Анализ крови на боррелиоз в воронеже

Диагностика инфекционных заболеваний (ИФА) —

Сроки исполнения: 1 рабочий день*.
Биоматериал: кровь.

Описание:

Подготовка к исследованию: специальной подготовки не требуется

Справка: Антитела к возбудителю боррелиоза IgG в крови (клещевой системный боррелиоз или болезнь Лайма) — показатель инфицированности спирохетой Borrelia burgdorferi после укуса клещом.

Боррелиоз или болезнь Лайма названа по географическому расположению местности (г. Лайм, штат Коннектикут, США) в котором в 1975 году впервые обнаружили заболевание. Переносчиком являются клещи. Возбудитель инфекции — спирохета Borrelia burgdorferi. Источником инфекции являются многие виды диких и домашних животных (включая грызунов и птиц). Инфицированный человек не является источником инфекции для другого человека. Механизм передачи возбудителя трансмиссивный — при укусе клеща.
Инкубационный период занимает от 2-х до 32 дней. Начальный этап болезни, длящийся до 4-5 недель, характеризуется лихорадкой, недомоганием и мышечными болями. На месте укуса клеща развивается, увеличивающаяся в размерах, эритема (в среднем через 7 дней). На втором этапе, длящемся от 2-й до 22-й недели возможно развитие неврологических симптомов — радикулоневриты, серозный менингит, невриты черепных нервов. Возможны осложнения со стороны сердечно-сосудистой системы, проявляющиеся миокардитом, перикардитом, нарушением предсердно-желудочковой проводимости. На поздних этапах, начиная с 6-й недели, могут развиться суставные и кожные проявления болезни.

Показания к назначению: подтверждение диагноза болезни Лайма (боррелиоза), клиническая картина сходная с боррелиозом (лихорадка, эритематозная мигрирующая сыпь, симптомы асептического менингита, неврологические нарушения, артриты неясной этиологии и другие).

Единицы измерения: тест качественный, результат выдается в терминах «положительно» и «отрицательно».

Нормальные показатели: в норме антитела к Borrelia burgdorferi IgG в крови отсутствуют.

Интерпретация результатов:

Содержание антител класса IgG увеличивается в крови через 4-6 недель после появления эритемы. На ранних стадиях Лайм-боррелиоза достаточно часто регистрируются ложноотрицательные результаты. Уровень антител в крови больных повышается достаточно медленно, что является особенностью боррелиозной инфекции, а чувствительность серологических тестов не позволяет выявить в это время их низкое количество. По мере прогрессирования заболевания возрастает число сероположительных результатов исследований (IgG обнаруживаются в 70% случаев). Наиболее активно выработка антител класса IgG происходит при диссеминации возбудителей, а также у пациентов с хроническим течением Лайм-боррелиоза. Повышенное содержание антител может оставаться в течение нескольких месяцев и лет. Разовое определение антител IgG не имеет существенного диагностического значения, так как может указывать на ранее перенесенную инфекцию. Диагностическое значение имеет определение парных сывороток взятых с интервалом 4-6 недель. Уменьшение содержания антител является показателем выздоровления.

Отдельные случаи серонегативного Лайм-боррелиоза у больных с прогрессирующим течением заболевания и определенными клиническими проявлениями боррелиоза обусловлена во многом состоянием иммуносупрессии этих пациентов.
Ложноположительные результаты (высокие значения) при определении антител класса IgG в ряде случаев могут быть получены при инфицировании человека сифилисом (антитела к спирохетам) и возвратному тифу.

Положительный результат теста:

• инфицирование Borrelia burgdorferi и развитие клинический картины болезни Лайма;
• болезнь Лайма, перенесенная в прошлом;
• ложноположительные неспецифические результаты (при инфекционном мононуклеозе, гепатите В, системной красной волчанке, сифилисе, возвратном тифе).

Отрицательный результат теста:

• инфицирование Borrelia burgdorferi не было;
• низкий титр антител в начале заболевания.

