Анализ крови на резистентность к антибиотикам
Анализ на чувствительность к антибиотикам широко применяется в педиатрии и в терапевтической практике. Он показан для назначения адекватного лечения при инфекционных процессах. Патогенные бактерии чувствительны не ко всем типам антибактериальных препаратов, поэтому так важно выбрать подходящий, угнетающий жизнеспособность микрофлоры антибиотик. Быстрое подавление активности патогенной микрофлоры снижает риск хронизации болезни и развития вторичных осложнений.
Общие сведения об анализе
Анализ на чувствительность к антибиотикам – лабораторный тест, который определяет тип возбудителя, общий объем патогенных сред. Перед тем, как сдавать анализ, требуется подготовиться. Обычно исследование назначают на утро. Пациентам не рекомендуется подмываться, промывать носовые ходы, умываться. Нельзя принимать антибиотики из-за риска получения ложных результатов. О том, как сдавать анализ правильно, расскажет лечащий врач.
Анализ на чувствительность к антибиотикам показан для изучения типа бактерий, определения медикаментозной терапии.
Основная цель заключается в определении типа бактерии, ее устойчивости или чувствительности к различным группам антибиотиков.
Показания и исследуемые пробы
Основными показаниями к назначению анализа являются острые воспалительные процессы бактериальной природы и составление плана дальнейшего ведения пациента. Анализ применяется в хирургии, урологии, нефрологии, онкологии других отраслях медицины.
Исследуемый биологический материал зависит от текущего клинического анамнеза пациента, локализации воспалительного очага. При обширном сепсисе рекомендуется развернутое изучение всех биологических материалов. Для исследования подходят:
- Кровь. Биохимический развернутый гемотест помогает определить не только тип возбудителя, но и общее состояние организма в целом.
- Урина. Бакпосев мочи проводится для уточнения половых инфекций, воспаления почек, органов урогенитальных путей.
- Анализ кала. Применяется в отношении пациентов с воспалением кишечного тракта, осложнениями острых кишечных инфекций, подозрением на паразитарные инфекции. Одновременно изучают физические и химические параметры каловых масс.
- Мазок из цервикального канала у женщин. Метод исследования помогает определить инфекции половых путей.
- Исследование спермы, мазок из уретры, секрет простаты. Анализы на бактериальный посев применяются для уточнения инфекций различной локализации у мужчин.
- Анализ мокроты. Помогает в диагностике дыхательных заболеваний, туберкулеза легких, пневмонии. Одновременно оценивают количество примесей — гноя, крови, слизи.
При хронических патологиях респираторного тракта и дыхательной системы возможно проведение забора мазка из носовых ходов, гортани. Анализ широко распространен в педиатрии ввиду легкости забора биологического материала.
Методы изучения материалов
Бакпосев выполняется несколькими способами, среди которых диско-диффузионный метод, Е-тест, метод разведения. В каждом случае выполняется определенный тип теста.
Дисковый способ
Распространенный и простой способ определения типа бактериальной микрофлоры. Исследуемый материал размещают в чаше Петри по всей поверхности, помещают небольшие картонные диски, смоченные в определенном виде антибиотика. После чашу плотно закрывают и устанавливают в термостат при температуре человеческого тела на 12 часов.
Бакпосев мочи назначается при подозрении на инфекции мочеполовых путей и урогенитального тракта
Под воздействием диффузных процессов антибактериального препарата формируется зона подавления патогенной микрофлоры. По окончанию анализа производят замер диаметра выявленной зоны подавления.
E-тест
Способ бакпосева похож на диско-диффузный, однако, вместо картонных дисков в чашу помещают специальную шкалу-полоску с различной интенсивностью пропитки антибиотиком. Посев инкубируют около 12 часов, после чего оценивают эффективность каждой пропитанной зоны полоски. Выбор антибиотика по результату теста зависит от выраженности зоны подавления на определенном участке полоски. Е-тест простой и доступный метод тестирования, но отличается высокой стоимостью.
Методы разведения
Анализ основан на последовательном двойном разведении антибиотика от максимальной к минимальной концентрации. 1 мл биоматериала разбавляют 10 раз в 10 пробирках с питательной средой. В той пробирке, где прекращается рост патогенной микрофлоры, обозначают максимальной границей количества патогенов в пробе. Этот же метод применяется для выявления чувствительности к антибиотикам.
