Анализ крови пцр на клещевой энцефалит
[40-176]
ПЦР-диагностика «клещевых» инфекций
1870 руб.
Комплексное исследование крови, в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) выявляют возбудителей боррелиоза (Borrelia burgdorferi), моноцитарного эрлихиоза человека (Ehrlichia chaffeensis) и анаплазмоза человека (Anaplasma phagocytophilum).
Синонимы русские
ПЦР-диагностика боррелиоза, эрлихиоза и анаплазмоза.
Синонимы английские
Tick-borne diseases, polymerase chain reaction, PCR, Lyme disease, Human ehrlichiosis, Human anaplasmosis.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Клещевые инфекции представляют серьезную проблему для здоровья человека. Наибольшее значение имеют следующие клещевые инфекции:
- болезнь Лайма (клещевой боррелиоз), возбудителем заболевания является спирохета Borrelia burgdorferi;
- анаплазмоз, ранее известный как гранулоцитарный эрлихиоз, возбудителем заболевания является α-протеобактерия Anaplasma phagocytophilum.
В обоих случаях переносчиком инфекции являются иксодовые клещи Ixodess capularis, I. ricinus, I. pacificus и I. persulcatus. В России наибольшее значение имеют виды I. ricinus и I. persulcatus.
- моноцитарный эрлихиоз, возбудителем заболевания является α-протеобактерия Ehrlichia chaffeensis. Переносчик инфекции – иксодовые клещи Amblyomma americanum.
Клещевые инфекции обладают рядом общих свойств:
- Клиническая картина клещевых инфекций имеет много общих черт и неспецифична. Как правило, заболевание манифестирует в виде гриппоподобного синдрома с лихорадкой, головной болью, миалгией и артралгией. Дифференцировать клещевые инфекции между собой и с другими острыми инфекционными на основании только лишь клинической картины заболевания невозможно.
- Некоторые иксодовые клещи инфицированы сразу двумя (реже тремя) патогенами (коинфекция) и могут приводить к развитию у одного и того же человека сочетанной инфекции. Чаще описаны случаи сочетанного боррелиоза и анаплазмоза.
Учитывая эти особенности, при подозрении на клещевую инфекцию необходимо комплексное лабораторное исследование, включающее анализы на все значимые возбудители клещевых инфекций.
Для лабораторной диагностики клещевых инфекций могут применяться несколько методов, в том числе серологические тесты, анализ окрашенного мазка крови, бактериологический посев, иммуногистохимический анализ и методы молекулярной диагностики. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это один из методов молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в крови) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Исследование обладает целым рядом преимуществ по сравнению с другими методами идентификации клещевых инфекций:
- Быстрота получения результата. ПЦР – это один из самых быстрых на сегодняшний день методов идентификации возбудителя. Благодаря этому, метод ПЦР считается самым опитмальным способом диагностики острой инфекции.
- Высокая чувствительность метода. Другой «быстрый» метод диагностики эрлихиоза – это окраска мазков крови по Гимзе. Обнаружение в мазках крови так называемых морул (скоплений микроорганизмов внутри лейкоцитов) – это характерный признак эрлихиоза и анаплазмоза. Морулы, однако, удается выявить не всегда: лишь в 3 % случаев моноцитарного эрлихиоза и 25-75 % случаев анаплазмоза. Чувствительность же ПЦР анализа достигает 85 % в отношении E. chaffeensis и 90 % в отношении A. phagocytophilum, что позволяет считать ПЦР самым точным среди быстрых методов диагностики клещевых инфекций.
- Высокая специфичность (60-85 %). Специфичность метода особенно важна для дифференциальной диагностики клещевых инфекций. Известно, что, например, серологические тесты на клещевые инфекции часто дают ложноположительный результат из-за наличия перекрестных реакций, обусловленных общими антигенными свойствами указанных микроорганизмов. Так как в ПЦР используются специфические для каждого из микроорганизмов праймеры, вероятность ложноположительного результата гораздо ниже.
