Анализ крови на никотин инвитро

Анализ крови на никотин инвитро thumbnail

Метод определения
Газовая хроматография/масспектрометрия (ГХ-МС).

Исследуемый материал
Моча

Анализ мочи на никотин, психотропные и наркотические вещества, психоактивные лекарственные препараты (никотин; психотропные, наркотические вещества и психоактивные лекарственные препараты: морфин, метадон, метамфетамин, амфетамин, фенциклидин, кокаин, декстропропоксифен, марихуана, тетрагидроканнабинол, фенобарбитал, циклобарбитал, барбамил, амобарбитал, секбутабарбитал, секобарбитал, диазепам, нордазепам, оксазепам, темазепам, алпразолам, кодеин, метаквалон и др.), алкоголь (этанол). (Drug screen, nicotine, urine). См. также тесты диагностики злоупотребления алкоголем — № 982 Этанол (алкоголь) мочи, № 838 CDT (углеводдефицитный трансферрин).

Скрининговые тесты на присутствие психоактивных препаратов предназначены для использования в медицинских целях (диагностика и лечение при применении или злоупотреблении этими препаратами). Результаты тестирования не могут служить предметом судебного разбирательства. Используемые методы скринингового исследования являются предварительными и, в некоторых случаях, требуют проведения подтверждающего исследования с использованием референсных методов. 

Моча считается предпочтительным материалом для проведения скринингового определения психоактивных веществ, поскольку методы такого исследования хорошо отработаны, материал может быть легко получен в достаточном количестве и обычно содержит экскретируемые вещества в концентрированной форме. В то же время следует иметь в виду, что концентрация исследуемого вещества или метаболитов в моче может не отражать его концентрацию в крови или степень повреждающего эффекта, это лишь признак, указывающий на предшествующее воздействие. Результат теста следует оценивать в комплексе с клиническими данными и результатами всех остальных диагностических процедур. 

Опиаты (Opiates). Морфин, кодеин. Один из наиболее известных опийных препаратов, связанных со злоупотреблением наркотиков – героин. В крови он быстро метаболизируется в 6-ацетилморфин, который далее подвергается превращению в морфин или глюкуронид морфина, который экскретируется с мочой. Примерно 10% от применяющейся дозы кодеина также преобразуется в морфин, который далее метаболизируется аналогичным способом. Поэтому в моче людей, употреблявших кодеин, могут содержаться небольшие количества морфина, глюкуронида морфина и N-норморфина. Период полувыведения морфина из крови составляет 2-4 часа. Приблизительный период выявления в моче – 48 часов. Порог положительного результата: морфин — 300 нг/мл, кодеин — 2000 нг/мл. 

Метаболит кокаина (Cocaine Metabolite). (бензоилэкгонин — benzoylecgonine). Кокаин – алкалоид естественного происхождения, сильнодействующий стимулятор центральной нервной системы, часто связанный со случаями злоупотребления наркотиков. Его могут вводить в организм вдуванием через нос, ингаляцией в легкие при курении или внутривенной инъекцией. Бензоилэкгонин (основной метаболит кокаина) составляет 35-54% от общего количества экскретирующихся производных кокаина в суточной моче. Мочевая экскреция кокаина и его метаболитов начинается через 20 минут после его введения через нос. Период полувыведения кокаина из крови составляет 0,5-1,5 часа. Приблизительный период выявления кокаина в моче – 6-8 часов, бензоилэкгонина – 2 суток. Порог положительного результата – 150 нг/мл.

Каннабиноиды (марихуана) (Cannabinoids (marijuana)). 11-нор-Δ9 тетрагидроканнабинол-9-карбоновая кислота (ТНСА) Марихуана – препарат листьев растения разновидности конопли (Cannabis sativa). Основной компонент марихуаны, связанный с ее эффектом на психику – это дельта-9-тетра-гидроканнабинол (delta-9-THC-9-carboxylic acid, THC), действующий на центральную нервную систему и сердечно-сосудистую систему. Тест система направлена на выявление этого компонента в моче. Период его полувыведения из крови составляет 14-38 часов. THC может персистировать в моче до нескольких недель после последнего приема (зависит от частоты и длительности употребления), поскольку он сохраняется в жировой ткани. Пассивная ингаляция дыма марихуаны может вызывать появление препарата в моче, но не выше 50 нг/мл. Порог положительного результата — 10 нг/мл. 

