Анализ крови на антитела коревой краснухи

Анализ крови на антитела коревой краснухи thumbnail

Метод определения
Иммуноферментный анализ (ИФА).

Исследуемый материал
Сыворотка крови

Индикатор наличия иммунитета к вирусу краснухи.

Антитела класса IgG к вирусу краснухи начинают вырабатываться через 3 — 4 недели с момента инфицирования и выявляются после окончания острого заболевания пожизненно, обеспечивая защиту от повторной инфекции. Выявление аnti-Rubella-IgG в концентрации менее 10 Ед/мл говорит об их недостаточном уровне для предохранения от клинических проявлений заболевания при экспозиции к вирусу краснухи или отсутствии.

Уровень аnti-Rubella-IgG более 10 Ед/мл рекомендован как показатель наличия иммунитета к данному вирусу. Определение титров аnti-Rubella-IgG в динамике (в парных исследованиях с интервалом 2 — 3 недели) используют при необходимости для подтверждения недавней инфекции вирусом краснухи (дополнительно к определению аnti-Rubella-IgМ). Достоверный рост титров IgG говорит об остроте процесса. Положительные результаты определения аnti-Rubella-IgG при тестировании пуповинной крови или крови новорожденных надо трактовать с осторожностью, поскольку специфические IgG могут передаваться плоду от матери через плаценту.

Особенности инфекции. Краснуха — острое вирусное инфекционное заболевание, которое может протекать в типичной, стёртой и асимптомной формах. Вирус краснухи во внешней среде нестойкий, поэтому для заражения требуется достаточно длительный и тесный контакт с больным. Передача инфекции происходит воздушно-капельным путём и трансплацентарно (от матери к плоду). Болеют в основном дети 1 — 7 лет. При инфицировании беременной женщины возникают тяжёлые пороки развития или самопроизвольное прерывание беременности. При передаче воздушно-капельным путём вирус поражает эпителиальную ткань верхних дыхательных путей, попадает в кровяное русло, затем — в лимфатические узлы, где происходит его репликация. Инкубационный период длится 15 — 21 день.

У детей заболевание протекает относительно легко. Начинается с увеличения лимфатических узлов в области шеи и затылка, через 1 — 5 дней на лице появляется мелкопятнистая сыпь размером до 5 мм (не возвышающейся над поверхностью кожи). В течение суток сыпь распространяется сверху вниз на разгибательные поверхности конечностей, спину, ягодицы. Присоединяется незначительная лихорадка, катар верхних дыхательных путей. Через 1 — 3 дня элементы сыпи бесследно исчезают.

У взрослых краснуха протекает тяжелее, чаще развиваются осложнения. Самое частое — полиартрит, длящийся 1 — 2 недели. Энцефалит возникает реже (1:5000), однако летальность в этом случае составляет 20 — 40%. Энцефалит может предшествовать сыпи на 1 — 12 дней, но чаще развивается на 3 — 4 сутки появления сыпи.

При трансплацентарной передаче вирус поражает эндотелий капилляров плаценты, вызывая гипоксию плода, затем — эмбриональные ткани, где подавляет митотическую активность отдельных популяций клеток. Если первичное инфицирование краснухой происходит в течение первых 12 недель беременности, вирус переходит через плаценту и вызывает генерализованную и персистирующую инфекцию плода, которая почти всегда вызывает мультисистемное заболевание и врождённые пороки развития. При инфицировании в более поздние сроки беременности (13 — 16 недели и позже) частота развития дефектов у внутриутробно инфицированных младенцев снижается, но определённая опасность сохраняется вплоть до третьего триместра.

Срок инфицированияПороки развития
3 — 11 неделяЦентральная нервная система
4 — 7 неделяОрган зрения, сердце
7 — 12 неделяОрган слуха

Особое значение лабораторная диагностика краснухи имеет у следующих категорий обследуемых:

КатегорияПричины
Женщины, при подготовке к беременности1. Латентное течение в детском возрасте (диагноза нет — иммунитет есть);

2. Ошибки дифференциальной диагностики краснухи (диагноз есть — иммунитета нет;

3. Решение вопроса о вакцинировании.

Беременные женщиныВрожденная краснуха, пороки развития, гипотрофия плода.
ВзрослыеТяжелое течение, осложнения.