Информация об исследовании

Исследование иксодового клеща методом ПЦР на наличие генетического материала возбудителей боррелиоза (болезни Лайма), вирусного клещевого энцефалита, моноцитарного эрлихиоза, гранулоцитарного анаплазмоза. Формат представления результатов качественный.

Возбудитель клещевого энцефалита – РНК-содержащий вирус семейства Flaviviridae. Заражение происходит трансмиссивным путем при укусе клеща, инфицированного вирусом. В редких случаях возможно заражение алиментарным путем: при употреблении в пищу не прошедших термическую обработку продуктов из молока коров или коз, инфицированных вирусом. Возбудитель не передается от человека человеку.

Инфекция поражает клетки нервной ткани, в том числе оболочку головного мозга, серое и белое вещество, спинной мозг, а также клетки других тканей. Этим обусловлено множество форм клинического проявления заболевания. Начинается болезнь, как правило, остро со стремительным нарастанием выраженности симптомов:

• чувство озноба из-за высокой температуры (38–39 оС);
• сильная слабость, сонливость, заторможенность;
• боли в мышцах шеи, спины, поясничной области, рук и ног;
• подергивания или дрожь конечностей;
• возможно чувство онемения конечности без потери двигательной функции;
• ригидность затылочных мышц (невозможность согнуть голову и достать подбородком до груди).

Наиболее тяжелые формы клещевого энцефалита могут начинаться появлением бреда, внезапной потерей сознания, генерализованным судорожным синдромом, как при эпилепсии.

Выявление возбудителя клещевого вирусного энцефалита в клеще позволит своевременно провести экстренную профилактику инфекции. Применение противоэнцефалитной сыворотки показано в срок не позднее 96 часов от момента укуса. При этом инкубационный период инфекции, как правило, составляет 7–12 дней от момента присасывания клеща, но может длиться до 35 дней. 
Перечень административных территорий субъектов Российской Федерации, эндемичных по клещевому вирусному энцефалиту в 2019 г.:

Лайм-боррелиоз – это самая распространенная болезнь на Европейском континенте, передаваемая иксодовыми клещами. Болезнь Лайма может длительное время протекать бессимптомно. Первые жалобы на недомогание могут появиться спустя месяцы или годы после заражения. Боррелии способны поражать различные органы и системы органов: суставы, миокард, органы центральной нервной системы и др. Этим обусловлена неспецифичность симптомов. К наиболее частым относят жалобы на боли в суставах.

Характерное для боррелиоза клиническое проявление – блуждающая эритема. Это покраснение на коже вокруг места укуса клеща, которое со временем расширяется и выглядит как кольцевидное красное пятно, в центре которого кожный покров сохраняет естественный цвет. Блуждающая эритема появляется в первые дни после укуса, однако ее отсутствие не исключает факта заражения боррелиями.

Возбудитель гранулоцитарного анаплазмоза человека – бактерия Anaplasma phagocytophilum, которая поражает гранулоциты – белые клетки крови. Заражение происходит трансмиссивным путем при укусе клеща, инфицированного анаплазмами. Инфицированность клещей анаплазмозом в европейской части России достигает 13,4%.

Клинические проявления неспецифичны и зависят от возраста человека, а также сопутствующих заболеваний. Как правило, это лихорадка, слабость, потливость, головная боль, боль в мышцах и суставах. Реже – кашель, тошнота и рвота, диарея. У инфицированных отмечают увеличение крупных лимфатических узлов, поражение почек, увеличение печени и селезенки. Возможно также воспаление оболочек головного и спинного мозга.

Инкубационный период в среднем составляет 14 дней. Болезнь протекает в тяжелой форме у пожилых людей и лиц с ослабленным иммунитетом.

Возбудители моноцитарного эрлихиоза – бактерии, относящиеся к роду Ehrlichia. Они попадают в организм человека со слюной клеща, проникают в кровоток и начинают размножаться в моноцитах (одной из разновидностей белых клеток крови) и в эпителиальных клетках, выстилающих внутреннюю поверхность кровеносных сосудов. Позже поражаются клетки других органов и тканей.

