Анализ крови в пензе на боррелиоз
Информация об исследовании
Исследование иксодового клеща методом ПЦР на наличие генетического материала возбудителей боррелиоза (болезни Лайма), вирусного клещевого энцефалита, моноцитарного эрлихиоза, гранулоцитарного анаплазмоза. Формат представления результатов качественный.
Возбудитель клещевого энцефалита – РНК-содержащий вирус семейства Flaviviridae. Заражение происходит трансмиссивным путем при укусе клеща, инфицированного вирусом. В редких случаях возможно заражение алиментарным путем: при употреблении в пищу не прошедших термическую обработку продуктов из молока коров или коз, инфицированных вирусом. Возбудитель не передается от человека человеку.
Инфекция поражает клетки нервной ткани, в том числе оболочку головного мозга, серое и белое вещество, спинной мозг, а также клетки других тканей. Этим обусловлено множество форм клинического проявления заболевания. Начинается болезнь, как правило, остро со стремительным нарастанием выраженности симптомов:
- чувство озноба из-за высокой температуры (38–39 оС);
- сильная слабость, сонливость, заторможенность;
- боли в мышцах шеи, спины, поясничной области, рук и ног;
- подергивания или дрожь конечностей;
- возможно чувство онемения конечности без потери двигательной функции;
- ригидность затылочных мышц (невозможность согнуть голову и достать подбородком до груди).
Наиболее тяжелые формы клещевого энцефалита могут начинаться появлением бреда, внезапной потерей сознания, генерализованным судорожным синдромом, как при эпилепсии.
Выявление возбудителя клещевого вирусного энцефалита в клеще позволит своевременно провести экстренную профилактику инфекции. Применение противоэнцефалитной сыворотки показано в срок не позднее 96 часов от момента укуса. При этом инкубационный период инфекции, как правило, составляет 7–12 дней от момента присасывания клеща, но может длиться до 35 дней.
Перечень административных территорий субъектов Российской Федерации, эндемичных по клещевому вирусному энцефалиту в 2019 г.:
https://www.garant.ru/products/ipo/prime/doc/71803714/
Возбудитель болезни Лайма – спиралевидная бактерия (спирохета) рода Borrelia. Большая часть случаев заражения происходит трансмиссивным путем при укусе клеща, инфицированного боррелиями. Также возможен алиментарный путь, при употреблении молока инфицированных животных (молочных продуктов), не прошедших термическую обработку. В редких случаях возможно заражение из-за втирания в кожу фекалий инфицированного клеща при расчесах места укуса. Боррелии могут передаваться от инфицированной матери плоду через плаценту.
Лайм-боррелиоз – это самая распространенная болезнь на Европейском континенте, передаваемая иксодовыми клещами. Болезнь Лайма может длительное время протекать бессимптомно. Первые жалобы на недомогание могут появиться спустя месяцы или годы после заражения. Боррелии способны поражать различные органы и системы органов: суставы, миокард, органы центральной нервной системы и др. Этим обусловлена неспецифичность симптомов. К наиболее частым относят жалобы на боли в суставах.
Характерное для боррелиоза клиническое проявление – блуждающая эритема. Это покраснение на коже вокруг места укуса клеща, которое со временем расширяется и выглядит как кольцевидное красное пятно, в центре которого кожный покров сохраняет естественный цвет. Блуждающая эритема появляется в первые дни после укуса, однако ее отсутствие не исключает факта заражения боррелиями.
Возбудитель гранулоцитарного анаплазмоза человека – бактерия Anaplasma phagocytophilum, которая поражает гранулоциты – белые клетки крови. Заражение происходит трансмиссивным путем при укусе клеща, инфицированного анаплазмами. Инфицированность клещей анаплазмозом в европейской части России достигает 13,4%.
Клинические проявления неспецифичны и зависят от возраста человека, а также сопутствующих заболеваний. Как правило, это лихорадка, слабость, потливость, головная боль, боль в мышцах и суставах. Реже – кашель, тошнота и рвота, диарея. У инфицированных отмечают увеличение крупных лимфатических узлов, поражение почек, увеличение печени и селезенки. Возможно также воспаление оболочек головного и спинного мозга.
Инкубационный период в среднем составляет 14 дней. Болезнь протекает в тяжелой форме у пожилых людей и лиц с ослабленным иммунитетом.