ВАЖНО! Краснуха входит в группу TORCH-инфекций (название образовано начальными буквами в латинских наименованиях — Toxoplasma, Rubella, Cytomegalovirus, Herpes), считающихся потенциально опасными для развития ребенка. В идеальном случае проконсультироваться с врачом и пройти лабораторное обследование на TORCH-инфекции женщине нужно за 2 — 3 месяца до планируемой беременности, поскольку в этом случае будет возможность предпринять соответствующие лечебные или профилактические меры, а также при необходимости в будущем сравнить полученные результаты исследований до беременности с результатами обследований во время беременности.

Источник



Краснуха — одно из самых опасных заболеваний для беременных женщин. В других случаях болезнь обычно протекает относительно легко. Однако для беременных риск очень велик, особенно при заражении в первом триместре — крайне высока вероятность серьезных патологий плода и даже его гибели. Кроме того, для краснухи характерны разнообразные и тяжелые осложнения. Поэтому к диагностике краснухи и проведению вакцинации нужно отнестись со всей возможной ответственностью.

Краснуха: что это за болезнь и в чем особенности ее диагностики

Краснуха — вирусное инфекционное заболевание, которое вызывается вирусом Rubella. Он передается воздушно-капельным путем, а также через плаценту от матери к плоду. Чаще всего краснухой болеют маленькие дети в возрасте 4–7 лет. При попадании в организм вирус поражает клетки крови — эритроциты, он также оказывает влияние и на нервные волокна.



На заметку




Замечено, что эпидемии краснухи случаются регулярно, примерно каждые 7 лет, причем пик заболеваемости приходится на конец весны–начало лета. После повсеместного внедрения вакцинации количество случаев краснухи резко снизилось, однако она до сих пор остается распространенной болезнью.

Симптомы краснухи очень похожи на признаки ОРВИ — слабость, покраснение и отек гортани, насморк, конъюнктивит, высокая температура (около 38 °C), увеличение лимфатических узлов. Однако через несколько дней на теле больного появляется нехарактернаядля респираторных заболеваний сыпь — небольшие красные пятнышки, результат разрушения мелких капилляров.

Обычно прогноз благоприятный, хотя в редких случаях развиваются такие осложнения, как артрит, энцефалит и нарушения свертываемости крови.

Но наиболее опасна краснуха для беременных женщин. Особенность заболевания в том, что она оказывает очень серьезное влияние на плод, и чем меньше срок, на котором будущая мама переболела краснухой, тем выше риск патологий у плода. При инфицированиина сроке 3–4 недель патологии выявляются у 60–80% новорожденных. Среди последствий врожденной краснухи — пороки сердца, катаракта, недоразвитость глазных яблок, микроцефалия, глухота и умственная отсталость. Риск гибели плода и новорожденногоребенка в таких случаях очень велик. Чем раньше произошло заражение, тем более тяжелыми будут последствия. Впрочем, иногда они проявляются не сразу — ребенок рождается здоровым, но со временем патологии начинают проявляться.

Риск так велик, что при инфицировании краснухой на самых первых неделях беременности может быть рекомендовано ее искусственное прерывание. Если же будущая мама заразилась во втором или третьем триместре, необходимо УЗИ-исследование плода для контроляза развитием патологий.

Проблема диагностики краснухи состоит в том, что ее нетрудно принять за ОРЗ, энтеровирусную инфекцию, корь или аллергическую реакцию. Кроме того, в некоторых случаях у беременных краснуха протекает почти бессимптомно. Для постановки диагноза необходим анализ на краснуху. Причем желательно пройти несколько исследований.

Когда сдают анализ на краснуху

Анализ на краснуху необходимо сделать при планировании беременности. Если анализ не выявит наличие антител (то есть иммунитета к краснухе), потребуется сделать прививку. И если беременность наступит спустя 2–3 месяца после вакцинации, никаких проблем не будет.

Анализ на краснуху также следует сдать при возникновении симптомов этого заболевания. Как уже было сказано, краснуха очень похожа на многие другие заболевания, и для выбора действенной терапии необходимо точно установить возбудителя болезни.

Его также назначают при увеличении лимфоузлов — иногда этот симптом является единственным проявлением краснухи.

