Анализ крови на энцефалит и боррелиоз методом пцр
Что страшнее, жить в неведении и подозревать, или сдать анализы, и развеять сомнения? Несомненно, анализ крови на боррелиоз специфичен, но для людей, проживающих в эндемичных данному заболеванию районах жизненно необходим! Клещевой боррелиоз (болезнь Лайма) или клещевой энцефалит серьезное заболевание, требующего незамедлительного лечения. А как лечить, если не знаешь что?
Как понять, что необходима диагностика?
Как и у любой болезни у боррелиоза имеется ряд симптомов, согласно которым можно сделать вывод о необходимости провести анализ на боррелиоз. Несомненно, факт посещения леса в эндемичном районе не является основанием для визита к врачу, а вот факт снятия с тела клеща либо его укус вполне. Кроме того, бывает так, что человек не чувствует укуса и он может пройти незаметно. В такой ситуации необходимо обращать внимание на наличие симптомов, и бить тревогу необходимо как можно раньше.
Мигрирующая эритема на теле ребенка
Основные симптомы:
мигрирующая эритема (покраснение в месте укуса);
повышение температуры до 40°;
головные боли;
тошнота;
нарушение памяти;
координационные изменения.
Обычно, данные проявления начинают приносить человеку беспокойства через несколько дней после укуса клеща, а непосредственно увеличение вредоносной инфекции в организме начинается через 1,5-2 недели. По этой причине анализ крови на энцефалит и боррелиоз в первые 10 дней после укуса не будет информативным.
В лучшем случае в крови будет обнаружено крайне малое содержание боррелий и анализ придется пересдавать повторно через 2 недели.
Боррелий – род бактерий семейства спирохет, представители данного рода являются возбудителями боррелиоза.
Что сдавать, где и почем?
Как правило, такая процедура, как анализ на энцефалит или боррелиоз подразумевает под собой взятие крови из вены. Обычно большая часть потенциальных больных спокойно переносит подобную процедуру. После взятия крови больному на место забора накладывают спиртовой тампон, который необходимо держать на месте прокола до полной остановки крови (в среднем 3-5 минут).
Помимо забора крови у человека, врачам, для постановки диагноза требуется изучение непосредственно самого клеща. Данная процедура проводится в специализированных учреждениях, но обычно сложность вызывает доставка клеща на анализ, после того как он был обнаружен и снят с человека, так как укушенный человек забывает о том, что клещ может быть полезным при изучении.
Сдать анализ на энцефалит можно в любой поликлинике, но желательно, чтобы учреждение помимо энцефалита определяло и наличие боррелиоза, так как зачастую клещ является носителем двух заболеваний.
Цена на проведение такого исследования колеблется в районе 500-1500 рублей и напрямую зависит от времени готовности результатов, и клиники. Если анализ берется сразу на два заболевания, то цена может достигать 2 тыс. рублей.
Анализы на боррелиоз не имеют жестких требований в подготовке, но существует несколько рекомендаций, выполнение которых позволит повысить точность результата.
Так, потенциальному больному не рекомендуется употребление пищи за 8-9 часов до процедуры. Так как кровь сдается натощак, крайний прием пищи должен быть вечером. Алкоголь желательно не употреблять за сутки до сдачи крови, а вот курить можно, но за полчаса до забора материала желательно воздержаться от этой пагубной привычки.
Кроме того, для определения наличия заболевания анализа крови может быть недостаточно. В таком случае возможен анализ по методу ПЦР (забор спинномозговой жидкости). Однако у него имеются противопоказания и не всем пациентам допустимо его делать.
Процедура забора спинномозговой жидкости проста, но достаточно болезненна. Получение жидкости происходит в стерильном помещении, так как попадание малейшей инфекции в спинной мозг будет иметь плачевные последствия для человека.
Данный анализ будет боле информативен, так как биоматериал помещается в специальную емкость, где происходит выращивание инфекции (если она имеется).
Когда результат и что он означает?
Как правило, анализ на энцефалит и боррелиоз подготавливается в течение суток, и до вечера пациент получает заключение с результатами, но ведь их еще необходимо расшифровать, что может сделать любой инфекционист.
Но ничего сложного в обилии цифр нет, поэтому предварительную расшифровку можно сделать самостоятельно.
Анализы на боррелиоз могут иметь в заключении несколько вариантов, а именно несколько значений содержания антител IgM и IgG.
