Забор крови на серологический анализ
Правила забора материала для бактериологического исследования
Результат бактериологического исследования биоматериала в значительной степени зависят от правильного взятия материала и сроков доставки его в лабораторию.
При заборе материала необходимо соблюдать следующие правила:
-взятие материала самим обследуемым не допускается, забор производится только медицинским работником;
-материал должен соответствовать характеру инфекционного процесса;
-любой материал забирается в стерильную посуду без следов дезинфицирующих средств, в количестве, достаточном для исследования;
-наилучшие результаты исследования достигаются при немедленном посеве материала после взятия его;
-при невозможности посева материала после его взятия в течение 2-3 часов следует использовать консервирующие растворы (при количестве биоматериала не более 1/3 объёма консерванта);
-при заборе материала тампоном достаточно 1 мл консерванта;
-материал для исследования следует собирать до начала антибактериальной терапии;
-доставка материала в лабораторию осуществляется в специальном металлическом футляре, биксе (в зимний период с утеплённой подкладкой);
-не допускается доставка материала в хозяйственных сумках и других упаковках личного пользования, а также в пробирках, завернутых в бумагу.
Любой биоматериал, присылаемый в лабораторию, должен иметь сопроводительный бланк-направление, в котором указываются:
-наименование учреждения или отделения, направивших материал в лабораторию;
-дата направления;
-номер медицинской карты стационарного больного;
-Ф.И.О. пациента, его возраст и место жительства;
-место работы или какое детское учреждение посещает;
-характер направленного на исследование материала (кровь, кал, моча и т.д.)
-цель обследования (с диагностической целью, профилактической, по эпидемиологическим показаниям);
-диагноз;
-кратность обследования (первичный, повторный анализ);
-дата и время забора материала;
-кто забрал материал (должность, фамилия);
-подпись лица, забравшего материал.
Направление должно быть помещено в полиэтиленовый пакет и изолировано от материала.
Процедура взятия крови из вены на гемокультуру
Показания:
-продолжительность лихорадки более 5 дней при неустановленном диагнозе;
-инфекционные заболевания, сопровождающиеся бактериемией (тифопаратифозные заболевания, сальмонеллёз, менингокцемия, иерсиниозная инфекция и др.)
Условия взятия:
-соотношение крови и среды 1:10;
-до начала назначения антибиотиков;
-при приёме больным антибактериальных препаратов необходимо указать их название, дозу и продолжительность приема.
Оснащение:
-средства индивидуальной защиты (фартук, нарукавники, перчатки, маска, очки);
-шприцы объёмом 10 и 20 мл;
-стерильный флакон с питательной средой, полученный в бактериологической лаборатории к моменту забора крови;
-стерильные салфетки и шарики;
-дезинфектант (йодсодержащий или спиртосодержащий);
-жгут резиновый, клеенчатая подушечка;
-лоток чистый и для отработанного материала;
-ёмкости с дезрастворами;
-пинцет для снятия иглы;
-спиртовка, спички;
-контейнер для транспортировки крови.
Алгоритм взятия крови:
1.За день до исследования заказать в баклаборатории флаконы с питательной средой.
2.Установить доброжелательные отношения с пациентом.
3.Объяснить пациенту цель и ход исследования, получить его согласие.
4.Помыть руки и обработать их антисептиком.
5.Надеть перчатки, фартук, нарукавники, маску, защитные очки.
6.Подготовить манипуляционный столик к работе.
7.Усадить или уложить больного на спину, подложить под локоть клеёнчатую подушечку.
8.Попросить пациента максимально разогнуть руку.
9.Наложить жгут на верхнюю треть плеча.
10.Проверить наличие пульса на лучевой артерии. Попросить пациента поработать кистью, а затем сжать кисть в кулак.
11.Обработать руки в перчатках антисептиком.
12.Взять 3 стерильных шарика и смочить их йод- или спиртсодержащим раствором. Обработать одним шариком пункционное поле широко, вторым — узко, третий шарик положить на место предполагаемой пункции.
13.Взять шприц в правую руку, а левой захватить шарик с предполагаемого места пункции и поместить его между четвертым и пятым пальцами кисти.
14.Большим пальцем левой руки зафиксировать вену.
15.Пунктировать вену и набрать в шприц 10 или 20 мл крови, учитывая соотношение крови и среды 1:10.
16.Развязать жгут. Попросить пациента разжать кулак, положить на место пункции шарик и быстрым движением выйти из вены.
17.Прижать ватку со спиртом в месте инъекции.
18.Согнуть руку больного в локтевом суставе на 3-5 минут.
19.Снять пинцетом использованную иглу и поместить в ёмкость с дезраствором.
20.Помощник должен зажечь спиртовку. Снять с флакона со средой пробку с бумажным колпачком. Обжечь горлышко флакона со средой и шприц в пламени спиртовки.
