Анализ крови на клещевой энцефалит и боррелиоз методом пцр цена
Лайм-боррелиоз (ЛБ), болезнь Лайма или иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ) – трансмиссивное полисистемное заболевание, приводящее к поражению опорно-двигательного аппарата, нервной и сердечно-сосудистой систем, кожи, занимающее по широте распространения и уровню заболеваемости одно из ведущих мест среди природно-очаговых заболеваний. Заболевание регистрируется на значительной территории Российской Федерации.
Возбудители ЛБ – боррелии комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato, переносчики – иксодовые клещи. В диагностике ЛБ необходимо учитывать эпидемиологический анамнез (посещение леса, присасывание клеща) и клинические проявления, главным из которых, является мигрирующая эритема на ранних стадиях заболевания. Однако до 50% случаев ЛБ могут протекать со стертыми клиническими признаками, в частности, в безэритемной форме, что осложняет постановку диагноза. Использование в клинической практике современных высокочувствительных и специфичных методов серологической диагностики ЛБ позволяет своевременно выявить ранний боррелиоз и начать курс лечения, сократить риск развития тяжелых хронических форм болезни Лайма, а также провести дифференциальную диагностику боррелиоза от других инфекций, передающихся иксодовыми клещами.
Серологическая диагностика клещевого боррелиоза (300049, 300051) – это уникальные исследования, выполняемые с помощью диагностической тест-системы в формате иммуночипа, разработанной в ФБУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора!
Иммуночип повышает эффективность проведения серологического анализа ЛБ и информативность результата, т.к. позволяет одновременно определять в исследуемом образце антитела к 8 группам диагностически значимых антигенов боррелий видов Borrelia afzelii и Borrelia garinii, наиболее распространенных в РФ, и одновременно дифференцировать их по классам: IgM и IgG. Показано, что использование комбинации из нескольких рекомбинантных белков разных видов боррелий позволяет повысить чувствительность и специфичность теста. Иммуночип – высокочувствителен и специфичен (сравнительная оценка проводилась с коммерческими тест-системами в формате ИФА и иммунного блоттинга, зарегистрированными на территории РФ), исключает субъективность оценки благодаря автоматизированной интерпретации результатов.
На I (острой, первые три месяца) стадии заболевания антитела IgM и IgG обнаруживаются у 50-70% пациентов; уровень антител IgM достигает пика в первые 3-6 недель заболевания, пик синтеза антител IgG приходится на 6–8-ю неделю после начала инфекции. На ранней стадии острой формы заболевания с целью установления сероконверсии важно исследовать парные сыворотки, полученные от пациентов с интервалом в 20–30 дней. На II (подострой, длящейся 3-6 месяцев) стадии заболевания в зависимости от сроков развития диссеминации и органной патологии антитела IgM обнаруживаются у 30-80% пациентов, антитела IgG – у 65-100%. ВАЖНО: наличие антител IgМ к антигенам боррелий в сыворотке крови больных Лайм-боррелиозом, как правило, указывает на раннюю стадию инфекции. В некоторых случаях антитела IgM могут выявляться в течение 1–2 лет и более. На III (хронической, длящейся более 6 месяцев) стадии заболевания антитела IgM выявляются у 5-50 % больных, антитела IgG – практически в 100% случаев. ВАЖНО: специфические иммуноглобулины класса G могут детектироваться в течение длительного периода времени (несколько лет). Долго они сохраняются также и после успешно проведенной антибиотикотерапии.
Для подтверждения диагноза рекомендуется использовать двухшаговую схему лабораторной диагностики: определение специфических антител методом ИФА, при положительном результате — подтверждение их специфичности методом иммунного блоттинга или иммуночипа.
Список антигенов, к которым определяется наличие антител в иммуночипе: p100 В.garinii, p100 B.afzelii, VlsE B.garinii, VlsE B.afzelii, p39 B.afzelii, p41 B.garinii, p41 B.afzelii, p58 B.afzelii, BBK32 B.garinii, BBK32 B.afzelii, OspC B.garinii, OspC B.afzelii, p17 B.garinii, p17 B.afzelii.
