Анализаторы для исследования общего анализа крови

Анализаторы для исследования общего анализа крови thumbnail

Гематологические анализаторы крови широко используются для исследований крови при диагностике и мониторинге заболеваний. Большинство представленных на рынке медицинского лабораторного оборудования автоматических гематологических анализаторов позволяют проводить полный клинический анализ крови с расчетом лейкоцитарной формулы. Сложные и дорогие анализаторы могут оценивать клеточную морфологию и фиксировать клеточные популяции при диагностике редких заболеваний крови.

Принцип работы гематологических анализаторов крови

В основе устройства автоматических гематологических анализаторов лежат три технологии:

  • Электрический импеданс
  • Проточная цитометрия
  • Флуоресцентная проточная цитометрия

Эти три метода предполагают использование химических реагентов, приводящих к лизису или изменения клеток для фиксации измеряемых параметров. Например, электрический импеданс позволяет дифференцировать эритроциты, лейкоциты и тромбоциты по объему. Добавление ядрообразующего агента, который сжимает лимфоциты больше, чем другие лейкоциты, позволяет дифференцировать объем лимфоцитов.

Электрический импеданс

Традиционным методом является метод электрического импеданса, иначе кондуктометрический или также называемый метод Коултера (Культера, Култера, Coulter) по имени его создателя. Этот метод/принцип используется практически во всех гематологических анализаторах.

Суть его состоит в том, что кровь пропускается между двумя электродами через отверстие настолько узкое, что через него может проходить только одна клетка. Импеданс или, проще говоря, проводимость среды изменяется по мере прохождения клеток через отверстие и это изменение пропорционально объему/размеру проходящих клеток. Данная зависимость и позволяет производить их дифференцированный подсчет.

Импедансный анализ позволяет выполнить клинический анализа крови с определением гранулоцитов, лимфоцитов и моноцитов, но он не позволяет различать гранулярные лейкоциты одинакового размера: эозинофилы, базофилы и нейтрофилы.

Скорость автоматического подсчета по данному методу в гематологических анализаторах составляет до 10000 клеток в секунду, и типичный анализ по импедансному методу может быть проведен менее чем за минуту.

Проточная цитометрия

Лазерная проточная цитометрия – более дорогостоящий метод по сравнению с импедансным, поскольку требует более дорогих реагентов, но он позволяет получать детальную картину морфологии клеток крови. Это лучший метод для определения лейкоцитарной пятикомпонентной формулы.

Суть метода состоит в том, что поток образца крови проходит через лазерный луч. Измеряется поглощение луча, а рассеянный свет измеряется под разными углами для определения зернистости, диаметра и внутренней сложности клетки. Это фактически те же самые морфологические характеристики клетки, которые можно определить вручную с помощью микроскопа.

Анализаторы для исследования общего анализа крови

Флуоресцентная проточная цитометрия

Добавление специальных флуоресцентных добавок позволяет расширить применение проточной цитометрии до возможности оценивать специфические популяции клеток.  Флуоресцентные красители позволяют оценить соотношение ядро-плазма в каждой окрашенной клетке. Это используется для анализа тромбоцитов, зарождающихся эритроцитов и ретикулоцитов.

Анализаторы для исследования общего анализа крови

Обзор производителей гематологических анализаторов

Производители автоматических гематологических анализаторов крови объединяют в своих приборах эти три технологии с инновационным применением реагентов и методов обработки данных, создавая собственные технологии, каждая из которых имеет свои преимущества с точки зрения точности измерений, скорости их выполнения или набора параметров.

В приборах ADVIA ® фирмы Siemens используется образец пероксидазы для дифференцированного тестирования. С его помощью выполняется самотестирование прибора (внутренний QC тест).

Метод лаурилсульфата натрия, используемый в приборах фирмы Sysmex при определении гемоглобина является нецианидным методом и имеет очень короткое время реакции. Гемоглобин определяется в отдельном канале, при этом минимизируется влияние высоких концентраций лейкоцитов.