Кроме того, рекомендуется сдать анализ на краснуху, если недавно вы контактировали с носителем инфекции.

Как подготовиться к исследованию

Биоматериалом для проведения анализа на краснуху является кровь. Ее сдают утром натощак (перед сдачей анализа можно пить воду). Как минимум за сутки до исследования следует отказаться от алкоголя, жирной пищи, сауны и других процедур, повышающих температуру тела, а также физических нагрузок. Анализ на краснуху желательно делать через 2 недели после окончания курса медикаментозной терапии — некоторые препараты могут повлиять на результат. Если же это невозможно, следует заранее предупредить врача, что вы принимаете лекарства, не забыв указать их дозировку.

Процедура забора биоматериала и методы исследования

Чаще всего для анализа на краснуху берут кровь из вены, хотя в некоторых случаях — при подозрении на внутриутробное инфицирование — берут кровь из пуповины или исследуют околоплодные воды. На сегодняшний день при диагностике краснухи используются три лабораторных методики:


Серологический метод

Серологический анализ на краснуху позволяет выявить антитела к этому заболеванию в крови у пациента. Однако он не дает информации о типе антител, а это очень важно для определения стадии болезни, так как на разных этапах соотношение антител групп А и G меняется. Серологический метод при диагностике краснухи применяется все реже из-за не особенно высокой точности — всего около 75%. Результаты можно получить через 1–3 дня.


ИФА

Иммуноферментный анализ (ИФА) считается более точным и чувствительным методом диагностики. Этот способ не просто показывает факт наличия антител, но и позволяет определить их тип и таким образом выяснить, как давно произошло заражение, а также определить этап болезни. Результаты исследования выдают на руки через 1–2 дня.


ПЦР

ПЦР (полимеразная цепная реакция) — один из самых современных и высокочувствительных методов. При помощи ПЦР можно выявить вирус даже на самой ранней стадии заражения, еще до возникновения первых симптомов. При проведении анализа по методу ПЦР фрагмент РНК многократно копируется и затем идентифицируется. Обычно ПЦР назначают для уточнения результата, полученного методом ИФА. Результаты будут готовы на следующий день.

Как прочитать результаты

Результаты анализа на краснуху интерпретирует врач, который учитывает не только результат как таковой, но и множество дополнительных факторов. Мы приводим принципы расшифровки анализов на краснуху только для общей информации, но никак не для самостоятельной постановки диагноза.


Серологический метод

Единицей измерения результата служит индекс авидности IgG антител. < 0,4 — означает возможность заражения краснухой в течение последних 3–4 мес.> 0,6 — позволяет исключить заражение в течение последних 3–4 мес. 0,4–0,6 — сомнительный результат, при котором рекомендовано пройти исследование еще раз через 2 недели.


ИФА

При диагностике краснухи методом ИФА учитывается наличие антител разных типов. Если в бланке указано IgM-, IgG-, значит, заражения и антител нет, и пациенту требуется вакцинация от краснухи. IgM-, IgG+ указывает на ранее перенесенную инфекцию и наличие иммунитета к этому заболеванию. Результат IgM+, IgG- говорит о наличии краснухи, причем болезнь находится на раннем этапе. IgM+, IgG+ — это острая краснуха.


ПЦР

Результат, обозначенный как «не обнаружено» или «отрицательно», означает, что РНК вируса не обнаружено. То есть пациент либо здоров, либо с момента заражения прошло слишком мало времени — хотя высокая чувствительность метода позволяет выявлять заболевание даже на ранней стадии. «Положительно» или «обнаружено» говорит о наличии РНК вируса, то есть о том, что человек инфицирован.

Сколько стоит исследование

Стоимость анализов в коммерческих лабораториях зависит от двух основных факторов — уровня клиники и скорости выдачи результатов. Разумеется, что цена в комфортных лабораториях, расположенных в самом центре столицы, всегда несколько выше, чем в маленьких лабораториях на окраинах. Впрочем, в сетевых лабораториях этой разницы может и не быть.

Результаты обычно выдают на руки через 1–3 рабочих дня. Но если вам необходимо получить их в день обращения, будьте готовы доплатить за скорость обработки. Такую услугу предоставляют не все лаборатории.

