Как брать кровь на анализ у лошади
2. ВЗЯТИЕ КРОВИ
Взятие крови проводят непосредственно в хозяйствах владельцев (конных заводах, племенных фермах, частных хозяйствах и пр.) или на ипподромах. Процедура взятия крови должна осуществляться квалифицированным ветеринарным работником при участии лиц, ведущих племенную работу и хорошо знающих лошадей, а также инспекторов ВНИИК.
Возраст лошадей. По рекомендациям К. Сандберга (1996) кровь для генетического тестирования лучше брать у жеребят после 4-х месяцев, но при необходимости типирование крови жеребят можно проводить уже в месячном возрасте.
Непосредственно перед взятием устанавливается идентичность лошади предоставленным племенным документам путем сверки тавра, масти, отметин и особых примет. Любое несоответствие должно быть отражено в акте взятия.
Кровь берут из яремной вены лошади с соблюдением правил асептики и антисептики в количестве 5-10 мл в чистые сухие пробирки или пенициллиновые флаконы с заранее внесенным антикоагулянтом (веществом, препятствующим слипанию эритроцитов). В качестве антикоагулянта лучше использовать сухой порошкообразный трилон Б (ЭДТА динатриевую соль) или лимоннокислый натрий в количестве 100 мг на 10 мл. Антикоагулянт добавляют в пробирки до взятия крови. После наполнения флакона или пробирки необходимо закрыть ее и перемешать содержимое с антикоагулянтом, несколько раз плавно перевернув емкость.
Ранее рекомендованный в качестве антикоагулянта гепарин может приводить к искажению результатов при типировании ферментов и ДНК, поэтому его лучше не использовать.
Не рекомендуется использовать другую тару (шприцы и пр.) для взятия и транспортировки.
Рекомендуется использовать разовые стерильные системы для взятия крови (типа BD Vacutainer), состоящие из вакуумной пробирки с антикоагулянтом, стерильной иглы и держателя для иглы. Пробирки подписывают маркером соответственно нумерации в сопроводительном списке.
Кровь у лошадей берут в спокойной обстановке за 2 часа до или после работы Сильный стресс, сопровождающийся выбросом андреналина, делает пробу непригодной для анализа.
Не следует брать кровь у лошадей во время интенсивного лечения антибиотиками и другими сильнодействующими препаратами, что может повлиять на свойства белков крови и результаты их типирования. При взятии недопустимо:
— использовать одну иглу для взятия крови у нескольких животных;
— собирать кровь в нестерильные пробирки и флаконы,
— попадание крови нескольких животных в одну пробирку или флакон
Необходимо аккуратно подготовить сопроводительную документацию по установленной форме (Табл.3).
При указании кличек отца и матери необходимо указывать номер ГПК или год рождения и происхождение родителей, а также место (хозяйство) рождения тестируемой лошади. У помесных лошадей необходимо указать породы отца и матери. Желательно отметить, были ли тестированы родители лошади.
Владельцам следует помнить, что в каждой породе имеются жеребцы и кобылы с одинаковыми кличками. Отсутствие полных сведений о происхождении лошади создает дополнительные проблемы при генетической экспертизе ее происхождения и приводит к задержке выдачи заключения.
Таблица 3
Дата привоза крови:
Список лошадей для иммуногенетического тестирования
Источник
Лабораторные исследования
Зачем:
Исследование крови, мочи, кала, соскобов с кожи, смывов с полостей и пунктатов органов и тканей проводят для подтверждения или исключения различных заболеваний. Многие заразные и незаразные патологии внутренних органов зачастую имеют схожую клиническую картину, и поэтому требуется их дифференциальная диагностика по анализам. Кроме того, отравления и инфекции могут одновременно поражать несколько органов и систем организма, и в этом случае лишь лабораторные анализы позволяют нам судить о реальном масштабе проблемы и проводить мониторинг ситуации по мере лечения.
Общеклинический анализ крови – ОКА.
