Анализ крови на реакцию грегерсена

Источник

Источник

Исследование каловых масс на предмет наличия в них скрытой крови – это важный этап в диагностике воспалительных, паразитарных, аутоиммунных и дегенеративно-дистрофических патологий ЖКТ, а также доступный способ своевременного обнаружения онкологических заболеваний органов пищеварительной системы. Заметив в своих испражнениях кровь, видимую невооруженным взглядом, большинство людей спешат на прием к врачу, понимая, насколько серьезен этот сигнал о неблагополучии.

Но скрытая кровь может свидетельствовать о не менее грозных диагнозах, причем тогда, когда болезнь еще находится на ранней стадии развития, и шансов на успешное выздоровление гораздо больше. Вот почему при наличии первых подозрительных симптомов необходимо получить квалифицированную медицинскую консультацию и сдать все необходимые анализы. А людям старше 50 лет, имеющим в анамнезе случаи колоректального рака, нужно ежегодно проходить исследование кала на скрытую кровь, поскольку эта простая мера в некоторых случаях может спасти жизнь.

Содержание:

• Скрытая кровь в кале – что это значит?
• Кому показан анализ кала на скрытую кровь?
• Подготовка, диета, сбор и сдача анализа
• Методы проведения исследования: плюсы и минусы
  • Реакция Грегерсена (бензидиновая проба)
  • Реакция Вебера (гваяковая проба)
  • Иммунохимический анализ кала
  • Флуоресцентный тест
• Расшифровка результатов анализа

Многие патологии органов ЖКТ, в том числе язвенные колиты и злокачественные опухоли кишечника, до поры до времени не беспокоят пациента выраженными неприятными ощущениями. Но разрушение здоровых тканей уже происходит, следовательно, выделяется кровь, обнаружить которую в кале визуально пока нельзя, зато с помощью специальных лабораторных проб сделать это вполне возможно. Сегодня мы расскажем вам, что показывает анализ кала на скрытую кровь, как подготовиться к исследованию и какую диету нужно соблюдать, как правильно собрать и сдать материал, о чем говорит положительный и отрицательный результат, в каких случаях он может быть ложным, и какие методы определения скрытой крови в кале наиболее точны.

Скрытая кровь в кале – что это значит?

Некоторое количество крови в норме может присутствовать в испражнениях – не более 2 мг гемоглобина на 1 г кала, при такой предельной концентрации получается, что за сутки здоровый человек теряет с фекалиями до 2 мл крови. Если же кровотечение становится более интенсивным, цвет каловых масс меняется, а его оттенок указывает на локализацию проблемы: чем темнее, тем выше. Например, при кровоточащей язве желудка или двенадцатиперстной кишки кал становится черным, дегтеобразным (мелена), если причина кроется в обострившемся язвенном энтероколите, испражнения приобретут бордовый цвет, а кровоточащие полипы, геморроидальные узлы и злокачественные новообразования в прямой кишке приводят к появлению алых прожилок и пятен на каловых массах. Подобные признаки не могут остаться незамеченными и должны стать поводом к немедленному обращению за врачебной помощью.

Скрытая кровь в кале – это такая кровь, которую не удается обнаружить ни при визуальном, ни при микроскопическом изучении испражнений. Найти ее позволяет только анализ кала на скрытую кровь – положительный результат свидетельствует о наличии скрытого желудочно-кишечного кровотечения и требует обязательного дообследования пациента.

Кому показан анализ кала на скрытую кровь?