Анализатор CELL-DYN Sapphire ® от Abbott использует трехцветную флуоресценцию в сочетании с запатентованной технологией Multiangle Polarized Scatter Separation для обеспечения высочайшей точности при определении лейкоцитарной формулы за счет идентификации клеток с использованием четырех углов рассеяния света.

Анализаторы для исследования общего анализа крови

Что следует учитывать при покупке гематологического анализатора?

Выбор подходящего инструмента будет зависеть от того, где его предполагается использовать: возле постели пациента (прикроватный), в лаборатории для экспресс-диагностики, крупной клинической лаборатории или в исследовательском медицинском учреждении. Разумеется, нужно помнить, что оборудование, используемое в клинических целях, должно иметь соответствующие сертификаты.

Основные характеристики гематологических анализаторов

Вот те параметры, которые необходимо тщательно проанализировать перед тем, как делать выбор:

    Набор параметров, заложенных в автоматический анализатор

    В каждый, даже самый простой автоматический гематологический анализатор крови заложена возможность определять не один, а несколько параметров крови. Все они выдают результаты клинического анализа CBC (complete blood count) и рассчитывают трех или пятикомпонентную лейкоцитарную формулу. Однако количество этих параметров у приборов разное. Наиболее простой гематологический анализатор XP-300™ от фирмы Sysmex дает результат по 17 параметрам: WBC; RBC; HGB; HCT; MCV; MCH; MCHC; PLT; NEUT #,%; LYM #,%; MXD #,%; RDW-SD; RDW-CV; MPV.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Модель же гематологического анализатора крови Pentra DX Nexus SPS от компании Horiba позволяет определять 50 параметров крови: WBC, RBC, HGB, HCT, MCV, MCH, MCHC, RDW, PLT, MPV, *PCT, *PDW %, NEU, LYM, MON, EOS, BAS, *ALY, *LIC, *IMM, *IML, *IMG: (% and #), RET (% and #), RETH %, RETM %, RETL %, *IMR %, CRC%, IRF, MRV, *RHCc, MFI, NRBC % NRBC#, *CWBC, *WBC#, *RBC#, *PolyNuc#, and *MonoNuc# и др. («*» отмечены те, что используются в исследовательских целях).

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Делая выбор, необходимо представлять, насколько целесообразно приобретать прибор на большое количество параметров, поскольку и расходы на обслуживание и реагенты будут выше.

    Время на анализ

    Время анализа зависит от определяемого параметра и является одной из наиболее важных технических характеристик гематологического анализатора. Лимитирующей временной стадией является реакция образца с реагентом. Простой клинический анализ крови на автоматических гематологических анализаторах как правило выполняется за одну минуту, на определение более сложных параметров может уходить до 10 мин.

    Анализатор CELL-DYN Sapphire от фирмы Abbot затрачивает на определение тромбоцитов иммунотромбоцитным методом CD 61 (immunoplatelet method) приблизительно 5 минут, а на определение CD3/4 и CD3/8 T-клеток около 7 минут.

    Степень автоматизации

    Высокопроизводительные лаборатории предъявляют высокие требования к степени автоматизации анализов. Рассматриваются такие характеристики анализатора, как максимальная загрузка образцами, скорость выполнения гематологического анализа, совместимость флаконов (виал или ячеек) с другим оборудованием.

    Гематологический анализатор крови XE-5000 от Sysmex позволяет выполнять анализ образцов по 31 параметру со скоростью 150 образцов в час.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Гематологический анализатор крови ADVIA 120 от фирмы Siemens – настольный прибор, который позволяет загрузить в автосэмплер одновременно 150 образцов и выполнить их полный анализ без участия оператора за 75 минут.

    Читайте также:  Анализ крови расшифровка у детей два года

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Гематологический анализатор Pentra DX Nexus SPS от фирмы Horiba оснащён автозагрузчиком проб, совместимым с различными пробоподатчиками.

    Сейчас необходимой технической характеристикой серьезного гематологического анализатора является возможность работать со штрих-кодами (бар-кодами). Технология считывания и распознавания данных у анализаторов разная.

