Соп по общему анализу крови

1 Область применения

Настоящая  стандартизованная операционная далее (процедура – СОП) определяет порядок выполнения анализа общего крови.

Настоящая СОП предназначена врача для клинической лабораторной диагностики, биолога и лаборанта-фельдшера.

2 Нормативные ссылки

2.1  ГОСТ Р 53079.4 – Технологии. 2008 лабораторные клинические. Обеспечение качества исследований лабораторных. Часть 4. Правила ведения преаналитического Руководство.

2.2    этапа пользователя автоматического гематологического анализатора Луговская-21.

2.3   С. А. SysmexKX и др. «Гематологические  анализаторы. Интерпретация общего крови анализа».

2.5   Инструкция по применению красителя азур-Романовскому по эозин

2.6   С. А. Луговская  и соавт. «Лабораторная гематология»

2.7   заведующего Справочник КДЛ 1 январь 2009 г. М. М. Антипов «оседания Скорость эритроцитов. Современные методы определения и интерпретация клиническая».

2.8  Руководство для пользователей автоматического СОЭ анализатора SRS20/II

2.9  Руководство по эксплуатации модуля мазковHematekSlideStainer окрашивания.

3 Термины и определения

3.1. Клинический анализ общий (крови анализ крови) – анализ качественных и свойств количественных форменных элементов крови.

3.2. Лейкограмма — соотношение процентное различных видов лейкоцитов, определяемое подсчёте при их в окрашенном мазке крови под Общие.

4 микроскопом положения

Клинический анализ крови – важнейших  из один диагностических методов, тонко отражающих кроветворных реакцию органов на воздействие различных физиологических и факторов патологических. Общеклиническое исследование крови имеет значение большое в постановке диагноза, а при заболеваниях кроветворения системы ему отводят ведущую роль.

 5  обеспечению к Требования выполнения технологии

5.1 Лабораторное оборудование: гематологический автоматический анализатор SysmexKX-21, ротамикс RM1-L, бинокулярный микроскоп с иммерсией и встроенным осветителем LeicaDM1000, лейкоцитарной счетчик формулы крови СЛФ-ЭЦ-01-09, автоматический СОЭSRS анализатор 20/II, модуль окрашивания мазков HematekSlideStainer.

5.2 реактивы, Реагенты: Диюлент CELLPACK, WBC/RBC раствор лизирующий STROMATOLYSER-WH, детергент CELLCLEAN, набор для реагентов автоматической окраски препаратов крови и мозга костного (НПФ Арбис+)

5.3 Прочий расходуемый масло: материал иммерсионное, предметные стекла, шпатель приготовления для мазков крови Flexi-strip, система вакуумная для забора крови BDVacutainerK2E, система вакуумная для забора крови Vacuette перчатки, 4NCESRsodiumcitrate медицинские, дезинфицирующее средство «Мелисептол», медицинский спирт 70%, дозатор автоматическмй 20-200 наконечники, мкл для автоматического дозатора, штативы предметных для стекол, буферная смесь для исследований гематологических (производства НПФ «Абрис+»), штативы предметных для стекол, штативы пластиковые для марля, пробирок, вода дистиллированная, бумага фильтровальная, мерные цилиндры вместимостью 25-1000 мл, таймер.

6 Требования к выполнения технологии исследования (работ)

6.1 Взятие образца: общего для анализа крови используется венозная Забор. кровь крови производится с использованием вакуумной BDVacutainerK2E системы, для определения СОЭ используются для система забора кровиVacuette 4NCESRsodiumcitrate . Пробы доставляются крови в течении 1 часа в лабораторию при температурного соблюдении режима 2-8 оС . Технология взятия и требования к этапу преаналитическому согласно ГОСТ Р 53079.4 – 2008. лабораторные Технологии клинические. Обеспечение качества лабораторных Часть. исследований 4. Правила ведения преаналитического этапа.

6.2 приемлемость и Идентификация образца: при поступлении образца лабораторию в крови лаборант, принимающий материал, должен правильность проверить оформления направления на анализ, маркировку наличие (пробирки штрих-кода), оценить объем отсутствие, пробы видимых сгустков, дату и время крови забора, время доставки образца в лабораторию и правил соблюдение транспортировки, в случае необходимости отметить в отсрочку бланке анализа и использование охлаждения образца, полученный зарегистрировать материал. Перед проведением исследования должны образцы быть доведены до комнатной температуры.

6.3 исследования Технология.