Следует отметить ограничения метода ПЦР:
- Так как в реакции определяется ДНК как живых, так и погибших микроорганизмов, метод ПЦР не предназначен для оценки эффективности лечения: результат будет оставаться положительным еще в течение некоторого времени после начала эффективного лечения.
- Чувствительность ПЦР в меньшей степени, чем других методов идентификации возбудителя, зависит от приема антибиотиков. Наиболее точный результат, однако, будет получен при взятии образца биоматериала до начала лечения антибактериальными препаратами.
В диагностике клещевых инфекций также могут помочь дополнительные лабораторные исследования. Так, характерной чертой эрлихиозов является панцитопения и умеренное повышение печеночных трансаминаз. При тяжелом течении заболевания могу наблюдаться гипонатриемия, гипокальциемия, гипомагниемия, повышение креатинина и мочевины и признаки ДВС-синдрома.
Следует отметить, что иксодовые клещи также являются переносчиками вируса клещевого энцефалита. При необходимости это комплексное ПЦР-исследование может быть дополнено исследованием на вирус клещевого энцефалита.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики боррелиоза, моноцитарного эрлихиоза и анаплазмоза.
Когда назначается исследование?
- При наличии у пациента гриппоподобного синдрома (лихорадки, головной боли, миалгии и артралгии) в сочетании с указанием на укус клеща;
- при обнаружении у пациента с лихорадкой «лабораторных» признаков клещевых инфекций: панцитопения, повышение уровня печеночных трансаминаз.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Положительный результат:
- боррелиоз (Borrelia burgdorferi), моноцитарный эрлихиоз человека (Ehrlichia chaffeensis) и/или анаплазмоз человека (Anaplasma phagocytophilum).
Отрицательный результат:
- норма.
Важные замечания
- Исследование не предназначено для оценки эффективности лечения заболевания.
Также рекомендуется
[02-029] Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой и СОЭ
[06-010] Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
[06-003] Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
[07-092] Вирус клещевого энцефалита, IgM
[07-095] Вирус клещевого энцефалита, антиген (в ликворе)
Инфекционист, терапевт, врач общей практики.
Литература
- Ismail N, Bloch KC, McBride JW. Human ehrlichiosis and anaplasmosis. Clin Lab Med. 2010 Mar;30(1):261-92.
- Swanson SJ, Neitzel D, Reed KD, Belongia EA. Coinfections acquired from ixodes ticks. Clin Microbiol Rev. 2006 Oct;19(4):708-27.
Источник
Информация об исследовании
Биологический материал: кровь
Клещевой энцефалит – менингоэнцефалит — вирусная инфекция нервной системы поражает не только человека, но и других млекопитающих. Вирус может инфицировать мозг, мозговые оболочки или то и другое вместе (менингоэнцефалит). Клещевой энцефалит — природноочаговое заболевание распространённое в России в основном в Сибири, Урале и на Дальном Востоке. В природе вирус имеет хозяина — клеща.
Этиология: возбудитель вирус клещевого энцефалита — член семейства флавивирусов (род flavivirius).
Выделяют 3 разновидности вируса:
1.Дальневосточный подвид
2.Центральноевропейский подвид
3.Возбудитель двухволнового менингоэнцефалита
Вирионы возбудителя клещевого энцефалита имеют сферическую форму с диаметром 40-50 нм. Внутренним компонентом является нуклеокапсид. Вирус длительное время сохраняется при низких температурах (оптимальный режим — 60 градусов и ниже). Быстро инактивируется при комнатной температуре.
Эпидемиология. Основными переносчикам вируса являются иксодовые клещи (Ixodes persulcatus, Ixodes nicinus). Во всех природных очагах вирус циркулирует между клещами и дикими животными (главным образом грызунами и птицами), которые являются дополнительным резервуаром. В антропурических очагах (местности сильно изменённые деятельностью человека) резервуаром могут служить домащние животные — козы и коровы. Вирус клещевого энцефалита может передоваться клещами трансовариально через яйцеклетки их потомству.