    Например у анализаторов крови LH 780 от Beckman Coulter реализована технология, которая позволяет достоверно считывать даже плохо пропечатанные изображения.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Особо следует отметить очевидную пользу от автоматической маркировки (выделения) результатов анализа, которые вышли за пределы допустимых диапазонов, возможность их автоматической перепроверки без участия оператора.

    Расход и стоимость используемых реагентов в гематологических анализаторах

    Заранее необходимо выяснить какие в гематологическом анализаторе применяются реагенты, в каком количестве и насколько они безопасны и экологичны. Важно узнать их основные характеристики, а также можно ли их приобрести у поставщиков реагентов или только у производителя.

    Анализатор ELite 3 от компании Erba позволяет определять 20 параметров с использованием только трех реагентов, которые не содержат цианидов и вообще экологически безопасны.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    В анализаторах DxH 800 и DxH 600 фирмы Beckman используется всего пять реагентов на определение всех параметров, включая NRBC и ретикулоциты.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Заранее выясняйте, как часто необходимо менять реагенты. Модель анализатора ADVIA 120 от Siemens поставляется с комплектом реагентов (анализ + промывка) на 1850 тестов.

    Размер образца и работа с микроколичествами

    Типичный размер аналитической пробы для проведения анализа составляет 150 μL. Некоторые производители позволяют выполнить анализ крови в пробе меньшего объема (микросэмпл), что очень востребовано в педиатрии.  Например, компания Horiba выпускает анализатор модели ABX Micros ES 60, который может выполнить полный анализ крови используя всего 10 μL образца.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Точность, сходимость и линейность

    Погрешность измерения объема клеток методом импеданса у большинства приборов может превышать 1% она определяется соотношением размера отверстия в импедансном узле к размеру исследуемых клеток. Некоторые приборы позволяют снизить эту погрешность за счет использования в измерительных модулях ячеек с разными диаметрами отверстий для клеток различного размера. Температура также влияет на погрешность. Особенность анализатора Pentra 80 от компании Horiba состоит в предварительном разогреве измерительного модуля, что повышает точность и стабильность результатов.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Время и периодичность технического обслуживания и калибровок

    Узнайте, как часто анализатор необходимо обслуживать, калибровать и что входит в техническое обслуживание. Производитель Idexx в своих анализаторах задействует технологию qualiBeads®. Это частицы с определенными характеристиками, которые используются для проверки гематологического анализатора в качестве внутреннего стандарта.

    В автоматических анализаторах крови ABX Pentra от Horiba заложена стандартизация, валидация, перепроверки, а также возможность обмена данными между центральной лаборатории и дочерними.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Образцы находятся в открытых или закрытых флаконах

    Работа анализатора с закрытыми флаконами/виалами сводит к минимуму возможность пролива образца крови и тем самым возможную опасность от контакта оператора с пробой. Приборы, которые позволяют работать как с открытыми, так и закрытыми флаконами имеют различную стабильность результатов и механизмы калибровки в зависимости от выбранного режима.

    Обработка результатов, их хранение

    Количество результатов анализов, которые могут быть сохранены в системе у всех анализаторов разное. Компактные настольные анализаторы обычно позволяют сохранить до 1000 результатов и гистрогармм, а, к примеру, ABX Pentra DX120 SPS от Horiba позволяет записать 90000 результатов и графиков. Многие из высокопроизводительных систем интегрируются в LIMS.     

    Размеры гематологического анализатора

    Размеры гематологических анализаторов варьируются, от компактных настольных моделей, до больших автоматизированных комплексов. Анализатор ABX Micros ES 60 (Horiba) – компактная настольная модель с размерами 41 × 36 × 36 см. и весом всего 12,7 кг. Она управляется с тачскрина и позволяет записывать до 1000 результатов анализов.