Минимальная бактерицидная концентрация (МБК)
Минимальная бактерицидная концентрация — наименьшая концентрация антибактериального вещества, которая уничтожает патогенные бактерии на 100%. Показатель МБК учитывают и в лечении тех пациентов, у которых отсутствует эффективность от ранее назначенной этиотропной терапии. Анализ на флору и МБК особенно применяют на фоне остеомиелита, генерализованного сепсиса или воспаления, бактериального миокардита, эндокардита.
Современные лаборатории оснащены необходимым оборудованием для определения типа и чувствительности бактерий. Получение результатов занимает 1-2 суток, что зависит от транспорта полученного материала и вида исследования.
Расшифровка результатов
Для определения чувствительности антибиотика оценивают зоны подавления роста колоний патогенных штаммов. Категории резистентности непостоянны, поэтому регулярно пересматриваются из-за изменения чувствительности к антибактериальным препаратам.
Анализ на флору постоянно применяется в различных медицинских сферах
Мутация патогенов вызвана и беспорядочным применением антибиотика без дополнительных исследований. Клиницисты выделяют несколько видов интерпретаций:
- клинический;
- микробиологический.
Оценка клинического метода основана на эффективности действия того или иного препарата. Микробиологическая интерпретация основана на распределении концентрации антибиотика и степени подавления патогенной активности в каждой концентрации. Благодаря микробиологической интерпретации подбирается доза препарата для достижения высоких терапевтических результатов.
Расшифровка по типу возбудителя
Проведение анализа на чувствительность к антибиотикам необходимо и при неясной природе воспалительного процесса. Учитывая, что после приема антибактериальных препаратов, патогенные штаммы могут мутировать, изменять состояние, то микроорганизмы классифицируют на устойчивые, чувствительные, условно-чувствительные.
Устойчивые
Устойчивые или резистентные бактерии характеризуются дальнейшим ростом и патогенной активностью даже на фоне приема максимальных доз препарата. В этом случае требуется длительное лечение, назначение комбинированных антибиотиков с различными концентрациями.
Условно-чувствительные
Условно-чувствительные или промежуточно-резистентные бактерии провоцируют различный терапевтический исход. Лечебный эффект достигается, благодаря повышению суточной дозы препарата, постоянной коррекции концентрации антибиотика.
В отдельных случаях резистентные и промежуточно-чувствительные бактерии объединяются в одну группу устойчивых штаммов. Лечение в таком случае носит эмпирический характер. Назначение минимальные дозы с их постепенным повышением. К таким возбудителям относятся хламидии, уреаплазма, микоплазма.
Чувствительные
Чувствительность бактерий к антибиотику характеризуется быстрым подавлением патогенной активности под воздействием минимальных или стандартных возрастных доз препарата. Для выздоровления достаточно одного медикаментозного курса.
Исходя из этой классификации, назначение антибиотиков не оправдано только на основании предъявляемых жалоб и клинической картины. Именно поэтому показано проведение бакпосева.
Полученные результаты исследования на бакпосев имеют клиническую значимость только на момент острого периода воспалительного процесса. Таким образом, при рецидиве инфекции через определенное время картина может значительно измениться, а назначенный ранее антибиотик станет неэффективным. При каждом обострении хронической инфекции показано проведение нового анализа.
Читайте далее: анализ крови на МНО
Источник
Анализ на чувствительность к антибиотикам является обязательным при возникновении у врача подозрений, что заболевание пациента имеет бактериальную природу. Это связано с тем, что медики пытаются контролировать назначение данных препаратов, чтобы не стимулировать мутации и не вызывать резистентность у микроорганизмов.
Определение
Анализ на чувствительность к антибиотикам – это лабораторный способ выявления препарата, который будет оказывать наибольшее действие на патогенную флору в данном конкретном случае болезни.
На данный момент антибактериальная терапия применяется достаточно широко там, где она нужна, а также в тех случаях, когда это совсем не обязательно, для перестраховки от возможных осложнений. Например, после кесарева сечения, лапароскопических операций, удаления конкрементов из почек или мочеточников и т. д.