ИФА на краснуху в коммерческих диагностических лабораториях Москвы стоит примерно 550–750 рублей.

ПЦР стоит около 700–900 рублей.

Серологический анализ обойдется в 1200–1500 рублей.

Стоимость забора материала составляет 200–300 рублей.

Где сдать биоматериал на анализ на краснуху

Анализы на краснуху делают как в государственных, так и в коммерческих диагностических лабораториях. Многие предпочитают второй вариант — занятым горожанам проще заплатить невысокую цену, но сдать анализ в удобно расположенном отделении лаборатории, в комфортное для них время, избежав очередей и прочих «прелестей» бесплатной медицины.

В столице работают сотни лабораторий, но как выбрать надежную?

Доверия заслуживают крупные сетевые лаборатории, у которых есть средства на покупку дорогостоящего современного оборудования. В наши дни проведение анализов — высокотехнологичный процесс, и от качества техники и материалов зависит многое. Не менее важен и контроль качества. Многие анализы, в частности ПЦР, требуют неукоснительного соблюдения технологии забора и исследования биоматериала, малейшая ошибка может сказаться на результатах. Поэтому, выбирая лабораторию, поинтересуйтесь, как там контролируют качество работы.

Сочетание разных диагностических методов позволяет определить наличие инфекции и иммунитета к ней практически со стопроцентной достоверностью. Помните о том, что краснуха лечится, а вакцинация против этой болезни переносится легко. А вот само заболевание во взрослом возрасте может иметь довольно тяжелое течение и последствия. Краснуха — типичный пример болезни, предупредить которую намного легче и дешевле, чем лечить.

Источник

Комплексное исследование, направленное на диагностику кори, краснухи, эпидемического паротита, а также используемое для оценки эффективности вакцинации против данных заболеваний.

Синонимы русские

Вирусные инфекции дыхательных путей; корь, краснуха, эпидемический паротит; комплексная серологическая диагностика.

Синонимы английские

Viral respiratory tract infections; measles, rubella, mumps; comprehensive serological diagnostics.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Корь, краснуха и эпидемический паротит являются высококонтагиозными инфекционными заболеваниями дыхательных путей, в лабораторной диагностике которых большое значение имеет специфическая серологическая диагностика.

Корь представляет собой острую антропонозную вирусную инфекцию, поражающую детей, подростков и взрослых людей, и даже может являться причиной детской смертности. Возбудителем является РНК-содержащий вирус, относящийся к роду Morbilivirus семейства ParamyxoviridaeИнфекция передаётся преимущественно воздушно-капельным путём. Основные клинические проявления кори: лихорадка, ринит, ларингит, сухой кашель, конъюнктивит и экзантема. Экзантема при кори носит яркий характер, тенденцию к слиянию высыпных элементов, этапность распространения и угасания с области лица на шею, верхнюю часть груди, а далее на туловище и конечности. У 15-20 % людей, заболевших данным заболеванием, возможно развитие серьезных осложнений. К ним относятся стоматит, трахеит, пневмония, отит, энцефалит, менингит, менингоэнцефалит, энтерит, колит, пиелонефрит. При заболевании корью беременных женщин могут развиться осложнения в виде выкидыша или преждевременных родов.

Диагностика кори основана на клинико-эпидемиологических данных, результатах изменений в клиническом анализе крови, общем анализе и подтверждается лабораторными методами. В серологической лабораторной диагностике главным образом применяется выявление специфических антител к вирусу. Для подтверждения диагноза необходимо определение значительного нарастания титра антител в четыре и более раза в парных сыворотках, полученных от больного в остром периоде и в период реконвалесценции. Рекомендуется использовать обнаружение вирус-специфических IgM антител в сыворотке крови, взятой на 4-7-й день с момента появления сыпи. Уровень данных антител в течение нескольких дней увеличивается до максимума, а затем начинает постепенно снижаться в течение следующих недель. Поэтому рекомендуется дополнять серологическое обследование лиц с подозрением на корь определением антител класса IgG в крови, взятой на 4-7-й день с момента появления сыпи и на 10-14-й день от даты взятия первой пробы. Определение противокоревых IgG-антител применяется также для оценки развития иммунного ответа после вакцинации.