    Напольная высокопроизводительная модель XN-9000 от Sysmex собирается из модулей и конфигурируется под задачи заказчика.  Конфигурация 801 имеет размеры 792 см × 122 см. Такой автоматизированный комплекс позволяет анализировать до 900 образцов в час.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Использование гематологических анализаторов в ветеринарии

    Для автоматиечкого анализа крови животных используются специальные гематологические анализаторы. Анализатор ProCyte Dx от Idexx предназначены для анализа крови собак, кошек, лошадей, быков, хорьков, кроликов, песчанок, свиней, морских свинок и образцов мини-свиней.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Программное обеспечение Coulter Ac-T для ветеринарных программ от Beckman Coulter предназначено для обработки результатов анализов крови кошек, собак и лошадей.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Производители гематологических анализаторов

    Самые широко известные производители это:

    1. Abbott Diagnostics
    2. Beckman Coulter
    3. Erba Diagnostics
    4. Horiba
    5. Idexx
    6. Siemens
    7. Sysmex

    Менее популярные зарубежные производители:

    1. APPLIED BIOSYSTEMS (USA)
    2. BOULE MEDICAL AB (SWELAB) (SWEDEN)
    3. DIATRON MESSTECHNIK GMBH (AUSTRIA)
    4. DREW SCIENTIFIC, LTD (NETHERLANDS)
    5. F. HOFFMAN-LA-ROCHE LTD. (SWITZERLAND)
    6. HOSPITEX DIAGNOSTICS (ITALY)
    7.  HUMAN GMBH (GERMANY)

    Вот список российских компаний, которые производят автоматические гематологические анализаторы:

    ООО «НПФ «Лабовэй» производит анализатор Пикоскель ПС-4М.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    ООО «Эйлитон» производит гематологические анализаторы серии Medonic. Эта компания входит в группу компаний «А/О Юнимед» и работает на российском рынке медицинского лабораторного оборудования c 2003 года.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Анализ крови на них по 19 параметрам с производительностью 60 проб в час

    НПФ ООО «ВИТАКО» производит анализаторы серии АРД.

    Анализаторы для исследования общего анализа крови

    Также на российском рынке представлены модели китайского производства.

    На нашем ресурсе, в категории «медицинские анализаторы» Вы может найти и купить новые и Б/У гематологические анализаторы у частных лиц и у продающих компаний.

    Источник

    Общий клинический анализ крови – это самый распространенный диагностический тест, который назначает пациенту врач. За последние десятилетия технология этого рутинного, но очень информативного исследования проделала колоссальный рывок – она стала автоматической. В помощь врачу лабораторной диагностики, орудием труда которого был обычный световой микроскоп, пришли высокотехнологичные автоматические гематологические анализаторы.

    В этом посте мы расскажем, что именно происходит внутри «умной машины», видящей нашу кровь насквозь, и почему ей следует верить. Мы будем рассматривать физику процессов на примере гематологического анализатора UniCel DxH800 мирового бренда Beckman Coulter. Именно на этом оборудовании выполняются исследования, заказанные в сервисе лабораторной диагностики LAB4U.RU. Но для того, чтобы понять технологию автоматического анализа крови, мы разберемся с тем, что видели врачи-лаборанты под микроскопом и как они интерпретировали эту информацию.

    Читайте также:  Что можно выявить по анализу крови

    Параметры анализа крови

    Итак, в крови содержится три вида клеток:

    • лейкоциты, обеспечивающие иммунную защиту;
    • тромбоциты, отвечающие за свертываемость крови;
    • эритроциты, осуществляющие транспорт кислорода и углекислого газа.

    Эти клетки находятся в крови в совершенно определенных количествах. Их обуславливают возраст человека и состояние его здоровья. В зависимости от условий, в которых находится организм, костный мозг производит столько клеток, сколько их требуется организму. Поэтому, зная количество определенного вида клеток крови и их форму, размер и другие качественные характеристики, можно уверенно судить о состоянии и текущих потребностях организма. Именно эти ключевые параметры – количество клеток каждого вида, их внешний вид и качественные характеристики – составляют общий клинический анализ крови.

    При проведении общего анализа крови производят подсчет количества эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов. С лейкоцитами сложнее: их несколько видов, и каждый вид выполняет свою функцию. Выделяют 5 разных видов лейкоцитов:

    1. нейтрофилы, нейтрализующие в основном бактерии;
    2. эозинофилы, нейтрализующие иммунные комплексы антиген-антитело;
    3. базофилы, участвующие в аллергических реакциях;
    4. моноциты – главные макрофаги и утилизаторы;
    5. лимфоциты, обеспечивающие общий и местный иммунитет.