Барбитураты (Barbiturates). Секобарбитал, фенобарбитал. Барбитураты являются депрессантами и используются как успокоительные, снотворные и противосудорожные средства. При длительном их использовании может развиваться толерантность к препарату, а передозировка или резкая отмена приема опасны для жизни. Доступность этих препаратов ограничена, но достаточно часто наблюдаются случаи их злоупотребления и развития зависимости от приема препарата в целях успокоительного или снотворного эффекта (чаще при приеме таких краткодействующих веществ как секобарбитал, пентобарбитал или амобарбитал). Период полувыведения секобарбитала из крови составляет 19-36 часов, длительно действующих барбитуратов – 24- 140 часов. Приблизительный период выявления в моче: барбитуратов кратковременного действия (циклобарбитон) – 24 часа; барбитуратов среднего времени действия (пентобарбитон) – 48-72 часа; барбитуратов длительного времени действия (фенобарбитал) – 7 суток. Порог положительного результата — 5000 нг/мл. 

Бензодиазепины (Benzodiazepinas). Нордиазепам, оксазепам, темазепам, а-гидроксиальпразолам. Бензодиазепины представляют большую группу препаратов, использующихся как седативные, снотворные, снимающие тревогу средства, миорелаксанты, противоэпилептические средства, средства, применяемые при лечении от алкогольной зависимости. Скорость их метаболизма и период выведения из крови (и, соответственно, концентрация в моче) могут значительно варьировать в зависимости от индивидуальных особенностей организма и свойств препарата (период полувыведения из крови составляет от 1 до 100 часов). Приблизительный период выявления в моче метаболитов бензодиазепина после приема препаратов кратковременного действия (триазолам) – 24 часа; среднего времени действия (темазепам, хлордиазепоксид) – 40-80 часов; длительного времени действия (диазепам, нитразепам) – 7 суток (наличие в моче нордиазепама – активного метаболита диазепама – может увеличить время определяемости). Порог положительного результата — 100 нг/мл. 

Амфетамин/метамфетамин (Amphetamine/Methamphetamine). D-Амфетамин, D-метамфетамин. Амфетамин и метамфетамин – стимуляторы центральной нервной системы. В медицине их используют для лечения тучности, нарколепсии, гипотензии. Применяются обычно перорально или в виде внутривенной инъекции. Имеет место нелегальное распространение и злоупотребление этими веществами, связанное с их стимулирующим эффектом. Метилендиоксиметамфетамин, MDMA, известен под наименованием «экстази». Период полувыведения из крови 12 часов. Приблизительный период выявления в моче 2-3 суток. Порог положительного результата — 300 нг/мл. 

Читайте также:  Что такое pdw анализа крови

Метадон (Methadone). D-Метадон, D, L-метадон. Метадон – синтетический наркотический анальгетик, обладающий многими фармакологическими свойствами сходными с морфином. В медицине этот препарат находит широкое применение в терапии героиновой зависимости, а определение метадона в моче используют для контроля соблюдения метадоновой терапии. Метадон может вызывать возникновение зависимости морфинового типа. Прием больших доз метадона при отсутствии толерантности может продуцировать пролонгированную депрессию центральной нервной системы. В моче выявляется 23-52% от общей дозы за 24 часа. Период полувыведения из крови составляет 15-25 часов. Приблизительный период выявления в моче (при дозах поддерживающего лечения) – 7-9 суток. Порог положительного результата — 100 нг/мл. 

Фенциклидин (Phencyclidine). (1-(1-фенициклогексил)-пиперидин, PCP). Действует как стимулятор, иногда как депрессант, обладает галлюциногенным действием, анальгетик. Использование этого препарата в медицинских целях прекращено. Самовведение наркотика может осуществляться путем курения, вдувания через нос, внутривенной инъекции или перорально. Период полувыведения из крови 1-12 часов. Приблизительный период выявления в моче – 8 суток. Прием препаратов, содержащих декстрометорфан (применяют при простуде), может привести к результату теста, превышающему порог чувствительности 10,0 нг/ мл или порог референсных значений 25,0 нг/мл (присутствие и уровень метаболитов декстрометорфана зависит от дозы, частоты приема и индивидуальных особенностей метаболизма). Порог положительного результата — 25 нг/мл. 