Фармацевтическая промышленность может предложить широкий выбор препаратов как в плане цены, так и в плане действенности. Для того чтобы не «тыкать пальцем в небо» и назначить эффективный антибиотик, нужно провести посевы на чувствительность.
Показания
Перед тем как врач подберет терапию, пациенту необходимо сдать некоторые анализы. Посев на чувствительность к антибиотикам назначается, если необходимо определить лекарство, которое в данном случае будет наиболее уместно. Чаще всего это исследование назначается для лечения заболеваний, передающихся половым путем, или ЗППП. Для детей же необходимость в определении антибиотика – это обязательное условие.
Кроме того, определение чувствительности нужно, чтобы избежать устойчивости бактерий к лечению. Если пациента недавно лечили антибиотиками, и теперь вновь необходим повторный курс, то требуется замена препарата. Это позволит использовать меньшие дозы лекарства и не вызывать мутации у возбудителя. В гнойных хирургических отделениях антибиотики меняют каждые два-три месяца.
Данный анализ необходим еще в том случае, если на основную группу антибиотиков у больного возникает аллергическая реакция.
Диффузионные методы
Анализ мочи на чувствительность к антибиотикам, и не только ее, можно провести несколькими способами. Первый из них – это метод дисков. Проводят его следующим образом. В чашку Петри заливают агар, а когда он застынет, специальным инструментом наносят исследуемый материал. Затем по поверхности агара раскладывают бумажные диски, пропитанные антибиотиками. После чашку закрывают и ставят в термостат. Постепенно диск погружается в желатин, а антибиотик диффундирует в окружающее пространство. Вокруг бумаги образуется зона «подавления роста». Чашки проводят в термостате двенадцать часов, затем их вынимают и измеряют диаметр вышеуказанной зоны.
Второй способ – это метод Е-теста. Он похож на предыдущий, но вместо бумажных дисков используют полоску, которая на своем протяжении в разной степени пропитана антибиотиком. После двенадцати часов экспозиции в термостате чашку Петри достают и смотрят, в каком месте зона подавления роста соприкасается с полоской бумаги. Это будет наименьшая концентрация препарата, которая необходима для лечения заболевания.
Достоинством этих тестов является быстрота и простота их проведения.
Методы разведения
Анализ на флору и чувствительность к антибиотикам можно провести и другим способом. Этот метод основан на последовательном уменьшении концентрации антибиотика (от максимальной до минимальной) с целью определить, в какой из пробирок прекратится сдерживание роста бактерий.
Сначала подготавливают растворы препарата. Затем их вносят в жидкую среду с бактериями (бульон или агар). Все пробирки на ночь (то есть 12 часов) помещаются в термостат при температуре 37 градусов, а утром проводят анализ получившихся результатов. Если содержимое пробирки или чашки Петри мутное, это свидетельствует о росте бактерий и, следовательно, неэффективности антибиотика в данной концентрации. Первая пробирка, в которой визуально не будет определяться рост колоний микроорганизмов, будет считаться достаточной концентрацией для лечения.
Это разведение препарата принято называть минимальной подавляющей концентрацией (МПК). Она измеряется в миллиграммах на литр или микрограммах на миллилитр.
Интерпретация результатов
Анализ на чувствительность к антибиотикам нужно уметь не только правильно сделать, но и грамотно расшифровать. Основываясь на получаемых результатах, все микроорганизмы делят на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные. Для того чтобы различать их между собой, используются условные пограничные концентрации препаратов.
Эти значения не являются постоянными и могут изменяться в зависимости от приспосабливаемости микроорганизмов. Разработкой и пересмотром этих критериев поручено заниматься химиотерапевтам и микробиологам. Одной из официальных структур такого рода является Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам США. Разработанные ими стандарты признаны во всем мире для использования в оценке активности антибиотиков, в том числе для рандоминизированных многоцентровых исследований.
Различают два подхода к оценке результатов анализа на чувствительность к антибиотикам: клинический и микробиологический. Микробиологическая оценка ориентируется на распределение эффективных концентраций антибиотика, а клиническая — на качество антибактериальной терапии.
Резистентные и чувствительные микроорганизмы
Анализ — определение чувствительности антибиотикам — назначается с целью выявить чувствительные и устойчивые микроорганизмы.
