Что такое анализ крови нсу
Согласно концепциям современной медицины превосходство распространенности на земном шаре принадлежит вирусам. Человечеству пришлось задействовать много сил и ресурсов для борьбы с ними. Крайне важная роль принадлежит диагностике вирусных поражений печени, в частности вирусного гепатита С. Правильная расшифровка лабораторных показателей для выявления этого заболевания затруднена из-за большого количества ложноположительных результатов анализа крови. Поэтому так важен правильный выбор и интерпретация проведенного исследования.
Способы обнаружения вируса
Вирус гепатита С (hcv) представляет собой мелкую цепь РНК внутри вирусной оболочки, которая для своего размножения использует генетический материал печеночных клеток. Непосредственный их контакт приводит к:
- Запуску воспалительного процесса в печени;
- Разрушению печеночных клеток (цитолиз);
- Запуску иммунных механизмов с синтезом специфических антител;
- Аутоиммунной агрессии иммунных комплексов в отношении воспаленных гепатоцитов.
Вирус гепатита С, попадая в организм, вызывает очень медленный иммунный ответ, что оставляет его длительное время незамеченным. Болезнь часто обнаруживается лишь на стадии цирроза печени, хотя все время вирусные частицы и соответствующие им антитела циркулируют в крови. На этом основаны все известные методы диагностики hcv-инфекции. К ним можно отнести:
- Серологические тесты в условиях лаборатории;
- ПЦР-диагностика (полимеразная цепная реакция);
- Экспресс-тесты для определения заболевания в домашних условиях.
Важно помнить!!! Диагностика вирусного гепатита С достаточно сложная. Это связано с высокой мутирующей способностью возбудителя заболевания. За короткий срок он способен приобретать новые антигенные свойства, что делает его практически незаметным для иммунных клеток и тестов серологической диагностики.
Видео о гепатите С:
Возможные показания для исследования
Пройти тестирование на hcv-инфекцию может любой желающий. Особых показаний для этого не нужно, кроме желания человека пройти этот анализ крови. Но существует категория лиц, которые в обязательном порядке подлежат исследованию. К ним относятся:
- Доноры крови;
- Люди, которым проводилось переливание крови, ее компонентов или препаратов на ее основе;
- Повышение уровня печеночных трансаминаз (АлАТ, АсАТ), особенно после предшествующих оперативных вмешательств, родов и других медицинских манипуляций;
- Подозрение на вирусный гепатит С или необходимость исключения этого диагноза;
- Отрицательные тесты на вирусный гепатит В при наличии симптомов воспаления печени;
- Контроль эффективности терапии hcv-инфекции и решение вопросов, касающихся тактики дальнейшего лечения.
Особенности серологической диагностики и оценка результатов
Лабораторный анализ крови на hcv предполагает обнаружение антител (иммуноглобулинов) классов M и G к антигенным компонентам вируса гепатита С. Для этого используются в основном реакции иммуноферментного анализа (ИФА) и радиоиммунный анализ (РИА). Лабораторные методы обнаружения антител считаются самыми достоверными, поскольку они позволяют использовать в качестве реагентов несколько антигенных комплексов самых распространенных типов вируса гепатита С.
Для исследования производится забор около 20 миллилитров венозной крови из периферической вены. Ее центрифугируют и отстаивают для получения плазмы (жидкой прозрачной части). Форменные элементы и осадок удаляются. Для исключения ложноположительных результатов лучше производить забор крови в утреннее время до приема пищи. За несколько дней до этого желательно исключить прием медикаментов, особенно влияющих на состояние иммунной системы.
Результаты проведенных анализов могут быть представлены таким образом:
- Hcv – отрицательный. Это значит, что в организме антител к вирусу гепатита С не обнаружено. Заболевания нет;
- Hcv – положительный. Это говорит о наличии в исследуемых образцах крови антител к вирусу гепатита С. Человек либо переболел этим заболеванием, либо болеет в данный момент острой или хронической его формой;
- Обнаружено анти-hcv IgG. В таком случае стоит думать о хроническом вирусном гепатите С;
- Обнаружено анти-hcv IgМ. Его изолированное наличие говорит об остром процессе, а сочетание с анти-hcv IgG – об обострении хронического.
Экспресс-тестирование на hcv – первый шаг в обнаружении заболевания
Особенности экспресс-тестирования
Любой человек может провести анализ крови на hcv самостоятельно. Это стало возможно благодаря созданию специальных тест-систем для экспресс-диагностики вирусного гепатита С. Их результативность уступает лабораторным серологическим методам, но отлично подходит для ориентировочного определения возможного инфицирования в короткое сроки.
