером. Стабильность такого барьера гарантирована в течение 5-7 дней при хранении пробирки с кровью при комнатной температуре.
Оптимальные сроки сохранности образца крови в данных пробирках составляет при комнатной температуре 6 часов, при хранении в холодильнике (+4ºС) – 24 часа. Повторное центрифугирование пробирок, особенно с гелем, не допускается.
Полученная сыворотка крови применяется для очень широкого спектра лабораторных биохимических, ИФА и иммунологических исследований:
белковый состав, ферменты, гормоны, онкомаркеры, ВИЧ-инфицирование, гепатиты и пр.
Вакуумные пробирки для получения цельной крови или плазмы
Не все анализы в клинике делаются из сыворотки крови. Для многих видов исследований необходима цельная кровь, содержащая форменные элементы, или плазма, освобожденная от клеток крови центрифугированием. С целью получения несвернувшейся крови разработаны пробирки с определенными добавками – антикоагулянтами. На практике используют два вида антикоагулянтов:
ингибиторы (вещества, вызывающие торможение) тромбина. Тромбин является ключевым игроком в коагуляционном каскаде. Он принимает участие в формировании ряда факторов свертывания крови и способствует трансформации фибриногена в фибрин. Добавление биохимических ингибиторов тромбина эффективно активирует антикоагуляционные свойства крови.
связывание (удаление) ионов Ca2+. При прочих равных условиях свертывание крови происходит при активном участии ионов Ca2+. Удаление их является эффективным механизмом сохранения крови в жидком состоянии.
Гепарин. Цвет крышечки – зеленый, светло-зеленый
Гепарин — кислый мукополисахарид с молекулярной массой 4000-40000 – является натуральным антикоагулянтом, присутствующем в любом здоровом организме. Гепарин активирует создание комплексных соединений между антитромбином III и такими факторами свертывания крови, как тромбин, факторы XIIa, XIa, Xa, IXa и VIIa. В таком комплексе факторы свертывания инактивируются необратимо.
Для целей получения плазмы крови в пробирки добавляют литиевую либо натриевую соль гепарина в пропорции к забираемой в пробирку кровью 15-20 МЕ/1 мл, что служит гарантией полной инактивации свертывания крови и не искажает исследуемые параметры. Эритроциты сохраняются в образце крови до 8 часов. Нельзя использовать для проведения анализов образец крови, хранившийся более 48 часов даже в условиях холодильника (+4ºС).
Для получения качественного результата анализа необходимо:
Немедленно после взятия крови осторожно перевернуть пробирку 5-7 раз для лучшего перемешивания крови и гепарина,
Плазма отделяется после центрифугирования. Нормальные скорости центрифугирования – 1000-1500G (2000-3000 об/мин). При необходимости допускается центрифугирование с ускорением 4000G c крышечкой и до 12000G без крышечки.
В клинике пробирки с гепарином применяются, в основном для проведения исследования:
электролитного состава крови,
газового состава крови,
содержания алкоголя в крови.
Не рекомендуется использовать гепарин для: морфологических исследований, так как кислотный характер гепарина способствует обесцвечиванию мазка крови, придавая ему голубоватый оттенок, подсчета лейкоцитов и тромбоцитов, поскольку гепарин стимулирует агрегацию этих клеток крови.
исследований по методике полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Для более чистого разграничения плазмы крови и сгустка применяются специальные пробирки, содержащие кроме гепарина инертный олефиновый гель. Последний представляет собой тиксотропный кополимер, который тяжелее плазмы, но легче форменных клеток крови, поэтому после центрифугирования гель в виде тонкой полоски занимает промежуточное положение и служит разделительным барьером.
Фторид натрия/ЭДТА калия. Цвет крышечки – серый
Добавление фторида натрия и ЭДТА калия в пробирку позволяет предотвратить разрушение глюкозы крови (процесс, называемый гликолизом) и сохранить ее уровень во взятом образце крови.