Пути передачи.
— Трансмисивный путь — через укус клеща.
— Алиментарный путь — при употреблении в пищу сырого молока и молочных продуктов инфецированных коз и коров.
Максимальный подъём заболеваемости в мае-июне. Второй менее выраженный подъём заболеваемости регистрируется в августе-сентябре, что сязанно с активностью и численностью клещей.
Клиническая картина.
Инкубационный период: при укусе клеща длится от 1-й до 2-х-3-х недель, при алиментарном способе заражения 4-7 дней. Клещевой энцефалит начинается внезапно с лихорадки, интоксикации. Температура тела повышается до 38-39 градусов. Больных беспокоят сильная головная боль, слабость, тошнота, рвота, нарушение сна. Характерен внешний вид больного — кожа лица, шеи, верхней половины грудной клетки, коньюктивы — гиперемированы, склеры инъецированы. Заболевание может завершиться в 3-5 дней.
Такая форма называется лихорадочной. Является одной из самых частых, но редко диагностируется. Поражение нервной системы при этой форме отсутствует. Менингиальная форма клещевого энцефалита характеризуется общемозговым синдромом, появляются регидность мышц затылка, симптомы Кернига и Брудзинского. Изменения в цереброспинальной жидкости свидетельствует о серозном менингите. Лихорадка длиться 10-14 дней.
Менингоэнцефалитическая форма протекает значительно тяжелее. Больной становиться вялым, заторможенным, сонливым. Усиливаются головные боли, тошнота, рвота, нередко наблюдается бред, галлюцинации, психомоторное возбуждение, нарушение сознания, у некоторых больных могут быть судороги, эпилептиформные припадки. Поражаются нервы иннервирующие лицевую и глазодвигательную мускулатуру и другие черепномозговые нервы.
Полирадикулоневритическая форма протекает с поражением периферических нервов и корешков с болями по ходу нервных стволов, нарушением чувствительности.
Полиэнцефаломиелитическая форма — наблюдаются проявления полимиелитического синдрома в виде симптома ‘’свисающей головы’’, ’’опущенных надплечий’’, ’’свисающих вдоль тела рук’’. Также периодически возникают подёргивания мышц фибриллярного или фасцикулярного характера. Полиэнцефаломиелитические нарушения могут сочетаться с проводниковыми, обычно пирамидными, вялые парезы рук и спастические ног. Комбинации амиотрофии и гиперфлексии в пределах одной паретической конечности.
Одним из методов диагностики клещевого энцефалита является ПЦР.
ПЦР (полимеразная цепная реакция) — это метод, который позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации (ДНК) любого организма среди огромного количества других участков и многократно размножить его.
Достоинства метода:
-Более высокая чувствительность по сравнению с другими методами
-Высокая специфичность метода
-Позволяет выявить возбудитель в малом количестве пробы
-Позволяет выявить только живые микроорганизмы
-Является ранним контролем результатов проведенного лечения
-Скорость проведения анализов
Показания к исследованию.
-Выявление возбудителя при латентном и бессимптомном течении воспалительного процесса .
-Является единственным подтверждающим тестом, так как другие методы лабораторной диагностики (микроскопия и бактериологический) обладают более низкой чувствительностью по сравнению с ПЦР .
-Контроль эффективности проведенного лечения.
Источник
Клинические анализы имеют основополагающее значение в постановке диагноза при клещевом энцефалите. У больного берут венозную кровь или спинномозговую жидкость, которую исследуют разными методами. Наиболее информативными считаются ИФА, ПЦР и иммуноанализ, позволяющие с высокой вероятностью определить факт заражения. Рассмотрим подробнее когда и где сдать кровь на антитела к вирусу igg. Какие показатели считаются нормой, вирус igg положительный что это значит, а так же сколько по времени делаются анализы.
