Забор крови для днк анализа

Материалом для проведения ДНК-анализа может быть любая ткань человека, содержащая ДНК. Удобно брать образцы жидкой венозной или артериальной крови, образцы сухой крови на фильтре или марле, плодный материал. Каждый образец должен быть разборчиво подписан с указанием ФИО человека, у которого взят образец, дата рождения, его статуса и степени родства (Сидоров Петр Иванович, 4 окт.1984г, пробанд; Сидорова Анна Алексеевна, 20 мая 1963г, мать пробанда). Пробирки подписывают на специальной клейкой ленте; образец сухой крови на фильтре — на предмете носителя, в области, где не будет пятна крови; образец сухой крови на марле — на конверте, в котором этот образец будет храниться, либо на листе бумаги, который прикрепляют к марле. К каждому образцу должно прилагаться направление с описанием диагноза и родословной.

Для правильного осуществления забора биологического материала, отличного от крови и плодного материала можно (или необходимо) проконсультироваться со специалистами Центра Молекулярной Генетики.

Получение образцов жидкой крови:

Для исследования должна быть предоставлена венозная кровь в объеме 1 — 5 мл. Забор крови должен осуществляться в специальные пробирки, содержащие раствор антикоагулянта (0,5М раствор ЭДТА, рН 8,0, цитрат натрия и др., кроме гепарина). Соотношение объема ЭДТА к объему крови не должно превышать 1:10. После забора крови пробирка должна быть закрыта пробкой и плавно несколько раз перевернута вверх дном, чтобы кровь в пробирке тщательно перемешалась с антикоагулянтом. Если образец будет предоставлен в лабораторию в течение 2-3 дней, то хранить его следует при температуре +4oС (например в холодильнике). Для более длительного хранения образец следует заморозить и транспортировать на ледяной бане (например в термосе со льдом).

Получение образцов сухой крови на фильтре или марле:

Стерильную марлю, сложенную в несколько слоев (4 и больше), или фильтровальную бумагу (участок, которого не касались руками) пропитывают кровью из пальца насквозь, чтобы получилось пятно диаметром не менее 2 см. Для увеличения достоверности исследования лучше получать 2-3 пятна крови. Затем образец должен быть высушен на воздухе в течение не менее 2 часов в условиях отсутствия прямых солнечных лучей и контакта с какой бы то ни было поверхностью. Недопустимо также никому, кроме исследуемого пациента, прикасаться к пятну крови или предмету, на который нанесен образец крови, в том месте, где будет пятно крови до его получения во избежании кантаминации и получения неверных результатов. После высыхания образец должен быть упакован в индивидуальный бумажный конверт. Образец хранится при комнатной температуре, избегать попадания влаги.

Источник

Если обратиться к данным статистики, то на сегодняшний день практически 10% отцов воспитывают чужих детей, и это мы сейчас не говорим о тех случаях, когда отчим заведомо усыновил ребенка. И даже если отец и догадывается об отсутствии родства с ребенком, он не всегда набирается смелости опровергнуть факт отцовства. Хотя способов определения кровных связей на сегодня предостаточно. Одним из таких является метод определения отцовства по группе крови. Нередко к нему прибегают и сами матери, которые не состоят в брачных отношениях с отцом ребенка и хотят привлечь его к родительским обязанностям. Мы расскажем вам об эффективности и способах проведения разных экспертиз.

Факторы определяющие группу крови

Исходя из данных населения всего мира около 80% приходится на людей с 1 и 2 группой крови, второе место занимает 3 группа и всего несколько процентов отводится людям с 4 группой. Каждая группа крови отличается своим биологическим составом – содержание белков, эритроцитов, тромбоцитов и уникальных антиген. Согласно классификации, выделяют следующие факторы, определяющие группу крови:

  • Первая (I) – 0 или антиген отсутствует;
  • Вторая (II) – антиген А;
  • Третья (IIl) – антиген В;
  • Четвертая (IV) – АВ, в наличии оба антигена А и В.