Такого рода исследование назначается в следующих случаях:

• Стойкие периодические боли в любой части живота, а также в правом или левом подреберье;

• Дискомфорт и болезненность во время акта дефекации или после него;

• Ощущение присутствия инородного тела в прямой кишке;

• Любые нарушения стула: запоры, поносы, патологическое увеличение или уменьшение объема каловых масс, изменение их цвета, консистенции или запаха, наличие подозрительных включений (пена, слизь, кровь, гной, паразиты или их яйца);

• Утрата аппетита, резкое снижение массы тела без видимых причин;

• Тошнота, рвота, отрыжка, изжога, неприятный привкус во рту;

• Необъяснимое повышение температуры тела;

• Диагностированные патологии ЖКТ: болезнь Крона, полипоз кишечника, неспецифический язвенный колит, дивертикулез, варикоз пищевода, гельминтоз и так далее – исследование выполняется для определения стадии заболевания или контроля над ходом лечения;

• Тревожные результаты других, ранее проведенных обследований, например, копрограммы, общего или биохимического анализа крови;

• Профилактика рака кишечника в возрасте старше 40-50 лет у пациентов с неблагоприятной наследственностью.

Подготовка, диета, сбор и сдача анализа

Исследование на скрытую кровь в кале имеет смысл проводить только при условии тщательного соблюдения правил предварительной подготовки, иначе вероятность получения ложного результата будет очень высока.

Начнем по порядку:

• Временно отложить анализ необходимо до устранения следующих обстоятельств – стоматит, пародонтоз, носовое кровотечение, менструация, диспепсия, гематурия, обострение геморроя, недавно проведенная диагностическая манипуляция с кишечником (колоноскопия, ректороманоскопия), анальный секс. Все эти факторы с большой вероятностью могут привести к искажению результатов исследования, значит, необходимо решить имеющуюся проблему или подождать несколько дней, в зависимости от ситуации;

• За неделю до анализа следует отказаться от приема любых медикаментов, нежелательно влияющих на состав кала, а именно – от НПВП (аспирина, ибупрофена, напроксена), барбитуратов, антикоагулянтов, стимуляторов кишечной перистальтики, аскорбиновой кислоты, препаратов и биологически активных добавок, содержащих железо. Если вы постоянно принимаете какие-либо лекарства, и не уверены в том, что они не отразятся на результатах исследования, лучше заблаговременно посоветуйтесь с лечащим врачом;

• За три дня до анализа нужно начать соблюдать диету – анализ кала на скрытую кровь почти всегда проводится с помощью лабораторных проб, чувствительных к составу пищи, потребляемой пациентом. Поэтому вам придется временно отказаться от любого мяса, птицы, рыбы и субпродуктов – то есть от всего, что может содержать не вашу кровь. Кроме того, рекомендуется исключить из меню некоторые бобы, овощи, фрукты и ягоды, богатые железом и витамином C или сильно влияющие на кишечную перистальтику – например, яблоки, сельдерей, клюкву, апельсины, шпинат, орехи, капусту, томаты, морковь, свеклу, фасоль, сою и чечевицу;

• За 12 часов до анализа необходимо отложить зубную щетку и отказаться от употребления жесткой пищи, способной травмировать десны и привести к попаданию крови изо рта в пищеварительный тракт.

Успешная сдача анализа на скрытую кровь = подготовка + диета, запомните это!

Как правильно собрать и сдать кал?

Итак, подготовительный этап позади, настало время собирать материал для исследования и везти в лабораторию:

• Рано утром, до завтрака, совершите наружный туалет интимной зоны с использованием обычного мыла, тщательно ополоснитесь и вытритесь;

• Произведите дефекацию в заранее подготовленную чистую тару. Процесс должен происходить естественно, без применения клизм или слабительных средств. Брать образец испражнений из унитаза нельзя. Анализ кала на скрытую кровь у ребенка берется из хорошо вымытого горшка, с пеленки или клеенки;

• Для сбора и транспортировки биоматериала лучше всего подходят специальные стерильные контейнеры с крышкой и ложечкой, которые продаются в любой аптеке. За неимением таковых можно воспользоваться маленькой стеклянной баночкой, предварительно продезинфицировав ее. Наберите понемногу кала из разных частей испражнений, чтобы картина исследования была максимально объективной. Всего достаточно количества, примерно равного 2-3 чайным ложкам;

• Тару с образцом лучше сразу доставить в лабораторию. Однако допустимо хранение материала в холодильнике в течение не более чем 12 часов. Это особенно удобно в случае с маленькими детьми, чей стул непредсказуем, или людьми, привыкшими опорожнять кишечник перед сном.