Критерии результата при тестировании IgM антител
| Отрицательный | Положительный | Неопределенный |
|---|---|---|
|
|
|
Критерии результата при тестировании IgG антител
| Отрицательный | Положительный | Неопределенный |
|---|---|---|
|
| Выявлены антитела только к одному антигену из группы: p100, p58, p41, p39, BBK32, OspC |
Комплекс антител, выявляемый на разных стадиях ЛБ
| Стадия заболевания | IgM антитела | IgG антитела |
|---|---|---|
| Острая (I) | OspC, p41, p17, VlsE | P41, BBK32, p17, OspC, VlsE |
| Подострая (II) | OspC, p41, p17, BBK32, VlsE | p17, p41, VlsE, OspC, BBK32, p58 |
| Хроническая (III) | OspC, p41, VlsE, P39, p58 | p17, BBK32, p41, p58, VlsE, p100, OspC, p39 |
Внимание!
- При наличии признаков поражения центральной нервной системы рекомендуется проводить анализ специфических антител в спинномозговой жидкости (интратекальный синтез антител), так как отрицательный результат анализа сыворотки крови у больного нейроборрелиозом не свидетельствует об отсутствии у него инфекции. Исследование спинномозговой жидкости (СМЖ) обязательно проводится одновременно с исследованием сыворотки крови.
- Отрицательный результат серологических тестов на ранних стадиях заболевания не является доказательством отсутствия инфекции.
- В исследовании 300051 (кровь + спинномозговая жидкость) отдельно описываются антигены для каждого вида биоматериала.
Показания к назначению исследования: диагностика иксодового клещевого боррелиоза (болезни Лайма).
Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.
Источник
!Внимание!
По рекомендации ФБУЗ ЦГиЭ при подозрении на заболевание клещевым энцефалитом, бореллиозом, анаплазмозом и эрлихиозом данное исследование проводится не ранеее 10-21 дня после присасывания клеща. При наличии клинической симптоматики и по рекомендации врача инфекциониста кровь можно сдавать раньше.
Дополнительно к тесту рекомендуется исследование крови на наличие антител IgM, IgG к возбудителям этих инфекций (43-20-140, 43-20-141, 45-20-109, 45-20-110.)
Клещи – переносчики опасных для человека инфекций: клещевого энцефалита, боррелиоза, гранулоцитарного анаплазмоза человека, моноцитарного эрлихиоза человека.
Инфицирование клещевыми инфекциями может привести к развитию тяжелых осложнений: нарушениям в работе центральной нервной системы, поражению суставов, инвалидизации.
Клиническая картина различных клещевых инфекций имеет схожие черты и характеризуется неспецифичностью симптомов.
Данное исследование проводится методом ПЦР — один из методов молекулярной диагностики, позволяющий выявить в крови человека фрагменты генетического материала (ДНК или РНК) возбудителя инфекции. По сравнению с серологическими тестами, при которых возможны ложноположительные результаты, обладает более высокой специфичностью (60-85%) и подходит для дифференциальной диагностики инфекций.
Как правило, заболевания, вызываемые вирусами клещей, манифестируют в виде гриппоподобного синдрома (повышение температуры, головная боль, мышечные и суставные боли). Поэтому дифференцировать клещевые инфекции между собой и с другими острыми инфекционными заболеваниями на основании только лишь клинической картины невозможно.
Некоторые клещи заражены сразу двумя (реже тремя) инфекциями, поэтому могут приводить к развитию у одного и того же человека сочетанной инфекции. Чаще описаны случаи совместного боррелиоза и анаплазмоза.
Учитывая эти особенности, при подозрении на клещевую инфекцию необходимо комплексное лабораторное исследование, включающее анализы на все значимые возбудители клещевых инфекций.
Тест выявляет 4 опасные для человека инфекции, передающиеся при укусе (присасывании) клеща.