Приобрести или заказать тестовую систему можно в любой аптеке. Она включает в себя все необходимое для проведения теста. Анализ начинают с вскрытия стерильного контейнера и подготовки всех компонентов. После обработки специальной салфеткой с антисептиком пальца его аккуратно прокалывают скарификатором. При помощи пипетки набирается 1-2 капли крови и переносятся в углубление на тест-планшете. К крови добавляют 1-2 капли реагента из флакона, который входит в состав теста. Результат должен оцениваться через 10 минут. Крайне важно не оценивать результат позже 20 минут в связи с возможностью ложноположительного результата.
Проведенный анализ крови может быть расценен так:
- В окошке планшета появилась одна фиолетовая полоска (тест отрицательный). Это значит, что антитела к hcv в исследуемой крови не обнаружены. Человек здоров;
- В окошке планшета появилось две фиолетовые полоски (тест положительный). Это говорит о наличии антител в исследуемой крови и связи организма с вирусным гепатитом С. Такие люди подлежат более тщательным методам серологической диагностики в обязательном порядке;
- В окошке планшета не появилось ни одной полоски. Тест-система испорчена. Рекомендуется повторное тестирование.
Важно помнить!!! Антитела к вирусу гепатита С в крови появляются через 9-12 недель после инфицирования. Для большей достоверности диагностики обязательно должны сочетаться серологические методы с ПЦР-исследованием крови на hcv!!!
Вирус гепатита С содержит РНК и обладает низкой антигенной активностью
Особенности ПЦР диагностики
Полимеразная цепная реакция – это самый современный способ обнаружения генетического материала любых клеток. В отношении вирусного гепатита С метод позволяет обнаружить РНК-молекулы вирусных частиц. Это можно сделать качественным и количественным методом. Первый способ может оказаться неинформативным, если количество вирусных частиц в исследуемой крови не достигнет порогового значения. Второй способ позволяет точно указать количество обнаруженных вирусных цепей РНК и более чувствителен.
Проведенный анализ может быть представлен такими результатами:
- РНК Hcv не обнаружено. Это значит, что в исследуемой крови нет вирусных частиц;
- РНК hcv обнаружены. Это говорит об инфицировании гепатитом С;
- Количественный hcv-тест ПЦР проводится для оценки степени инфицированности крови больного и активности размножения вируса в организме. Высокой считается вирусная нагрузка крови от 600 до 700 МЕ/мл. Показатели выше этой цифры называют очень высокими, ниже ее – низкой вирусной нагрузкой крови.
Анализ крови на hcv при диагностике вирусного гепатита С – это единственный информативный, доступный и безвредный метод верификации диагноза. Правильная интерпретация и комбинирование разных способов его проведения минимизируют количество диагностических ошибок.
Источник
Тест на определение антител к возбудителю гепатита С в настоящее время используется в качестве «золотого стандарта» первичной диагностики заболевания. Исследование получило название анти-HCV. Методика выполнения теста позволяет определить титр иммуноглобулинов, что определяет активность иммунного ответа.
Некоторые разновидности анализа способны дифференцировать различные типы антител, что является определяющим фактором в постановке диагноза острого или хронического гепатита С. При наличии показаний возможно выявление иммуноглобулинов к специфическим структурным протеинам патогена. Такое исследование проводят редко, но оно помогает определить причину резистентности к терапии и оценить возможность развития осложнений.
Что значит Анти-HCV?
Анализ крови анти-HCV предназначен для обследования человека на предмет гепатита С. Что это за тест? Принцип исследования состоит в выявлении антител (иммуноглобулинов или АТ). Иммуноглобулины – специфические вещества протеиновой структуры, которые вырабатываются для защиты организма от бактерий и вирусов. Антитела способны «распознать» частицы болезнетворных патогенов, которые могут нанести необратимый урон здоровью.
Такие частицы именуют антигенами. Задача АТ – уничтожить их до наступления необратимых изменений. Иммуноглобулины отличаются высокой специфичностью. Иными словами, к каждому антигену вырабатываются определенные, уникальные по структуре антитела. Соответственно, если в организме обнаружены АТ к гепатиту С, то это свидетельствует о произошедшем инфицировании.