Фторид натрия и оксалат калия выступают в качестве антикоагулянтов, связывая ионы Са2+ и, кроме того, фторид натрия стабилизирует уровень глюкозы.
Глюкоза разрушается до пирувата и лактата при последовательном осуществлении различных энзиматических реакций. Фторид натрия ингибирует некоторые ферментативные реакции, включая превращение фосфоглицерата в фосфоенолпируватацид, и предотвращает гликолиз.
Для получения качественного результата анализа необходимо:
немедленно после взятия крови осторожно перевернуть пробирку 5-7 раз для лучшего перемешивания крови и антикоагулянта
плазма отделяется после центрифугирования. Нормальные скорости центрифугирования – 1000-1500G (2000-3000 об/мин).
Пробирки с добавлением фторида натрия и оксалата калия используют для проведения определения уровня сахара (глюкозы) в крови. Соотношение компонентов 1/1, общее количество добавляемых реагентов – 4,5 мг/1 мл забираемой в пробирку крови.
Замечания: Фторид блокирует активность уреазы и некоторых других ферментов. Образцы крови из данных пробирок нельзя использовать для прямого определения энзимов. Фторид натрия и ЭДТА калия связывают ион Са2+, заменяя в крови 1 ион кальция на 2 иона натрия или калия. Следствием этого является повышение напряжения ионов в межклеточной жидкости и выкачивание воды из внутриклеточного пространства в межклеточное, сморщивание клеток крови с умеренным «выдавливанием» из эритроцитов гемоглобина. Поэтому видимый гемолиз свойственен образцам крови с данной добавкой.
Глюкоза превращается в лактат в результате комплекса реакций, включающего в себя различные этапы. Фторид ингибирует один их последних этапов разрушения глюкозы, начальные этапы с участием гексокиназы и фосфофруктокиназы блокируются менее эффективно, поэтому можно наблюдать снижение содержания глюкозы в образце крови на 6-7% от первоначального.
После первоначального незначительного снижения уровня глюкозы ее количество остается постоянным при хранении крови в пробирке в течение 8-10 часов при температуре до 25ºС и в течение 2-3 дней в холодильнике (+4ºС).
ЭДТА-К2. Цвет крышечки — сиреневый
Этилендиаминтетраацетат (ЭДТА) является предпочтительным антикоагулянтом для гематологических исследований. ЭДТА и его щелочные соли способны создавать хелатные соединения с ионами кальция с образованием растворимых высокостабильных комплексов. Наиболее эффективная концентрация ЭДТА – 1,2 мг/мл крови. Во всем мире используют три варианта солей ЭДТА: ЭДТА-К3, ЭДТА-К2 и ЭДТА-Na2. Наиболее предпочтительной и рекомендуемой Международной Комиссией по Стандартизации в Гематологии является двукалиевая соль ЭДТА:
ЭДТА-К3 показывает меньшую способность поддержания крови в жидком состоянии, также ЭДТА-К3 влияет на подсчет лейкоцитов, занижая их количество.
различия между ЭДТА-К2 и ЭДТА-Na2 в клиническом плане незначительны и ими можно пренебречь, но ЭДТА-Na2 хуже растворим.
Для получения качественного результата анализа необходимо:
немедленно после взятия крови осторожно перевернуть пробирку 5-7 раз для лучшего перемешивания крови и антикоагулянта;
плазма отделяется после центрифугирования. Нормальные скорости центрифугирования – 1000-1500G (2000-3000 об/мин). При необходимости допускается центрифугирование с ускорением 4000G c крышечкой и до 12000G без крышечки.
Наиболее широко используются пробирки, содержащие 1,95 мг ЭДТА/1мл крови. Они нашли свое применение в таких областях лабораторной практики, как:
гематологические исследования – подсчет клеток крови, определение СОЭ и пр.
ПЦР-исследования (качественные и количественные методики).
Пробирки с образцами крови можно хранить до 6-10 часов при 4ºС, хранение свыше 24 часов не рекомендуется из-за снижения числа эритроцитов и лейкоцитов.
