Анализ крови методом ифа энцефалит
Клинические анализы имеют основополагающее значение в постановке диагноза при клещевом энцефалите. У больного берут венозную кровь или спинномозговую жидкость, которую исследуют разными методами. Наиболее информативными считаются ИФА, ПЦР и иммуноанализ, позволяющие с высокой вероятностью определить факт заражения. Рассмотрим подробнее когда и где сдать кровь на антитела к вирусу igg. Какие показатели считаются нормой, вирус igg положительный что это значит, а так же сколько по времени делаются анализы.
Иммуноферментное исследование крови (ИФА)
Анализ основывается на выявление специфических антител (иммуноглобулинов) к возбудителю клещевого энцефалита – IgM и IgG. Они начинают вырабатываться иммунной системой в ответ на активность вируса заболевания или введение вакцины. Метод ИФА ценится за то, что позволяет определить не только факт заражения, но и стадию болезни. Материал для исследования – венозная кровь больного.
Иммуноглобулины IgM вырабатываются вместе с начальными симптомами клещевого энцефалита, через 3,5-4,5 недель их концентрация достигает пика, после чего снижаются на протяжении нескольких месяцев.
Антитела IgG обнаруживаются в крови пациентов через неделю после появления симптоматики, после чего их количество нарастает и достигает максимума спустя 1,5-2,5 месяца. Впоследствии они сохраняются в крови на протяжении всей жизни, обеспечивая стойкий иммунитет. Биологический материал для исследования у пациента обычно берут несколько раз с интервалом в несколько недель, чтобы определить рост концентрации антител в динамике.
При расшифровке результатов анализов используется понятие защитный титр, которое означает концентрацию определенных антител в образце биоматериала. Титр может иметь следующий вид – 1:100, 1:400, 1:1000 и т.д.
Иногда анализ отражает количество иммуноглобулинов в крови человека, которое измеряется в Ед/мл. Нормой (отрицательным результатом) обычно считается показатель от 0 до 100 Ед/мл, а любые цифры выше 100 требуют дополнительных исследований.
Референсные значения (нормы) показателей анализов могут отличаться в зависимости от лаборатории, поэтому расшифровкой должен заниматься специалист.
Как правило, повышение титра антител IgM выше нормы свидетельствует о ранних стадиях заболевания, а IgG – о выздоровлении или недавно перенесенного вируса. Обнаружение обоих видов антител в крови обычно свидетельствует о том, что человек заражен вирусом клещевого энцефалита в острой форме.
Кроме того, увеличение концентрации иммуноглобулинов наблюдается после проведенной вакцинации и свидетельствует о том, что процедура прошла эффективно. На ранних стадиях возможны отрицательные результаты исследования, а в некоторых случаях (неправильно проведенный анализ, наличие других арбовирусов в крови) – ложноотрицательные. Отсутствие обоих видов антител в организме свидетельствует о том, что пациент здоров и никогда не болел клещевым энцефалитом.
ВАЖНО! Общие и биохимические анализы крови не считаются информативными при диагностике клещевого энцефалита, но их проводят для оценки общего состояния организма. Для заражения характерно снижения количества лейкоцитов и тромбоцитов, невыраженное повышение печеночных ферментов.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Диагностика с помощью полимеразной цепной реакции, или ПЦР – прямой метод, который позволяет выявить наличие ДНК или РНК вируса клещевого возбудителя в крови. Материал для анализа – венозная кровь, реже у пациентов берут ликвор, слюну или другие биологические жидкости.
Метод ПЦР имеет преимуществами перед другими диагностическими процедурами, так как позволяют выявить возбудителя с достаточно высокой точностью. Для проведения исследования не требуется большое количество биологического материала, а результаты анализов можно получить в кратчайшие сроки. ПЦР позволяет диагностировать хронические, затяжные и серонегативные формы заболевания, которые тяжело выявить с помощью других видов исследований.
