Ama анализ крови что это

Анализ на антиядерные антитела — часть длительного процесса диагностики системных заболеваний соединительной ткани. При этом сложны и тесты и и их расшифровка. 

ANA-скрининг

Какие типы антиядерных антител нужно проверять? Когда следует проводить тест?

Что такое ядерные антитела

Антинуклеарные антитела — это аутоантитела, направленные против компонентов собственных клеточных ядер, например, ДНК и цитоплазмы. Их изучают для выявления аутоиммунных заболеваний, так как они  являются маркерами таких патологий.

Интерпретацию результатов анализов на антиядерные антитела затрудняет сложный механизм их образования. Наличие или отсутствие определенного антитела не всегда означает процесс заболевания. 

Антиядерные антитела – типы

В медицине выделяется несколько типов аутоантител:

• Антитела к экстрагируемым ядерным антигенам (анти-ENA):
  • против ДНК-топоизомеразы I (анти-Scl70);
  • против рибонуклеопротеина (анти-РНП);
  • против антигена Смита (анти-Sm);
  • анти-Mi2 / Mi2;
  • анти-Ро (СС-А);
  • анти-La;
  • анти-jo1;
  • анти-PM-SCL;
  • анти-Kn;
• Белок, образующий ядро ​​клетки анти-gp-2010 (анти-gp-210);
• Антитела против нативной двухцепочечной ДНК (анти-дсДНК);
• Антиконцентромерные антитела (анти-АСА).

Антиядерные антитела – формирование и механизм действия

Аутоиммунитет — это неправильный ответ иммунной системы на собственные ткани, что приводит к появлению аутоиммунных заболеваний.

Описаны различные механизмы аутоиммунитета, один из которых связан с высвобождением антигенов, скрытых от иммунной системы, например, в результате повреждения воспалительной ткани. В итоге высвобождаются элементы, обнаруженные в ядре клетки, например, ДНК, РНК, гистоны, которые иммунная система начинает распознавать как нечто чужеродное и вырабатывать против них антиядерные антитела.

Патогенез аутоиммунитета

Антиядерные антитела – показания к анализам

Анализы на антиядерные антитела назначаются при сомнительных диагнозах редких заболеваний. К ним, например, относятся: системные заболевания соединительных тканей, аутоиммунный панкреатит, билиарный цирроз, некоторые раковые опухоли. 

1. Скрининг ANA особенно рекомендуется при симптомах аутоиммунных заболеваний, включая красную волчанку:

• длительная лихорадка с неизвестными причинами;
• суставной синдром;
• высыпания  на коже;
• постоянная слабость и др. 

1. При артралгии/артрите, пневмоните, перикардите, эпилепсии и поражениях почек.
2. При подтвержденном диагнозе СКВ (2 раза в год). 
3. При приеме лекарств: прокаинамида, дизопирамида, пропафенона, гидралазина и т.п..

При положительном ответе, пациента необходимо обследовать и далее, проводя более специфичные тесты. Например:

• При симптомах системной склеродермии важно выявить анти-Scl-70. 
• Для подтверждения билиарного цирроза делают антитела к митохондриям. При этом отрицательный ответ ANA не исключает аутоиммунного заболевания.
• При симптомах СКВ требуется сделать тест на антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA). Наличие анти-dsDNA в сочетании с клиническими признаками болезни подтверждает диагноз, даже при отрицательном ANA.

Конкретных показаний для этих сложных анализов довольно много:

• Подозреваемые заболевания соединительной ткани:
  • системная красная волчанка (наличие антител у 95-100% пациентов; специфический маркер заболевания  — антитела против дцДНК);
  • лекарственная волчанка (95-100% пациентов);
  • антифосфолипидный синдром (40-50% пациентов);
  • системный склероз (80-95% пациентов, особенно антитела против Scl70);
  • полимиозит и дерматомиозит (40-80% пациентов, особенно антитела против Jo1 и против Mi2);
  • синдром Шегрена (48-96% пациентов, особенно анти-Ro и анти-La антитела);
  • ревматоидный артрит (около 10% пациентов);
  • ювенильный идиопатический артрит (менее 10% пациентов);
  • синдром Рейно (20-60% пациентов);
  • фибромиалгия (15-25% пациентов);
  • смешанные заболевания соединительной ткани (95-100% пациентов);
• Оценка активности заболевания и мониторинг эффективности лечения, например, антитела против дцДНК при системной красной волчанке;
• Корреляция наличия антител с появлением специфических симптомов заболевания, например синдрома Шегрена, и наличия антител против Ro и против La;
• Прогнозирование рисков заболеваемости.