Краснуха – это вирусное антропонозное заболевание, вызванное РНК-содержащим вирусом семейства Togaviridae, рода Rubivirus. Источником инфекции является человек, больной манифестной или субклинической формой заболевания, а также новорождённый с врождённой формой краснухи в течение 1-6 месяцев. Инфекция передается от человека к человеку воздушно-капельным путем. К основным клиническим проявлениям краснухи относятся лихорадка, генерализованная лимфаденопатия, особенно с вовлечением заднешейных и затылочных лимфоузлов, мелкопятнистая сыпь, конъюнктивит, ринит, фарингит. Сыпь или экзантема при краснухе обычно возникает в первые три дня болезни на лице и шее, а затем в течение нескольких часов распространяется по всему телу в хаотичной последовательности. У взрослых людей также могут появляться миалгии и артралгии, часто заболевание может осложняться пневмонией, отитом, энцефалитом, менингоэнцефалитом.

Важно отметить опасность заражения вирусом краснухи беременных женщин, особенно в первый триместр беременности. В этом случае он может послужить причиной выкидыша, рождения мертвого плода и/или развития клинической картины врождённой краснухи – группы серьёзных пороков развития, которые могут вызвать глухоту, катаракту, пороки сердца, гепатит, микроцефалию, признаки прогрессирующего нарушения деятельности центральной нервной системы.

Диагностика краснухи основывается на комплексном подходе с учетом клинических, эпидемиологических данных и результатах лабораторного обследования. Серологическое обследование включает в себя количественное выявление антител классов IgM и IgG к вирусу краснухи.  Выявление IgM-антител свидетельствует о свежем, первые 2-3 недели, инфицировании вирусом. Присутствие в крови антител класса IgM, вне зависимости от наличия IgG, у ребенка или взрослого указывает на недавнее инфицирование вирусом краснухи. Обнаружение антител класса IgG может свидетельствовать о перенесенной или текущей краснухе, наличии иммунного ответа к вирусу краснухи, сформировавшегося после перенесенного заболевания, в результате проведенной вакцинации или при передаче антител от матери плоду в течение беременности. Обнаружение в крови беременной женщины возрастания титров антител в четыре и более раза или появление антител во второй парной сыворотке, а также специфических IgM или высоких титров IgG свидетельствует об инфицировании ее вирусом и о возможном риске поражения вирусом плода.

Эпидемический паротит является острой вирусной антропонозной инфекцией, вызванной РНК-содержащим Mumps вирусом семейства Coronaviridae, передающимся воздушно-капельным путем. Является преимущественно детской инфекцией, причём мальчики болеют чаще девочек. Оно характеризуется лихорадкой, интоксикацией, воспалением слюнных желез, поражением других железистых органов (поджелудочной железы, половых желез) и нервной системы. Возможно развитие специфических осложнений: серозного менингита, менингоэнцефалита, панкреатита, воспаления яичек (орхита), эпидидимита, воспаления яичников (оофорита), поражения органа слуха, миокардита, артритов.

Диагностика заболевания основывается на данных эпидемиологического анализа с выявлением возможного контакта, специфических клинических проявлениях. В клиническом анализе крови возможно выявление лейкопении, относительного лимфоцитоза.

Серологическая диагностика эпидемического паротита основана на выявлении нарастания титра специфических антител в парных сыворотках, взятых в первые дни болезни и через две недели от ее начала. Обнаружение в крови специфических антител класса IgM указывает на начальную стадию заболевания, в сочетании с повышением IgG свидетельствует о текущей инфекции, выздоровлении или недавнем инфицировании вирусом. Определение антител класса IgG применяется для оценки развития иммунного ответа в результате текущего или недавно перенесенного эпидемического паротита, а также в результате вакцинации.

Для чего используется исследование?

  • Для комплексной лабораторной диагностики кори, краснухи, эпидемического паротита;
  • для дифференциальной диагностики острых вирусных инфекций дыхательных путей при подозрении на корь, краснуху или эпидемический паротит;
  • для подтверждения текущей или перенесенной инфекции, особенно при подозрении на бессимптомное течение или при отсутствии типичных клинических признаках заболеваний;
  • для оценки эффективности вакцинации против кори, краснухи, эпидемического паротита;
  • для определения титра антител против краснухи у беременных женщин или у женщин, планирующих беременность;

Когда назначается исследование?