21.Медленно перелить кровь из шприца во флакон со средой.
22.Обжечь горлышко флакона со средой и пробку.
23.Закрать флакон пробкой и бумажным колпачком.
24.Загасить спиртовку.
25.Снять шарик с руки пациента.
26.Использованные шарики замочить в контейнере с дезинфектантом.
27.Флакон поместить в контейнер для транспортировки крови.
28.Руки вымыть под проточной водой с мылом.
29.Поместить направление в полиэтиленовый пакет.
30.Контейнер и отдельно полиэтиленовый пакет с направлением транспортировать в лабораторию.
31.Снять с себя маску, очки, нарукавники, передник, перчатки. Перчатки замочить в дезрастворе.
32.Вымыть и осушить руки.
Примечание:
-манипуляцию проводить утром натощак;
-пробирка для забора крови должна быть не только стерильной, но и сухой (для избежания гемолиза эритроцитов);
-запрещается производить забор крови без шприца, только иглой.
В пользу наличия в крови возбудителей заболевания свидетельствуют:
-повторное выделение одних и тех же микроорганизмов;
-обильный рост микробов при проведении количественных исследований.
В пользу контаминации (загрязнения) образца крови посторонними микроорганизмами после взятия материала свидетельствуют:
-выделение небольшого количества нескольких видов микроорганизмов;
-наличие представителей нормальной микрофлоры (особенно микрофлоры кожи) только в одной пробе.
Процедура взятия крови из вены для серологического исследования
Показания:
-определение титра антител при бактериальных или вирусных инфекциях, чаще всего начиная с конца первой недели заболевания в динамике болезни по типу парных сывороток;
-постановка серологических реакций при диспансерном наблюдении за реконвалисцентами для верификации перенесённых заболеваний (особенно маркёров вирусных гепатитов).
Оснащение:
-средства индивидуальной защиты (фартук, нарукавники, перчатки, маска, очки);
-шприцы объёмом 5 и 10 мл;
-сухие чистые пробирки с резиновыми пробками;
-стерильные салфетки и шарики;
-дезинфектант (йодсодержащий или спиртосодержащий);
-жгут резиновый, салфетка, клеёнчатая подушечка;
-лоток чистый и для отработанного материала;
-ёмкости с дезрастворами;
-штатив для пробирок;
-контейнер для транспортировки крови;
-бланк-направление в лабораторию.
Алгоритм взятия крови:
1.Подготовьте шприц, иглы, ватные шарики, салфетки, спирт, стерильную сухую пробирку, штатив для пробирок, лоток.
2.Выпишете направление в баклабораторию.
3.Установите доброжелательные отношения с пациентом и объясните цель исследования.
4. Помойте руки и обработайте их антисептиком.
5.Наденьте перчатки, фартук, нарукавники, маску, защитные очки.
6.Усадите или уложите больного на спину.
7.Расположите руку пациента ладонной поверхностью вверх, подложив под локоть клеёнчатую подушечку или валик.
8.Наложите жгут на верхнюю треть плеча.
9. Попросите пациента поработать кистью, а затем сжать кисть в кулак.
10.Обработайте локтевой сгиб спиртом дважды.
11.Введите иглу в вену и наберите 5 мл крови.
12.Снимите жгут и приложите к месту укола шарик со спиртом.
13.Быстрым движением выйдите из вены и перелейте кровь из шприца в пробирка медленно по стенке.
14.Закройте пробирку резиновой пробкой, пронумеруйте и поместите пробирку в штатив.
15.Установите штатив в металлический контейнер (пенал, бикс).
16.Отправьте кровь и направление в лабораторию.
17.Заберите тампон у пациента, убедившись, что кровь из места пункции вены не выделяется.
18.Поместите тампоны в ёмкость с дезраствором.
19.Проведите дезинфекцию использованного инструментария и оснащения.
20.Снимите с себя маску, очки, нарукавники, передник, перчатки. Перчатки замочите в дезрастворе.
21.Вымойте и осушите руки.
Примечание:
-кровь для серологического исследования необходимо брать натощак или через 6 часов после приёма пищи;
-пробирка для забора крови должна быть химически чистой, сухой(для устранения гемолизы эритроцитов, затрудняющего определить степень помутнения сыворотки при взаимодействии антигена с антителом);
-запрещается проводить забор крови без шприца, только иглой.
Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском гугл на сайте:
Источник
Что такое серологическое исследование крови?
Объект серологии — антигены и антитела
Серологическое исследование (СИ) основано на способности антигенов и антител связываться друг с другом. СИ позволяет с точностью выявить наличие у пациента определённого вируса либо бактерии, группу крови и резус, реактивность организма к антибиотикам, аутоиммунные заболевания, гормональные нарушения, индивидуальную специфичность белков, определить эффективность терапии.