Исследование ПЦР имеет свои особенности, которые следует учитывать при диагностике. В первые 1-4 суток после попадания вируса в организм его можно обнаруживать в 54% случаев, с 5 по 10 день вероятность выявления возбудителя снижается до 9%, а на 11-20 день снова возрастает до 25%. После 20-го дня после заражения обнаружить инфекцию в крови крайне трудно – это можно сделать только в 6% случаев.
Метод ПЦР используется не только для исследования биологических жидкостей больного, но и для проверки паразита. Анализ позволяет выявить возбудителей заболевания в организме клеща – если насекомое стерильно, дальнейшие обследования укушенного, как правило, не требуются.
СПРАВКА! Обычно метод ИФА и ПЦР рекомендуется использовать в комплексе, так как результаты анализов крови, выполненных разными методами, позволяют увидеть полную и точную картину болезни.
Иммуноанализ
Для определения инфекций, которые передаются укусами клещей, используются хемилюминесцентный анализ и иммуноблот (вестерн-блот). Для получения точных результатов они, как правило, используются в комплексе.
Хемилюминесцентный анализ основывается на тех же принципах, что и ИФА, но обладает более высокой точностью. Он позволяет определить содержание антител к возбудителю клещевого энцефалита, а точность составляет 95%.
Иммуноблот назначается в случаях, когда пациента необходимо проверить на наличие инфекции при получении отрицательных результатов остальных исследований. Например, анализы показывают, что вирус в организме отсутствует, но у больного наблюдаются явные признаки заражения.
Остальные обследование
Помимо вышеперечисленных методов, в диагностике клещевого энцефалита используется вирусологическое исследование крови и спинномозговой жидкости, а также анализ ликвора. В случае лихорадочной формы течения изменения в биоматериале отсутствуют. При менингеальной и некоторых других разновидностях заболевания наблюдается лимфоцитарный плеоцитоз (увеличение количества лимфоцитов) и повышение концентрации белка. Примеси гноя в спинномозговой жидкости свидетельствуют о том, что у пациента развивается менингит, а не клещевой энцефалит.
В качестве дополнительных исследований при диагностике болезни используются следующие методы:
- реакция связывания комплемента;
- реакция прямой гемагглютинации;
- реакция торможения гемагглютинации;
- реакция нейтрализации.
Они отражают изменения, которые происходят в организме при вирусных заболеваниях, и позволяют точно оценить клиническую картину.
СПРАВКА! У небольшого количества людей иммунная система справляется с возбудителем клещевого энцефалита самостоятельно, поэтому больной может не знать о факте заражения. В этом случае в его крови будет выявлен определенный титр антител, который свидетельствует о пожизненном иммунитете.
Лечение заболевания
Терапия клещевого энцефалита проводится в стационаре, схема лечения зависит от стадии заболевания и общего состояния больного. Специфических средств против болезни не существует, поэтому пациентам назначается этиотропная, поддерживающая и симптоматическая терапия.
На начальных стадиях (обычно до появления первых симптомов) в качестве лечения используются иммуноглобулины – клетки, которые получают из крови доноров.
Они эффективно борются с возбудителями клещевого энцефалита, но положительных результатов можно достичь только при раннем введении препаратов.
Если симптомы болезни уже проявились или она перешла во вторую стадию, лечение проводится с помощью противовирусных средств – рибонуклеазы, препаратов или индукторов интерферона. В качестве симптоматической терапии используются дезинтоксикационные средства, глюкокортикостероиды, нейролептики, антиспастические, противосудорожные лекарства. При серьезных бульбарных расстройствах больных переводят на искусственную вентиляцию легких.
В остром периоде больным с диагнозом «клещевой энцефалит» необходим строгий постельный режим, витаминотерапия, прием иммуностимуляторов и рациональное питание. Каждые несколько недель необходимо делать анализы крови для оценки эффективности лечения и клинической картины.