В частности, отрицательные антитела IgM и IgG свидетельствуют об отсутствии инфекции в организме. Положительный IgG и отрицательный IgM говорит о наличии заболевания в хронической стадии, как правило, лечение не требуется.
Отрицательный IgG и положительный IgM говорит об острой стадии болезни, а положительные антитела IgM и IgG об обострении. В данных случаях лечение необходимо.
Таким образом, анализы на боррелиоз и энцефалит являются важной составляющей успешного лечения, тот факт, что их цена достаточно демократична делает их доступность максимальной, что в свою очередь снижает риск развития болезни у небогатых слоев населения.
Источник
!Внимание!
По рекомендации ФБУЗ ЦГиЭ при подозрении на заболевание клещевым энцефалитом, бореллиозом, анаплазмозом и эрлихиозом данное исследование проводится не ранеее 10-21 дня после присасывания клеща. При наличии клинической симптоматики и по рекомендации врача инфекциониста кровь можно сдавать раньше.
Дополнительно к тесту рекомендуется исследование крови на наличие антител IgM, IgG к возбудителям этих инфекций (43-20-140, 43-20-141, 45-20-109, 45-20-110.)
Клещи – переносчики опасных для человека инфекций: клещевого энцефалита, боррелиоза, гранулоцитарного анаплазмоза человека, моноцитарного эрлихиоза человека.
Инфицирование клещевыми инфекциями может привести к развитию тяжелых осложнений: нарушениям в работе центральной нервной системы, поражению суставов, инвалидизации.
Клиническая картина различных клещевых инфекций имеет схожие черты и характеризуется неспецифичностью симптомов.
Данное исследование проводится методом ПЦР — один из методов молекулярной диагностики, позволяющий выявить в крови человека фрагменты генетического материала (ДНК или РНК) возбудителя инфекции. По сравнению с серологическими тестами, при которых возможны ложноположительные результаты, обладает более высокой специфичностью (60-85%) и подходит для дифференциальной диагностики инфекций.
Как правило, заболевания, вызываемые вирусами клещей, манифестируют в виде гриппоподобного синдрома (повышение температуры, головная боль, мышечные и суставные боли). Поэтому дифференцировать клещевые инфекции между собой и с другими острыми инфекционными заболеваниями на основании только лишь клинической картины невозможно.
Некоторые клещи заражены сразу двумя (реже тремя) инфекциями, поэтому могут приводить к развитию у одного и того же человека сочетанной инфекции. Чаще описаны случаи совместного боррелиоза и анаплазмоза.
Учитывая эти особенности, при подозрении на клещевую инфекцию необходимо комплексное лабораторное исследование, включающее анализы на все значимые возбудители клещевых инфекций.
Тест выявляет 4 опасные для человека инфекции, передающиеся при укусе (присасывании) клеща.
Боррелиоз (болезнь Лайма) – развивается на 5-30 день после укуса. Характерный первый признак заболевания в 70% случаев — появление кольцевидной эритемы (красного пятна с бледным центром), которое постепенно увеличивается и может достигнуть 60 см в диаметре. Наружный край эритемы, как правило, более яркий и возвышающийся над поверхностью кожи. Со временем пятно бледнеет и постепенно исчезает, и заболевание переходит во 2-ю стадию — диссеминированной инфекции. В этот период у пациентов отмечаются прогрессирующие артралгии (боли в суставах), поражение нервной системы – полинейропатия, энцефаломиелит, спастический парапарез, расстройства памяти. Также отмечается нарушение сердечного ритма и проводимости.
Эрлихиоз – заболевание начинается остро, примерно на 8-10 день после присасывания клеща – с повышения температуры, озноба, головной боли и болей в мышцах, умеренного кашля с гиперемией зева. Позже может развиться менингит (воспаление мозговых оболочек), парестезии, поражение лицевого нерва с развитием неврологических осложнений.
Анаплазмоз также характеризуется острым началом, инкубационный период составляет от 3 до 21 дней после укуса: внезапно повышается температура, выраженная слабость, головная и мышечная боль. Иногда может быть тошнота, рвота, тяжесть в правом подреберье, кашель и одышка. На рентгенограмме могут выявиться увеличенные внутригрудные лимфатические узлы. У 80% пациентов развивается поражение печени – гепатит. На фоне тяжелого течения развивается воспаление вещества мозга (энцефалит), поражение почек.