Симптомы эрлихиоза неспецифичны и схожи с симптомами гранулоцитарного анаплазмоза. При тяжелом течении болезни отмечают поражение кожи, печени, почек, центральной нервной системы, костного мозга.

Подготовка к исследованию

Использованная литература

• Клещевой вирусный энцефалит у взрослых. Клинические рекомендации Национального научного общества инфекционистов, 2014 г.
• https://www.rospotrebnadzor.ru/about/info/predpr/news_predpr.php?ELEMENT_ID=14010&sphrase_id…
• Болезнь лайма у взрослых. Клинические рекомендации Министерства Здравоохранения Российской Федерации, 2016 г.
• Климова Ю.А. и соавт. Гранулоцитарный анаплазмоз человека// Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Медицина, 2018 г.
• Злобин В.И. Клещевые трансмиссивные инфекции // В.И. Злобин, Н.В. Рудаков, И.В. Малов. – Новосибирск: Наука, 2015. – 224 с.

Серологический показатель ранних стадий инфекции спирохетами Borrelia.

Боррелиоз или болезнь Лайма (по названию местечка, в котором в 1975 г. было впервые выявлено заболевание) – распространённая, переносимая клещами инфекция. Возбудитель – очень маленькая спирохета Borrelia burgdorferi, единственная из всех боррелий патогенная для человека. Хозяевами являются многие позвоночные животные: собаки, овцы, птицы, коровы и лошади, но основной хозяин и переносчик – иксодовые клещи, у которых инфекция длится на протяжении всей жизни клеща. В России — это I.ricinus и I.persulcatus. Заболевание характерно для весенне-летнего периода. Чаще наблюдается в Московской, Ленинградской, Тверской и других, преимущественно северных областях, а также в Прибалтике.

Заболевание системное, имеющее 3 стадии:

• I стадия возникает через одну неделю после укуса клеща и длится от 3 до 33 дней. Для неё характерна лихорадка и мигрирующая эритема. Если терапию начинают в этой стадии, то дальнейшее развитие заболевание удаётся предотвратить.
• Через 4 недели после укуса развивается II стадия. Для неё характерны поражение сердца и неврологическая «триада»: асептический менингит, паралич лицевого нерва и периферические невропатии.
• Через 6 недель, а иногда через несколько лет у нелеченных больных развиваются тяжёлые поражения суставов.

Лабораторная диагностика. При классической картине мигрирующей эритемы диагноз ставится по клиническим признакам, в остальных случаях его подтверждают лабораторными методами. Посев, выявление антигена возбудителя и гистологическое исследование кожи недостаточно чувствительны и специфичны, гистологическое исследование, кроме того, инвазивно. Поэтому диагноз подтверждают, в основном, серологическими методами — выявлением в крови специфических IgG и IgM антител к возбудителю (в лаборатории ИНВИТРО, соответственно, тесты № 243 и 244).

ПЦР-тестирование на наличие генетического материала возбудителя в данном случае малоэффективно, но используется при необходимости у пациентов с отрицательными результатами серологических тестов, но вескими клиническими подозрениями на инфицирование, а также у пациентов с иммунодефицитом.

Специфические антитела  к Borrelia burgdorferi начинают обнаруживаться  на 2-4 неделе после начала инфекции (сначала IgM,  потом IgG), максимальное количество IgG синтезируется через 1,5 — 3 месяца после инфицирования. Антитела к Borrelia burgdorferi часто не выявляются на ранней, локализованной стадии заболевания или при рано назначенной антимикробной терапии. Таким образом, отрицательный результат серологических тестов на ранних стадиях инфекции не является подтверждением её отсутствия и требует перепроверки в динамике через 2 — 4 недели. На диссеминированной и хронической стадиях специфические антитела к возбудителю имеются практически всегда.