Этот анализ отражает количество форменных элементов крови (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов), а также количественное и процентное содержание гемоглобина. Анализ незаменим при всех случаях подъема температуры тела, подозрении на острые и хронические инфекционные заболевания и отравления, при длительном лечении лекарственными препаратами с целью контроля и предупреждения побочных эффектов, а также при всех видах травм с обширной кровопотерей.
Как:
Для анализа кровь берут из вены в специальную пробирку с антикоагулянтом (большинство современных лабораторий имеют оборудование, настроенное на анализ проб, консервированных ЭДТА, пробирки с сиреневыми крышками). Если вы решили взять кровь самостоятельно, без врача, уточните заранее у лаборатории, в каком виде она принимает кровь на анализ.
Что потребуется:
Кровь берут независимо от времени суток и приема пищи, и, доставляют в лабораторию в охлажденном виде не позднее 3-4-х часов после взятия.
Биохимический анализ крови.
Исследование содержания различных биологически активных компонентов сыворотки крови. Для лошади клиническое значение имеют следующие элементы: общий белок, альбумины, глюкоза, мочевина, креатинин, холестерин, триглицериды, желчные кислоты, общий билирубин (сумма прямого/несвязанного/неконьюгированного и непрямого/связанного/коньюгированного билирубина), прямой билирубин, кальций, фосфор, натрий, калий; а также ряд основных ферментов: АСТ, КФК, ЩФ, ГГТ.
Как:
Кровь берут из вены в химически чистые пробирки без консервантов. Иногда такие пробирки могут содержать гелевую массу на дне или капельки на стенках для лучшего разделения крови на сыворотку и элементы.
Что потребуется:
Для лошади время отбора проб не имеет особого значения, так как по природе они травоядные и принимают корм практически круглые сутки. Однако утренние пробы всегда предпочтительнее, особенно если будет проводиться исследование на гормоны. Доставка отобранных проб должна производиться в охлажденном виде не позднее 3-4-х часов после взятия. Для более длительного хранения отобранную кровь отстаивают, центрифугируют и отбирают чистую сыворотку. В последующем, до проведения анализа, сыворотка может храниться в холодильнике при температуре + 4°С до 4-х дней, а в замороженном виде до 1 месяца.
Коагулограмма или оценка свертывающей системы организма.
Этот анализ проводят при подозрении на дефицит свертывающих факторов крови (может быть врожденным у чистокровных лошадей и может быть приобретенным при отравлениях и заболеваниях). Также, его можно выполнить перед плановым оперативным вмешательством, чтобы заблаговременно оценить ресурсы кровоостанавливащей системы организма.
Как:
Пробы крови из вены берут в специальные пробирки с консервантом — цитратом натрия.
Что потребуется:
Кровь берут независимо от времени суток и приема пищи, и доставляют в лабораторию в течение 2-х часов с момента отбора.
Фибриноген.
Этот белок является одним из факторов свертывающей системы крови, и, кроме того для лошади это еще и белок так называемой «острой фазы», повышение которого достоверно точно указывает на наличие инфекционного или сильного воспалительного агента в организме.
Как:
Пробы крови из вены берут в специальные пробирки с консервантом — цитратом натрия.
Что потребуется:
Кровь берут независимо от времени суток и приема пищи, и, доставляют в лабораторию в течение 2-х часов с момента отбора.
Анализ мочи бывает общеклинический, биохимический и бактериологический.
Любое исследование может быть назначено врачом при подозрении как на локальные инфекции и заболевания мочеполовой сферы, так и в случае системных заболеваний, инфекций и отравлений.
На качество анализа мочи, особенно если требуется исследование на бактерии, сильно влияет способ отбора проб (должна быть соблюдена максимальная стерильность) и скорость доставки материала в лабораторию (пробы необходимо передать на анализ не позднее 2-х часов с момента отбора). При невозможности выполнить эти два условия смысла в бактериологическом исследовании мочи нет, так как пробы будут либо контаминированы (заражены) другими бактериями, либо при длительном хранении/транспортировке в них произойдет изменение физико-химического и бактериального состава.
