Анализ крови на гепатит в hbv

По оценкам эпидемиологов, в России около 5 млн человек имеют HBV вирус в крови. В мире эта цифра достигает 2 миллиардов, то есть, каждый четвертый житель планеты болен или является носителем вируса.

Вы знаете что такое HBV вирус?

ДаНет

Что такое HBV?

Аббревиатура HBV имеет более привычный русскоязычный аналог – ВГВ, что расшифровывается как «вирус гепатита В». Во многих случаях вирус и его антигены выявляют при бессимптомном носительстве. Хронический гепатит В приводит к фиброзу, циррозу, первичноклеточному раку печени.

Строение ДНК HBV

Вирус гепатита В состоит из 3 антигенов:

Поверхностный антиген (HBsAg) формирует оболочку вируса.
При заболевании анализ покажет высокие значения HBsAg.
Антиген инфекциозности (HBeAg) обеспечивает повышенную заразность HBV.
Ядерный, или сердцевидный антиген, тесно связанный с ДНК-полимеразой вируса (HBcAg, он же HBcorAg).

Молекула ДНК HBV состоит из двух цепочек, замкнутых в кольцо. Одна из цепочек полная, содержит около 3200 нуклеотидов. Другая цепь укороченная , в ней 1800-2800 нуклеотидов. За синтез белков и воспроизводство вирусных частиц отвечают последовательности ДНК. Ген Р кодирует полимеразу, ген С – HBcAg, ген S отвечает за HBsAg, ген Х формирует белок, регулирующий экспрессию генов.

Размножение HBV происходит в гепатоцитах – клетках печени. Элементы вируса оказываются в крови, слюне, сперме и других биологических жидкостях человека.

Анализ крови на HBV

Для диагностики заражения HBV применяют следующие исследования:

выявление антигенов вируса;
исследование антител к компонентам вируса гепатита В;
обнаружение ДНК HBV методом ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Анализ методом ПЦР очень чувствителен. Присутствие ДНК вируса в крови измеряют качественно или количественно.

Качественный анализ определяет присутствие или отсутствие HBV DNA (ДНК) в исследуемом образце. При положительном результате проводят количественное исследование, которое показывает концентрацию ДНК вируса. На основе результатов анализа делают прогноз перехода болезни в хроническую стадию. Если после 3-6 месяцев терапии концентрация HBV DNA не снизится хотя бы в 10 раз, схему лечения меняют.

Исследование методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) выявляет даже мутантные штаммы вируса. Анализы на антигены и антитела в этом случае не дадут полной картины. Какой-либо из антигенов при заражении мутантной инфекцией может отсутствовать, что приводит к неверному толкованию результатов.

Для исследования нужна венозная кровь. Требуется стандартная подготовка к сдаче крови из вены: накануне избегать жирной пищи и сильных нагрузок, за час до манипуляции не курить, минут 20 посидеть спокойно. Если кровь берут утром, явиться в лабораторию натощак. При сдаче анализа в другое время суток не есть хотя бы 4 часа.

Определение антител

В тех случаях, когда человек заражен немутантным вирусом HBV, анализ на выявление антител информативен. Изменения значений титров говорит не только о присутствии вируса гепатита в организме, но и о стадии заболевания или перенесенной инфекции в прошлом.

При заражении HBV для связывания антигенов вируса организм вырабатывает специфические антитела: anti-HBcor, anti-HBe, anti-HBs.

Анализ anti-HBcor сумм. включает anti-HBcor IgM и anti-HBcor IgG. Anti-HBcor IgM свидетельствуют об острой фазе болезни, anti-HBcor IgG говорят о перенесенной инфекции. Антитела к ядерному антигену (cor) классов M и G обнаруживаются при остром гепатите В ещё до желтухи или в первые дни проявлений болезни. Антитела М циркулируют в крови 3-5 месяцев, иногда сохраняются на протяжении года. Антитела G остаются на всю жизнь.

Anti-HBs-антитела появляются на этапе выздоровления. В зависимости от состояния иммунитета больного, этот период длится от месяца до года. Антитела к поверхностному антигену защищают от вируса. Их значение проверяют для оценки эффективности прививки от гепатита В.