Цитрат натрия. Цвет крышечки — голубой
Цитрат натрия является антикоагулянтом для сбора венозной крови с це6лью проведения исследований коагуляционных свойств крови.
Процесс свертывания крови представляет собой последовательность сложных реакций, в которых результатом первых реакций (с участием активных ферментов) является активация следующих, первоначально неактивных энзимов. Последним активным ферментом в этой цепочке присутствует тромбин, который осуществляет превращение фибриногена в фибрин. Нити фибрина опутывают клетки крови и окончательно формируют кровяной сгусток. Крайне важную роль на этом этапе играют ионы Са2+. Антикоагуляционные свойства цитрата проявляются в формировании комплекса с ионами Са2+ и эффективном удалении их из крови.
Общее исследование свертывания крови определяется временем, необходимым для последовательной активации ферментов, участвующих в коагуляционном процессе. Проводится определение времени активации и количественное измерение различных составляющих коагуляционного каскада, для чего создаются так называемые «обходные пути» добавлением некоторых промежуточных продуктов свертывания.
Наиболее часто используются пробирки с 3,8% или 3,2% раствором цитрата натрия (0,129 моль/л), соотношение цитрата к количеству забираемой крови 1/9.
Для максимально качественного проведения коагулологических исследований рекомендуется соблюдение определенных правил:
нельзя использовать пробирку для взятия крови на коагуляционные тесты первой, сразу после венепункции, так как на результаты может повлиять выделяющийся при пункции тканевой тромбопластин;
венозный жгут во время взятия крови в пробирку должен быть снят;
немедленно после взятия крови пробирку аккуратно переворачивают 5-6 раз для лучшего перемешивания крови и антикоагулянта;
сразу после этого надо проверить количество взятой крови: ее верхняя граница должна быть на уровне голубой полоски на этикетке.
Оптимальными условиями хранения пробирки с образцом крови является температура 20-24ºС и исследование коагуляционных свойств и факторов свертывания крови должно быть проведено в течение 2-х часов с момента взятия крови
Источник
Вакутейнеры для забора крови изготавливаются в виде герметичной пластиковой пробирки с разряженным воздухом внутри – это альтернативный вариант старому методу забора, выполняемому обычным шприцем. Сегодня вакуумные системы стали применяться повсеместно, что удобно для больных и медицинского персонала.
В чем особенности?
Вакуумная система – комплект в составе из стерильных двусторонних, разных по диаметру игл с держателями и пробирок со специальными реагентами для взятия того или иного анализа. Вакуумный забор крови, в отличие от одноразового шприца, имеет ряд особенностей, к которым относят:
- получение точных ответов, ведь при проведении исследования венозную кровь уже не приходится переливать по разным пробиркам,
- исключение путаницы и подмены анализов, так как каждая пробирка снабжена номером,
- отсутствие битого стекла, ведь покрытие систем изготавливается из небьющегося пластикового материала, гарантирующего сохранность крови непосредственно в пробирке,
- выполнение процедуры менее чем за 10 секунд,
- отсутствие контактов биоматериала с окружающей средой и людьми, ведь ни одной капли крови не упадет на одежду, что немаловажно в целях защиты от заражения инфекцией для медработников и технического персонала больницы,
- отсутствие венозных травм, поскольку при проведении сразу 2-3 обследований не приходится извлекать иглу, искать и захватывать вену вновь – достаточно поменять контейнер.
Все пробирки для взятия биохимического анализа промаркированы с учетом таблицы по ГОСТу и имеют определенный цвет колпачка, который соответствует составу, содержащемуся в пробирке.
Так, если у вакуумной системы крышка:
- зеленая – содержит гепарин для иммунохимического, биохимического исследования,
- серая – используется она для забора на глюкозу, диагностики варикозного расширения вен,
- голубая– содержит цитрат натрия в виде геля для проверки сыворотки на коагуляцию, СОЭ,
- фиолетовая – реагент подходит для иммунохимического теста,
- синяя – содержит АДТА кислоту для выявления солей тяжелых металлов в крови,
- розовая применяется для исследования донорской крови,
- красная – для биохимии, иммунохимического теста, определения резус-фактора.
