Анализ крови на волчаночный коагулянт

Метод определения
Исследование с использованием разведённого яда гадюки Рассела (dRVTT), скрининговый и подтверждающий тест. Автоматический анализатор свертывания.

Исследуемый материал
Плазма (цитрат)

Волчаночный антикоагулянт (ВА) – собирательное название для популяции антифосфолипидных антител, которые вызывают удлинение времени свертывания в фосфолипид-зависимых коагуляционных тестах. Происхождение названия «волчаночный антикоагулянт» исторически связано с тем, что впервые этот феномен был описан при обследовании пациента с системной красной волчанкой (СКВ). Парадоксально, в отличие от антикоагулянтного эффекта и удлинения времени свертывания в лабораторных тестах (in vitro), присутствие волчаночного антикоагулянта в условиях организма (in vivo) ассоциировано с риском состояний гиперкоагуляции и тромбозов.

В соответствии с текущими представлениями, антифосфолипидные антитела представляют собой гетерогенную группу аутоиммунных антител, которые способны взаимодействовать не только с фосфолипидами, но главным образом с фосфолипид-связывающими белками и их комплексами с фосфолипидами. Наиболее часто мишенью антифосфолипидных антител при АФС является белок бета-2-гликопротеин 1. Помимо него, фосфолипид-связывающими белками являются протромбин, протеин С, аннексин V, тромбомодулин, кининогены, антитромбин III и другие. Одним из важных видов фосфолипидов, с которыми связываются эти белки, является фосфатидилсерин. Механизмы патогенного действия и индукции тромбоза антифосфолипидными антителами изучены недостаточно. Предположительно они могут включать интерференцию с эндогенными антикоагулянтами (в том числе ингибирование пути протеина С, нарушение антикоагулянтной защиты, связанной с аннексином V, ингибирование антитромбина); взаимодействие с эндотелиальными клетками, которое приводит к выделению тканевого фактора и экспрессии молекул адгезии; связывание и активацию тромбоцитов; активацию системы комплемента.

Исследование волчаночного антикоагулянта используют в диагностике антифосфолипидного синдрома (АФС). Это комплекс симптомов, который включает повторные сосудистые тромбозы или патологию беременности (чаще синдром потери плода) и характеризуется присутствием антифосфолипидных антител. Диагноз АФС ставится при сочетании наличия 1 клинического критерия (подтвержденные эпизоды сосудистого тромбоза или определенные виды патологии беременности в анамнезе) и как минимум 1 лабораторного критерия (положительный результат в любом из трех видов исследований: 1) антитела к кардиолипину, 2) волчаночный антикоагулянт, 3) антитела к бета-2-гликопротеину 1, перепроверенный по крайней мере 2 раза в течение 12 недель). Выявляемые в этих тестах антифосфолипидные антитела частично перекрываются по своей специфичности. Из указанных лабораторных маркеров, персистирующий ВА проявляет наиболее тесную связь с риском тромбозов при АФС. ВА может быть обусловлен присутствием антител к бета-2-гликопротеину 1 или антител к протромбину, но часто выявляется и в отсутствие таких антител.

Тест с использованием разведенного яда гадюки Рассела, который активирует непосредственно V и X факторы свертывания, независимо от активации VII, VIII, IX, XI, и XII факторов (таким образом результат не зависит от влияния их дефицита или ингибирования), является одним из рекомендуемых вариантов исследования ВА. Скрининговый тест проводится при использовании ограниченной концентрации фосфолипидов в реагенте для повышения чувствительности к ВА. Подтверждающее исследование проводится при получении положительного результата в скрининге, тем же методом, но на фоне избытка фосфолипидов. Если удлиненное время свертывания в скрининговом тесте корректируется избытком фосфолипидов в подтверждающем тесте, это подтверждает фосфолипид-зависимый эффект и указывает на высокую вероятность присутствия ВА.

Следует учитывать, что выполнение исследования ВА на фоне терапии антикоагулянтами типа варфарина, прямых ингибиторов тромбина (Прадакса и пр.), прямых ингибиторов Xa фактора (Ксарелто и пр.) или избытка гепарина может приводить к искажению результатов (см. также раздел «Подготовка к исследованиям»).