Иммуноферментное исследование крови (ИФА)
Анализ основывается на выявление специфических антител (иммуноглобулинов) к возбудителю клещевого энцефалита – IgM и IgG. Они начинают вырабатываться иммунной системой в ответ на активность вируса заболевания или введение вакцины. Метод ИФА ценится за то, что позволяет определить не только факт заражения, но и стадию болезни. Материал для исследования – венозная кровь больного.
Иммуноглобулины IgM вырабатываются вместе с начальными симптомами клещевого энцефалита, через 3,5-4,5 недель их концентрация достигает пика, после чего снижаются на протяжении нескольких месяцев.
Антитела IgG обнаруживаются в крови пациентов через неделю после появления симптоматики, после чего их количество нарастает и достигает максимума спустя 1,5-2,5 месяца. Впоследствии они сохраняются в крови на протяжении всей жизни, обеспечивая стойкий иммунитет. Биологический материал для исследования у пациента обычно берут несколько раз с интервалом в несколько недель, чтобы определить рост концентрации антител в динамике.
При расшифровке результатов анализов используется понятие защитный титр, которое означает концентрацию определенных антител в образце биоматериала. Титр может иметь следующий вид – 1:100, 1:400, 1:1000 и т.д.
Иногда анализ отражает количество иммуноглобулинов в крови человека, которое измеряется в Ед/мл. Нормой (отрицательным результатом) обычно считается показатель от 0 до 100 Ед/мл, а любые цифры выше 100 требуют дополнительных исследований.
Референсные значения (нормы) показателей анализов могут отличаться в зависимости от лаборатории, поэтому расшифровкой должен заниматься специалист.
Как правило, повышение титра антител IgM выше нормы свидетельствует о ранних стадиях заболевания, а IgG – о выздоровлении или недавно перенесенного вируса. Обнаружение обоих видов антител в крови обычно свидетельствует о том, что человек заражен вирусом клещевого энцефалита в острой форме.
Кроме того, увеличение концентрации иммуноглобулинов наблюдается после проведенной вакцинации и свидетельствует о том, что процедура прошла эффективно. На ранних стадиях возможны отрицательные результаты исследования, а в некоторых случаях (неправильно проведенный анализ, наличие других арбовирусов в крови) – ложноотрицательные. Отсутствие обоих видов антител в организме свидетельствует о том, что пациент здоров и никогда не болел клещевым энцефалитом.
ВАЖНО! Общие и биохимические анализы крови не считаются информативными при диагностике клещевого энцефалита, но их проводят для оценки общего состояния организма. Для заражения характерно снижения количества лейкоцитов и тромбоцитов, невыраженное повышение печеночных ферментов.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Диагностика с помощью полимеразной цепной реакции, или ПЦР – прямой метод, который позволяет выявить наличие ДНК или РНК вируса клещевого возбудителя в крови. Материал для анализа – венозная кровь, реже у пациентов берут ликвор, слюну или другие биологические жидкости.
Метод ПЦР имеет преимуществами перед другими диагностическими процедурами, так как позволяют выявить возбудителя с достаточно высокой точностью. Для проведения исследования не требуется большое количество биологического материала, а результаты анализов можно получить в кратчайшие сроки. ПЦР позволяет диагностировать хронические, затяжные и серонегативные формы заболевания, которые тяжело выявить с помощью других видов исследований.
Исследование ПЦР имеет свои особенности, которые следует учитывать при диагностике. В первые 1-4 суток после попадания вируса в организм его можно обнаруживать в 54% случаев, с 5 по 10 день вероятность выявления возбудителя снижается до 9%, а на 11-20 день снова возрастает до 25%. После 20-го дня после заражения обнаружить инфекцию в крови крайне трудно – это можно сделать только в 6% случаев.
Метод ПЦР используется не только для исследования биологических жидкостей больного, но и для проверки паразита. Анализ позволяет выявить возбудителей заболевания в организме клеща – если насекомое стерильно, дальнейшие обследования укушенного, как правило, не требуются.
СПРАВКА! Обычно метод ИФА и ПЦР рекомендуется использовать в комплексе, так как результаты анализов крови, выполненных разными методами, позволяют увидеть полную и точную картину болезни.