Вакуумная система состоит из набора стерильных игл, разных по размерам, длине и диаметру с учетом вен пациента. Для более удобного забора иглы двухсторонние и вводятся одной стороной в вену пациента, другой – в пробку эластичного колпачка пробирки для забора крови из полой вены. Допускается использование игл-бабочек с выступами, которыми удобно прокалывать тонкие и плохо доступные вены.
Как действует вакутейнер?
Принцип работы вакуумных систем схож с методом Вестергрена. После забора клинической крови емкость встряхивают, чтобы биологическая жидкость перемешалась с химическими компонентами для начала реакции. Это важно, особенно для выявления точной характеристики эритроцитов, скорости их оседания.
Сегодня вакуумные контейнеры применяются в педиатрии для взятия крови у ребенка, что делает процедуру безболезненной в отличие от обычного прокола иголкой. Дети и даже новорожденные ведут себя спокойно, без слез.
Вакуумная замкнутая система забора крови уверенно вытесняет традиционное взятие из пальца или вены, поскольку эффективна, удобна и безопасна. Забор выполняется быстро, и это тоже важно для получения точного результата анализа.
Техника забора крови из вены вакуумными пробирками
Забор крови из вены вакуумной системой практически ничем не отличается от использования обычного шприца с иглой. Только процедура стала безопасной и комфортной для пациентов и врачей. Когда материал поступает в пробирку, то создается объемный вакуум, позволяющий взять исключительно стерильную кровь и в нужном количестве. Посмотреть, как производится забор крови вакуумной системой, можно на картинках, видео.
Сегодня вакутейнер – самый безопасный способ взятия крови из пальца или вены. Это приспособление значительно упрощает процедуру забора, его можно приобрести для личных нужд в аптеке без всякого рецепта.
Это важно в первую очередь для лаборантов, поскольку достаточно выбрать нужную пробирку с соответствующей маркировкой и выполнить процедуру безопасно, удобно и быстро. Какие-либо контакты с биоматериалом отсутствуют. Главное – соблюдать алгоритм действий при работе с вакуумной системой.
Забор анализа крови вакутейнером производится медсестрой следующим образом:
- в условиях лаборатории распечатывается вакутейнер, снимается колпачок с одноразовой иглы,
- накладывается жгут чуть выше локтя,
- обрабатывается место для прокола медицинским спиртом,
- вводится игла одной стороной в пробирочный держатель, другой – в вену у пациента,
- остается смотреть, когда кровь сама наберется в вакуумную пробирку в нужном количестве, что немаловажно для проведения того или иного исследования,
- отсоединяется емкость с кровью без вынимания иглы из вены, что удобно для пациентов, ведь синяков и кровоподтеков на коже не останется,
- плотно и герметично закрывается емкость с жидкостью
- аккуратно вынимается игла, обрабатывается место прокола антисептиком, прикладывается ватный тампон.
После этого взятие крови вакутейнером можно считать завершенным.
Многие пациенты еще не знакомы с вакуумными системами, поэтому врачи должны проводить разъяснительную беседу непосредственно перед забором общего анализа крови или из вены, чтобы объяснить смысл и суть использования подобного метода, рассказывать о плюсах и минусах вакуумной системы. Обязательно требуется получить согласие пациента на вакуумный забор крови из вены, рассказать о ходе действий, возможно, дать прочесть письменную инструкцию или описание устройства вакутейнера.
Подготовка к проведению исследования имеет немаловажное значение, ведь это гарантия быстрой и безболезненной сдачи анализа, получения точной и информативной расшифровки результатов.
Подробнее о процессе забора биоматериала вакуумной системой можно узнать из видеоролика:
Загрузка…
Источник