  • При клинических проявлениях и подозрении на корь;
  • при клинических проявлениях и подозрении на краснуху;
  • при клинических проявлениях и подозрении на эпидемический паротит;
  • при обследовании лиц, находившихся в тесном контакте с больными корью, краснухой, эпидемическим паротитом;
  • при оценке эффективности вакцинации против кори, краснухи, эпидемического паротита.

Что означают результаты?

Референсные значения

1. [07-033] Вирус кори, IgG (Measles Virus, IgG)

Результат: отрицательный.

Концентрация: 0 — 0,12 МЕ/мл.

2. [07-040] Rubella Virus, IgG (количественно)

Результат: отрицательный.

Концентрация: 0 — 10 МЕ/мл.

3. [07-042] Rubella Virus, IgM

Отношение S/CO (signal/cutoff): 0 — 0,8.

Результат: отрицательный.

4. [07-096] Mumps Virus, IgM

Результат: отрицательный.

5. [07-097] Mumps Virus, IgG

Результат: отрицательный.

Причины повышения:

  • текущее или перенесенное заболевание корью, краснухой, эпидемическим паротитом;
  • антитела класса IgM против вируса кори: острое заболевание корью;
  • антитела класса IgG против вируса кори: текущее или перенесенное заболевание, наличие иммунного ответа после перенесенного заболевания или в формировние его в результате вакцинации;
  • антитела класса IgM против вируса краснухи: острое заболевание краснухой, у новорождённых – внутриутробное инфицирование;
  • антитела класса IgG против вируса краснухи: свидетельство о перенесенной или текущей краснухе, наличии иммунного ответа к вирусу краснухи, сформировавшегося после перенесенного заболевания, в результате проведенной вакцинации или при передаче антител от матери плоду в течение беременности;
  • антитела класса IgM против вируса эпидемического паротита: изолированное, без сопутствующего повышения IgG – указывает на начальную стадию заболевания, в сочетании с повышением IgG – свидетельствует о текущей инфекции, выздоровлении или недавней инфекции;
  • антитела класса IgG против вируса эпидемического паротита: текущий или недавно перенесенный эпидемический паротит, иммунитет вследствие ранее перенесенной инфекции или вакцинации;
  • иммунный ответ после вакцинации.

Причины отрицательного результата / понижения:

  • отсутствие кори, краснухи или эпидемического паротита;
  • отсутствие или снижение иммунного ответа;
  • ранние сроки инфицирования вирусом;
  • неэффективно проведенная вакцинация против кори, краснухи или эпидемического паротита;
  • снижение иммунологического ответа после вакцинации;
  • ложноотрицательные результаты.

Что может влиять на результат?

  • Клинический период заболевания, возраст пациента, наличие предшествующей вакцинации;
  • особенности иммунного ответа у новорождённых детей;
  • предшествующая вакцинация.



Важные замечания

  • При интерпретации результатов обследования необходимо учитывать возраст пациентов, клиническую стадию (период) заболевания, предшествующую вакцинацию;
  • для комплексной оценки полученных результатов их необходимо сопоставлять с эпидемиологическими, клиническими и другими лабораторными данными.

Также рекомендуется

[02-029] Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)

[02-006] Общий анализ мочи с микроскопией осадка

Кто назначает исследование?

Инфекционист, педиатр, пульмонолог, оториноларинголог, гинеколог, терапевт, врач общей практики.

Литература

  1. Покровский В.И., Творогова М.Г., Шипулин Г.А. Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Справочник / М. : БИНОМ. – 2013.
  2. Шувалова Е.П. Инфекционные болезни / М.: Медицина. – 2005. – 696 с.
  3. Fauci, Braunwald, Kasper, Hauser, Longo, Jameson, Loscalzo Harrison’s principles of internal medicine, 17th edition, 2009.
  4. Kanamori H, Tokuda K, Ikeda S, Endo S, Ishizawa C, Hirai Y, Takahashi M, Aoyagi T, Hatta M, Gu Y, Yano H, Weber DJ, Kaku MPrevaccination antibody screening and immunization program for healthcare personnel against measles, mumps, rubella, and varicella in a Japanese tertiary care hospital / Tohoku J Exp Med // 2014;234(2):111-6.

Источник