Боррелиоз (болезнь Лайма) – развивается на 5-30 день после укуса. Характерный первый признак заболевания в 70% случаев — появление кольцевидной эритемы (красного пятна с бледным центром), которое постепенно увеличивается и может достигнуть 60 см в диаметре. Наружный край эритемы, как правило, более яркий и возвышающийся над поверхностью кожи. Со временем пятно бледнеет и постепенно исчезает, и заболевание переходит во 2-ю стадию — диссеминированной инфекции. В этот период у пациентов отмечаются прогрессирующие артралгии (боли в суставах), поражение нервной системы – полинейропатия, энцефаломиелит, спастический парапарез, расстройства памяти. Также отмечается нарушение сердечного ритма и проводимости.
Эрлихиоз – заболевание начинается остро, примерно на 8-10 день после присасывания клеща – с повышения температуры, озноба, головной боли и болей в мышцах, умеренного кашля с гиперемией зева. Позже может развиться менингит (воспаление мозговых оболочек), парестезии, поражение лицевого нерва с развитием неврологических осложнений.
Анаплазмоз также характеризуется острым началом, инкубационный период составляет от 3 до 21 дней после укуса: внезапно повышается температура, выраженная слабость, головная и мышечная боль. Иногда может быть тошнота, рвота, тяжесть в правом подреберье, кашель и одышка. На рентгенограмме могут выявиться увеличенные внутригрудные лимфатические узлы. У 80% пациентов развивается поражение печени – гепатит. На фоне тяжелого течения развивается воспаление вещества мозга (энцефалит), поражение почек.
Клещевой энцефалит — инкубационный период может составлять до 30 суток после укуса, но в среднем заболевание развивается на 7-14 сутки. Возбудитель поражает нервную систему, при этом страдает серое вещество головного мозга и его оболочки. Также в патологический процесс может быть вовлечен спинной мозг. Для начала заболевания характерно общее недомогание, разбитость, легкие боли в мышцах спины, шеи, головная боль. Позже в зависимости от формы заболевания, повышается температура до фебрильных цифр (высоких). Появляется напряжение мышц шеи и затылка: пациент не может наклонить голову вперед. Также при поражении вещества мозга, развиваются судорожные припадки, нарушение дыхания, паралич мимической мускулатуры. У трети переболевших, развиваются неврологические последствия, часто с нарушением психической сферы и инвалидностью.
Важно помнить!
1. В случае обнаружения клещевого энцефалита рекомендуется срочно проконсультироваться в специализированных Центрах экстренной серопрофилактики против клещевого энцефалита.
2. В случае обнаружения возбудителей боррелиоза, анаплазмоза и эрлихиоза проводится антибиотикопрофилактика (назначает врач-инфекционист).
Источник
Клещевой энцефалит – трансмиссивное вирусное заболевание с выраженной сезонностью, зависящей от периода активности иксодовых клещей, и природной очаговостью. Возбудитель – вирус клещевого энцефалита, относящийся к РНК-вирусам рода Flavivirus. В России клещевой энцефалит регистрируется в 46 субъектах, около 70% всех случаев заболевания приходится на Урал и Сибирь. Кроме того, вирус клещевого энцефалита широко распространен в Европе: прибалтийских странах, Чехии, Словакии, Австрии, Германии, Швеции, Норвегии и Финляндии, а также встречается в Казахстане, Монголии, Китае и Японии.
В течение эпидемического сезона в РФ ежегодно регистрируется около 3000 случаев заболевания, средняя летальность при клещевом энцефалите составляет 1,2%. Наиболее тяжелые его формы и летальность около 10% связаны с дальневосточным генотипом вируса, циркулирующем преимущественно на Дальнем Востоке.
Как и многие другие арбовирусные инфекции в 80–90% случаев клещевой энцефалит протекает в инаппарантной форме, в остальных случаях развиваются различные по степени тяжести варианты течения заболевания: лихорадка, вирусные менингит и энцефалит. Также выделяют полиомиелитическую форму заболевания. При неблагоприятном сценарии острая стадия инфекции переходит в прогредиентную (хроническую) форму. В большинстве случаев после очаговой энцефалитической формы развиваются стойкие нарушения деятельности ЦНС.