Группа крови у каждого человека закладывается на генетическом уровне, еще в момент зачатия в утробе матери, путем передачи антигенов родителей своему ребенку. Группа крови остается неизменной у человека на протяжении всей его жизни. На ее состав не может повлиять даже химиотерапия, переливание крови или пересадка костного мозга.

Определение группы крови ребенка

Итак, медицина предлагает нам несколько способов определения отцовства. Мы расскажем вам об их методике определения и точности полученных результатов.

Использование резус-фактора

Самым простым методом определения крови является проведение анализа на совпадение резус-фактора. Несмотря на несложность и доступность способа, назвать его универсальным нельзя. Именно поэтому, если процесс установления отцовства происходит в суде, то результаты анализа крови по резус-фактору не принимаются за стопроцентное доказательство. В единичных случаях можно получить однозначный неоспоримый ответ по данному способу, когда оба родителя имеют отрицательный резус-фактор. Ведь согласно биологическим особенностям человека, ребенок 100% наследует отрицательный резус от родителей, если они оба обладают таковым.

А вот что касаемо положительного резус-фактора, то здесь ситуация иная. Если у обоих родителей показатель крови положительный, то вероятность родства ребенка составляет 50%. Что уже говорить о тех случаях, когда резус-факторы у отца и матери абсолютно разные. Здесь вероятность родства с ребенком определить невозможно, поэтому в таких ситуациях применение данного метода практически не используется.

Если у отца с матерью одинаковые положительные резус-факторы, а у ребенка отрицательный, это еще не говорит о том, что он приходится не родным.

Анализ ДНК

Во время зачатия плод получает от родителей генетический материал, который является уникальным и неповторимым. Для забора на анализ ДНК берутся различные биологические материалы человека, в которых содержится его генетическая информация – кровь, слюна, волос, кожа, естественные выделения. На основе тщательного исследования проводится их сравнение и наличие совпадений генетических цепей. Ошибок быть не может, экспертиза ДНК находится под строгим контролем ученых, тем более что полученные результаты перепроверяются – они должны либо дважды подтверждаться, либо опровергаться. Такой подход дает невероятную точность, с которой пока не могут сравниться любые другие методики на проведение родства.

Экспертиза ДНК является наиболее точным, практически стопроцентным подтверждение родства. Именно благодаря высокой эффективности и достоверным данным данный метод является главным доказательством в суде, когда идет процедура оспаривания отцовства. Ведь тест ДНК показывает совпадение генов двух людей на 99,9 % либо отрицает факт кровных связей. Главным минусом такого исследования является его дороговизна, около 15 000 рублей с одного исследуемого материала. Соответственно при установлении отцовства придется заплатить минимум 30 000 рублей. Кроме того, если вы хотите получить результаты в ближайшее время – через 3 дня, а не как положено через 10 дней, то придется еще немало доплатить. Но, несмотря на дороговизну анализа ДНК, он проводится только в проверенных высокопрофессиональных медицинских учреждениях при помощи дорогостоящего лабораторного оборудования.

Система ABO

Еще одним способом установления отцовства является система АВ0. Суть ее заключается в сравнении состава крови на антигены. Как мы уже ранее писали, в зависимости от группы крови можно распознать наличие того или иного антигена:

  • для первой группы – 00;
  • для второй – А0, АА;
  • для третей – В0,ВВ;
  • для четвертой АВ.

Такая комбинация набора антигенов объясняется тем, что у каждого человека двойной набор хромосом, поэтому мы и видим такие результаты. Расчет вероятности кровной связи определяется сопоставлением этих показателей обоих родителей. И как результат, если ребенок является биологическим этому отцу, то у него должна совпадать комбинация набора антигенов. Такая методика больше подходит для тех родителей, у которых одинаковая группа крови. И то, даже если результат будет правильным в зависимости от набора хромосом, то он не является достоверным, это может быть банальное совпадение.

Данная методика определения родства не является стопроцентным доказательством кровной связи между отцом и ребенком, однако может использоваться в качестве предварительного скринингового исследования.