Возбудители моноцитарного эрлихиоза – бактерии, относящиеся к роду Ehrlichia. Они попадают в организм человека со слюной клеща, проникают в кровоток и начинают размножаться в моноцитах (одной из разновидностей белых клеток крови) и в эпителиальных клетках, выстилающих внутреннюю поверхность кровеносных сосудов. Позже поражаются клетки других органов и тканей.
Симптомы эрлихиоза неспецифичны и схожи с симптомами гранулоцитарного анаплазмоза. При тяжелом течении болезни отмечают поражение кожи, печени, почек, центральной нервной системы, костного мозга.
Подготовка к исследованию
Присосавшегося клеща необходимо как можно быстрее удалить без использования масла! (при помощи нитки, пинцета или специального приспособления). Клеща с кусочком влажной ваты поместить в стерильный контейнер. Желательно проводить исследование живого клеща. Живого клеща до исследования допускается хранить в холодильнике при +2 +8 С до 1 мес.
Исследование мертвых клещей допускается при условии соблюдения правил доставки материала в лабораторию. После снятия клеща хранить в холодильнике при температуре +2 +8 С не более 5 суток
Использованная литература
- Клещевой вирусный энцефалит у взрослых. Клинические рекомендации Национального научного общества инфекционистов, 2014 г.
- https://www.rospotrebnadzor.ru/about/info/predpr/news_predpr.php?ELEMENT_ID=14010&sphrase_id…
- Болезнь лайма у взрослых. Клинические рекомендации Министерства Здравоохранения Российской Федерации, 2016 г.
- Климова Ю.А. и соавт. Гранулоцитарный анаплазмоз человека// Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Медицина, 2018 г.
- Злобин В.И. Клещевые трансмиссивные инфекции // В.И. Злобин, Н.В. Рудаков, И.В. Малов. – Новосибирск: Наука, 2015. – 224 с.
Источник
Метод определения
Хемилюминесцентный иммуноанализ.
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Специфические антитела к возбудителю боррелиоза (болезни Лайма, Lyme Disease), свидетельствующие о текущей или перенесённой в прошлом инфекции.
Боррелиоз или болезнь Лайма (по названию местечка, в котором в 1975 г. было впервые выявлено заболевание) – распространённая, переносимая клещами инфекция. Возбудитель – очень маленькая спирохета Borrelia burgdorferi, единственная из всех боррелий патогенная для человека. Хозяевами являются многие позвоночные животные: собаки, овцы, птицы, коровы и лошади, но основной хозяин и переносчик – иксодовые клещи, у которых инфекция длится на протяжении всей жизни клеща. В России — это I.ricinus и I.persulcatus. Заболевание характерно для весенне-летнего периода. Чаще наблюдается в Московской, Ленинградской, Тверской и других, преимущественно северных областях, а также в Прибалтике.
Заболевание системное, имеющее 3 стадии
- I стадия возникает через одну неделю после укуса клеща и длится от 3 до 33 дней. Для неё характерна лихорадка и мигрирующая эритема. Если терапию начинают в этой стадии, то дальнейшее развитие заболевание удаётся предотвратить.
- Через 4 недели после укуса развивается II стадия. Для неё характерны поражение сердца и неврологическая «триада»: асептический менингит, паралич лицевого нерва и периферические невропатии.
- Через 6 недель, а иногда через несколько лет у нелеченных больных развиваются тяжёлые поражения суставов.
Лабораторная диагностика. При классической картине мигрирующей эритемы диагноз ставится по клиническим признакам, в остальных случаях его подтверждают лабораторными методами. Посев, выявление антигена возбудителя и гистологическое исследование кожи недостаточно чувствительны и специфичны, гистологическое исследование, кроме того, инвазивно. Поэтому диагноз подтверждают, в основном, серологическими методами — выявлением в крови специфических IgG и IgM антител к возбудителю (в лаборатории ИНВИТРО, соответственно, тесты № 243 и № 244).
ПЦР-тестирование на наличие генетического материала возбудителя в данном случае малоэффективно, но используется при необходимости у пациентов с отрицательными результатами серологических тестов, но вескими клиническими подозрениями на инфицирование, а также у пациентов с иммунодефицитом.
Специфические антитела к Borrelia burgdorferi начинают обнаруживаться на 2-4 неделе после начала инфекции (сначала IgM, потом IgG), максимальное количество IgG синтезируется через 1,5 — 3 месяца после инфицирования. Антитела к Borrelia burgdorferi часто не выявляются на ранней, локализованной стадии заболевания или при рано назначенной антимикробной терапии.