Метаквалон (Methaqualone). Метаквалон (Methaqualone, Quaalude, Mandrax, 2-methyl-3-o-tolyl-4(3H)-quinazolinone) — седативное, снотворное средство, характер воздействия сходен с барбитуратами. Обладает потенциалом привыкания, последствия передозировки могут быть опасны для жизни. Побочные эффекты включают депрессию, бредовые состояния, спутанность сознания, нарушения деятельности сердечно-сосудистой и дыхательной систем. Запрещен к свободному обороту. Выявляется в моче 4-6 дней после использования. Порог положительного результата – 300 нг/мл. 

Пропоксифен (Propoxyphene). D-Пропоксифен. Пропоксифен (Propoxyphene, Darvon) – синтетический агонист опиатов. D-Пропоксифен (правовращающий изомер пропоксифена) обладает анальгетическим эффектом. Способен вызывать привыкание. К побочным эффектам относят депрессию центральной нервной системы, дыхательной системы, нарушения деятельности сердца, острые передозировки опасны для жизни. Период выявления до 2 дней. Порог положительного результата – 300 нг/мл.

Никотин (Nicotine). Никотин, котинин. Никотин – алкалоид, содержащийся в растениях семейства пасленовых, преимущественно в табаке. Курение табака – важнейшая причина смерти от раковых заболеваний, которую можно предупредить. Никотин не является прямой причиной большинства связанных с табаком заболеваний, но он обладает выраженной способностью вызывать привыкание, что является причиной продолжения курения, а тем самым и продолжающегося воздействия ряда канцерогенов. Котинин (основной метаболит никотина) является более информативным маркером при выявлении курения из-за более продолжительного периода детектирования относительно никотина. 

Исходя из следующих фактов: 

  • максимальные концентрации никотина и котинина в плазме возникают уже спустя 10 минут после курения; 
  • максимальные концентрации никотина и котинина в моче возникают уже спустя 78 минут после курения; 
  • период полувыведения никотина – 2 часа; 
  • период полувыведения котинина 7-40 часов (в среднем 24 часа);
  • ориентировочная средняя концентрация котинина у курильщиков в плазме — 80,5 нг/мл, в моче — 800 нг/мл; 
  • за 24 часа концентрация котинина в среднем упадет до значений в плазме — 40 нг/мл, в моче — 400 нг/мл, что и в первом и втором случае не дотягивает до концентраций пассивного курения. 

— можно сделать вывод о необходимости отбора биологических проб в течение первых 24 часов после предполагаемого случая курения сигарет. Предпочтительным объектом является моча, т.к. разность возможных концентраций у курящих и у не курящих максимальна.

Никотин, моча, нг/млКотинин, моча нг/мл
Курильщики200-700300-1300
Не курильщики2-171-20
Пассивные курильщики18-19921-299

Порог положительного результата: никотин — 200 нг/мл, котинин — 300 нг/мл

Источники: 

  1. Clarke’s Analysis of Drugs and Poisons in pharmaceuticals, body fluids and postmortem material. FOURTH EDITION, Cosulting Editors Anthoni C Moffat, M David Osselton, Brian Widdor, Executive Development Editor Jo Watts, 2011, стр. 49, 1772-1776. 
  2. Клиническое руководство Тица по лабораторным тестам, четвертое издание, Алан Г.Б.Ву, 2013 г, стр 897.

ВНИМАНИЕ! Настоящее лабораторное исследование не является экспертизой. Тип исследования – предварительное скрининговое лабораторное исследование. Результаты, получаемые пациентом, могут быть переданы им в судебные органы и могут быть рассмотрены как доказательство в судебных процессах только на усмотрение суда.

Литература

1. Tietz сlinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B.- USA,W.B Sounders Company, 2006,1798 p.

2. /Wolff K., Welch S., Strang J./ Значение специальных лабораторных исследований для оценки и лечения расстройств, вызванных употреблением психоактивных веществ. Advances in Psychiatric Treatment 1999, vol. 5, pp. 180-191 (цит. по: Обзор современной психиатрии, 2000, вып. 6, электронная версия https://www.psyobsor.org/1998/6/7-1-1.php ).

3. Материалы к наборам реагентов.