Показания к обследованию. Лихорадка, головная боль, боль в области мышц шеи и плечевого пояса, тошнота, рвота, гиперемия лица, шеи и верхней части туловища, возможные потеря сознания, бред, психомоторное возбуждение и судорожный приступ при наличии эпидемиологического анамнеза: присасывание клеща, посещение лесной зоны, употребление в пищу сырого козьего молока.
Дифференциальная диагностика
- Другие иксодовые клещевые инфекции.
- При хронической форме – заболевания ЦНС неинфекционной этиологии.
Материал для исследований
- Сыворотка крови – выявление специфических АТ, изоляция вируса в культуре клеток;
- плазма крови – выявление РНК вируса;
- СМЖ – выявление РНК вируса, изоляция вируса в культуре клеток;
- цельная кровь – изоляция вируса в культуре клеток.
Этиологическая лабораторная диагностика включает изоляцию вируса с использованием культуральных методов, обнаружение РНК вируса и его АГ, обнаружение специфических АТ к возбудителю.
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Культуральный метод, основанный на изоляции вируса из цельной крови, сыворотки крови, тканей мозга в культуре клеток (СПЭВ, Vero, клещевых клеточных культурах) и с использованием чувствительных лабораторных животных не применяется как рутинный метод в диагностических лабораториях, т. к. требует соблюдения мер биологической безопасности при работе, связанной с накоплением вируса, относящегося ко II группе патогенности.
Обнаружение АГ вируса в анализе на клещевой энцефалит методом ИФА в крови, взятой в инкубационный период, в случае отсутствия переносчика, позволяет провести адекватную профилактику клещевого энцефалита. В период острых клинических проявлений динамическое определение АГ в крови позволяет сделать прогноз о возможном переходе заболевания в хроническую форму, и в случае прогредиентного течения заболевания – дифференцировать клещевой энцефалит от заболеваний нервной системы другой этиологии.
Выявление РНК вируса методом ПЦР обладает высокой диагностической специфичностью, но недостаточной чувствительностью, которая не превышает 50% (относительно обнаружения специфических АТ методом ИФА); исследование проводят только в комплексе с выявлением специфических АТ. Для обнаружения РНК вируса используют пробы крови или СМЖ, взятые в первую неделю острой стадии заболевания или в случае уточнения развития персистенции вируса клещевого энцефалита, при расшифровке летальных исходов исследуют ткани мозга.
Определение специфических АТ IgM и IgG в сыворотке крови и/или в СМЖ выполняют преимущественно методом ИФА. Также для изучения в динамике титров нарастания гемагглютинирующих АТ в остром периоде заболевания используют метод РТГА. АТ IgM к вирусу клещевого энцефалита появляются с 3–4-го дня от начала заболевания, АТ IgG – в среднем на 10–14-й дни. Определенные сложности при лабораторном подтверждении диагноза, основанном на выявлении специфических АТ IgM и динамическом изменении титра АТ IgG в «парных сыворотках», возникают в случае заболевания вакцинированных лиц. Как правило, при этом можно наблюдать в основном нарастание АТ IgG. В этом случае целесообразно использовать методы прямого обнаружения возбудителя: изоляция вируса, обнаружение РНК вируса или его АГ.
Реакция нейтрализации (РН) является наиболее специфичной реакцией для обнаружения АТ. Ограничением для использования этого метода является необходимость работы с живым вирусом и соблюдения соответственных мер биологической безопасности.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Обнаружение РНК вируса клещевого энцефалита в крови и СМЖ пациента является основанием для предварительной постановки диагноза, выявление нарастания титров АТ к вирусу клещевого энцефалита в образцах крови, взятых в динамике (парные сыворотки), служит подтверждением этиологии заболевания.
Источник