Клещевой энцефалит — инкубационный период может составлять до 30 суток после укуса, но в среднем заболевание развивается на 7-14 сутки. Возбудитель поражает нервную систему, при этом страдает серое вещество головного мозга и его оболочки. Также в патологический процесс может быть вовлечен спинной мозг. Для начала заболевания характерно общее недомогание, разбитость, легкие боли в мышцах спины, шеи, головная боль. Позже в зависимости от формы заболевания, повышается температура до фебрильных цифр (высоких). Появляется напряжение мышц шеи и затылка: пациент не может наклонить голову вперед. Также при поражении вещества мозга, развиваются судорожные припадки, нарушение дыхания, паралич мимической мускулатуры. У трети переболевших, развиваются неврологические последствия, часто с нарушением психической сферы и инвалидностью.
Важно помнить!
1. В случае обнаружения клещевого энцефалита рекомендуется срочно проконсультироваться в специализированных Центрах экстренной серопрофилактики против клещевого энцефалита.
2. В случае обнаружения возбудителей боррелиоза, анаплазмоза и эрлихиоза проводится антибиотикопрофилактика (назначает врач-инфекционист).
Источник
Лайм-боррелиоз (ЛБ), болезнь Лайма или иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ) – трансмиссивное полисистемное заболевание, приводящее к поражению опорно-двигательного аппарата, нервной и сердечно-сосудистой систем, кожи, занимающее по широте распространения и уровню заболеваемости одно из ведущих мест среди природно-очаговых заболеваний. Заболевание регистрируется на значительной территории Российской Федерации.
Возбудители ЛБ – боррелии комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato, переносчики – иксодовые клещи. В диагностике ЛБ необходимо учитывать эпидемиологический анамнез (посещение леса, присасывание клеща) и клинические проявления, главным из которых, является мигрирующая эритема на ранних стадиях заболевания. Однако до 50% случаев ЛБ могут протекать со стертыми клиническими признаками, в частности, в безэритемной форме, что осложняет постановку диагноза. Использование в клинической практике современных высокочувствительных и специфичных методов серологической диагностики ЛБ позволяет своевременно выявить ранний боррелиоз и начать курс лечения, сократить риск развития тяжелых хронических форм болезни Лайма, а также провести дифференциальную диагностику боррелиоза от других инфекций, передающихся иксодовыми клещами.
Серологическая диагностика клещевого боррелиоза (300049, 300051) – это уникальные исследования, выполняемые с помощью диагностической тест-системы в формате иммуночипа, разработанной в ФБУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора!
Иммуночип повышает эффективность проведения серологического анализа ЛБ и информативность результата, т.к. позволяет одновременно определять в исследуемом образце антитела к 8 группам диагностически значимых антигенов боррелий видов Borrelia afzelii и Borrelia garinii, наиболее распространенных в РФ, и одновременно дифференцировать их по классам: IgM и IgG. Показано, что использование комбинации из нескольких рекомбинантных белков разных видов боррелий позволяет повысить чувствительность и специфичность теста. Иммуночип – высокочувствителен и специфичен (сравнительная оценка проводилась с коммерческими тест-системами в формате ИФА и иммунного блоттинга, зарегистрированными на территории РФ), исключает субъективность оценки благодаря автоматизированной интерпретации результатов.
На I (острой, первые три месяца) стадии заболевания антитела IgM и IgG обнаруживаются у 50-70% пациентов; уровень антител IgM достигает пика в первые 3-6 недель заболевания, пик синтеза антител IgG приходится на 6–8-ю неделю после начала инфекции. На ранней стадии острой формы заболевания с целью установления сероконверсии важно исследовать парные сыворотки, полученные от пациентов с интервалом в 20–30 дней. На II (подострой, длящейся 3-6 месяцев) стадии заболевания в зависимости от сроков развития диссеминации и органной патологии антитела IgM обнаруживаются у 30-80% пациентов, антитела IgG – у 65-100%. ВАЖНО: наличие антител IgМ к антигенам боррелий в сыворотке крови больных Лайм-боррелиозом, как правило, указывает на раннюю стадию инфекции. В некоторых случаях антитела IgM могут выявляться в течение 1–2 лет и более. На III (хронической, длящейся более 6 месяцев) стадии заболевания антитела IgM выявляются у 5-50 % больных, антитела IgG – практически в 100% случаев. ВАЖНО: специфические иммуноглобулины класса G могут детектироваться в течение длительного периода времени (несколько лет). Долго они сохраняются также и после успешно проведенной антибиотикотерапии.