Прогноз при клещевом энцефалите зависит от общего состояния человека и своевременности терапии – чем раньше она будет начата, тем лучше. Большинство пациентов излечиваются без последствий для здоровья, но иногда возможны необратимые изменения в организме и серьезные осложнения. В их число входят параличи, парезы, атрофия мышц и нарушения работы нервной системы.
Полезное видео
Ознакомьтесь подробно на видео о анализах при клещевом энцефалите:
Клещевой энцефалит – тяжелое заболевание, которое может стать причиной инвалидизации больного или даже летального исхода. Чтобы предотвратить неприятные последствия, нужно придерживаться простых профилактических правил – во время прогулок на природе защищать руки и ноги одеждой, носить головной убор, использовать репелленты. Людям, проживающим в эпидемиологически неблагоприятных районах, рекомендуется пройти вакцинацию, которая надежно защищает от заражения вирусом.
Оцените статью:
Загрузка…
Источник
Лайм-боррелиоз (ЛБ), болезнь Лайма или иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ) – трансмиссивное полисистемное заболевание, приводящее к поражению опорно-двигательного аппарата, нервной и сердечно-сосудистой систем, кожи, занимающее по широте распространения и уровню заболеваемости одно из ведущих мест среди природно-очаговых заболеваний. Заболевание регистрируется на значительной территории Российской Федерации.
Возбудители ЛБ – боррелии комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato, переносчики – иксодовые клещи. В диагностике ЛБ необходимо учитывать эпидемиологический анамнез (посещение леса, присасывание клеща) и клинические проявления, главным из которых, является мигрирующая эритема на ранних стадиях заболевания. Однако до 50% случаев ЛБ могут протекать со стертыми клиническими признаками, в частности, в безэритемной форме, что осложняет постановку диагноза. Использование в клинической практике современных высокочувствительных и специфичных методов серологической диагностики ЛБ позволяет своевременно выявить ранний боррелиоз и начать курс лечения, сократить риск развития тяжелых хронических форм болезни Лайма, а также провести дифференциальную диагностику боррелиоза от других инфекций, передающихся иксодовыми клещами.
Серологическая диагностика клещевого боррелиоза (300049, 300051) – это уникальные исследования, выполняемые с помощью диагностической тест-системы в формате иммуночипа, разработанной в ФБУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора!
Иммуночип повышает эффективность проведения серологического анализа ЛБ и информативность результата, т.к. позволяет одновременно определять в исследуемом образце антитела к 8 группам диагностически значимых антигенов боррелий видов Borrelia afzelii и Borrelia garinii, наиболее распространенных в РФ, и одновременно дифференцировать их по классам: IgM и IgG. Показано, что использование комбинации из нескольких рекомбинантных белков разных видов боррелий позволяет повысить чувствительность и специфичность теста. Иммуночип – высокочувствителен и специфичен (сравнительная оценка проводилась с коммерческими тест-системами в формате ИФА и иммунного блоттинга, зарегистрированными на территории РФ), исключает субъективность оценки благодаря автоматизированной интерпретации результатов.
На I (острой, первые три месяца) стадии заболевания антитела IgM и IgG обнаруживаются у 50-70% пациентов; уровень антител IgM достигает пика в первые 3-6 недель заболевания, пик синтеза антител IgG приходится на 6–8-ю неделю после начала инфекции. На ранней стадии острой формы заболевания с целью установления сероконверсии важно исследовать парные сыворотки, полученные от пациентов с интервалом в 20–30 дней. На II (подострой, длящейся 3-6 месяцев) стадии заболевания в зависимости от сроков развития диссеминации и органной патологии антитела IgM обнаруживаются у 30-80% пациентов, антитела IgG – у 65-100%. ВАЖНО: наличие антител IgМ к антигенам боррелий в сыворотке крови больных Лайм-боррелиозом, как правило, указывает на раннюю стадию инфекции. В некоторых случаях антитела IgM могут выявляться в течение 1–2 лет и более. На III (хронической, длящейся более 6 месяцев) стадии заболевания антитела IgM выявляются у 5-50 % больных, антитела IgG – практически в 100% случаев. ВАЖНО: специфические иммуноглобулины класса G могут детектироваться в течение длительного периода времени (несколько лет). Долго они сохраняются также и после успешно проведенной антибиотикотерапии.