Чувствительными называются возбудители, которые поддаются лечению антибиотиками в средней терапевтической концентрации. Если достоверная информация о категории чувствительности микроорганизма отсутствует, то учитываются данные, полученные в условиях лаборатории. Они совмещаются со знаниями о фармакокинетике используемого препарата, и после синтеза данной информации делается вывод о восприимчивости бактерий к лекарству.
К резистентным, то есть устойчивым, микроорганизмам относятся те бактерии, которые продолжают вызывать заболевания даже при использовании максимальных концентраций лекарственных веществ.
Промежуточную резистентность устанавливают в том случае, если заболевание в процессе лечения может иметь несколько исходов. Выздоровление пациента возможно в случае использования высоких доз антибиотиков либо в случае прицельного накапливания лекарства в месте инфекции.
Минимальная бактерицидная концентрация
Анализ на микрофлору и чувствительность к антибиотикам определяет такой показатель, как минимальная бактерицидная концентрация, или МБК. Это самая низкая концентрация препарата, которая в лабораторных условиях вызывает элиминацию практически всех микроорганизмов в течение двенадцати часов.
Знание этого показателя врачи используют, когда назначают терапию не бактерицидными, а бактериостатическими лекарственными средствами. Или в случаях, когда стандартная антибактериальная терапия оказывается неэффективной. Чаще всего этот анализ заказывают для больных с бактериальным эндокардитом, остеомиелитом, а также при оппортунистических инфекциях.
Что может быть образцом?
Анализ на чувствительность к антибиотикам может проводиться с использованием биологических жидкостей:
— слюна;
— кровь;
— моча;
— сперма;
— грудное молоко.
Кроме того, для определения местной чувствительности производят забор мазков из уретры, цервикального канала и верхних дыхательных путей.
Подготовка к анализам
Бак. анализ на чувствительность к антибиотикам не требует от пациентов существенной подготовки, но некоторые ограничения все-таки есть.
- Для исследования используется средняя порция утренней мочи, которая собирается в стерильную посуду. Перед этим пациент обязательно должен осуществить туалет наружных половых органов и рук.
- Грудное молоко собирается перед кормлением ребенка. Первая порция сливается, а затем в стерильный контейнер сцеживается несколько миллилитров с каждой груди.
- Перед сдачей мазка из носоглотки стоит воздержаться от приема пищи в течение пяти-шести часов.
- В случае взятия мазка из половых путей, рекомендуют воздерживаться от половых контактов в течение пары дней.
На сегодняшний день не существует клинических или лабораторных методов, которые бы со стопроцентной вероятностью могли предсказать эффект от антибактериальной терапии. Но в то же время определение чувствительности бактерий к лекарственным веществам может быть ориентиром для врачей в вопросах выбора и коррекции лечения.
Источник
Антибиотикограмма — это лабораторное исследование, определяющее чувствительность микрофлоры к антибактериальным препаратам. Метод необходим для подбора максимально эффективной терапии. На практике используют у длительно болеющих пациентов, которым не помогают стандартные схемы.
Бактерии и антибиотики
Все бактерии, способные вызвать заболевание у человека, подразделяются на патогенные и условно-патогенные. Патогенные микроорганизмы — это те, которых у здорового человека быть не должно. Они попадают в организм из окружающей среды и вызывают патологический процесс.
Условно-патогенная флора — это бактерии, которые в норме проживают в организме человека, не вызывая заболеваний. Но при снижении иммунной защиты и дисбиозе активизируются и размножаются, что приводит к развитию болезни.
Антибиотикограмма определяет чувствительность бактерий к антибиотикам
Лечение бактериальных заболеваний проводят антибиотиками. Нет одного универсального препарата, который бы действовал на все бактерии сразу. Существует более 20 групп антибиотиков, эффективных против разных бактерий. Чтобы определить, какой именно препарат нужен для лечения, и назначают антибиотикограмму.
Правила забора материала для антибиотикограммы
Бактерии вызывают заболевания разных органов и обнаруживаются в разных средах организма — кровь, моча, кал, мокрота. Чтобы получить достоверные результаты, материал для исследования нужно собирать правильно.
Забор крови делает медсестра в процедурном кабинете. Для исследования берется венозная кровь, ее собирают в стерильную пробирку и сразу отправляют в лабораторию.