Читайте также:  Анализ крови в норме кроме тромбоцитов

Источник

Метод определения
Газовая хроматография/масспектрометрия (ГХ-МС).

Исследуемый материал
Моча

Анализ мочи на никотин, психотропные и наркотические вещества, психоактивные лекарственные препараты (никотин; психотропные, наркотические вещества и психоактивные лекарственные препараты: морфин, метадон, метамфетамин, амфетамин, фенциклидин, кокаин, декстропропоксифен, марихуана, тетрагидроканнабинол, фенобарбитал, циклобарбитал, барбамил, амобарбитал, секбутабарбитал, секобарбитал, диазепам, нордазепам, оксазепам, темазепам, алпразолам, кодеин, метаквалон и др.), алкоголь (этанол). (Drug screen, nicotine, urine). См. также тесты диагностики злоупотребления алкоголем — № 982 Этанол (алкоголь) мочи, № 838 CDT (углеводдефицитный трансферрин).

Скрининговые тесты на присутствие психоактивных препаратов предназначены для использования в медицинских целях (диагностика и лечение при применении или злоупотреблении этими препаратами). Результаты тестирования не могут служить предметом судебного разбирательства. Используемые методы скринингового исследования являются предварительными и, в некоторых случаях, требуют проведения подтверждающего исследования с использованием референсных методов. 

Моча считается предпочтительным материалом для проведения скринингового определения психоактивных веществ, поскольку методы такого исследования хорошо отработаны, материал может быть легко получен в достаточном количестве и обычно содержит экскретируемые вещества в концентрированной форме. В то же время следует иметь в виду, что концентрация исследуемого вещества или метаболитов в моче может не отражать его концентрацию в крови или степень повреждающего эффекта, это лишь признак, указывающий на предшествующее воздействие. Результат теста следует оценивать в комплексе с клиническими данными и результатами всех остальных диагностических процедур. 

Опиаты (Opiates). Морфин, кодеин. Один из наиболее известных опийных препаратов, связанных со злоупотреблением наркотиков – героин. В крови он быстро метаболизируется в 6-ацетилморфин, который далее подвергается превращению в морфин или глюкуронид морфина, который экскретируется с мочой. Примерно 10% от применяющейся дозы кодеина также преобразуется в морфин, который далее метаболизируется аналогичным способом. Поэтому в моче людей, употреблявших кодеин, могут содержаться небольшие количества морфина, глюкуронида морфина и N-норморфина. Период полувыведения морфина из крови составляет 2-4 часа. Приблизительный период выявления в моче – 48 часов. Порог положительного результата: морфин — 300 нг/мл, кодеин — 2000 нг/мл. 

Метаболит кокаина (Cocaine Metabolite). (бензоилэкгонин — benzoylecgonine). Кокаин – алкалоид естественного происхождения, сильнодействующий стимулятор центральной нервной системы, часто связанный со случаями злоупотребления наркотиков. Его могут вводить в организм вдуванием через нос, ингаляцией в легкие при курении или внутривенной инъекцией. Бензоилэкгонин (основной метаболит кокаина) составляет 35-54% от общего количества экскретирующихся производных кокаина в суточной моче. Мочевая экскреция кокаина и его метаболитов начинается через 20 минут после его введения через нос. Период полувыведения кокаина из крови составляет 0,5-1,5 часа. Приблизительный период выявления кокаина в моче – 6-8 часов, бензоилэкгонина – 2 суток. Порог положительного результата – 150 нг/мл.

Каннабиноиды (марихуана) (Cannabinoids (marijuana)). 11-нор-Δ9 тетрагидроканнабинол-9-карбоновая кислота (ТНСА) Марихуана – препарат листьев растения разновидности конопли (Cannabis sativa). Основной компонент марихуаны, связанный с ее эффектом на психику – это дельта-9-тетра-гидроканнабинол (delta-9-THC-9-carboxylic acid, THC), действующий на центральную нервную систему и сердечно-сосудистую систему. Тест система направлена на выявление этого компонента в моче. Период его полувыведения из крови составляет 14-38 часов. THC может персистировать в моче до нескольких недель после последнего приема (зависит от частоты и длительности употребления), поскольку он сохраняется в жировой ткани. Пассивная ингаляция дыма марихуаны может вызывать появление препарата в моче, но не выше 50 нг/мл. Порог положительного результата — 10 нг/мл. 