Таким образом, наиболее точным методом установления родства между двумя людьми на сегодняшний день пока остается экспертиза ДНК. Два остальных способа хоть и могут показать достоверную информацию, однако подтвердить ее никак нельзя. Поэтому если вы решаете вопрос установления отцовства через суд, то данные согласно определения совпадений резус-фактора и антигенов АВ0, могут выступать второстепенными доказательствами.

Какую группу крови унаследует ребенок

Не менее часто мать или отец интересуется вопросом, как можно определить группу крови у ребенка, если имеются данные по обоим родителям. Мы привели вам обобщенную таблицу, которая путем сопоставления данных отца и матери приводит к нужному ответу. Однако вы должны понимать, что чем больше антигенов содержит группа крови каждого из родителей, тем больше вариантов вы получаете.

В таблице имеется достаточно значений со 100%. Однако, даже если согласно приведенной таблице при наличии информации о группе крови матери и отца, нельзя однозначно утверждать, что именно он является его биологическим родителем. Что уже говорить о тех результатах, где выбивает сразу несколько значений. Поэтому полностью доверять такому способу не стоит, он может иметь погрешности.

Сдать анализы в домашних условиях

Правильно – это проводить экспертизу в специализированных лабораториях, с соблюдением всех строгих норм забора анализов. Однако сегодня все чаще можно услышать информацию, о том, что можно сдать анализы дома. Сразу хочется сказать, что сдавать анализы вы дома не будете – это строгое нарушение. А вот произвести забор материала для предстоящего исследования в домашних условиях, такое на практике встречается.

Делаете вы это не по собственному усмотрению, а только после уведомления об этом в медицинское учреждение. Они в ответ могут прислать сотрудника, который приедет и сделает забор крови для будущего анализа и доставит его в специальном оборудовании в лабораторию. Если вы проводите экспертизу ДНК, где биологическим материалом может выступать слюна, волосы, засохшие пятна выделений, зубная щетка, то вы можете сами произвести забор, однако организация, которая будет проводить экспертизу, пришлет вам по адресу специальные конверты, контейнеры, пинцет и перчатки, а после доставит в лабораторию.

Перед тем как согласиться на проведение забора анализов в домашних условиях, вы должны понимать, что полученные результаты нельзя будет предоставить в суде в качестве основных доказательств.

Недостатки определения отцовства по группе крови

Мы уже рассказали о минусах каждого метода определения отцовства путем анализа по забору крови. Однако в качестве итога еще раз о них напомним, чтобы вы понимали ответственность своих действий:

  • Ни система АВ0, ни определение резус-фактора не дает никакой гарантии, что проведенное сравнение группы крови отца и ребенка является достоверным, даже при их полном совпадении, или наоборот.
  • Узнать результаты можно только после рождения ребенка, в отличие от ДНК экспертизы, где процедуру установления родства можно проводить уже после 5 месяцев.

Несмотря на дешевизну и доступность проведения процедуры установления отцовства по группе крови, данный способ не дает никаких гарантий о достоверности результатов, только в исключительных случаях.
Если вы решили установить отцовство, то доверяйте проверенной методике – экспертизе ДНК, которая позволяет с высокой точностью установить кровную связь между ребенком и предполагаемым отцом. Дороговизна процедуры полностью оправдывает полученные результаты и исход судебного разбирательства. Прочие способы на основе анализов крови, могут служить лишь в качестве предварительного результата или дополнительного доказательства.

Источник

 
Диагностируем:
· Катаракта
· Глаукома
· Макулярная дегенерация
· Близорукость
· Пигментный ретинит
· Дистрофии сетчатки
· Дистрофии роговицы
· Увеиты
· Ретинобластома
· Амавроз Лебера
· Микрофтальм
· Анофтальм
· Аксенфельда-Ригера
· Ваарденбурга синдром
· Ретиношизис
· Косоглазие
· Выезд окулиста на дом
· Синдром Ашера
· Редкие болезни
 