Таким образом, отрицательный результат серологических тестов на ранних стадиях инфекции не является подтверждением её отсутствия и требует перепроверки в динамике через 2 — 4 недели. На диссеминированной и хронической стадиях специфические антитела к возбудителю имеются практически всегда. Антитела класса IgG циркулируют в крови длительный срок (от нескольких месяцев до нескольких лет), даже после успешной антимикробной терапии и излечения инфекции. Поэтому по присутствию и титру антител об успехе лечения судить нельзя. Иммунитет против Borrelia burgdorferi не является стерильным. У переболевших людей возможно повторное заражение через несколько лет. Выявление антител к Borrelia burgdorferi не всегда сопровождается клиническими признаками болезни Лайма.
По оценкам, специфичность ИФА тестирования антител к Borrelia burgdorferi в настоящее время достигает 95% (т. е. неспецифические реакции, перекрёстное реагирование с антигенами других бактерий могут примерно в 5% случаев давать ложноположительные результаты).
В сомнительных случаях для подтверждения результатов ИФА-тестов используют иммуноблот.
Литература
- Инфекционные болезни у детей. Ред. Д. Марри. М. Практика, 2006. 928 с.
- В.И. Офицеров. Лайм-боррелиоз и его диагностика. Новости «Вектор-Бест» N 2 (28).
Июнь 2003. - Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B.- USA,W.B Sounders Company, 2006. 1798 p.
Источник
Метод определения
Хемилюминисцентный иммуноанализ.
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Серологический показатель ранних стадий инфекции спирохетами Borrelia.
Боррелиоз или болезнь Лайма (по названию местечка, в котором в 1975 г. было впервые выявлено заболевание) – распространённая, переносимая клещами инфекция. Возбудитель – очень маленькая спирохета Borrelia burgdorferi, единственная из всех боррелий патогенная для человека. Хозяевами являются многие позвоночные животные: собаки, овцы, птицы, коровы и лошади, но основной хозяин и переносчик – иксодовые клещи, у которых инфекция длится на протяжении всей жизни клеща. В России — это I.ricinus и I.persulcatus. Заболевание характерно для весенне-летнего периода. Чаще наблюдается в Московской, Ленинградской, Тверской и других, преимущественно северных областях, а также в Прибалтике.
Заболевание системное, имеющее 3 стадии:
- I стадия возникает через одну неделю после укуса клеща и длится от 3 до 33 дней. Для неё характерна лихорадка и мигрирующая эритема. Если терапию начинают в этой стадии, то дальнейшее развитие заболевание удаётся предотвратить.
- Через 4 недели после укуса развивается II стадия. Для неё характерны поражение сердца и неврологическая «триада»: асептический менингит, паралич лицевого нерва и периферические невропатии.
- Через 6 недель, а иногда через несколько лет у нелеченных больных развиваются тяжёлые поражения суставов.
Лабораторная диагностика. При классической картине мигрирующей эритемы диагноз ставится по клиническим признакам, в остальных случаях его подтверждают лабораторными методами. Посев, выявление антигена возбудителя и гистологическое исследование кожи недостаточно чувствительны и специфичны, гистологическое исследование, кроме того, инвазивно. Поэтому диагноз подтверждают, в основном, серологическими методами — выявлением в крови специфических IgG и IgM антител к возбудителю (в лаборатории ИНВИТРО, соответственно, тесты № 243 и 244).
ПЦР-тестирование на наличие генетического материала возбудителя в данном случае малоэффективно, но используется при необходимости у пациентов с отрицательными результатами серологических тестов, но вескими клиническими подозрениями на инфицирование, а также у пациентов с иммунодефицитом.
Специфические антитела к Borrelia burgdorferi начинают обнаруживаться на 2-4 неделе после начала инфекции (сначала IgM, потом IgG), максимальное количество IgG синтезируется через 1,5 — 3 месяца после инфицирования. Антитела к Borrelia burgdorferi часто не выявляются на ранней, локализованной стадии заболевания или при рано назначенной антимикробной терапии. Таким образом, отрицательный результат серологических тестов на ранних стадиях инфекции не является подтверждением её отсутствия и требует перепроверки в динамике через 2 — 4 недели. На диссеминированной и хронической стадиях специфические антитела к возбудителю имеются практически всегда.
Антитела класса IgG циркулируют в крови длительный срок (от нескольких месяцев до нескольких лет), даже после успешной антимикробной терапии и излечения инфекции. Поэтому по присутствию и титру антител об успехе лечения судить нельзя. Иммунитет против Borrelia burgdorferi не является стерильным. У переболевших людей возможно повторное заражение через несколько лет. Выявление антител к Borrelia burgdorferi не всегда сопровождается клиническими признаками болезни Лайма.