Барбитураты (Barbiturates). Секобарбитал, фенобарбитал. Барбитураты являются депрессантами и используются как успокоительные, снотворные и противосудорожные средства. При длительном их использовании может развиваться толерантность к препарату, а передозировка или резкая отмена приема опасны для жизни. Доступность этих препаратов ограничена, но достаточно часто наблюдаются случаи их злоупотребления и развития зависимости от приема препарата в целях успокоительного или снотворного эффекта (чаще при приеме таких краткодействующих веществ как секобарбитал, пентобарбитал или амобарбитал). Период полувыведения секобарбитала из крови составляет 19-36 часов, длительно действующих барбитуратов – 24- 140 часов. Приблизительный период выявления в моче: барбитуратов кратковременного действия (циклобарбитон) – 24 часа; барбитуратов среднего времени действия (пентобарбитон) – 48-72 часа; барбитуратов длительного времени действия (фенобарбитал) – 7 суток. Порог положительного результата — 5000 нг/мл. 

Бензодиазепины (Benzodiazepinas). Нордиазепам, оксазепам, темазепам, а-гидроксиальпразолам. Бензодиазепины представляют большую группу препаратов, использующихся как седативные, снотворные, снимающие тревогу средства, миорелаксанты, противоэпилептические средства, средства, применяемые при лечении от алкогольной зависимости. Скорость их метаболизма и период выведения из крови (и, соответственно, концентрация в моче) могут значительно варьировать в зависимости от индивидуальных особенностей организма и свойств препарата (период полувыведения из крови составляет от 1 до 100 часов). Приблизительный период выявления в моче метаболитов бензодиазепина после приема препаратов кратковременного действия (триазолам) – 24 часа; среднего времени действия (темазепам, хлордиазепоксид) – 40-80 часов; длительного времени действия (диазепам, нитразепам) – 7 суток (наличие в моче нордиазепама – активного метаболита диазепама – может увеличить время определяемости). Порог положительного результата — 100 нг/мл. 

Амфетамин/метамфетамин (Amphetamine/Methamphetamine). D-Амфетамин, D-метамфетамин. Амфетамин и метамфетамин – стимуляторы центральной нервной системы. В медицине их используют для лечения тучности, нарколепсии, гипотензии. Применяются обычно перорально или в виде внутривенной инъекции. Имеет место нелегальное распространение и злоупотребление этими веществами, связанное с их стимулирующим эффектом. Метилендиоксиметамфетамин, MDMA, известен под наименованием «экстази». Период полувыведения из крови 12 часов. Приблизительный период выявления в моче 2-3 суток. Порог положительного результата — 300 нг/мл. 

Читайте также:  Билирубин в анализе крови значение

Метадон (Methadone). D-Метадон, D, L-метадон. Метадон – синтетический наркотический анальгетик, обладающий многими фармакологическими свойствами сходными с морфином. В медицине этот препарат находит широкое применение в терапии героиновой зависимости, а определение метадона в моче используют для контроля соблюдения метадоновой терапии. Метадон может вызывать возникновение зависимости морфинового типа. Прием больших доз метадона при отсутствии толерантности может продуцировать пролонгированную депрессию центральной нервной системы. В моче выявляется 23-52% от общей дозы за 24 часа. Период полувыведения из крови составляет 15-25 часов. Приблизительный период выявления в моче (при дозах поддерживающего лечения) – 7-9 суток. Порог положительного результата — 100 нг/мл. 

Фенциклидин (Phencyclidine). (1-(1-фенициклогексил)-пиперидин, PCP). Действует как стимулятор, иногда как депрессант, обладает галлюциногенным действием, анальгетик. Использование этого препарата в медицинских целях прекращено. Самовведение наркотика может осуществляться путем курения, вдувания через нос, внутривенной инъекции или перорально. Период полувыведения из крови 1-12 часов. Приблизительный период выявления в моче – 8 суток. Прием препаратов, содержащих декстрометорфан (применяют при простуде), может привести к результату теста, превышающему порог чувствительности 10,0 нг/ мл или порог референсных значений 25,0 нг/мл (присутствие и уровень метаболитов декстрометорфана зависит от дозы, частоты приема и индивидуальных особенностей метаболизма). Порог положительного результата — 25 нг/мл. 