Людям с высоким риском заражения HBV рекомендуется контроль титра Anti-HBs через 5 лет после вакцинации. Если уровень антител снижен, значит, пора ставить новую прививку.

Расшифровка результатов

Качественный анализ ПЦР имеет два возможных результата: ДНК вируса либо обнаружена, либо нет. Современные тесты выявляют инфекционный агент при концентрации от 100 МЕ/мл (международных единиц на миллилитр плазмы крови). Более низкие показатели считаются отрицательным результатом.

Чувствительность количественного теста выше. Результат представлен в МЕ/мл или количестве копий ДНК.
«отрицательно» – результат ниже границы чувствительности метода;
до 7,5*102 копий на мл – ДНК HBV выявлена ниже линейного диапазона концентраций;
до 105 копий ДНК на мл – умеренная виремия, решение о лечении принимают с учетом показателей функции печени;
более 105 – высокая вирусная нагрузка.
108 копий на мл – показатель выше линейного диапазона концентраций.

Как правило, при умеренной виремии после острого гепатита больной полностью выздоравливает. Концентрация ДНК HBV в пределах 2*104–2*106 приводит к хронизации заболевания в каждом четвертом случае. При более высоких показателях гепатит переходит в хроническую форму в 98-100% случаев.

200 копий ДНК соответствуют 90 МЕ/мл. Это значение – нижний порог чувствительности большинства амплификаторов (приборов, в которых происходит подсчет ДНК методом ПЦР). Зная соотношение, можно перевести результат из одной системы в другую.

Что делать, если HBV или антитела к вирусу обнаружены?

При назначении лечения врач руководствуется не только значениями маркеров гепатита в крови. Он учитывает значения билирубина, АЛТ и АСТ, при необходимости назначает биопсию или эластографию печени. Высокие шансы на полное выздоровление у тех, кто заразился и переболел острым гепатитом В будучи взрослым. Заражение в возрасте до 5 лет наиболее опасно.

Если результаты анализов говорят о носительстве HBV, потребуется контроль каждые 3-6 месяцев. Носитель должен позаботиться о безопасности близких: возможно заражение через зубную щетку, бритву, маникюрные инструменты. Малейшие травмы кожи следует закрывать пластырем.

Больным гепатитом также необходим повтор анализа крови каждые 3 месяца. По изменению в концентрации маркеров судят об эффективности терапии. При необходимости врач изменит схему лечения.

Положительный анализ на гепатит В – основание для проведения исследования на гепатит D. Последний более опасен, но не передается без HBV.

Заразность гепатита В почти в 100 раз выше, чем ВИЧ. К тому же, вирус очень устойчив во внешней среде. От заболевания убережет вакцинация. Курс прививок обеспечивает защиту на срок от 5 до 25 лет. Заболеть гепатитом от прививки невозможно, так как в вакцине нет ДНК вируса, есть только поверхностный антиген. Помимо вакцинации, для защиты от инфицирования нужно принимать такие меры:

правильно стерилизовать многоразовые инструменты, связанные с нарушением целостности кожи;
там, где возможно, применять одноразовые инструменты и иглы, следить за целостностью упаковки;
избегать контакта с биологическими жидкостями посторонних людей;
не пользоваться чужими средствами личной гигиены, никому не давать своих.

( 3 оценки, среднее 5 из 5 )

Источник

[09-009]
HBV, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

2890 руб.

Исследование для выявления возбудителя гепатита B (HBV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (ДНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

ДНК HBV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HBV, определяемых тест-системой, составляет 75,0 — 1,0*10^8 МЕ/мл.

Синонимы русские

Вирус гепатита В (ВГВ), количественное определение ДНК.

Синонимы английские

Hepatitis B Virus DNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood; HBV Viral Load; Hepatitis B Virus DNA Quant.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Единицы измерения

МЕ/мл (международная единица на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирусный гепатит В (ВГВ) – инфекционное заболевание печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV). Среди всех причин развития острого гепатита и хронической вирусной инфекции вирус гепатита В считается одной из самых распространенных в мире. Действительное количество инфицированных неизвестно, так как у многих людей инфекция протекает без специфических симптомов и за медицинской помощью они не обращаются. Нередко вирус обнаруживают при проведении профилактических лабораторных исследований. По приблизительным подсчетам, в мире около 350 миллионов человек поражено вирусом гепатита В и ежегодно от его последствий умирает 620 тысяч. В России количество носителей HBV превышает 5 миллионов человек.