    В свою очередь, нейтрофилы по степени зрелости разделяют на:

    • палочкоядерные,
    • сегментоядерные,
    • миелоциты,
    • метамиелоциты.

    Процент каждого вида лейкоцитов в их общем объеме называют лейкоцитарной формулой, которая имеет важное диагностическое значение. Например, чем более выражен бактериальный воспалительный процесс, тем больше нейтрофилов в лейкоцитарной формуле. Наличие нейтрофилов разной степени зрелости говорит о тяжести бактериальной инфекции. Чем острее процесс, тем больше в крови палочкоядерных нейтрофилов. Появление в крови метамиелоцитов и миелоцитов говорит о крайне тяжелой бактериальной инфекции. Для вирусных заболеваний характерно увеличение лимфоцитов, при аллергических реакциях – увеличение эозинофиллов.

    Помимо количественных показателей, крайне важна морфология клеток. Изменение их обычной формы и размеров также свидетельствует о наличии определенных патологических процессов в организме.

    Важный и наиболее известный показатель – количество в крови гемоглобина – сложного белка, обеспечивающего поступление кислорода к тканям и выведение углекислого газа. Концентрация гемоглобина в крови – главный показатель при диагностике анемий.

    Еще один из важных параметров – это скорость оседания эритроцитов (СОЭ). При воспалительных процессах у эритроцитов появляется свойство слипаться друг с другом, образуя небольшие сгустки. Обладая большей массой, слипшиеся эритроциты под действием силы тяжести оседают быстрее, чем одиночные клетки. Изменение скорости их оседания в мм/ч является простым индикатором воспалительных процессов в организме.

    Как было: скарификатор, пробирки и микроскоп

    Забор крови

    Вспомним, как раньше сдавали кровь: болезненный прокол подушечки скарификатором, бесконечные стеклянные трубочки, в которые собирали драгоценные капли выжатой крови. Как лаборант одним стёклышком проводил по другому, где находилась капля крови, царапая на стекле номер простым карандашом. И бесконечные пробирки с разными жидкостями. Сейчас это уже кажется какой-то алхимией.

    Кровь брали именно из безымянного пальца, на что были вполне серьезные причины: анатомия этого пальца такова, что его травмирование дает минимальную угрозу сепсиса в случае инфицирования ранки. Забор крови из вены считался куда более опасным. Поэтому анализ венозной крови не был рутинным, а назначался по необходимости, и в основном в стационарах.

    Стоит отметить, что уже на этапе забора начинались значительные погрешности. Например, разная толщина кожи дает разную глубину укола, вместе с кровью в пробирку попадала тканевая жидкость – отсюда изменение концентрации крови, кроме того, при давлении на палец клетки крови могли разрушаться.

    Помните ряд пробирок, куда помещали собранную из пальца кровь? Для подсчета разных клеток действительно нужны были разные пробирки. Для эритроцитов – с физраствором, для лейкоцитов – с раствором уксусной кислоты, где эритроциты растворялись, для определения гемоглобина – с раствором соляной кислоты. Отдельный капилляр был для определения СОЭ. И на последнем этапе делался мазок на стекле для последующего подсчета лейкоцитарной формулы.

    Анализ крови под микроскопом

    Для подсчета клеток под микроскопом в лабораторной практике использовался специальный оптический прибор, предложенный еще в ХIX веке русским врачом, именем которого этот прибор и был назван – камера Горяева. Она позволяла определить количество клеток в заданном микрообъеме жидкости и представляла собой толстое предметное стекло с прямоугольным углублением (камерой). На нее была нанесена микроскопическая сетка. Сверху камера Горяева накрывалась тонким покровным стеклом.

    Эта сетка состояла из 225 больших квадратов, 25 из которых были разделены на 16 малых квадратов. Эритроциты считались в маленьких исчерченных квадратах, расположенных по диагонали камеры Горяева. Причем существовало определенное правило подсчета клеток, которые лежат на границе квадрата. Расчет числа эритроцитов в литре крови осуществлялся по формуле, исходя из разведения крови и количества квадратов в сетке. После математических сокращений достаточно было посчитанное количество клеток в камере умножить на 10 в 12-й степени и внести в бланк анализа.