Мазок из зева и носоглотки берет медсестра или врач. Стерильным тампоном собирают слизь из носовых ходов, с задней стенки глотки. Тампон помещают в стерильную пробирку или сразу на питательную среду.
Желательно, чтобы материал был доставлен в лабораторию не позднее трех часов после забора.
Влагалищную и шеечную слизь собирает гинеколог. Женщина располагается на гинекологическом кресле, а врач с помощью специального инструмента собирает слизь. Ее помещают в стерильную пробирку и отдают для исследования.
Мочу и кал собирают дома. Перед мочеиспусканием и дефекацией нужно тщательно подмыться. В стерильный контейнер собирают среднюю порцию мочи. Дефекацию рекомендуется совершать в чисто вымытое судно или другую емкость. Оттуда стерильной лопаточкой собрать кал и поместить в стерильный контейнер.
Если у человека острое заболевание, анализы делают до назначения антибактериальной терапии. На фоне даже однократного приема антибиотиков состав патогенной флоры меняется. Если же у человека длительно текущий патологический процесс, плохо поддающийся терапии, то исследование делают даже на фоне приема противомикробных препаратов.
Техника лабораторного исследования
Для определения чувствительности бактерий нужно сделать посев материала на питательную среду. Используют для этого чашку Петри, куда помещают питательную среду. На поверхность кладут бумажные диски, пропитанные антибиотиками. Обычно в одну чашку помещается пять дисков. Если нужно исследовать большее количество препаратов, берут две или три чашки.
Затем на поверхность среды мазками наносят материал, который нужно исследовать. Чашки помещают в термостат — это тепловой шкаф, в котором поддерживается температура 37 градусов. Она оптимальна для выращивания бактериальных колоний. Через 24–72 часа появляются колонии микроорганизмов.
Если микроб чувствителен к антибиотику, вокруг бумажного диска роста не будет. Если же бактерия резистентна, то есть устойчива, рост будет наблюдаться даже рядом с пропитанным диском.
Как расшифровать результаты исследования, определяет врач по отметкам лаборанта в бланке
Как расшифровать анализ
Бланк ответа на исследование заполняется лаборантом. Вверху бланка пишут, какой материал и откуда был взят. Отмечают фамилию и инициалы пациента, его пол и возраст. Затем пишут, какие бактерии и в каком количестве были выделены. Кровь и моча в норме стерильны.
В кале здорового человека присутствуют лактобактерии, условно-патогенная флора — кишечная палочка, протей, клебсиеллы. Количество условно-патогенной флоры не должно превышать 10 в третьей степени на 1 мл кала. В содержимом зева и носоглотки тоже обнаруживают условно-патогенную флору — стафилококки, стрептококки. Их количество не должно быть больше 10 в четвертой степени на 1 мл слизи.
Ниже ставится перечень антибиотиков, к которым определялась чувствительность. Напротив каждого препарата выставляют букву, обозначающую степень чувствительности. Что означает S и R в бланке:
- S — бактерия восприимчива к данному антибиотику, его можно использовать для лечения;
- I — промежуточный вариант, микроб умеренно чувствителен, препарат можно использовать для лечения, если другого лекарства нет или у человека имеется его непереносимость;
- R — микроб абсолютно устойчив к антибиотику, препарат для лечения не подходит.
Анализ выполняют в течение трех дней, поэтому пациенту сначала назначают препарат широкого спектра действия, подходящий по клинике заболевания. Когда же будет получена расшифровка анализа, врач оставляет прежний препарат или меняет его на другой.
Профилактика резистентности
Развитие антибиотикорезистентности связано с бесконтрольным приемом препаратов. Антибиотики показаны только при подтвержденном бактериальном происхождении заболевания. Назначенный курс нужно принимать полностью, даже если самочувствие улучшилось на второй-третий день.
Все большее число бактерий становится устойчивыми к лекарствам. А новых препаратов не изобретают. Это грозит возникновением эпидемий инфекционных заболеваний с высокой смертностью.
Определение чувствительности бактерий к антибиотикам важно для назначения эффективной терапии. Для исследования можно взять любую биологическую жидкость. Чтобы не исказить результаты, материал нужно собирать в стерильную емкость. Исследование рекомендуется делать всем пациентам с признаками бактериальной инфекции.
Также интересно почитать: анализ на чувствительность антибиотиков
Источник