Общеклинический анализ мочи заключается в определении ее физико-химических свойств, таких как рН, плотность, цвет, слизь, наличие глюкозы, уробилиногена, кетоновых тел белка и т. д., а также в микроскопии осадка для определения его состава (клетки крови, мочевого пузыря, почек, цилиндры, кристаллы солей и т. д.). Большая часть такого исследования может быть выполнена врачом на месте, при наличии у него специальных тест-полосок, и только при необходимости микроскопии осадка потребуются условия лаборатории (микроскоп).
Биохимический анализ мочи бывает полезен для выявления причины повышенного потребления воды и выделения мочи (синдром полидипсии-полиурии лошадей), а также при тестировании выделительной функции почек. Так как не все лаборатории могут выполнить такой анализ из-за отсутствия специальных приборов и реагентов, параметры этого исследования нужно согласовать с врачом заранее.
Как:
Так как среднесуточное количество пассажей мочи у лошадей колеблется в пределах 7-10, и животные могут достаточно долго терпеть в ожидании «подходящего случая», все наши варианты с поджиданием в деннике с банкой или ведром могут растянутся на 10 и более часов. Более простой, удобный и безопасный для всех способ — отбор проб мочи при помощи стерильного катетера. Для кобыл достаточно фиксации, а меринам и жеребцам перед введением катетера делают инъекцию транквилизатора, чтобы достичь легкого расслабления пениса.
Катетер вводят соблюдая все меры асептики и антисептики после предварительной дезинфекции окружающих тканей и фиксации хвоста.
Пробы мочи исследуют на месте при помощи специальных тест-полосок или доставляют в лабораторию в охлажденном виде в пределах 3-х часов с момента сбора в стерильной посуде (специальные пластиковые контейнеры на 50-100 мл или можно использовать стеклянные банки с крышкой, заранее прокипяченые).
Что потребуется:
Почищенная перед приездом врача лошадь, помощник и место в конюшне, чтобы никто никому не мешал.
Цитологический смыв
Вид анализа, при котором в полость органа (матка, носовые пазухи, трахея, бронхи и т. д.) вводят теплый стерильный физиологический раствор натрия хлорида с последующим его отбором обратно.
Как:
Подготовка животного проводится в зависимости от вида обследования: наружный туалет органа, введение седативных и местно анестезирующих средств, введение эндоскопической техники и катетеров. Собранные образцы доставляют в лабораторию в чистом виде, где они центрифугируются и из них приготавливают мазки на стеклах (при необходимости мазки могут быть выполнены на месте врачом и только потом переданы в лабораторию на анализ). В лаборатории мазки окрашивают специальными красителями и передают для интерпретации цитологу/гистопатологу.
Что потребуется:
Лошадь должна быть почищена перед приездом врача. Для процедуры нужно продумать место, недалеко от электрической розетки и воды, и выбрать время, в которое ни доктор, ни лошадь, не помещают другим обитателям конюшни. Процедура получения материала может занять от 15 минут, если речь идет о поверхностной ране, и до 1 часа, если пробы будут получать при процедуре смыва с бронхов (бронхо-альвеолярный лаваж) или с матки.
Гистопатологическое исследование.
Этому виду исследования подвергают материал, полученный при биопсии органа, ткани и/или новообразования, а также образцы (биопаты) органов и тканей, которые были удалены в процессе оперативного вмешательства или отобраны при патоморфологическом вскрытии. Большинство хронических заболеваний печени и кишечника лошади можно подтвердить лишь по данному исследованию.
Как:
Для биопсии печени зону вмешательства подготавливают по правилам асептики и антисептики, делают местную анестезию кожи в межреберном промежутке и под контролем ультразвукового прибора вводят специальный шприц-автомат для биопсии. Отбор пробы происходит мгновенно и вся процедура занимает не более 10-15 мин. Иногда нервным животным требуется седация. После процедуры лошади вводят дозу противовоспалительного средства и в течение двух дней предоставляют отдых в деннике.