Антитела класса IgG циркулируют в крови длительный срок (от нескольких месяцев до нескольких лет), даже после успешной антимикробной терапии и излечения инфекции. Поэтому по присутствию и титру антител об успехе лечения судить нельзя. Иммунитет против Borrelia burgdorferi не является стерильным. У переболевших людей возможно повторное заражение через несколько лет. Выявление антител к Borrelia burgdorferi не всегда сопровождается клиническими признаками болезни Лайма.

По оценкам, специфичность ИФА тестирования антител к Borrelia burgdorferi в настоящее время достигает 95% (т. е. неспецифические реакции, перекрёстное реагирование с антигенами других бактерий могут примерно в 5% случаев давать ложноположительные результаты). В сомнительных случаях для подтверждения результатов ИФА-тестов используют иммуноблот.

Литература

1. Инфекционные болезни у детей. Ред. Д. Марри. М. Практика, 2006. 928 с.
2. Материалы фирмы – производителя реагентов.
3. В.И. Офицеров Лайм-боррелиоз и его диагностика. Новости «Вектор-Бест» № 2 (28). Июнь 2003.
4. Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B.- USA,W.B Sounders Company, 2006. 1798 p.

Стадия 3 болезни Лайма или хронический боррелиоз

Для хронической болезни Лайма характерен Лайм-  артрит – это периодическое воспаление крупных суставов (коленных, тазобедренных, плечевых), редко поражаются мелкие суставы.

Суставы опухшие, умеренно болезненные, кожа над ними не изменена.
Приступы артрита длятся от нескольких недель до нескольких месяцев с периодами полной ремиссии между ними.
Суставная жидкость содержит до 500 клеток в кубическом миллилитре, чаще лейкоциты, характерна положительная ПЦР (чувствительность 80%)
Даже без лечения процесс может самостоятельно разрешаться в течение нескольких лет. Основной метод диагностики 3 стадии болезни Лайма – нахождения антител к боррелиям.
Хронический атрофический акродерматит характеризуется появлением на коже конечностей чаще стоп или кистей красно – фиолетовых пятен с последующим развитием атрофии кожи.
Развивается через несколько лет после укуса клеща.
Кожа истончена, морщинистая, легко собирается в складки, шелушится, имеет вид папиросной бумаги, иногда со склеродермоподобными уплотнениями.

Нейроборрелиоз

Типичные проявления раннего нейроборрелиоза:

• Изолированный неврит черепных нервов
• Асептический менингит
• Радикулоневрит
• Менингорадикулоневрит

Поздний  нейроборрелиоз протекает как:

•  Хронический менингит длительностью более 1 месяца
• Рассеянный энцефаломиелит
• Лайм – энцефалит

Особенностями менингита при раннем нейроборрелиозе является:
Умеренно выраженные головные боли без лихорадки, тошноты и рвоты. Нечетко выраженные или вовсе отсутствующие объективные менингеальные знаки. Изменения в ликворе: лимфоцитарный плеоцитоз, умеренно повышенный белок и нормальная глюкоза
При исследовании бывают всегда положительные серологические реакции. Для менингита характерно наличие специфических антител в ликворе ( чувствительность метода 30- 70% )
Нередко положительная ПЦР с ликвором (низкая чувствительность)

Ретикулопатия при болезни Лайма

Характерны мигрирующие жгучие боли в межлопаточной области спины, часто иррадиирущие в верхние или нижние конечности, область груди или живота.
Могут имитировать корешковые боли другого генеза, плексопатии или миофасциальные боли
Боли более выражены в ночное время и иногда сопровождаются наличием мигрирующих фрагментарных участков гиперестезии.
При отсутствии других клинических проявления для диагностики болезни Лайма важен эпиданамнез (факт присасывания клещи или пребывание в высоко эндемичной по клещевому боррелиозу области)

Поздний нейроборрелиоз: рассеянный энцефаломиелит.