Для подтверждения диагноза рекомендуется использовать двухшаговую схему лабораторной диагностики: определение специфических антител методом ИФА, при положительном результате — подтверждение их специфичности методом иммунного блоттинга или иммуночипа.
Список антигенов, к которым определяется наличие антител в иммуночипе: p100 В.garinii, p100 B.afzelii, VlsE B.garinii, VlsE B.afzelii, p39 B.afzelii, p41 B.garinii, p41 B.afzelii, p58 B.afzelii, BBK32 B.garinii, BBK32 B.afzelii, OspC B.garinii, OspC B.afzelii, p17 B.garinii, p17 B.afzelii.
Критерии результата при тестировании IgM антител
| Отрицательный | Положительный | Неопределенный |
|---|---|---|
|
|
|
Критерии результата при тестировании IgG антител
| Отрицательный | Положительный | Неопределенный |
|---|---|---|
|
| Выявлены антитела только к одному антигену из группы: p100, p58, p41, p39, BBK32, OspC |
Комплекс антител, выявляемый на разных стадиях ЛБ
| Стадия заболевания | IgM антитела | IgG антитела |
|---|---|---|
| Острая (I) | OspC, p41, p17, VlsE | P41, BBK32, p17, OspC, VlsE |
| Подострая (II) | OspC, p41, p17, BBK32, VlsE | p17, p41, VlsE, OspC, BBK32, p58 |
| Хроническая (III) | OspC, p41, VlsE, P39, p58 | p17, BBK32, p41, p58, VlsE, p100, OspC, p39 |
Внимание!
- При наличии признаков поражения центральной нервной системы рекомендуется проводить анализ специфических антител в спинномозговой жидкости (интратекальный синтез антител), так как отрицательный результат анализа сыворотки крови у больного нейроборрелиозом не свидетельствует об отсутствии у него инфекции. Исследование спинномозговой жидкости (СМЖ) обязательно проводится одновременно с исследованием сыворотки крови.
- Отрицательный результат серологических тестов на ранних стадиях заболевания не является доказательством отсутствия инфекции.
- В исследовании 300051 (кровь + спинномозговая жидкость) отдельно описываются антигены для каждого вида биоматериала.
Показания к назначению исследования: диагностика иксодового клещевого боррелиоза (болезни Лайма).
Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.
Источник
[40-176]
ПЦР-диагностика «клещевых» инфекций
1870 руб.
Комплексное исследование крови, в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) выявляют возбудителей боррелиоза (Borrelia burgdorferi), моноцитарного эрлихиоза человека (Ehrlichia chaffeensis) и анаплазмоза человека (Anaplasma phagocytophilum).
Синонимы русские
ПЦР-диагностика боррелиоза, эрлихиоза и анаплазмоза.
Синонимы английские
Tick-borne diseases, polymerase chain reaction, PCR, Lyme disease, Human ehrlichiosis, Human anaplasmosis.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Клещевые инфекции представляют серьезную проблему для здоровья человека. Наибольшее значение имеют следующие клещевые инфекции:
- болезнь Лайма (клещевой боррелиоз), возбудителем заболевания является спирохета Borrelia burgdorferi;
- анаплазмоз, ранее известный как гранулоцитарный эрлихиоз, возбудителем заболевания является α-протеобактерия Anaplasma phagocytophilum.
В обоих случаях переносчиком инфекции являются иксодовые клещи Ixodess capularis, I. ricinus, I. pacificus и I. persulcatus. В России наибольшее значение имеют виды I. ricinus и I. persulcatus.
- моноцитарный эрлихиоз, возбудителем заболевания является α-протеобактерия Ehrlichia chaffeensis. Переносчик инфекции – иксодовые клещи Amblyomma americanum.
Клещевые инфекции обладают рядом общих свойств:
- Клиническая картина клещевых инфекций имеет много общих черт и неспецифична. Как правило, заболевание манифестирует в виде гриппоподобного синдрома с лихорадкой, головной болью, миалгией и артралгией. Дифференцировать клещевые инфекции между собой и с другими острыми инфекционными на основании только лишь клинической картины заболевания невозможно.
- Некоторые иксодовые клещи инфицированы сразу двумя (реже тремя) патогенами (коинфекция) и могут приводить к развитию у одного и того же человека сочетанной инфекции. Чаще описаны случаи сочетанного боррелиоза и анаплазмоза.