По оценкам, специфичность ИФА тестирования антител к Borrelia burgdorferi в настоящее время достигает 95% (т. е. неспецифические реакции, перекрёстное реагирование с антигенами других бактерий могут примерно в 5% случаев давать ложноположительные результаты). В сомнительных случаях для подтверждения результатов ИФА-тестов используют иммуноблот.
Литература
- Инфекционные болезни у детей. Ред. Д. Марри. М. Практика, 2006. 928 с.
- Материалы фирмы – производителя реагентов.
- В.И. Офицеров Лайм-боррелиоз и его диагностика. Новости «Вектор-Бест» № 2 (28). Июнь 2003.
- Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B.- USA,W.B Sounders Company, 2006. 1798 p.
Источник
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме реального времени.
Важно! Необходимость исследования спинномозговой и суставной жидкостей определяется лечащим врачом; взятие биологического материала осуществляется в условиях стационара квалифицированным медицинским персоналом.
Определение ДНК патогенных для человека видов боррелий комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato (Borrelia afzelii, Borrelia garinii, Borrelia burgdorferi sensu stricto), выделенной из синовиальной жидкости методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.
Лайм-боррелиоз (ЛБ), болезнь Лайма или клещевой боррелиоз − трансмиссивная инфекция, занимающая по широте распространения и уровню заболеваемости одно из ведущих мест среди природно-очаговых заболеваний. Возбудитель ЛБ − спирохета Borrelia burgdorferi − передается человеку при укусе иксодовых клещей, которые распространены в лесных и лесостепных зонах Северного полушария в Америке, Европе и Азии. Хозяевами являются многие позвоночные животные: собаки, овцы, птицы, коровы и лошади, но основной хозяин и переносчик – иксодовые клещи, у которых инфекция присутствует в организме на протяжении всей жизни. В России это I. ricinus и I. persulcatus. Заболевание характерно для весенне-летнего периода, чаще наблюдается в Московской, Ленинградской, Тверской и других, преимущественно северных, областях, а также в Прибалтике. Клещевой боррелиоз – это системное заболевание, характеризующееся полиморфизмом клинических проявлений и часто имеющее хроническое и рецидивирующее течение. При боррелиозной инфекции поражаются кожные покровы, нервная и сердечно-сосудистая система, опорно-двигательный аппарат. Поэтому болезнь Лайма называют новым «великим имитатором» различных человеческих болезней.
Заболевание системное, имеет три стадии: I стадия возникает через неделю после укуса клеща и длится от 3 до 33 дней. Для неё характерны лихорадка и мигрирующая эритема. Если терапию начинают на этой стадии, то дальнейшее развитие заболевания удаётся предотвратить.
Через 4 недели после укуса развивается II стадия. Для неё характерны поражение сердца и неврологическая «триада» : асептический менингит, паралич лицевого нерва и периферические невропатии. III стадия возникает обычно через 6 недель, иногда − через несколько лет, у больных, не получавших адекватного лечения, развиваются тяжёлые поражения суставов.
Лабораторная диагностика.
При классической картине мигрирующей эритемы диагноз ставится по клиническим признакам, в остальных случаях его подтверждают лабораторными методами. Посев, выявление антигена возбудителя и гистологическое исследование кожи недостаточно чувствительны и специфичны, гистологическое исследование, кроме того, инвазивно. Поэтому диагноз подтверждают, в основном, серологическими методами (№ 243 Антитела класса IgG к Borrelia burgdorferi, № 244 Антитела класса IgM к Borrelia burgdorferi, № 1191 Боррелии, антитела класса IgM методом Вестерн-блота). Исследование возможности ПЦР-диагностики при боррелиозах сосредоточено, в основном, на тех стадиях инфекционного процесса, где серологический метод диагностики недостаточно информативен, прежде всего, в раннем периоде заболевания и нейроборрелиозе. ПЦР можно рассматривать как дополнительный метод диагностики боррелиозов, который в ряде случаев позволяет получить результат до формирования серологического ответа у обследуемого пациента. При этом отрицательный результат ПЦР не исключает заболевания, а положительный результат не свидетельствует однозначно о наличии активного инфекционного процесса, поскольку ПЦР выявляет ДНК как жизнеспособных, так и инактивированных боррелий.
Аналитические показатели:
- определяемый фрагмент − специфичный участок ДНК- комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato;
- специфичность определения − 100%;
- чувствительность определения − 100 копий ДНК возбудителя в образце.