Для подтверждения диагноза рекомендуется использовать двухшаговую схему лабораторной диагностики: определение специфических антител методом ИФА, при положительном результате — подтверждение их специфичности методом иммунного блоттинга или иммуночипа.
Список антигенов, к которым определяется наличие антител в иммуночипе: p100 В.garinii, p100 B.afzelii, VlsE B.garinii, VlsE B.afzelii, p39 B.afzelii, p41 B.garinii, p41 B.afzelii, p58 B.afzelii, BBK32 B.garinii, BBK32 B.afzelii, OspC B.garinii, OspC B.afzelii, p17 B.garinii, p17 B.afzelii.
Критерии результата при тестировании IgM антител
| Отрицательный | Положительный | Неопределенный |
|---|---|---|
|
|
|
Критерии результата при тестировании IgG антител
| Отрицательный | Положительный | Неопределенный |
|---|---|---|
|
| Выявлены антитела только к одному антигену из группы: p100, p58, p41, p39, BBK32, OspC |
Комплекс антител, выявляемый на разных стадиях ЛБ
| Стадия заболевания | IgM антитела | IgG антитела |
|---|---|---|
| Острая (I) | OspC, p41, p17, VlsE | P41, BBK32, p17, OspC, VlsE |
| Подострая (II) | OspC, p41, p17, BBK32, VlsE | p17, p41, VlsE, OspC, BBK32, p58 |
| Хроническая (III) | OspC, p41, VlsE, P39, p58 | p17, BBK32, p41, p58, VlsE, p100, OspC, p39 |
Внимание!
- При наличии признаков поражения центральной нервной системы рекомендуется проводить анализ специфических антител в спинномозговой жидкости (интратекальный синтез антител), так как отрицательный результат анализа сыворотки крови у больного нейроборрелиозом не свидетельствует об отсутствии у него инфекции. Исследование спинномозговой жидкости (СМЖ) обязательно проводится одновременно с исследованием сыворотки крови.
- Отрицательный результат серологических тестов на ранних стадиях заболевания не является доказательством отсутствия инфекции.
- В исследовании 300051 (кровь + спинномозговая жидкость) отдельно описываются антигены для каждого вида биоматериала.
Показания к назначению исследования: диагностика иксодового клещевого боррелиоза (болезни Лайма).
Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.
Источник
Клещевой энцефалит – трансмиссивное вирусное заболевание с выраженной сезонностью, зависящей от периода активности иксодовых клещей, и природной очаговостью. Возбудитель – вирус клещевого энцефалита, относящийся к РНК-вирусам рода Flavivirus. В России клещевой энцефалит регистрируется в 46 субъектах, около 70% всех случаев заболевания приходится на Урал и Сибирь. Кроме того, вирус клещевого энцефалита широко распространен в Европе: прибалтийских странах, Чехии, Словакии, Австрии, Германии, Швеции, Норвегии и Финляндии, а также встречается в Казахстане, Монголии, Китае и Японии.
В течение эпидемического сезона в РФ ежегодно регистрируется около 3000 случаев заболевания, средняя летальность при клещевом энцефалите составляет 1,2%. Наиболее тяжелые его формы и летальность около 10% связаны с дальневосточным генотипом вируса, циркулирующем преимущественно на Дальнем Востоке.
Как и многие другие арбовирусные инфекции в 80–90% случаев клещевой энцефалит протекает в инаппарантной форме, в остальных случаях развиваются различные по степени тяжести варианты течения заболевания: лихорадка, вирусные менингит и энцефалит. Также выделяют полиомиелитическую форму заболевания. При неблагоприятном сценарии острая стадия инфекции переходит в прогредиентную (хроническую) форму. В большинстве случаев после очаговой энцефалитической формы развиваются стойкие нарушения деятельности ЦНС.