    Лейкоциты считали здесь же, но использовали уже большие квадраты сетки, поскольку лейкоциты в тысячу раз больше, чем эритроциты. После подсчета лейкоцитов их количество умножали на 10 в 9-й степени и вносили в бланк. У опытного лаборанта подсчет клеток занимал в среднем 3-5 мин.

    Методы подсчета тромбоцитов в камере Горяева были очень трудоемки из-за малой величины этого вида клеток. Оценивать их количество приходилось только на основе окрашенного мазка крови, и сам процесс был тоже весьма трудоемким. Поэтому, как правило, количество тромбоцитов рассчитывали только по специальному запросу врача.

    Лейкоцитарную формулу, то есть процентный состав лейкоцитов каждого вида в общем их количестве мог определять только врач – по результатам изучения мазков крови на стеклах.

    Визуально определяя находящиеся в поле зрения различные виды лейкоцитов по форме их ядра, врач считал клетки каждого вида и общее их количество. Насчитав 100 в совокупности, он получал требуемое процентное соотношение каждого вида клеток. Для упрощения подсчета использовались специальные счетчики с отдельными клавишами для каждого вида клеток.

    Читайте также:  Анализ крови на витамины и микроэлементы расшифровка

    Примечательно, что такой важный параметр, как гемоглобин, определялся лаборантом визуально (!) по цвету гемолизированной крови в пробирке с соляной кислотой. Метод был основан на превращении гемоглобина в солянокислый гематин коричневого цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина. Полученный раствор солянокислого гематина разводили водой до цвета стандарта, соответствующего известной концентрации гемоглобина. В общем, прошлый век

    Как стало: вакуумные контейнеры и гематологические анализаторы

    Начнем с того, что сейчас полностью поменялась технология забора крови. На смену скарификаторам и стеклянным капиллярам с пробирками пришли вакуумные контейнеры. Использующиеся теперь системы забора крови малотравматичны, процесс полностью унифицирован, что значительно сократило процент погрешностей на этом этапе. Вакуумные пробирки, содержащие консерванты и антикоагулянты, позволяют сохранять и транспортировать кровь от точки забора до лаборатории. Именно благодаря появлению новой технологии стало возможным сдавать анализы максимально удобно – в любое время, в любом месте.

    На первый взгляд, автоматизировать такой сложный процесс, как идентификация клеток крови и их подсчет, кажется невозможно. Но, как обычно, все гениальное просто. В основе автоматического анализа крови лежат фундаментальные физические законы. Технология автоматического подсчета клеток была запатентована в далеком 1953 году американцами Джозефом и Уолессом Культерами. Именно их имя стоит в название мирового бренда гематологического оборудования Bеckman&Coulter.

    Подсчет клеток

    Апертурно-импедансный метод (метод Культера или кондуктометрический метод) основан на подсчете количества и оценке характера импульсов, возникающих при прохождении клетки через отверстие малого диаметра (апертуру), по обе стороны которого расположены два электрода. При прохождении клетки через канал, заполненный электролитом, возрастает сопротивление электрическому току. Каждое прохождение клетки сопровождается появлением электрического импульса. Чтобы выяснить, какова концентрация клеток, необходимо пропустить через канал определенный объем пробы и сосчитать количество появившихся импульсов. Единственное ограничение – концентрация пробы должна обеспечивать прохождение через апертуру только одной клетки в каждый момент времени.

    За прошедшие более 60 лет технология автоматического гематологического анализа прошла большой путь. Вначале это были простые счетчики клеток, определяющие 8-10 параметров: количество эритроцитов (RBC), количество лейкоцитов (WBC), гемоглобин (Hb) и несколько расчетных. Такими были анализаторы первого класса.

    Второй класс анализаторов определял уже до 20 различных параметров крови. Они существенно выше по уровню в дифференциации лейкоцитов и способны выделять популяции гранулоцитов (эозинофилы + нейтрофилы + базофилы), лимфоцитов и интегральной популяции средних клеток, куда относились моноциты, эозинофилы, базофилы и плазматические клетки. Такая дифференциация лейкоцитов успешно использовалась при обследовании практически здоровых людей.