Система иммунитета борется с проникающими в организм болезнетворными микробами (антигенами) при помощи антител, при этом создавая к каждому из вирусов, паразитов либо бактерий свой определённый тип защиты.
Антиген и антитело подходят друг другу как замочная скважина и ключ, при встрече они непременно связываются. Эта серологическая реакция позволяет выявлять различные виды антител либо антигенов.
Способность иммунитета вырабатывать особые вещества, нейтрализующие вредоносные частицы, была известна учёным давно. Но увидеть реакцию антиген-антитело в лабораторных условиях удалось только в конце XIX века. Было обнаружено, что в результате образования связки, комплексы выпадают в осадок, образуя хлопья либо помутнение. Такие реакции получили названия агглютинации и преципитации. В XX веке серология — наука о свойствах сыворотки, стремительно развивалась, обнаруживались новые методы диагностирования на основе реакций антиген-антитело. На сегодняшний день существует множество способов выявления иммунных комплексов, а СИ являются незаменимым звеном в диагностике, лечении, создании новых медицинских препаратов и вакцин.
Показания к проведению анализа.
Серологические исследования широко применяется в акушерстве
Серологические исследования сопровождают современного человека на протяжении всей жизни. Первые анализы на выявление определённых антител проводятся, когда малыш находится ещё в утробе. Беременная женщина сдаёт кровь на различные СИ для определения возможного резус-конфликта либо инфекций, способных навредить вынашиваемому плоду. Когда ребёнок появляется на свет, его ожидают серологические исследования, позволяющие диагностировать врождённые заболевания. Впоследствии анализы сдаются по следующим причинам:
- вирусные, бактериальные, паразитарные инфекции;
- выявление активности, стадии развития болезни;
- гормональные патологии;
- бесплодие;
- аутоиммунные заболевания;
- нарушение обмена веществ;
- аллергии;
- онкологические заболевания;
- планирование беременности, период вынашивания, патологии беременных;
- выявление ревматоидного фактора;
- определение группы крови и резус-фактора;
- эффективность терапии при различных болезнях;
- эффективность вакцинации;
- предоперационный и постоперационный период при необходимости оценки уровня некоторых антител;
- изучение иммунного состояния организма.
Подготовка к исследованию.
Прием препаратов желательно отменить накануне теста
Так как серологические исследования охватывают широкий спектр анализов, в каждом конкретном случае может понадобиться определённая подготовка, но существуют общие правила сдачи серологического теста:
- За сутки до исследования следует ограничить в рационе жирное и жареное, исключить алкоголь.
- Последний приём пищи должен завершиться за 10 — 12 часов до анализа.
- В день сдачи крови не следует употреблять кофе, чай либо иные напитки. Можно в небольшом количестве пить чистую воду.
- Лекарственные средства перед анализом исключаются. Если приём отменить невозможно, необходимо предоставить врачу полный перечень препаратов, в том числе витаминов, пероральных контрацептивов.
- Все другие исследования либо медицинские манипуляции проводятся после СИ.
- Курение рекомендуется прекратить за 12 часов до взятия образца крови.
- В предыдущий день следует избегать физических и эмоциональных нагрузок, а перед исследованием желательно 15 минут посидеть в полном покое.
- СИ назначаются на утреннее время и сдаются натощак.
Методы проведения серологического исследования.
В серологии может применяться большое число методов
Все методики определения комплексов антиген-антитело (Аг-Ат) основываются на использовании известного Аг либо Ат в поиске неизвестного. Если необходимо обнаружить Аг, необходимы диагностические иммунные сыворотки с содержанием специфических Ат. Если целью СИ является выявление Ат, используются диагностикумы — взвеси, содержащие определённые Аг.
Серологические анализы могут отражать качественный либо количественный результат. При качественном исследовании итог может быть отрицательный или положительный, то есть искомый элемент либо обнаружен, либо нет. Количественный итог выражается в виде числового значения либо знаками «+» (обычно от одного до четырёх).
Непрямая гемагглютинация — один из методов диагностики
Методы серологических исследований:
- Агглютинация. Связывание Ат с Аг с последующим формированием хлопьев либо осадка. Применяются прямые, непрямые, развёрнутые, ориентировочные реакции, позволяющие выявить антитела в сыворотке.
- Гемагглютинация. Используются эритроциты с адсорбированными на них Аг либо Ат, которые склеиваются с соответствующими Ат и Аг. Образуемые комплексы выпадают в виде фестонного осадка.
- Преципитация. Образование комплекса Аг-Ат с последующим осаждением в виде помутнения, именуемого преципитатом.
- Коагглютинация. Выявление Аг при помощи Ат, адсорбированных на белке клеток стафилококка.
- Торможение гемагглютинации. Ат иммунной сыворотки подавляют вирусные Аг, в итоге вирусы теряют способность склеиваться с эритроцитами.