Литература

Алексеева Е.И. с соавт. Системная красная волчанка: клинические рекомендации. Часть 1. 1. Вопросы современной педиатрии. 2018; 17 (1): 19–37
Клинические рекомендации по лечению антифосфолипидного синдрома. Ассоциация ревматологов России. М., 2013
Кобилянская В. А. Определение волчаночного антикоагулянта у пациентов на фоне приема ривароксабана. Вестник гематологии, 2018, 15, 1, с.47-48
Flieder T. et al. Interference of DOACs in different DRVVT assays for diagnosis of lupus anticoagulants. Thrombosis Research, 2018, 165, 101–106
Lim W. Thrombotic Risk in the Antiphospholipid Syndrome. Semin Thromb Hemost 2014;40, pp.741–746.
Molhoek J.E. et al The Lupus Anticoagulant Paradox. Semin Thromb Hemost. 2018, 44 (5), pp. 445-452.
Moore G.W. Recent Guidelines and Recommendations for Laboratory Detection of Lupus Anticoagulants. Semin Thromb Hemost. 2014; 40 (2), pp. 163-171.
Negrini S. et al. The antiphospholipid syndrome: from pathophysiology to treatment. Clin Exp Med. 2017 17 (3), pp. 257-267.
CLSI H60-A Laboratory Testing for the Lupus Anticoagulant; Approved Guideline, 04/2014
Материалы фирмы – производителя реагентов.

Источник

Волчаночный антикоагулянт в анализе крови у здорового человека должен практически отсутствовать. Его появление даже в небольшом количестве должно вызвать беспокойство, поскольку этот факт свидетельствует о том, что нарушено время свертывания крови.

Напомним, что свертывание крови крайне важный аспект гемостаза. При любых нарушениях герметичности сосудистой системы (порезы, повреждения сосудов любого происхождения) в дело вступают тромбоциты, которые создают кровяной сгусток (или сгустки) в месте утечки крови. Тем самым закупоривая место повреждения и предотвращая кровопотерю.

При некоторых обстоятельствах происходит нарушение сложного процесса свертывания крови (образования сгустка), при котором ухудшается такой важный показатель, как время свертывания.

Что такое волчаночный антикоагулянт

Волчаночный антикоагулянт принадлежит к иммуноглобулинам человека преимущественно класса G.

По направленности своего действия ВА представляет собой комплекс антител, которые:

Запускают реакции против анионных фосфолипидов и связанных с ними белков – обязательных структурных компонентов клеточных мембран тромбоцитов, одной из функций которых является активизация факторов свертывающей системы крови.
Препятствуют образованию комплексов фосфолипиды – витамин К-зависимые факторы свертывания крови.

Так как нормальное функционирование гемостаза невозможно без фосфолипидов, при развитии реакций по типу антиген-антитело запускается процесс патологического тромбообразования и нарушения свертывания крови.

Важно. Несмотря на удлинение времени свертывания при активизации волчаночного антикоагулянта, весь процесс сопровождается усиленным тромбообразованием в артериях и венах различного калибра и уровня локализации, что является результатом развития патологических реакций.

Механизм действия ВА

При развитии ряда аутоиммунных процессов в организме, которые могут приводить к повышению уровней волчаночного антикоагулянта, механизм действия ВА запускаются реакции против своих же клеток:

Чаще всего патологическое состояние начинается с развития в организме человека инфекционного процесса, преимущественно вирусной или бактериальной этиологии.
Нарушение адекватного иммунного ответа приводит к аутоиммунным реакциям против своего же организма, что заставляет появляться комплексы собственный антиген (в указанном случае фосфолипиды) – антитело.
Повышается количество белковых компонентов (именно волчаночных антикоагулянтов), которые атакуют фосфолипиды и блокируют их нормальные функции.
ВА начинает подавлять трансформацию протромбина в тромбин.
Развивается удлинение времени свертывания крови.
В ответ на такую реакцию развивается усиленный ответ тромбоцитов, который и приводит к распространенному тромбозу, но, к сожалению, на сегодня это лишь гипотеза, так как механизм образования тромбов при воздействии ВА до конца не изучен.