Пациенты часто спрашивают, если анализ анти-HCV положительный, что это значит? Зачастую такие результаты говорят о заражении. Но при проведении скрининга на иммуноглобулины возможно получение ложных (как позитивных, так и негативных) анализов. Дело в том, что результаты исследования Anti-HCV зависят от особенностей работы иммунной системы. К примеру, беременность и аутоиммунные заболевания могут продемонстрировать ложные маркеры теста.
Когда пациенты интересуются, что это за анализ, доктора разъясняют, что существует несколько разновидностей исследования. Типы тестов для выявления антител описаны в таблице.
| Тип анализа на иммуноглобулины | Описание |
| Anti-HCV суммарный | Исследование определяет весь спектр циркулирующих в крови иммуноглобулинов. Показано в качестве средства для первичной диагностики |
| Анти-HCV IgG и IgM | Тест применяется для дифференцирования острой формы гепатита С от хронической |
| Определение HCV core Antigen | Протеин core – один из основных структурных элементов капсида возбудителя вируса гепатита С. Полагают, что это исследование может заменить качественную ПЦР, так как наличие антигена core является 100% признаком присутствия вируса в организме и его репликации. Но из-за сложности выполнения теста и высокой стоимости проведения доктора отдают предпочтение именно ПЦР |
Достоверность
Практически все современные клинические лаборатории сейчас перешли на тест-системы последнего поколения. Их точность и специфичность превышает 98%. Поэтому возможные сомнительные результаты обычно связаны не с человеческим фактором либо качеством используемого для диагностики набора реактивов, а с особенностями работы иммунной системы больного.
Именно из-за этого положительный анализ на гепатит С иммуноферментным методом (ИФА) не служит основанием для постановки диагноза. Результат ИФА требует обязательного подтверждения более специфичным тестом на наличие РНК патогена в крови, выполняемого способом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Точность последнего также приближается к 100%.
Сравнительно недавно в продаже в аптеках появились экспресс-тесты, направленные на выявление антител и позволяющие провести анализ HCV самостоятельно дома. Их преимуществом служит возможность выполнения без медицинской помощи. Подобный набор не заменит полноценного лабораторного анализа, но поможет провести самодиагностику и вовремя обратиться к врачу. Точность экспресс-тестов составляет порядка 95%. Но для минимизации риска неправильных результатов нужно соблюдать все правила выполнения анализа. Подробная инструкция по использованию тест-системы прилагается к набору. Существуют экспресс-тесты для выявления антител как в крови, так и в слюне.
Как проводят анализ на гепатит С
Серологический анализ на гепатит С выполняется с использованием одной из следующих методик:
- ELISA (от английской аббревиатуры «enzyme linked immunoadsorbent assay), исследование проводят при помощи реагентов-адсорбентов, которые обладают специфической способностью связывать иммуноглобулины в биологическом образце;
- EIA (enzyme immunoassay), результаты теста основаны на биохимической реакции антител с содержащимися в реактивах специфическими ферментами.
Существуют и другие методики выполнения анализа ИФА анти-HCV (например, EMIT), но они используются гораздо реже. ELISA и EIA просты в применении, доступны в финансовом плане, подходят для работы с большим количеством образцов. Во время исследования находящиеся в крови антитела образуют соединения со специфическими реагентами. Впоследствии они обнаруживаются либо при микроскопическом исследовании, либо при обработке образца при помощи специальных компьютерных программ. Таким образом возможен двойной контроль результатов исследования.
В качестве реактивов могут использоваться различные соединения:
- лизатные, полученные путем очищения патогена (для этой цели обычно применяют ультразвук);
- рекомбинантные, когда реагенты получают генно-инженерным путем;
- пептидные с применением искусственно полученных веществ.
В зависимости от используемого реагента тест-системы могут определять либо суммарные антитела, либо дифференцировать иммуноглобулины на G и М. В качестве твердой фазы применяют луночные планшеты либо шарики, лидируют в производстве таких устройств корпорации Roche или Abbot.
Показания для исследования ИФА
Тестирование на HCV (Hepatitis C Virus) проводится как в качестве рутинного исследования для регулярного обследования работников некоторых сфер (образования, здравоохранения), при планировании зачатия и т.д. Также анализ ИФА Тотал на суммарные антитела к гепатиту С выполняется и при подозрении на вирусное поражение печени.
ИФА является основным первичным методом диагностики заболевания. Остальные тесты проводятся по результатам этого исследования.