Источник инфекции – больной ВГВ или бессимптомный вирусоноситель. HBV передается с кровью и другими биологическими жидкостями. Заразиться можно при незащищенном половом контакте, использовании нестерильных шприцев, переливании крови и пересадке донорских органов, ребенка может заразить мать во время или после родов (через трещины в сосках). В группу риска входят: медицинские работники, у которых возможен контакт с кровью пациента, пациенты, получающие гемодиализ, инъекционные наркоманы, люди, ведущие беспорядочную половую жизнь, дети, рождённые от матерей с ВГВ.

Инкубационный период заболевания – от 4 недель до 6 месяцев. Вирусный гепатит В может протекать как в виде легких форм, длящихся несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции. Основные признаки гепатита: желтушность кожных покровов, лихорадка, тошнота, утомляемость, в лабораторных анализах – нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. Считается, что после перенесенного ВГВ формируется стойкий иммунитет. Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.

Есть несколько специфических тестов для выявления существующего или перенесенного вирусного гепатита В. Для подтверждения наличия инфекции и уточнения периода заболевания используют определение антигенов вируса, антител к ним и ДНК вируса.

Полимеразная цепная реакция отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки позволяет оценить интенсивность развития болезни, эффективность проводимой терапии или развитие устойчивости к противовирусным препаратам.

Существует зависимость между концентрацией вируса в крови и исходом острого вирусного гепатита В. При низком уровне виремии вероятность перехода инфекции в хроническую форму близка к нулю, а инфицированный человек неопасен для окружающих. При высокой вирусной нагрузке (5 копий/мл) хронизация возникает часто и больной является потенциальным источником инфекции. Доказана связь между количеством ДНК вируса в сыворотке крови, присутствием HBeAg, повышенной АЛТ и развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы (рака печени).

Эффективность противовирусной терапии оценивается по уменьшению количества ДНК вируса в крови. Через 3-6 месяцев после начала лечения вирусная нагрузка при адекватном терапевтическом ответе должна уменьшиться на 1-2 порядка. Отсутствие уменьшения количества вируса или его увеличение на фоне проводимого лечения требует пересмотра и изменения терапии.

Количественное определение ДНК вируса гепатита В совместно с клинической картиной заболевания и биохимическими показателями, маркерами инфекции, а также результатом пункционной биопсии печени позволяет дать прогноз заболевания и оценить необходимость противовирусной терапии.

Для чего используется исследование?

Для прогнозирования течения вирусного гепатита В.
Для подтверждения хронической формы вирусного гепатита В.
Для выявления носителей вирусного гепатита В и мониторинга активности размножения вируса.
Для выявления скрытых и мутантных штаммов вируса гепатита В.
Для оценки эффективности противовирусной терапии гепатита В и принятия решения о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

При качественном обнаружении ДНК вируса гепатита В.
При остром и хроническом вирусном гепатите В.
При микст-гепатитах.
До и во время противовирусной терапии.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено

«Не обнаружено» – ДНК вируса гепатита В не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (50 МЕ/мл);
от 75 до 1,2*10^5 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена, низкая виремия;
от 1,2*10^5 до 1,2*10^6 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена, средняя виремия;
более 1,2*10^6 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена, высокая виремия;
> 1*10^8 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.

Линейный диапазон концентраций ДНК вируса гепатита В, определяемых тест-системой, составляет 75,0 — 1,0*10^8 МЕ/мл.

Важные замечания

Количественное определение ДНК вируса гепатита В является обязательным исследованием до назначения противовирусной терапии. Во время курса лечения анализ необходимо повторить через 3-6 месяцев.
Вирусный гепатит В нередко сочетается с вирусным гепатитом D.