    Самыми технологичными и инновационными анализаторами на сегодняшний день являются машины третьего класса, определяющие до сотни различных параметров, проводящие развернутое дифференцирование клеток, в том числе по степени зрелости, анализирующие их морфологию и сигнализирующие врачу-лаборанту об обнаружении патологии. Машины третьего класса, как правило, снабжены еще и автоматическими системами приготовления мазков (включая их окраску) и вывода изображения на экран монитора. К таким передовым гематологическим системам относятся оборудование BeckmanCoulter, в частности система клеточного анализа UniCel DxH 800.

    Современные аппараты BeckmanCoulter используют метод многопараметрической проточной цитометрии на основе запатентованной технологии VCS (Volume-Conductivity-Scatter). VCS-технология подразумевает оценку объема клетки, ее электропроводимость и светорассеяние.

    Первый параметр – объем клетки – измеряется с использованием принципа Культера на основе оценки сопротивления при прохождении клеткой апертуры при постоянном токе. Величину и плотность клеточного ядра, а также ее внутренний состав определяют с помощью измерения ее электропроводности в переменном токе высокой частоты. Рассеяние лазерного света под разными углами позволяет получить информацию о структуре клеточной поверхности, гранулярности цитоплазмы и морфологии ядра клетки.

    Полученные по трем каналам данные комбинируются и анализируются. В результате клетки распределяются по кластерам, включая разделение по степени зрелости эритроцитов и лейкоцитов (нейтрофилов). На основе полученных измерений этих трех размерностей определяется множество гематологических параметров – до 30 в диагностических целях, более 20 в исследовательских целях и более ста специфичных расчетных параметров для узкоспециализированных цитологических исследований. Данные визуализируются в 2D- и 3D-форматах. Врач-лаборант, работающий с гематологическим анализатором BackmanCoulter, видит результаты анализа на мониторе примерно в таком виде:

    А далее принимает решение – надо ли их верифицировать или нет.

    Стоит ли говорить, что информативность и точность современного автоматического анализа во много раз выше мануального? Производительность машин подобного класса – порядка сотни образцов в час при анализе тысяч клеток в образце. Вспомним, что при микроскопии мазка врачом анализировалось только 100 клеток!

    Однако несмотря на эти впечатляющие результаты, именно микроскопия до сих пор пока остается «золотым стандартом» диагностики. В частности, при выявлении аппаратом патологической морфологии клеток образец анализируется под микроскопом вручную. При обследовании больных с гематологическими заболеваниями микроскопия окрашенного мазка крови проводится только вручную опытным врачом-гематологом. Именно так, вручную, дополнительно к автоматическому подсчету клеток, выполняется оценка лейкоцитарной формулы во всех детских анализах крови по заказам, сделанным с помощью лабораторного онлайн-сервиса LAB4U.RU.

    Вместо резюме

    Технологии автоматизированного гематологического анализа продолжают активно развиваться. По существу они уже заменили микроскопию при выполнении рутинных профилактических анализов, оставив ее для особо значимых ситуаций. Мы имеем в виду детские анализы, анализы людей, имеющих подтвержденные заболевания, особенно гематологические. Однако в обозримом будущем и на этом участке лабораторной диагностики врачи получат аппараты, способные самостоятельно выполнять морфологический анализ клеток с использованием нейронных сетей. Снизив нагрузку на врачей, они в то же время повысят требования к их квалификации, поскольку в зоне принятия решений человеком останутся только нетипичные и патологические состояния клеток.

    Количество информативных параметров анализа крови, увеличившиеся многократно, поднимает требования к профессиональной квалификации и врача-клинициста, которому необходимо анализировать сочетания значений массы параметров в диагностических целях. На помощь врачам этого фронта идут экспертные системы, которые, используя данные анализатора, предоставляют рекомендации по дальнейшему обследованию пациента и выдают возможный диагноз. Такие системы уже представлены на лабораторном рынке. Но это уже тема отдельной статьи.

    Источник