Показания к обследованию. Лихорадка, головная боль, боль в области мышц шеи и плечевого пояса, тошнота, рвота, гиперемия лица, шеи и верхней части туловища, возможные потеря сознания, бред, психомоторное возбуждение и судорожный приступ при наличии эпидемиологического анамнеза: присасывание клеща, посещение лесной зоны, употребление в пищу сырого козьего молока.
Дифференциальная диагностика
- Другие иксодовые клещевые инфекции.
- При хронической форме – заболевания ЦНС неинфекционной этиологии.
Материал для исследований
- Сыворотка крови – выявление специфических АТ, изоляция вируса в культуре клеток;
- плазма крови – выявление РНК вируса;
- СМЖ – выявление РНК вируса, изоляция вируса в культуре клеток;
- цельная кровь – изоляция вируса в культуре клеток.
Этиологическая лабораторная диагностика включает изоляцию вируса с использованием культуральных методов, обнаружение РНК вируса и его АГ, обнаружение специфических АТ к возбудителю.
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Культуральный метод, основанный на изоляции вируса из цельной крови, сыворотки крови, тканей мозга в культуре клеток (СПЭВ, Vero, клещевых клеточных культурах) и с использованием чувствительных лабораторных животных не применяется как рутинный метод в диагностических лабораториях, т. к. требует соблюдения мер биологической безопасности при работе, связанной с накоплением вируса, относящегося ко II группе патогенности.
Обнаружение АГ вируса в анализе на клещевой энцефалит методом ИФА в крови, взятой в инкубационный период, в случае отсутствия переносчика, позволяет провести адекватную профилактику клещевого энцефалита. В период острых клинических проявлений динамическое определение АГ в крови позволяет сделать прогноз о возможном переходе заболевания в хроническую форму, и в случае прогредиентного течения заболевания – дифференцировать клещевой энцефалит от заболеваний нервной системы другой этиологии.
Выявление РНК вируса методом ПЦР обладает высокой диагностической специфичностью, но недостаточной чувствительностью, которая не превышает 50% (относительно обнаружения специфических АТ методом ИФА); исследование проводят только в комплексе с выявлением специфических АТ. Для обнаружения РНК вируса используют пробы крови или СМЖ, взятые в первую неделю острой стадии заболевания или в случае уточнения развития персистенции вируса клещевого энцефалита, при расшифровке летальных исходов исследуют ткани мозга.
Определение специфических АТ IgM и IgG в сыворотке крови и/или в СМЖ выполняют преимущественно методом ИФА. Также для изучения в динамике титров нарастания гемагглютинирующих АТ в остром периоде заболевания используют метод РТГА. АТ IgM к вирусу клещевого энцефалита появляются с 3–4-го дня от начала заболевания, АТ IgG – в среднем на 10–14-й дни. Определенные сложности при лабораторном подтверждении диагноза, основанном на выявлении специфических АТ IgM и динамическом изменении титра АТ IgG в «парных сыворотках», возникают в случае заболевания вакцинированных лиц. Как правило, при этом можно наблюдать в основном нарастание АТ IgG. В этом случае целесообразно использовать методы прямого обнаружения возбудителя: изоляция вируса, обнаружение РНК вируса или его АГ.
Реакция нейтрализации (РН) является наиболее специфичной реакцией для обнаружения АТ. Ограничением для использования этого метода является необходимость работы с живым вирусом и соблюдения соответственных мер биологической безопасности.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Обнаружение РНК вируса клещевого энцефалита в крови и СМЖ пациента является основанием для предварительной постановки диагноза, выявление нарастания титров АТ к вирусу клещевого энцефалита в образцах крови, взятых в динамике (парные сыворотки), служит подтверждением этиологии заболевания.
Источник