Также рекомендуется

HBsAg
anti-HBc, IgM
anti-HBc, антитела
anti-HBe, антитела
anti-HBs, антитела
HBеAg
HBV, ДНК [реал-тайм ПЦР]
anti-HDV, антитела
Anti-HCV, антитела, ИФА
Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)
Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
Фосфатаза щелочная общая
Альбумин в сыворотке
Билирубин общий
Холестерол общий
Тромбиновое время
Фибриноген

Кто назначает исследование?

Инфекционист, гепатолог.

Литература

Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. — К.: Здоровье, 2000 – Т.1.: 601-654.
Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling, and others. Use of Hepatitis B Virus DNA Quantitation To Predict Hepatitis Be Antigen Reversion in Cases of Chronic Hepatitis B. J Clin Microbiol. 2003 October; 41(10): 4793–4795. PMCID: PMC294957
Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
Management of Hepatitis B. An NIH Consensus Development Conference. Program and Abstracts. October 20–22, 2008.

Источник

Гепатит Б – вирусное заболевание печени, опасное осложнениями. Возбудитель передается гематогенным и половым путем, заражение происходит в бытовых условиях, если частички инфицированной крови попадают на слизистые или в ранки. Вирус сохраняет жизнеспособность в течение недели в сухой среде, до полугода во влажной. Разрушается только при нагреве до температуры свыше 140 градусов или в дезинфицирующих растворах.

Выявить присутствие вируса визуально невозможно. Методы диагностики позволяют с высокой точностью установить инфекционную природу патологии печени. Это связано с природой ДНК-вируса. В нем содержатся особые белки, в ответ на них иммунитет вырабатывает антитела. По анализам на гепатит Б устанавливается факт заражения, стадия заболевания, динамика выздоровления, наличие иммунитета.

Что такое гепатит В?

Инфекция развивается по аутоиммунному принципу. Попадая в кровь, возбудитель достигает клеток печени, проникает в них, начинает размножаться. В период выхода из гепатоцита выделяет геном, который распознают иммунные клетки. Атакуя возбудитель, организм уничтожает собственную печень. Желтушность и другие симптомы появляются, когда секреторные функции паренхимы угасают, нарастает интоксикация организма.

Установить диагноз помогает исследование крови. Если результат на гепатит В положительный, делается оценка вирусной нагрузки. В зависимости от нее разрабатывается терапия, контролируется процесс формирования иммунитета. Повторное заражение исключено. Хроническая форма, требующая длительного лечения, возникает в 15% случаев.

Как в анализах обозначается гепатит B?

В международной классификации возбудители болезни обозначаются буквенными символами. Возбудитель гепатита вида В – HBV, на русском языке – ВГВ. Его присутствие в крови выявляют:

по промежуточному белку HBеAg, он содержится в оболочке вируса;
ядерному геному HBcAg, он появляется при активном делении HBV.

Эти символы встречаются в бланках.

Как пишут гепатит Б в анализах, когда в пробах находится вирус? В графе делается отметка «положительный», а рядом з буквенный символ HBеAg или HBcAg. В количественном анализе указывается числовой показатель в единицах измерения «копий/мл».

Какие анализы крови сдают при гепатите В и их расшифровка?

Заподозрить возбудитель можно по общему и биохимическому анализу крови. Печень выполняет очистительную функцию, при нарушении ее работы концентрация компонентов крови меняется. Факт присутствия гепатита Б в крови устанавливают маркерами, выявляющим гены ДНК-Серологическая проба выявляет вид возбудителя. Расшифровка анализа на гепатит В под силу медицинским работникам. Антигены и антитела встречаются в различных комбинациях в зависимости от фазы болезни, степени ее тяжести, состояния иммунитета.

Маркеры гепатита

На молекулярном уровне тестированием выявляются компоненты крови, появляющиеся в ее составе при заражении вирусом. Этот анализ крови на гепатит позволяет определить тип возбудителя. Для вида В характерны особые антигены и антитела. По ним специалистами определяется фаза течения болезни. Например, наличие антител IgM говорит об острой фазе заболевания, IgG появляются в процессе формирования иммунитета. Другие маркеры выявляют антигены и антитела разных типов, все они характерны для инфекции. На бытовом уровне достаточно знать, как в анализах обозначают гепатит В:

Anti-HBс-total или anti-НBcore-total – присутствие антител к HBV типа IgM и IgG;
HBs или Hepatitis B surface Antigen – австралийский антиген, характерный для HBV;
HBeAg и HBcAg – антигены HBV, свидетельствуют о делении вируса в клетках печени;
Anti-HBе и Anti-HBs – вид антител, вырабатываемых иммунитетом при инфицировании или после вакцинации.