В зависимости от первичного состояния и предварительного диагноза в это время может наблюдаться кровотечение в месте проведения процедуры. В качестве превентивных мер используют инфузионную терапию, кровоостанавливающие и антибактериальные препараты. В дальнейшем лошадь возвращают к обычному режиму жизни.
Отобранные пробы доставляют в лабораторию, используя различные виды консервирования: физиологический раствор натрия хлорида, спирт, формалин, что заранее согласовывается с лабораторией. Для проведения анализа из материала изготавливают микро срезы. Как правило, для объективного заключения требуется провести микроскопию не менее чем с 5-10 срезов от каждого кусочка ткани/органа.
Интерпретация многих гистопатологических изменений у лошадей мало чем отличается от таковых у мелких домашних животных или человека. Однако, во всех затруднительных ситуациях для получения «второго» мнения цифровое изображение гистологической картины можно отправить по электронной почте в любую другую ветеринарную лабораторию РФ и зарубежья.
Что потребуется:
Перед процедурой биопсии необходимо почистить лошадь и подготовить место, где ни лошадь, ни доктор, не будут мешать другим обитателям конюшни, а эти самые обитатели не будут мешать лошади-пациенту и врачу. Также желательно иметь в непосредственной близости электрическую розетку и воду.
Бактериологический/микологический анализ
Этот вид исследования проводят при подозрении на инфицирование ран и полостей, а также в ряде случаев острых и хронических заболеваний кожи, глаз, суставов, респираторного, желудочно-кишечного и мочеполового тракта, когда требуется не только выявить инфекционного агента, но и подобрать к нему эффективные антибактериальные или противогрибковые препараты.
Как:
Соскобы с кожи, образцы корочек и волос, пробы выделений (кровь, слизь, моча, кал и др.) или транссудата/экссудата, если таковые имеются, собирают руками в стерильных перчатках или инструментами: специальным стерильным шпателем/тампоном или шприцем с иголкой в стерильные пробирки/контейнеры с питательной средой или без. При необходимости с органа или полости делают смыв стерильным физиологическим раствором натрия хлорида с последующим сбором материала в пробирку для анализа.
Пробы доставляют в лабораторию при температуре не выше +4°С как можно раньше, но не более чем через 4 часа с момента отбора, если они собраны в пробирки без транспортной среды (исключение есть лишь для сухих проб с кожи и образцов волос для микологического анализа, которые могут храниться в прохладных сухих условиях до 3-х суток). Если предполагается более длительная транспортировка/хранение, и особенно если подозревают ряд специфических инфекций (клостридиозы и др.) нужны специальные пробирки со средами, при чем раздельно для аэробных, анаэробных бактерий и грибов.
Микологическое исследование соскобов с кожи и образцов волос.
Эти исследования проводят в основном при подозрении на особо опасные грибковые заболевания — дерматомикозы (трихофития и микроспория/лишай), но также и при длительно незаживающих ранах и различных дерматитах, особенно в нижних частях конечностей (мокрецы/подседы), и некоторых системных заболеваниях.
Как:
Для точного подтверждения или исключения диагноза «лишай» в лаборатории проводят три специфических теста: микроскопию волос, диагностику с лампой Вуда и посев проб на питательные среды. Первые два анализа могут быть выполнены быстро, в пределах 2-х часов или одного дня, что зависит от экстренности ситуации, а вот результатов посева придется ждать 2-3 недели (грибы очень медленно растут и капризны к средам).
Очень часто при заболевании трихофитией (это тоже разновидность лишая) первые два анализа могут быть отрицательны, поэтому для окончательного диагноза всегда требуется ждать заключения после посева.
Что потребуется:
Очень важно при планировании любых соскобов и мазков с кожи, ран и т. д. не позднее чем за три дня до отбора проб прекратить их лечение. Также, не рекомендуется мыть эти места с мылом и шампунем и наносить какие либо защитные спреи, кремы и репелленты.
Лошадь должна быть почищена перед приездом врача.