Обучение
· Конференции
· Книги по офтальмогенетике
· Книга О.В. Хлебниковой Наследственная патология органа зрения
· Методы исследования в офтальмологии
· Классификация наследственных болезней сетчатки
· Критерии клинической классификации
· Форум по молекулярной медицине 2013
· Анализ геномных NGS данных
 
Пороки развития
· размеров и формы глаза
· придаточного аппарата
· роговицы
· сосудистой оболочки глаза
· хрусталика
· сетчатки
· зрительного нерва
· МУТАНТНЫЕ БЕЛКИ
 
Типы диагностики
· CLIA — что это?
· Кариотипирование
· FISH анализ
· SKY тест
· SSDGE или SSCP
· DGGE
· RFLPs
· Специфичный микрочип
· Типичный микрочип
· Прямое секвенирование
 
Панели тестов
· Панель «цилиопатии»
· Панель «пигментный ретинит»
· Панель «все глазные заболевания»
· Животные модели
· Пигментный ретинит: новости 2013
· Метаболизм сетчатки
· Дегенерация сетчатки и клеточная биология
 
 

Материалом для проведения ДНК-анализа может быть любая ткань человека, содержащая ДНК. Удобно брать образцы жидкой венозной или артериальной крови, образцы сухой крови на фильтре или марле, плодный материал. Каждый образец должен быть разборчиво подписан с указанием ФИО человека, у которого взят образец (пробанд), дата рождения, его статуса и степени родства (Иванов Иван Иванович, 09.01.2012 г.р., пробанд; Иванова Мария Ивановна 20 мая 1978 г.р., мать пробанда). Пробирки разборчиво подписывают, образец сухой крови на фильтре — на предмете носителя, в области, где не будет пятна крови; образец сухой крови на марле — на конверте, в котором этот образец будет храниться, либо на листе бумаги, который прикрепляют к марле. К каждому образцу должно прилагаться направление с описанием диагноза и родословной.

 
 
Капиллярная кровь для генетической диагностики 

Самым удобным для получения и анализа биологическим материалом является цельная венозная или капиллярная кровь. Образцы собирают в пробирку с антикоагулянтом. Забор крови для ДНК исследования может производиться в любое время суток вне зависимости от приема пищи. Для исследования должна быть предоставлена венозная кровь в объеме 1 — 5 мл. Забор крови должен осуществляться в специальные пробирки, содержащие раствор антикоагулянта (0,5М раствор ЭДТА, рН 8,0, цитрат натрия и др., кроме гепарина). Соотношение объема ЭДТА к объему крови не должно превышать 1:10. После забора крови пробирка должна быть закрыта пробкой и плавно несколько раз перевернута вверх дном, чтобы кровь в пробирке тщательно перемешалась с антикоагулянтом. Если образец будет предоставлен в лабораторию в течение 2-3 дней, то хранить его следует при температуре +4oС (например в холодильнике). Для более длительного хранения образец следует заморозить и транспортировать на ледяной бане (например в термосе со льдом).

 
 
Кровь на фильтровальной бумаге для генетической диагностики 

Стерильную марлю, сложенную в несколько слоев (4 и больше), или фильтровальную бумагу (участок, которого не касались руками) пропитывают кровью из пальца насквозь, чтобы получилось пятно диаметром не менее 2 см. Для увеличения достоверности исследования лучше получать 2-3 пятна крови. Затем образец должен быть высушен на воздухе в течение не менее 2 часов в условиях отсутствия прямых солнечных лучей и контакта с какой бы то ни было поверхностью. Недопустимо также никому, кроме исследуемого пациента, прикасаться к пятну крови или предмету, на который нанесен образец крови, в том месте, где будет пятно крови до его получения во избежании контаминирования и получения неверных результатов. После высыхания образец должен быть упакован в индивидуальный бумажный конверт. Образец хранится при комнатной температуре, избегать попадания влаги.