Иммуноанализ
Для определения инфекций, которые передаются укусами клещей, используются хемилюминесцентный анализ и иммуноблот (вестерн-блот). Для получения точных результатов они, как правило, используются в комплексе.
Хемилюминесцентный анализ основывается на тех же принципах, что и ИФА, но обладает более высокой точностью. Он позволяет определить содержание антител к возбудителю клещевого энцефалита, а точность составляет 95%.
Иммуноблот назначается в случаях, когда пациента необходимо проверить на наличие инфекции при получении отрицательных результатов остальных исследований. Например, анализы показывают, что вирус в организме отсутствует, но у больного наблюдаются явные признаки заражения.
Остальные обследование
Помимо вышеперечисленных методов, в диагностике клещевого энцефалита используется вирусологическое исследование крови и спинномозговой жидкости, а также анализ ликвора. В случае лихорадочной формы течения изменения в биоматериале отсутствуют. При менингеальной и некоторых других разновидностях заболевания наблюдается лимфоцитарный плеоцитоз (увеличение количества лимфоцитов) и повышение концентрации белка. Примеси гноя в спинномозговой жидкости свидетельствуют о том, что у пациента развивается менингит, а не клещевой энцефалит.
В качестве дополнительных исследований при диагностике болезни используются следующие методы:
- реакция связывания комплемента;
- реакция прямой гемагглютинации;
- реакция торможения гемагглютинации;
- реакция нейтрализации.
Они отражают изменения, которые происходят в организме при вирусных заболеваниях, и позволяют точно оценить клиническую картину.
СПРАВКА! У небольшого количества людей иммунная система справляется с возбудителем клещевого энцефалита самостоятельно, поэтому больной может не знать о факте заражения. В этом случае в его крови будет выявлен определенный титр антител, который свидетельствует о пожизненном иммунитете.
Лечение заболевания
Терапия клещевого энцефалита проводится в стационаре, схема лечения зависит от стадии заболевания и общего состояния больного. Специфических средств против болезни не существует, поэтому пациентам назначается этиотропная, поддерживающая и симптоматическая терапия.
На начальных стадиях (обычно до появления первых симптомов) в качестве лечения используются иммуноглобулины – клетки, которые получают из крови доноров.
Они эффективно борются с возбудителями клещевого энцефалита, но положительных результатов можно достичь только при раннем введении препаратов.
Если симптомы болезни уже проявились или она перешла во вторую стадию, лечение проводится с помощью противовирусных средств – рибонуклеазы, препаратов или индукторов интерферона. В качестве симптоматической терапии используются дезинтоксикационные средства, глюкокортикостероиды, нейролептики, антиспастические, противосудорожные лекарства. При серьезных бульбарных расстройствах больных переводят на искусственную вентиляцию легких.
В остром периоде больным с диагнозом «клещевой энцефалит» необходим строгий постельный режим, витаминотерапия, прием иммуностимуляторов и рациональное питание. Каждые несколько недель необходимо делать анализы крови для оценки эффективности лечения и клинической картины.
Прогноз при клещевом энцефалите зависит от общего состояния человека и своевременности терапии – чем раньше она будет начата, тем лучше. Большинство пациентов излечиваются без последствий для здоровья, но иногда возможны необратимые изменения в организме и серьезные осложнения. В их число входят параличи, парезы, атрофия мышц и нарушения работы нервной системы.
Полезное видео
Ознакомьтесь подробно на видео о анализах при клещевом энцефалите:
Клещевой энцефалит – тяжелое заболевание, которое может стать причиной инвалидизации больного или даже летального исхода. Чтобы предотвратить неприятные последствия, нужно придерживаться простых профилактических правил – во время прогулок на природе защищать руки и ноги одеждой, носить головной убор, использовать репелленты. Людям, проживающим в эпидемиологически неблагоприятных районах, рекомендуется пройти вакцинацию, которая надежно защищает от заражения вирусом.
Оцените статью:
Загрузка…
Источник