Справочно. Несмотря на сложности в патогенетических механизмах, определение волчаночного антикоагулянта несет огромную диагностическую ценность в выявлении аутоиммунных заболеваний.

Диагностическое значение

ВА в настоящее время является маркером следующих процессов:

Диагностика антифосфолипидного синдрома.
Развитие в организме системных аутоиммунных заболеваний.
Патологическое образование тромбов в сосудах как артериального, так и венозного русла неясного генеза.

Внимание! Опасность того, что волчаночный антикоагулянт повышен в крови больных заключается в том, что предугадать локализацию образования тромбов не представляется возможным.

Во избежание развития опасных ситуаций необходимо проводить анализ крови на уровни ВА у определенных групп пациентов.

Показания к исследованию ВА

Основными показаниями к проведению анализа крови на волчаночный антикоагулянт и его активность являются:

Подтверждение наличия и повышенных уровней ВА.
Диагностика антифосфолипидного синдрома (проводится в комбинации с определением в крови больного антикардиолипиновых антител и антител к бета-2-гликопротеину).
Выявление антикардиолипиновых антител.
Пониженное содержание тромбоцитов.
Диагностика системных аутоиммунных заболеваний, в первую очередь системной красной волчанки.
Первичные и рецидивирующие ранние венозные и артериальные тромбозы.
Тромбоэмболии различной локализации.
Инфаркт миокарда.
Ишемические инсульты, нарушения кровообращения головного мозга, особенно у лиц до 45 лет.
Привычное невынашивание беременности, мертворождения, частые выкидыши, внутриутробная гибель плода.
Планирование беременности.
Комбинации тромбоза с тромбоцитопении.
Сетчатое ливедо (ливедо ретикулярис, мраморная кожа).
Ложноположительные реакции Вассермана (исследование на сифилис).
Увеличение АЧТВ (активированное частичное тромбопластиновое время).
Начало лечения препаратами группы непрямых антикоагулянтов.

При наличии как минимум одного показания к исследованию крови на ВА необходимо незамедлительно проводить анализ у больного в соответствии с установленными нормами.

Методы проведения анализа

Волчаночный антикоагулянт является одним из показателей свертываемости крови, который по показаниям включается в анализ на волчанку коагулограмму.

Для проведения исследования проводится забор венозной крови натощак. Для получения точных данных необходимо придерживаться следующих рекомендаций:

Анализ крови на волчаночный антикоагулянт проводится натощак с отменой еды и питья за 12 часов до исследования. Допускается прием только негазированной воды.
За две недели отменяются лекарственные средства кумаринового ряда.
За два дня до исследования исключается прием препаратов на основе гепарина.

Для более точного проведения диагностики и постановки правильного диагноза заболевания рекомендовано провести дополнительное обследование на определение:

Антифосфолипидных антител (АФС-АТ) IgM.
АФС- АТ IgG.
Антитела к кардиолипину, IgM, IgG.
Антитела к бета-2-гликопротеину.
Суммарные IgG.

При исследовании крови на ВА необходимо учитывать такие факторы, как:

При гиперпротеинемии исследование крови на волчаночный антикоагулянт проводится каждые 2-4 недели.
Определение ложноположительных данных анализа крови на RW требует повторного проведения исследования с целью исключения или подтверждения активности волчаночного антикоагулянта.
Для диагностики антифосфолипипдного синдрома необходимо как минимум двукратное исследование.

В целом, при проведении тестов у больных с нарушением свертывания крови и патологическим образованием тромбов Международным обществом по тромбозу и гемостазу необходимо осуществлять диагностику по установленному алгоритму:

Этап 1 – скрининговый анализ, который основывается на удлинении фосфолипидзависимых коагуляционных тестов.
Этап 2 – коррекционная проба, целью которой является установление причины нарушения данных скринингового обследования.
Этап 3 – подтверждающая, или завершающая проба на определение характера ингибитора.