Синдром Шегрена

Как проводится анализ на антиядерные антитела

Для выявления антиядерных антител берется кровь из вены на локтевом сгибе.

Методы, используемые для определения антител, очень разные и зависят от типа измеряемого антиядерного антитела. 

Это в первую очередь иммунологические методы, такие как:

• ELISA;
• РИА;
• непрямая иммунофлюоресценция;
• метод двойной иммунодиффузии;
• вестерн-блот.

Для выявления антиядерных антител используется двухэтапная диагностика. Сначала проводится скрининг-тест с использованием метода непрямой иммунофлюоресценции, характеризующегося высокой чувствительностью.

Методика заключается в иммобилизации на микроскопном предметном стекле клеток линии HEp-2, полученных из эпителиальных клеток человека. Клетки этой линии имеют в своей цитоплазме и в ядре антигены, связывающие патологические антитела из крови пациента.

После добавления сыворотки пациента на предметное стекло антиядерные антитела связываются со специфическими антигенами и видны под микроскопом благодаря специальным флуоресцентным маркерам.

Преимущество непрямой иммунофлуоресценции заключается в способности дифференцировать типы антител на основе типа флуоресцентного красителя. Например, светящееся гомогенное клеточное ядро ​​означает наличие антител против dsDNA или антител против ssDNA.

Положительный результат скрининг-теста должен быть подтвержден. Для этой цели используются очень специфические иммунологические методы, например вестерн-блот. После обнаружения присутствия и идентификации типа антиядерного антитела определяют его титр, то есть концентрацию сыворотки, при которой можно определить присутствие антител.

Антиядерные антитела – как интерпретировать результат?

Нормальные титры антиядерных антител должны быть ниже 1:40. Если результат скрининг-теста нотрицательный и отсутствуют клинические симптомы, указывающие на заболевание соединительной ткани, диагноз не распространяется на конкретные антитела, например, анти-дцДНК, анти-Sm.

Клинически значимыми титрами у взрослых считаются ≥ 1: 160, а у детей ≥ 1:40.

В случае положительных результатов предлагается интерпретировать результат анализа следующим образом:

• Титр 1: 40-1: 80 – пограничный (слегка положительный). При отсутствии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани повторять тест или проводить контрольный тест не рекомендуется, так как результаты у большинства людей не меняются с годами.
• Титр 1: 160-1: 640 – средне положительный. При отсутствии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани рекомендуется повторить анализ через 6 месяцев.
• Титр ≥ 1: 1280 – высоко положительный. При наличии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани для диагностики заболевания требуется дополнительная специализированная диагностика.

Следует иметь в виду, что серологические тесты на антиядерные антитела являются частью сложного диагностического процесса, и положительный результат всегда следует интерпретировать в контексте клинической картины и появления характерных симптомов заболевания.

Антиядерные антитела с низким титром встречаются у 5% людей из здоровой популяции, и их частота увеличивается с возрастом. В 65 лет — до 37 %. Положительный ответ без симптомов необходимо подтверждать, учитывая дополнительные анамнестические, клинические и лабораторные результаты.

Кроме того, их присутствие обнаруживается при физиологических и патофизиологических состояниях, но в этих случаях антиядерные антитела не имеют диагностического значения.

В эту группу входят:

• инфекции, например, туберкулез, сифилис, малярия;
• заболевания печени, например, цирроз печени;
• заболевания легких, например саркоидоз, асбестоз;
• раковые заболевания, например лейкоз, лимфома, рак молочной железы, меланома;
• кожные заболевания, например псориаз, красный плоский лишай;
• состояния после трансплантации  органов, например, после пересадка сердца, пересадки почки;
• использование лекарственных средств, например противоэпилептических препаратов, гидралазина, солей лития;
• другие аутоиммунные заболевания, например. тиреоидит Хашимото, болезнь Аддисона, диабет типа I;
• беременность (до 20% беременных).

Появление различных типов антиядерных антител характеризуется этнической изменчивостью. Например, у людей с кавказским системным склерозом анти-АСА антитела встречаются чаще, а у афроамериканцев и жителей Африки чаще выявляются реактивные антитела к топоизомеразе.

Что может повлиять на результат?

Ложноотрицательные результаты дают уремия и прием лекарств, ассоциированных с развитием лекарственной волчанки.