Литература
- Манзенюк И.Н., Манзенюк О.Ю., Клещевые боррелиозы (болезнь Лайма) Пособие для врачей, Кольцово, 2005. – 45 c.
- Офицеров В.И. Лайм-боррелиоз и его диагностика. Новости «Вектор-Бест» № 2 (28), июнь 2003.
Источник
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме реального времени.
Важно! Необходимость исследования спинномозговой и суставной жидкостей определяется лечащим врачом; взятие биологического материала осуществляется в условиях стационара квалифицированным медицинским персоналом.
Исследуемый материал
Спинномозговая жидкость
Определение ДНК патогенных для человека видов боррелий комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato (Borrelia afzelii, Borrelia garinii, Borrelia burgdorferi sensu stricto), выделенной из спинномозговой жидкости методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.
Лайм-боррелиоз (ЛБ), болезнь Лайма или клещевой боррелиоз − трансмиссивная инфекция, занимающая по широте распространения и уровню заболеваемости одно из ведущих мест среди природно-очаговых заболеваний. Возбудитель ЛБ − спирохета Borrelia burgdorferi − передается человеку при укусе иксодовых клещей, которые распространены в лесных и лесостепных зонах Северного полушария в Америке, Европе и Азии. Хозяевами являются многие позвоночные животные: собаки, овцы, птицы, коровы и лошади, но основной хозяин и переносчик – иксодовые клещи, у которых инфекция присутствует в организме на протяжении всей жизни. В России это I. ricinus и I. persulcatus. Заболевание характерно для весенне-летнего периода, чаще наблюдается в Московской, Ленинградской, Тверской и других, преимущественно северных, областях, а также в Прибалтике. Клещевой боррелиоз – это системное заболевание, характеризующееся полиморфизмом клинических проявлений и часто имеющее хроническое и рецидивирующее течение. При боррелиозной инфекции поражаются кожные покровы, нервная и сердечно-сосудистая система, опорно-двигательный аппарат. Поэтому болезнь Лайма называют новым «великим имитатором» различных человеческих болезней.
Заболевание системное, имеет три стадии: I стадия возникает через неделю после укуса клеща и длится от 3 до 33 дней. Для неё характерны лихорадка и мигрирующая эритема. Если терапию начинают на этой стадии, то дальнейшее развитие заболевания удаётся предотвратить.
Через 4 недели после укуса развивается II стадия. Для неё характерны поражение сердца и неврологическая «триада» : асептический менингит, паралич лицевого нерва и периферические невропатии. III стадия возникает обычно через 6 недель, иногда − через несколько лет, у больных, не получавших адекватного лечения, развиваются тяжёлые поражения суставов.
Лабораторная диагностика.
При классической картине мигрирующей эритемы диагноз ставится по клиническим признакам, в остальных случаях его подтверждают лабораторными методами. Посев, выявление антигена возбудителя и гистологическое исследование кожи недостаточно чувствительны и специфичны, гистологическое исследование, кроме того, инвазивно. Поэтому диагноз подтверждают, в основном, серологическими методами (№ 243 Антитела класса IgG к Borrelia burgdorferi, № 244 Антитела класса IgM к Borrelia burgdorferi, № 1191 Боррелии, антитела класса IgM методом Вестерн-блота). Исследование возможности ПЦР-диагностики при боррелиозах сосредоточено, в основном, на тех стадиях инфекционного процесса, где серологический метод диагностики недостаточно информативен, прежде всего, в раннем периоде заболевания и нейроборрелиозе. ПЦР можно рассматривать как дополнительный метод диагностики боррелиозов, который в ряде случаев позволяет получить результат до формирования серологического ответа у обследуемого пациента. При этом отрицательный результат ПЦР не исключает заболевания, а положительный результат не свидетельствует однозначно о наличии активного инфекционного процесса, поскольку ПЦР выявляет ДНК как жизнеспособных, так и инактивированных боррелий.
Аналитические показатели:
- определяемый фрагмент − специфичный участок ДНК- комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato;
- специфичность определения − 100%;
- чувствительность определения − 100 копий ДНК возбудителя в образце.
Литература
- Манзенюк И.Н., Манзенюк О.Ю., Клещевые боррелиозы (болезнь Лайма) Пособие для врачей, Кольцово, 2005. – 45 c.
- Офицеров В.И. Лайм-боррелиоз и его диагностика. Новости «Вектор-Бест» № 2 (28), июнь 2003.
Источник