Проведение ИФА строго показано в следующих случаях:
- перенесенные до 1992 года гемотрансфузионные процедуры и хирургические вмешательства по поводу трансплантации органов (до этого времени не были известны методы выявления HCV у доноров и в биологическом материале);
- пристрастие к внутривенным наркотикам: применение психоактивных веществ ослабляют иммунную систему и делают организм более восприимчивым к подобного рода заболеваниям;
- использование общих с инфицированным человеком предметов гигиены;
- половые контакты с больным (особенно, гомосексуальные);
- инфицирование ВИЧ;
- при беременности;
- повышение уровня печеночных ферментов;
- любые иммунодефицитные состояния;
- работа с сфере здравоохранения.
Людям из группы риска рекомендуют регулярно сдавать кровь на HBsAg, HCV и HIV (гепатиты В и С, ВИЧ ).
Также исследование показано и при появлении определенных клинических признаков, которые могут косвенно указывать на наличие поражения печени вирусной этиологии. Это:
- постоянное чувство слабости;
- головные боли;
- сонливость;
- расстройства пищеварения (тошнота, изжога, диспепсия, диарея либо запор, неприятный привкус во рту);
- желтуха;
- потемнение урины;
- осветление кала.
Относительными показаниями к проведению иммуноферментного теста на ВГС служат:
- нанесение татуировок, перманентного макияжа, выполнение пирсинга;
- ведение беспорядочной половой жизни;
- проведение частых лечебных процедур (гемодиализа, эндоскопии);
- планирование беременности (тестирование проходят оба партнера);
- регулярные посещения маникюрных кабинетов.
В некоторых структурах результаты ИФА требуют при приеме на работу и далее ежегодно. С этой целью оформляется медицинская книжка, куда вносится не только тест на гепатит С, но и другие обследования и рекомендации врача.
Как правило, это касается:
- работников здравоохранения, которые непосредственно контактируют с пациентами или донорским материалом;
- продавцов;
- поваров, официантов и других служащих сферы общественного питания;
- учителей, воспитателей в детских садах и другого персонала школ, интернатов, дошкольных детских учреждений, образовательных и развлекательных центров;
- косметологов и парикмахеров;
- мастеров в тату- и пирсинг-салонах.
В целом, риску заразиться гепатитом С подвергается почти каждый человек. Сейчас для выполнения теста вовсе не обязательно обращаться к врачу, брать направления и тратить несколько часов на ожидание в очереди. Анализ проводится практически в каждой частной лаборатории, а цена его вполне доступна. Забор крови занимает несколько минут, а результат выдают на руки либо присылают по указанному в бланке электронному адресу в течение 1–3 дней.
Правила подготовки к лабораторному тесту
Иммуноферментное исследование для выявления гепатита С зависит не только от качества используемых тест-систем и профессионализма лаборанта, проводящего анализ. На результаты также влияет и особенности подготовки к забору крови. В первую очередь это касается пациентов, страдающих от хронических заболеваний и вынужденных принимать медикаменты.
Таким больным следует:
- за 7–10 дней до предполагаемого обследования предупредить врача о необходимости сдачи анализов и возможности сделать перерыв в приеме лекарств;
- если прием медикаментов не требует соблюдения временного режима, пить препараты (делать укол) следует после забора крови;
- некоторые средства обладают иммуносупрессивной активностью (лекарства, назначаемые для терапии онкологических заболеваний, цитостатики, иммунобиологические медикаменты);
- длительный прием антибиотиков, противомикробных, противопаразитарных средств и некоторых других препаратов может негативно отразиться на состоянии печени, поэтому о курсе такого лечения следует известить доктора.
На консультации перед сдачей крови либо при обращении к врачу по поводу расшифровки анализа необходимо обязательно сообщить о любых проблемах со здоровьем, а тем более, об известных диагнозах и принимаемых лекарствах.
Чтобы снизить вероятность сомнительных, неопределенных результатов доктор и консультанты в клинической лаборатории неоднократно предупреждают о необходимости соблюдать определенные правила.
К числу обязательных врачебных рекомендаций относят:
- Специальную диету – за 3 дня до обследования. Питание по столу №5 рекомендовано при подтвержденном поражении печени вирусного либо другого генеза. Но на этапе подготовки к проведению исследования также нужно придерживаться диеты. Не следует есть жирные сорта птицы, мяса и рыбы, молока и кисломолочных продуктов, некоторые сыры, мясные субпродукты, соусы, колбаса, ветчина, сосиски, консервы. Рекомендуют ограничить употребление соли, противопоказаны маринованные овощи и фрукты, жареные блюда, фаст-фуд, сдоба.