ПЦР на гепатит В

Анализ методом ПЦР полимеразной цепной реакции позволяет выявить возбудитель. Он виден по качественному показателю: положительный говорит об инфицировании пациента. Количественная оценка указывается в числовом значении. HBV-DNA – показатель вирусной нагрузки. По нему определяют, борется ли организм с инфекцией, правильно ли выбран противовирусный препарат.

Биохимический анализ крови при гепатите В

Когда печень поражена вирусом, меняются показатели, возрастает:

концентрация ферментов аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), они появляются после разрушения гепатоцитов;
содержание ГГТ (гамма-глутамилтрансфераза), характерный признак интоксикации организма, вызывающей гибель гепатоцитов.
уровень билирубина.

Непрямой билирубин вызывает желтушность. Он связывается в паренхиме ферментами энзимами, трансформируется в водорастворимую форму (прямой билирубин). В таком виде выводится по желчным протокам.

Если присутствует гепатит А, анализы выявляют снижение уровня альбумина и общего белка, это говорит об угасании функции паренхимы. Гепатоциты выделяют ферменты, участвующие в белковом обмене, альбумин нужен для связывания билирубина, чтобы он из ядовитой непрямой формы в паренхиме перешел в прямую.

Клинический анализ крови

При подозрении на инфекционную природу заболевания на исследование сдаются моча и кровь. По ОАК определяют содержание эритроцитов и скорость их осаждения, превышение нормы говорит о воспалительном процессе. Уровень тромбоцитов позволяет поставить ориентировочный диагноз, так как при поражении гепатоцитов снижается свертываемость. По результатам общего анализа назначаются дополнительные исследования пациента.

Результаты анализа: положительный, отрицательный и ложноположительный

После проведения тестирования возможны три версии результатов на присутствие антигенов и антител:

Если проба на гепатит В положительная, что это значит? В пробах присутствуют антигены HBV. Сначала возрастает концентрация HBеAg, затем появляются HBсAg. Когда начинается процесс выздоровления, появляются антитела, вырабатываемые организмом для борьбы с вирусом. При хронической форме болезни выявляется австралийский антиген. Если результат положительный, определится концентрация возбудителя. Значительное превышение нормы говорит об остром течении заболевания.
Если возбудитель попал в организм, но его концентрация ничтожна или антигенов вообще нет в пробах, результат отрицательный. Это говорит, что инфицирования не было. Отсутствие возбудителя при наличии антител говорит о выздоровлении (инфицирование было, но на момент взятия проб пациент здоров).
Ложноположительный анализ на гепатит показывает присутствие возбудителя у здорового человека. Такое возможно, если:

пациент поставил прививку;
женщина беременная, у нее изменен гормональный фон;
развивается онкология;
были погрешности при заборе проб;
в организме присутствует другая инфекция;
ослаблен иммунитет;
имеются заболевания аутоиммунной природы.

Может ли быть ошибка в анализе на гепатит В?

Когда биологический материал обследуется в лицензированных лабораториях, вероятность механической ошибки мала. Она возникает при:

несоблюдении правил забора проб, их транспортировке, хранении (биологический материал нельзя прогревать до температуры свыше 20 градусов);
сбое в работе оборудования (отключении электроэнергии, изменение частоты, напряжения и силы тока);
ошибке или низкой квалификации лаборанта (не исключена путаница проб).

Неправильный результат возможен, если пациент не подготовлен к анализу. Накануне сдачи нужно умерить физические нагрузки, они способны спровоцировать сбой иммунитета. Важно правильно питаться, исключить алкоголь, газировку, копчености, консервации. Нельзя сдавать анализы после лучевой диагностики (рентгена, КТ, МРТ, УЗИ). Пробы берутся на голодный желудок, через 12 часов после последнего приема пищи. Лекарственные препараты, особенно иммуностимулирующие, также способны изменить результаты.

Источник