Для процедуры нужно продумать место, недалеко от электрической розетки и воды, и время, когда ни доктор, ни лошадь, не помещают другим обитателям конюшни. Как правило, процедура получения соскобов с кожи занимает 15-30 минут, а смыв с бронхов (бронхо-альвеолярный лаваж) или с матки длится от 40 мин до 1 часа.
Заказать услугу и получить дополнительную информацию можно
по телефону +7 (495) 991-69-61 или оставить заявку на сайте
Источник
В своей практической деятельности ветеринарным специалистам при выполнение плана противоэпизоотических мероприятий, а также при исключении тех или иных инфекционных заболеваний приходится проводит взятие проб крови от животных. При этом у лошадей, крупного рогатого скота, верблюдов, оленей, овец и коз кровь берут из яремной вены в верхней трети шеи. Иглы для взятия крови обязательно стерилизуются кипячением. Кровь берется от каждого животного отдельной иглой. В последние годы забор крови от животных проводится вакуумными пробирками или одноразовыми шприцами из подхвостовой вены.
1. Шерсть на месте взятия крови тщательно выстригается, кожа дезинфицируется 70% спиртом.
2. При взятии крови специалист должен следить, чтобы кровь стекала по стенке пробирки струей, а не каплями. Кровь, взятая каплями и вспененная, скорее гемолизируется и часто дает неправильные результаты показаний при исследовании. Во время взятия крови ветспециалист должен следить, чтобы кровь не попадала в кормушку и на землю. Для этого ветспециалист при взятие крови из вены должен пользоваться тазиком с дезинфицирующей жидкостью, куда спускают первую порцию крови.
У свиней кровь берется из уха (иглой или шприцем) или из кончика хвоста. Хвост перед взятие крови обмывают водой с мылом и дезинфицируют 70% спиртом, затем кончик отрезают ножницами. После взятия крови кончик хвоста обрабатывают йодом, перевязывают или прижигают.
У птиц кровь берут из вены крыла или гребешка. Брать кровь надо по возможности утром, до кормления животного.
3. Объем: Для серологического исследования от крупных животных кровь берут в количестве 7-10мл, а от мелких животных в объеме 2-4мл.
4. Взятую кровь выдерживают около часа при температуре 30-35 градусов для свертывания, а затем выносят в прохладное помещение для отстаивания.
5. Сроки доставки: сыворотка крови должна быть доставлена в ветлабораторию, в течение первых суток. И в исключительных случаях не позднее третьего дня после ее взятия!!!
6. При пересылке сыворотки на большое расстояние, особенно летом ее необходимо консервировать 5%-ным раствором карболовой кислоты на физиологическом растворе из расчета на каждые 9мл сыворотки 1мл раствора карболовой кислоты или 1-2капли раствора на 1мл сыворотки.
Сыворотку можно консервировать также высушиванием. Для высушивания сыворотку наносят на фильтровальную бумагу размером 5*5см в количестве 0,4мл и выдерживают в комнате при рассеянном свете до полного высыхания. После этого на каждой бумаге с высушенной сывороткой делают соответствующие записи карандашом и завертывают в пергаментную бумагу (каждую пробу отдельно), а затем упаковывают в конверт и в таком виде отсылают в лабораторию.
7. Для серологического исследования в лабораторию особенно от вблизи расположенных хозяйств можно отправлять и цельную кровь, не отделяя сыворотку, но при условии, что в пути ее не будут встряхивать и она не подвергнется гемолизу.
8. Маркировка: на каждой пробе сыворотки крови или крови указывают ее порядковый номер, инвентарный номер животного (кличку животного, фамилию владельца животного).
9. Оформление: к сопроводительному письму на пробы крови, направляемые в плановом порядке для серологического или гематологического исследования, прилагается опись проб в 2-х экземплярах. Смотри приложение №1. (doc)
10. Упаковка и транспортировка: Пробирки с кровью или сывороткой плотно закрывают стерильными пробками и устанавливают для пересылки в строго вертикальном положении (на лицевой стороне посылки вверху должна быть надпись «осторожно-стекло!» и «Верх»). Зимой кровь и сыворотку упаковывают и пересылают так, чтобы они не замерзали.
Источник