Метаквалон (Methaqualone). Метаквалон (Methaqualone, Quaalude, Mandrax, 2-methyl-3-o-tolyl-4(3H)-quinazolinone) — седативное, снотворное средство, характер воздействия сходен с барбитуратами. Обладает потенциалом привыкания, последствия передозировки могут быть опасны для жизни. Побочные эффекты включают депрессию, бредовые состояния, спутанность сознания, нарушения деятельности сердечно-сосудистой и дыхательной систем. Запрещен к свободному обороту. Выявляется в моче 4-6 дней после использования. Порог положительного результата – 300 нг/мл. 

Пропоксифен (Propoxyphene). D-Пропоксифен. Пропоксифен (Propoxyphene, Darvon) – синтетический агонист опиатов. D-Пропоксифен (правовращающий изомер пропоксифена) обладает анальгетическим эффектом. Способен вызывать привыкание. К побочным эффектам относят депрессию центральной нервной системы, дыхательной системы, нарушения деятельности сердца, острые передозировки опасны для жизни. Период выявления до 2 дней. Порог положительного результата – 300 нг/мл.

Никотин (Nicotine). Никотин, котинин. Никотин – алкалоид, содержащийся в растениях семейства пасленовых, преимущественно в табаке. Курение табака – важнейшая причина смерти от раковых заболеваний, которую можно предупредить. Никотин не является прямой причиной большинства связанных с табаком заболеваний, но он обладает выраженной способностью вызывать привыкание, что является причиной продолжения курения, а тем самым и продолжающегося воздействия ряда канцерогенов. Котинин (основной метаболит никотина) является более информативным маркером при выявлении курения из-за более продолжительного периода детектирования относительно никотина. 

Исходя из следующих фактов: 

  • максимальные концентрации никотина и котинина в плазме возникают уже спустя 10 минут после курения; 
  • максимальные концентрации никотина и котинина в моче возникают уже спустя 78 минут после курения; 
  • период полувыведения никотина – 2 часа; 
  • период полувыведения котинина 7-40 часов (в среднем 24 часа);
  • ориентировочная средняя концентрация котинина у курильщиков в плазме — 80,5 нг/мл, в моче — 800 нг/мл; 
  • за 24 часа концентрация котинина в среднем упадет до значений в плазме — 40 нг/мл, в моче — 400 нг/мл, что и в первом и втором случае не дотягивает до концентраций пассивного курения. 

— можно сделать вывод о необходимости отбора биологических проб в течение первых 24 часов после предполагаемого случая курения сигарет. Предпочтительным объектом является моча, т.к. разность возможных концентраций у курящих и у не курящих максимальна.

Никотин, моча, нг/млКотинин, моча нг/мл
Курильщики200-700300-1300
Не курильщики2-171-20
Пассивные курильщики18-19921-299

Порог положительного результата: никотин — 200 нг/мл, котинин — 300 нг/мл

Источники: 

  1. Clarke’s Analysis of Drugs and Poisons in pharmaceuticals, body fluids and postmortem material. FOURTH EDITION, Cosulting Editors Anthoni C Moffat, M David Osselton, Brian Widdor, Executive Development Editor Jo Watts, 2011, стр. 49, 1772-1776. 
  2. Клиническое руководство Тица по лабораторным тестам, четвертое издание, Алан Г.Б.Ву, 2013 г, стр 897.

ВНИМАНИЕ! Настоящее лабораторное исследование не является экспертизой. Тип исследования – предварительное скрининговое лабораторное исследование. Результаты, получаемые пациентом, могут быть переданы им в судебные органы и могут быть рассмотрены как доказательство в судебных процессах только на усмотрение суда.

Литература

1. Tietz сlinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B.- USA,W.B Sounders Company, 2006,1798 p.

2. /Wolff K., Welch S., Strang J./ Значение специальных лабораторных исследований для оценки и лечения расстройств, вызванных употреблением психоактивных веществ. Advances in Psychiatric Treatment 1999, vol. 5, pp. 180-191 (цит. по: Обзор современной психиатрии, 2000, вып. 6, электронная версия https://www.psyobsor.org/1998/6/7-1-1.php ).

3. Материалы к наборам реагентов.

Источник