Учитывая эти особенности, при подозрении на клещевую инфекцию необходимо комплексное лабораторное исследование, включающее анализы на все значимые возбудители клещевых инфекций.
Для лабораторной диагностики клещевых инфекций могут применяться несколько методов, в том числе серологические тесты, анализ окрашенного мазка крови, бактериологический посев, иммуногистохимический анализ и методы молекулярной диагностики. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это один из методов молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (например, в крови) фрагменты генетического материала (ДНК) возбудителя инфекции. Исследование обладает целым рядом преимуществ по сравнению с другими методами идентификации клещевых инфекций:
- Быстрота получения результата. ПЦР – это один из самых быстрых на сегодняшний день методов идентификации возбудителя. Благодаря этому, метод ПЦР считается самым опитмальным способом диагностики острой инфекции.
- Высокая чувствительность метода. Другой «быстрый» метод диагностики эрлихиоза – это окраска мазков крови по Гимзе. Обнаружение в мазках крови так называемых морул (скоплений микроорганизмов внутри лейкоцитов) – это характерный признак эрлихиоза и анаплазмоза. Морулы, однако, удается выявить не всегда: лишь в 3 % случаев моноцитарного эрлихиоза и 25-75 % случаев анаплазмоза. Чувствительность же ПЦР анализа достигает 85 % в отношении E. chaffeensis и 90 % в отношении A. phagocytophilum, что позволяет считать ПЦР самым точным среди быстрых методов диагностики клещевых инфекций.
- Высокая специфичность (60-85 %). Специфичность метода особенно важна для дифференциальной диагностики клещевых инфекций. Известно, что, например, серологические тесты на клещевые инфекции часто дают ложноположительный результат из-за наличия перекрестных реакций, обусловленных общими антигенными свойствами указанных микроорганизмов. Так как в ПЦР используются специфические для каждого из микроорганизмов праймеры, вероятность ложноположительного результата гораздо ниже.
Следует отметить ограничения метода ПЦР:
- Так как в реакции определяется ДНК как живых, так и погибших микроорганизмов, метод ПЦР не предназначен для оценки эффективности лечения: результат будет оставаться положительным еще в течение некоторого времени после начала эффективного лечения.
- Чувствительность ПЦР в меньшей степени, чем других методов идентификации возбудителя, зависит от приема антибиотиков. Наиболее точный результат, однако, будет получен при взятии образца биоматериала до начала лечения антибактериальными препаратами.
В диагностике клещевых инфекций также могут помочь дополнительные лабораторные исследования. Так, характерной чертой эрлихиозов является панцитопения и умеренное повышение печеночных трансаминаз. При тяжелом течении заболевания могу наблюдаться гипонатриемия, гипокальциемия, гипомагниемия, повышение креатинина и мочевины и признаки ДВС-синдрома.
Следует отметить, что иксодовые клещи также являются переносчиками вируса клещевого энцефалита. При необходимости это комплексное ПЦР-исследование может быть дополнено исследованием на вирус клещевого энцефалита.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики боррелиоза, моноцитарного эрлихиоза и анаплазмоза.
Когда назначается исследование?
- При наличии у пациента гриппоподобного синдрома (лихорадки, головной боли, миалгии и артралгии) в сочетании с указанием на укус клеща;
- при обнаружении у пациента с лихорадкой «лабораторных» признаков клещевых инфекций: панцитопения, повышение уровня печеночных трансаминаз.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Положительный результат:
- боррелиоз (Borrelia burgdorferi), моноцитарный эрлихиоз человека (Ehrlichia chaffeensis) и/или анаплазмоз человека (Anaplasma phagocytophilum).
Отрицательный результат:
- норма.
Важные замечания
- Исследование не предназначено для оценки эффективности лечения заболевания.
Также рекомендуется
[02-029] Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой и СОЭ
[06-010] Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
[06-003] Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
[07-092] Вирус клещевого энцефалита, IgM
[07-095] Вирус клещевого энцефалита, антиген (в ликворе)
Инфекционист, терапевт, врач общей практики.
Литература
- Ismail N, Bloch KC, McBride JW. Human ehrlichiosis and anaplasmosis. Clin Lab Med. 2010 Mar;30(1):261-92.
- Swanson SJ, Neitzel D, Reed KD, Belongia EA. Coinfections acquired from ixodes ticks. Clin Microbiol Rev. 2006 Oct;19(4):708-27.
Источник