фильтровальная бумага капля крови для генетического ДНК анализа теста

Для выполнения анализа требуется взять у пациента только 4 капли крови. Этот тест может быть выполнен вместе с другими стандартными анализами крови. Можно использовать капиллярную или венозную кровь (можно добавлять антикоагулянты ЭДТА или ACD, гепарин применять нельзя!).
У пациентов, находящихся на диализе, важно взять образец крови до сеанса диализа. Кровь, взятая во время или после сеанса диализа, не может быть использована для анализа.
Не используйте йодсодержащие дезинфицирующие средства.
Нанесите только одну каплю крови на каждый круг. Убедитесь, что кровь покрывает всю площадь круга и растекается по обе стороны фильтровальной бумаги.

Взятие образцов крови у пациентов
в возрасте менее 6 месяцев.

Согрейте место взятия крови. Очистите поверхность дезинфицирующим средством. Высушите стерильной марлей. Проколите кожу пятки стерильным ланцетом. Вытрите первую каплю крови с стерильной марлей. Дождитесь, пока сформируется вторая большая капля крови. Слегка коснитесь капли крови центром первого круга на фильтровальной бумаге. Дождитесь, пока кровь пропитает и полностью заполнит круг с первого раза. Нанесите кровь только на одну сторону фильтровальной бумаги. Не помещайте в один круг более одной капли крови.

Неправильная подготовка образцов может привести к ложноположительным результатам и даже отбраковке при тестировании. Удостоверьтесь, что кровь покрывает всю площадь круга.

Неправильно: (а) недостаточно крови, чтобы пропитать обе стороны, (б) дезинфектант не высох в момент взятия крови, (в) несколько капель нанесены одна поверх другой.

 
 
Пренатальная генетическая диагностика 

Пренатальная диагностика проводится на забранном специалистами акушерами-гинекологами и предоставленном в лабораторию биологическом материале плода: ворсинах хориона, амниотической жидкости или пуповинной крови. Для исключения загрязнения плодного материала материнскими клетками необходимо предоставление биологического образца беременной женщины. В качестве плодного материала для проведения пренатальной диагностики используют либо биоптат ворсин хориона (при сроке беременности от 8 до 14 недель), либо амниотическую жидкость (на сроке от 16 до 21 недели). После 21 недели исследуют кровь плода, полученную методом кордоцентеза. Биоптат ворсин хориона, помещенный в специальную среду, должен представлять собой видимый глазом кусочек ткани, отмытый от материнской крови и отделенный от материнской части ворсин. В противном случае заражение плодного материала материнской ДНК не позволит правильно провести анализ. Флакон с плодным материалом должен быть подписан фамилией матери, у которой произведена пункция, а также необходимо приложить направление, в котором четко указать фамилию больного, диагноз, кем направлен, а также нарисовать родословную и указать фамилии, имена, отчества и дату рождения для всех членов семьи, у которых был осуществлен забор крови. Подробнее…

 
 
Генетическая диагностика со внутренней поверхности щеки 

Для некоторых видов анализа пригодна ДНК, выделенная из клеток букального эпителия, собранных на зонд или ватную палочку. Не подходит для детей младше 6 мес.

 
 
генетическая диагностика слюны 

В некоторых случаях возможно провести тест материала, полученного из слюны, однако этот способ является наименее точным и подходит не во всех случаях.

 
 
Кадаверный образец для генетического анализа - ноготь или волосы 

В случае недоступности человека для исследования, возможно выделение ДНК из секционного материала (парафиновых блоков), ногтей.

 
  
 Как собирать образцы для генетического анализа
Как собирать образцы для генетического анализа
 
 ДНК диагностика глазных болезней в России и СНГ
Мы работаем в России и странах СНГ
 
 Как проводится генетическая диагностика в офтальмологии
Как проводится ген.диагностика
 
 Цены на ДНК диагностику глазных болезней
Из чего складывается цена анализа?
 
 Как правильно рисовать генеалогическое дерево
Как правильно составлять историю здоровья семьи?
 
 секвенирование нового поколения
Используемые нами технологии
 
 клинические признаки при генетической диагностике
Необходимые для ген.анализа клинические данные
 
 Organum visus Голубев Сергей Юрьевич
Информационный партнер проекта
 
 Профессионально о зрении портал OD OS
Информационный партнер проекта
 
 

Источник