Даже если по результатам исследования на первом этапе показатели отрицательные, это не говорит о том, что волчаночный антикоагулянт в крови отсутствует. Только отрицательный результат при двух анализах допускает отсутствие или показатели в диапазоне нормальных значений волчаночного антикоагулянта.

Только при использовании правильного алгоритма исследования возможно правильно оценить и расшифровать полученные данные.

Волчаночный антикоагулянт. Норма

Общепринятыми допустимыми нормами ВА в крови человека считаются показатели от 0,8 до 1,2 у.е.

Полученные результаты анализа на волчаночный антикоагулянт интерпретируются таким образом:

Отрицательный – в крови ВА не определяется, либо присутствует в пределах допустимых норм.
Положительный – в крови обнаруживается волчаночный антикоагулянт выше нормальных показателей.

В зависимости от степени повышения ВА у больных, тест может быть:

Слабоположительный – показатели варьируют от 1,2 до 1,5 у.е. – активность оценивается как невысокая.
Умеренный – от 1,5 до 2 у.е. – на этом этапе появляется риск развития тромбозов.
Высокий – от 2 у.е. – высокий риск тромбообразования любой локализации.

Причины повышения ВА

Основными причинами появления или увеличения концентрации волчаночного антикоагулянта в крови являются:

Антифосфолипидный синдром (необходимо комплексное обследование).
Системная красная волчанка.
Неспецифический язвенный колит.
Множественная миелома.
Ревматоидный артрит.
Новообразования различной локализации.
Осложнения в процессе лечения некоторыми группами лекарственных веществ.

Внимание! Необходимо учитывать, что только на основании наличия ВА в крови нельзя ставить диагноз, а тем более начинать какое-либо лечение, так как для каждого указанного заболевания необходимо применение дополнительных диагностических манипуляций.

Отдельную категорию лиц, у которой выявление волчаночного антикоагулянта даже при однократном проведении исследования требует строжайшего контроля, составляют беременные женщины.

Волчаночный антикоагулянт при беременности

Появление волчаночного антикоагулянта или его повышение выше нормы у беременных или у женщин, планирующих беременность, волчаночный антикоагулянт при беременности приводит к:

Трудности зачатия.
Бесплодию.
Частым выкидышам.
Невынашиванию.
Замиранию беременности (внутриутробная гибель плода).
Мертворождению.
Гибели беременной женщины.

Выявление волчаночного антикоагулянта во время беременности может приводить не только к патологии ее протекания, риску для плода. Также это является огромным риском для самой женщины, так как состояние, характеризующееся усиленным образованием тромбов, может вызывать инфаркт, инсульт, поражение нижних конечностей, тромоэмболии даже при своевременно начатом лечении.

При планировании беременности и уже ее наступлении женщины подвергаются скринингу в случае нахождения в зоне риска:

Тромбозы в анамнезе.
Акушерская патология в виде частых самопроизвольных абортов, невынашивания.
Преэклампсия, эклампсия.

При исследовании крови на волчаночный антикоагулянт у беременных женщин проводится исследование, определяющее уровни и активность следующих показателей:

Фибриноген.
Антитромбин III.тромбоциты.
Протеины С и S.
D – димер.
Протромбиновые мутации.

Определение тактики лечения беременной женщины требует тщательной диагностики по всем стандартам с проведением всех требуемых анализов, а также постоянного наблюдения и контроля состояния.

Лечение

Волчаночный антикоагулянт не является заболеванием. Это один из симптомов болезни, которую и необходимо лечить после проведения тщательной диагностики и дифференциального диагноза больных.

Источник

Волчаночный антикоагулянт (ВА) представляет собой группу антител против фосфолипидов собственных клеток организма, впервые был выявлен у больных с системной красной волчанкой. Взаимодействуя с фосфолипидами мембран клеток крови, нервной системы, сосудов, эти антитела нарушают их функции и приводят к развитию так называемого антифосфолипидного синдрома (подробно см. позицию прайс-листа), имеющего разнообразные клинические проявления. Волчаночный антикоагулянт, наряду с другими антителами к фосфолипидам, является тестом, позволяющим диагностировать антифосфолипидный синдром.