- Полное исключение алкоголя вне зависимости от объема и крепости напитков. Такое правило соблюдают как минимум 2 недели до забора крови.
- Воздержание от приема пищи (разрешена только негазированная вода) за 12 часов до посещения лаборатории.
- Не курить 8–10 часов до сдачи крови.
- Посещение лаборатории утром после пробуждения.
- За сутки до исследования ограничить тяжелые физические нагрузки.
Исследование лучше перенести, если:
- развилась бактериальная инфекция (вне зависимости от этиологии, например, ангина, пневмония, пиелонефрит);
- возникла необходимость в приеме антибиотиков, противоглистных средств, фунгицидных препаратов (анализ лучше выполнять через 7–10 дней после окончания курса терапии).
Симптомы ОРЗ и других заболеваний следует дифференцировать от признаков гепатита С. Зачастую вирусное поражение печени дает о себе знать гриппоподобной симптоматикой.
При нарушении правил подготовки к проведению исследования, лучше перенести анализ. Если же это по каким-либо причинам сделать невозможно, нужно известить доктора. Иногда подобные обстоятельства могут стать причиной получения ложноположительных либо ложноотрицательных результатов.
Расшифровка результатов анализа крови
Идеально, если расшифровка Anti-HCV проводится профильным специалистом. Но при сдаче анализа в частной лаборатории пациент получает результаты лечения еще до посещения врача. Редкий человек сможет дождаться консультации доктора и не поинтересоваться, выходят ли показатели за пределы физиологически допустимых значений.
В норме Anti-HCV Total отрицательный, это значит, что антител к возбудителю гепатита С в крови человека не обнаружено.
Основные принципы интерпретации различных вариантов результатов серологического исследования приведены в таблице. Также указана цель выполняемого теста.
| Наименование анализа | Возможный результат и описание |
| Anti-HCV суммарный (тотал) | Является основой диагностики гепатита С. Возможные результаты:
|
| Дифференцированный анализ на антитела к HCV | Может выполняться как вместо Anti-HCV Total, так и при обнаружении суммарных антител. Возможные результаты:
|
| ИФА HCV Ag At | Исследование проводят для обнаружения вирус-антигенов (как правило это ядерный протеин core) либо структурных протеинов (NS3, NS4 и др.). В рутинной клинической практике тест назначают редко. Анализ на core-антиген успешно заменяется более быстрой и простой в выполнении ПЦР, а исследование на антитела к антигенам прочих структурных протеинов целесообразен в сложных случаях, когда необходимо выяснить причину резистентности и т. д. Но выявление любого из перечисленных антигенов на гепатит С служит однозначным признаком инфицирования |
Как и любое другое исследование, ИФА на антитела к HCV сопряжены с риском получения ошибочных результатов.
Помимо технической ошибки в проведении анализа, ложные позитивные либо негативные данные возможны при:
- беременности;
- аутоиммунных заболеваниях (особенно, аутоиммунном гепатите);
- лейкемии и других видах онкологии;
- ВИЧ;
- ранее перенесенном гепатите С (как после противовирусной терапии, так и при самостоятельном выздоровлении, которое отмечают в 10–15% случаев инфицирования);
- тяжелых системных инфекциях, когда в кровь происходит постоянный выброс большого количества антител, что и является причиной погрешности в анализе;
- любых состояниях, связанных с серьезным иммунодефицитом (включая медикаментозный).
Еще одной причиной ложного результата является так называемое «диагностическое окно». Это период с момента инфицирования до накопления в крови человека антител в количестве, необходимом для лабораторной диагностики. Сроки, когда выявляется HCV методом ИФА, индивидуальны, но в среднем составляют 6–8 недель.
Проведение серологического исследования нецелесообразно для диагностики патологии у ребенка, рожденного от больной матери. Если вероятность внутриутробной и интранатальной передачи вируса не превышает 5–7% (исключение составляют женщины с ВИЧ, у них риск составляет порядка 20–25%), то IgG проходят через плаценту и обнаруживаются в крови ребенка. Поэтому в данном случае исследование на HCV всегда проводят при помощи ПЦР.
Учитывая возможность получения ложных результатов, доктора всегда назначают подтверждающий тест по методике качественной ПЦР.
ИФА остается главным рекомендуемым методом быстрой диагностики гепатита С. Данный тест проводится повсеместно. Но во избежание ошибок с результатами анализа лучше обратиться к врачу за более комплексным обследованием (особенно при негативном ИФА на фоне ухудшающегося самочувствия).
Источник