- Непрямая реакция Кумбса. Определяются Ат к поверхностным Аг эритроцитов.
- Кольцепреципитация. Проводится на основе иммунной сыворотки с наслоением растворимого Аг.
- Двойная радиальная иммунодиффузия. Реакция основана на диффундировании компонентов антисыворотки и Аг в лунках агара либо агарозы.
- Реакция связывания комплемента. Связь Аг и Ат сопровождается адсорбцией комплемента, в качестве индикатора используются эритроциты барана и Ат к ним в составе гемолитической сыворотки.
- Нейтрализация. Основана на нейтрализации вирусного агента антителами.
- Реакции, основанные на маркировании Ат и Аг флуоресцентным либо ферментным составом — иммунофлюорисцентный (РИФ) и иммуноферментный (ИФА) методы.
Иммунофлюорисцентный метод.
«Свечение» в темнопольном микроскопе
Данный метод основан на использовании Ат, меченных флуоресцентным веществом. Чаще всего в качестве метки используется флуоресцеинизотиоционат, обладающий зелёным свечением в лучах ультрафиолета. Результат анализа оценивается по степени яркости свечения. Может быть использован ручной метод определения при помощи люминесцентного микроскопа, оптического микроскопа с люминесцентной насадкой, а также автоматический способ с применением микрочипового цитомера, проточного цитомера либо роботизированного флуоресцентного микроскопа.
РИФ проводится прямым и непрямым методом. Прямой способ означает непосредственное связывание сорбированного Аг с меченым Ат. Непрямой метод подразумевает использование немаркированных Ат для связки с Аг, а затем добавление меченых Ат, что позволяет избежать неспецифических реакций.
Иммуноферментный анализ.
Иммуноферментный анализ как метод серологической диагностики
ИФА основан на выявлении комплексов Аг-Ат при помощи маркирования одного из компонентов. В качестве метки используются различные ферменты, которые в результате ферментативной реакции образуют окрашивание. Существуют разнообразные методы ИФА, их можно классифицировать как гомогенные и гетерогенные методы.
Гомогенные означают, что все этапы реакции происходят в растворе.
Гетерогенные методы включают разделение на фазы с использованием твёрдого носителя.
Гомогенно-гетерогенные способы основываются на том, что комплексы Аг-Ат формируются в растворе, а затем для разделения используется твёрдая фаза.
Принцип «сэндвич»-метода
Существует множество вариаций методов ИФА, некоторые из них представлены ниже.
- Сэндвич-метод. К иммобилизованным Ат добавляется раствор с Аг, после образования комплексов носитель отмывают от лишних компонентов и добавляют маркированные Ат. В результате, Аг оказываются зажатыми иммобилизованными и мечеными Ат, откуда и произошло название метода.
- Неконкурентный непрямой ИФА. К иммобилизованным Аг присоединяют исследуемую сыворотку с Ат. Когда образуются комплексы, лишние Ат смывают и добавляют маркированные Ат, способные связаться с прикреплёнными к поверхностям лунок иммунными комплексами.
- Конкурентный прямой ИФА. К иммобилизованным Аг вносят исследуемую сыворотку и конъюгат, содержащий маркированные Ат. Формируются комплексы Аг-Ат нескольких видов: с мечеными Ат и с немаркированными Ат, которые вступают между собой в конкуренцию за связь с Аг.
Какие инфекции помогает выявить серологическое исследование.
Серологическая диагностика позволяет выявить возбудителя
СИ позволяют выявить определённое заболевание при наличии на него подозрения, то есть в основе анализа лежит знание того, какой именно элемент необходимо искать.
Если у пациента присутствует определённая симптоматика либо иные исследования указывают на заболевание, назначается серологический анализ.
Серологические исследования используют для диагностики следующих инфекций:
- вирус гепатита А, В, С, D, Е;
- сифилис;
- ВИЧ;
- герпес;
- цитомегаловирус;
- краснуха;
- корь;
- паротит;
- Эпштейн-Барр;
- хеликобактер;
- хламидии;
- микоплазмы;
- токсоплазмы;
- лямблии;
- гельминты;
- уреаплазмы;
- парвовирус;
- вирус ветряной оспы;
- вирус клещевого энцефалита;
- вирус Денге;
- коклюш;
- боррелии;
- легионеллы.
Серологические исследования способны выявить любые инфекции в лабораторных условиях, если в наличии есть Аг возбудителя инфекции.
Преимущества серологического метода исследования в диагностике инфекций.
Серологическая диагностика — быстро и доступно
- Высокая чувствительность и специфичность.
- Широкий спектр определяемых инфекций.
- Ранняя диагностика инфицирования.
- Возможность мониторинга развития заболевания.
- Быстрота и удобство в исполнении.
- Возможность использования минимального объёма исследуемого материала.
- Безопасность исследования.
Источник