Характеры спастический парапарез, атаксия
Нарушения функции тазовых органов, чаще дисфункция мочевого пузыря
Краниальные нейропатии
Когнитивные нарушения
Изменения на МРТ головного мозга
Не характерно поражение спинного мозга
Изменения в ликворе (невысокий плейоцитоз, умеренное повышение белка)
Всегда положительные серологические реакции
Продукция специфических интратекальных антител.
ПЦР ликвора – низкая чувствительность 20 -40%

МРТ – картина болезни Лайма и рассеянного склероза не имеют специфических признаков, позволяющих дифференцировать данные состояния.

Необходимо исключать клещевой боррелиоз у всех пациентов с подозрением на рассеянный склероз и другие демиелинизирующие заболевания, особенно в случае:

•  Наличия эпидемиологических предпосылок (проживание в эндемичной по болезни Лайма местности, многократное присасывание клещей в анамнезе)
• Если пациент с демиелинизирующим поражением ЦНС не укладывается в общепринятые критерии рассеянного склероза
• Рефрактерности к проводимой терапии демиелинизирующего заболевания ЦНС

Поздний нейроборрелиоз : Лайм – энцефалопатия .

Всегда положительные серологические реакции
Патологические изменения в ликворе либо отсутствуют, либо слегка повышен белок.
Наличие специфических интратекальных антител

В эндемичных по болезни Лайма регионах следует помнить о возможности боррелиозной этиологии церебрального васкулита и острого нарушения мозгового кровообращения в случае:

• Васкулита и рецидивирующего острого нарушения мозгового кровообращения, особенно у пациентов молодого возраста при отсутствии других явных причин.
• Васкулита с преимущественных поражением вертебро –базиллярной системы кровоснабжения головного мозга
• В случае эпидемических предпосылок, анамнестических их и клинических данных, указывающих на возможность клещевого боррелиоза

Диагностика болезни Лайма

Бактериологический метод – трудоемкий

Серологические методы:

• РНИФ
•  ИФА
• иммуноблот – иммунный чип
• определение интратекальных антител в ликворе

Молекулярно – генетический ПЦР ( синовиальная жидкость, ликвор, чувствительность 20-40-60% )

Антитела боррелий в моче

Иммуноблот при отрицательном результате ИФА бесполезен!!!

1. Критерии для интерпретации иммуноблота были разработаны для пациентов, имеющих позитивный или сомнительный результат ИФА, в их отсутствии фоновая кросс – реактивность антител, присутствующая практически у каждого пациента, делает тест не интерпретируемым.
2. При создании иммуноблота с целью повышения его чувствительности и специфичности критерии интерпретации выбираются не на основе сочетания антител к уникальным белкам возбудителя, а на основе статистически значимой разности тех или иных антител у пациентов, больных болезнью Лайма , по сравнению со здоровыми пациентами.

Удаление клеща

При помощи хлопчатобумажной нитки
Завязывают нитку в узел, как можно ближе к хоботку, затем закручивая концы нити при помощи кругового движения, извлекают клеща, аккуратно подтягивают его вверх
Пинцетом клеща захватывают как можно ближе к хоботку и аккуратно вытаскивают, вращая вокруг своей оси в удобную сторону. Нельзя надавливать на брюшко, так как возможно выдавливание его содержимого вместе с возбудителем в ранку.

Профилактика клещевого боррелиоза

Избегать укусов клещей при посещении леса и лесопарковых зон, работе на приусадебных участках (закрытая одежда, репелленты, само и взаимоосмотры)
В случае укуса клеща – доксициклин 200 мг однократно в первые 72 ч от момента присасывания клеща (эффективность 87 – 95%)
Наблюдать за местом присасывания клеща в течение 1 месяца, при появлении мигрирующей эритемы – схема лечения
Обследование клещей на наличие боррелий имеет сомнительную практическую ценность, замедляет назначение постконтактной профилактики и не коррелирует с вероятностью инфицирования возбудителем