Методы проведения исследования: плюсы и минусы

В настоящее время используется четыре основных способа определения скрытой крови в испражнениях:

• Реакция Грегерсена (бензидиновая проба);

• Реакция Вебера (гваяковая проба);

• Иммунохимический анализ кала;

• Флуоресцентный тест.

Давайте разберемся в сути этих методик, в их преимуществах и недостатках. Забегая вперед, отметим, что в России наиболее часто используются бензидиновая проба и иммунохимический анализ, но являются ли они наиболее точными?

Реакция Грегерсена (бензидиновая проба)

Бензидиновая проба — это простой и быстрый лабораторный тест, позволяющий обнаружить кровь не только в кале, но также, например, в моче, рвотных массах и любой другой биологической жидкости пациента. Это возможно за счет окисления бензидина (парадиаминодифенила) перекисью водорода или бария в присутствии гемоглобина. У бензидиновой пробы есть несколько вариаций, самая часто используемая из них была предложена врачом М. Грегерсеном, потому и носит его имя.

Суть метода в следующем: берут 0,025 г бензидина, к нему добавляют 0,1 г перекиси бария и 5 мл 50% раствора уксусной кислоты, взбалтывают все до полного растворения, наносят несколько капель состава на предметное стекло, по которому тонким слоем размазан исследуемый кал, и наблюдают за реакцией. Если скрытая кровь есть, возникает яркое сине-зеленое окрашивание. Существует альтернативный вариант – готовят насыщенный раствор бензидина в уксусной кислоте и смешивают с 3% раствором перекиси водорода в равных частях. Результат будет выглядеть примерно так же, да и стоимость исследования мало изменится.

Плюсы:

• Очень высокая чувствительность – 1:100 000;

• Быстрота получения результата – почти мгновенно;

• Доступность в любой лаборатории;

• Невысокая цена.

Минусы:

• Необходимость в тщательной подготовке к сдаче анализа кала на скрытую кровь по методу Грегерсена, поскольку бензидиновая проба дает положительную реакцию на животный гемоглобин из пищи.

Реакция Вебера (гваяковая проба)

Помимо двух озвученных, у этого способа диагностики есть еще несколько названий: проба Ван-Деена или Альмена-Ван-Деена, гемоккульт-тест. Что любопытно, реакция с применением гваяковой смолы является первой в мировой медицинской практике методикой обнаружения скрытой крови в кале и прочих биологических жидкостях человека. Доктор Ван Деен предложил ее в 1864 году, и она до сих пор активно используется во многих странах.

Суть гваяковой пробы в следующем: берут 3-5 г исследуемого кала, растворяют в уксусной кислоте, при этом выделяется эфирный экстракт, к нему добавляют перекись водорода и настойку гваяковой смолы, а потом наблюдают за изменением цвета реактивов в пробирке. Если состав стал синим, значит, результат анализа на скрытую кровь в кале положительный. Тест повторяют в общей сложности шесть раз: изучают по два образца из биоматериалов, последовательно взятых в течение трех дней.

Плюсы:

• Оперативность.

• Доступная цена.

Минусы:

• Невысокая чувствительность – реакция будет положительной только в случае кровопотери в объеме от 30 мл и более, колоректальный рак обнаруживается в трети случаев, доброкачественные опухоли кишечника – лишь в 15% случаев;

• Жесткие требования к диете перед анализом кала на скрытую кровь – гваяковая проба чувствительна не только к пероксидазе гема человеческого гемоглобина, но и к пероксидазам других гемов, содержащихся в пище.

Иммунохимический анализ кала

Этот анализ иначе называют иммунологическим или иммунохроматографическим тестом. Методика базируется на реакции, которая возникает при взаимодействии специфических антител с гемоглобином человеческой крови. Ошибки исключены, поскольку антитела не реагируют на гемоглобин животных или железо, содержащееся в некоторых продуктах растительного происхождения. Иммунохимический анализ кала на скрытую кровь появился в арсенале медиков сравнительно недавно и уже прочно там обосновался.