Высокий уровень ВА в крови нередко наблюдается у больных с рецидивирующими тромбозами различной локализации (например, тромбозы вен нижних конечностей, тромбофлебиты), «ранними» инфарктами миокарда и инсультами. Кроме того, повышенное содержание этих антител, указывающее на АФЛ-синдром, часто выявляется при невынашивании беременности, внутриутробной гибели плода, другой акушерской патологии. У больных с коллагенозами (системная красная волчанка, ревматоидный артрит, системная склеродермия и т.д.) также нередко определяются высокие титры волчаночного антикоагулянта.

Женщинам не рекомендуется сдавать данное исследование во время менструации.

Волчаночный антикоагулянт относится к иммуноглобулинам класса IgG. Это группа антител против отрицательно заряженных фосфолипидов. Он подавляет в крови реакцию превращения протромбина в тромбин. Как предполагается, волчаночные антикоагулянты образуются в организме большей частью в результате развития аутоиммунных процессов после инфекционных воздействий.

При выявлении присутствия этих антител в крови по удлинению коагулологических тестов, их определяют как «волчаночный антикоагулянт». Это название они получили в связи с тем, что впервые были выявлены у больных СКВ (системной красной волчанкой). Наличие волчаночного антикоагулянта часто наблюдается при антифосфолипидном синдроме. Они также могут присутствовать у пациентов с аутоиммунными заболеваниями, СПИДом, при воспалениях, при онкологических заболеваниях, а также у тех, кто принимает фенотиазины, прокаинамид или фансидар.

Волчаночные антикоагулянты увеличивают риск появления тромбов в венах и артериях (чаще всего в венах ног – тромбоз глубоких вен). Такие тромбы способны блокировать ток крови в любой части тела, что может приводить к сердечным приступам, инфарктам, эмболии легких, а также к самопроизвольным абортам, в особенности во втором и третьем триместрах беременности.

ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К ИССЛЕДОВАНИЯМ:

1. Для большинства исследований кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 11 часов, натощак (между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8-ми часов, воду можно пить в обычном режиме), накануне исследования легкий ужин с ограничением приема жирной пищи. Для тестов на инфекции и экстренных исследований допустимо сдавать кровь через 4-6 часов после последнего приема пищи.

2. ВНИМАНИЕ! Специальные правила подготовки для ряда тестов: строго натощак, после 12-14 часового голодания, следует сдавать кровь на гастрин-17, липидный профиль (холестерин общий, холестерин-ЛПВП, холестерин-ЛПНП, холестерин-ЛПОНП, триглицериды, липопротеин (а), аполипо-протен А1, аполипопротеин В); глюкозотолерантный тест выполняется утром натощак после 12-16 часов голодания.

3. Накануне исследования (в течение 24 часов) исключить алкоголь, интенсивные физические нагрузки, прием лекарственных препаратов (по согласованию с врачом).

4. За 1-2 часа до сдачи крови воздержаться от курения, не употреблять сок, чай, кофе, можно пить негазированную воду. Исключить физическое напряжение (бег, быстрый подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. За 15 минут до сдачи крови рекомендуется отдохнуть, успокоиться.

5. Не следует сдавать кровь для лабораторного исследования сразу после физиотерапевтических процедур, инструментального обследования, рентгенологического и ультразвукового исследований, массажа и других медицинских процедур.

6. При контроле лабораторных показателей в динамике рекомендуется проводить повторные исследования в одинаковых условиях – в одной лаборатории, сдавать кровь в одинаковое время суток и пр.

7. Кровь для исследований нужно сдавать до начала приема лекарственных препаратов или не ранее, чем через 10–14 дней после их отмены. Для оценки контроля эффективности лечения любыми препаратами нужно проводить исследование спустя 7–14 дней после последнего приема препарата.

Если Вы принимаете лекарства, обязательно предупредите об этом лечащего врача.

Источник