Суть методики в следующем: образец исследуемого кала наносится на тест-полоску или помещается в окошко планшета с реактивами – моноклональными антителами. Если в биоматериале присутствует человеческий гемоглобин, он связывается с антителами, и в контрольной области проступает полоса ярко-розового или фиолетового цвета. Вторая полоса появляется в любом случае – она представляет собой индикатор доброкачественности прибора. Сдача анализа кала на скрытую кровь таким методом очень напоминает проведение теста на беременность – все очень просто, быстро и понятно.

В аптеке можно приобрести «ИммуноХРОМ-ГЕМ-Экспресс» или любой другой аналогичный прибор для самодиагностики скрытых желудочно-кишечных кровотечений в домашних условиях, однако для получения достоверного результата рекомендуется провести анализ не менее трех раз с перерывами в несколько дней.

Плюсы:

• Быстрота и удобство;

• Отсутствие необходимости в предварительной подготовке и соблюдении диеты;

• Высокая точность – определяет ранние стадии колоректального рака в 97% случаев.

Минусы:

• Относительно высокая стоимость;

• Наличие не в каждой лаборатории;

• Объективность результатов анализа кала на скрытую кровь только в случае кровотечения в нижних отделах пищеварительного тракта. Агрессивные ферменты, воздействующие на гемоглобин в желудке и тонком кишечнике, приводят его в состояние, негодное для вступления в реакцию с моноклональными антителами.

Флуоресцентный тест

Для полноты картины следует упомянуть о том, что скрытая кровь может быть обнаружена в испражнениях в ходе химической реакции с использованием разрушающих реагентов. Азотсодержащие пигменты порфирины, содержащиеся в молекулах гемоглобина и высвобождающиеся наружу при их гибели обладают сверхвысоким коэффициентом светопоглощения – около 10 в 6 степени. Их яркое флуоресцентное свечение и регистрирует лаборант в том случае, если в исследуемом образце кала имеется скрытая кровь. Однако в России этот метод диагностики не очень популярен, особенно в сравнении с бензидиновой пробой.

Плюсы:

• Оперативность;

• Доступная цена;

• Относительно высокая точность – около 80%.

Минусы:

• Необходимость в соблюдении диеты, поскольку порфирины присутствуют в любом гемоглобине, в том числе и в животном.

Расшифровка результатов анализа на скрытую кровь

В зависимости от того, каким способом проводился тест, и каков внутренний регламент лаборатории, ответ вы получите через 1-6 дней. Из описания методов проведения этого исследования видно, что его результаты не могут быть выражены в точном цифровом эквиваленте: в бензидиновой и гваяковой пробе реагент либо окрашивается, либо нет – разнится только скорость и интенсивность окраски. Что касается иммуноферментного и флуоресцентного теста, то тут тоже все однозначно: вторая полоска либо проявляется, либо нет, также и свечение – либо есть, либо нет.

Для примера рассмотрим расшифровку результатов анализа кала на скрытую кровь по методу Грегерсена (бензидиновая проба):

Важно: даже слабая реакция обычно настораживает врача и побуждает повторить тест или присовокупить к нему дополнительные методы диагностики, поскольку наличие скрытой крови в кале – это признак серьезного неблагополучия.

Ложные результаты

Рассмотрим теперь, по какой причине итоги исследования могут оказаться необъективными:

• Ложноотрицательный результат анализа кала на скрытую кровь – это почти всегда следствие нарушения технологии проведения пробы или недоброкачественности реактивов. Может быть и так, что пациент предоставил мало биоматериала или поленился собрать его из разных фрагментов каловых масс. Кроме того, при некоторых заболеваниях органов ЖКТ, например, при полипозе толстого кишечника, новообразования кровоточат не постоянно, а эпизодически. Поэ?