Этапы клинического исследования крови:

1. исследования Выполнение на гематологическом анализаторе (показатели: количество WBC (лейкоцитов), количество эритроцитов (RBC), концентрация HGB (гемоглобина), гематокрит (HCT), количество тромбоцитов (средний), PLT объем эритроцита (MCV), среднее гемоглобина содержание в эритроцитах (MCH), средняя концентрация эритроците в гемоглобина (MCHC), показатель гетерогенности эритроцитов по RDW (объему-CV, RDW-SD), взвешенное распределение тромбоцитов (средний), PDW объем тромбоцита (MPV), отношение (%) крупных объема тромбоцитов ко всему объему тромбоцитов (P-образцы)): LCR помещаются в ротамикс для перемешивания течении в пробы 3-5 минут.  С помощью сканера с пробирки штрих считывается-код. Порядок проведения аналитической гематологическом на процедуры анализаторе см. «Руководство пользователя автоматического анализатора гематологического SysmexKX-21» п. 2.4.1.
2. После аспирации образца предметное на анализатором стекло с помощью       дозатора наносится 10 крови мкл и с помощью шпателя готовится мазок Приготовление. крови  и покраска  мазков см. Руководство по эксплуатации окрашивания модуля мазков HematekSlideStainer.
3. Установка пробирок определения для СОЭ по методу Вестергрена в автоматический СОЭ анализатор SRS20/II.
   1.  Подсчет лейкоцитарной формулы в производится мазке с помощью бинокулярного микроскопа Leica и лейкоцитарной счетчика формулы крови. Технологию подсчета см. С. А. соавт  и Луговская. «Лабораторная гематология» «Морфологическое исследование крови мазков». Лейкоцитарная формула записывается в виде бланк на лейкограммы распечатки результатов анализа, выполненного на анализаторе гематологическом.
   2. Показатели исследования, выполненные на гематологическом переносятся, анализаторе в электронную форму бланка ответа Лейкограмма. автоматически с указанием особенностей морфологии эритроцитов и СОЭ и лейкоцитов вносятся вручную, проверяются врачом диагностики лабораторной, утверждаются и отправляются в регистратуру медицинского Бланк. центра распечатки результатов общего анализа гематологического с крови анализатора вклеивается в бумажный журнал исследований регистрации общего анализа крови.

7. Обеспечение выполнения качества исследования

7.1 Контроль качества оборудования и Контроль

материалов работы оборудования проводится согласно процедуре документированной «Управление оборудованием».

Наборы реагентов пределах в используются установленных сроков годности и хранятся регламентированных при в паспорте условиях.

7.2 Контроль качества Контроль

исследования качества работы гематологического анализатора см. «пользователя Руководство автоматического гематологического анализатора SysmexKX-21» п. 5, Х Регистрация.

7.3 контроль контрольных мероприятий

Результаты контроля выводятся качества на компьютер и хранятся в электронном виде.

Источник

Пример стандартной операционной процедуры по планированию качества количественного метода исследования.

Используя данный пример, Вы можете разработать СОП по количественным методам исследований.

Содержание

 1.Область применения

 Настоящая  стандартная операционная процедура (далее- СОП) описывает алгоритм планирования качества количественного метода исследования общей амилазы в сыворотке крови на модульной платформе cobas 6000, биохимическом модуле  с501 фирмы Roche.

   Настоящая СОП предназначена для врачей клинической лабораторной              диагностики.

 2. Нормативные ссылки

1. ISO 15189:2012 «Лаборатории медицинские. Требования к качеству и компетентности»
2. https://www.westgard.com/biodatabase1.htm. Дата обращения 10.08.2014
3. https://15189.ru/data/documents/MEDxChart.xls
4. МР «Планирование аналитического качества количественных лабораторных исследований с использованием коммерческих контрольных материалов», М.2013, И.А. Арефьева, М.М. Федорова, А.В. Мошкин
5. Приказ № 45 от 07.02.2000 г «О системе мер по повышению качества клинических лабораторных исследований в учреждениях здравоохранения Российской Федерации».
6.  ГОСТ Р 53133.2-2008 «Контроль качества клинических лабораторных исследований. Часть 2.  Правила проведения внутрилабораторного контроля качества количественных методов клинических лабораторных исследований с использованием контрольных материалов».
7. Инструкция к реагенту общая амилаза (AMYL2) фирмы Roche, каталожный номер № 03183742 122.
8. А. В. Мошкин, В. В. Долгов «Обеспечение качества в клинической лабораторной диагностике», М.2004,-с.117-118

            3. Выбор аналитического метода.

3.1 На первом этапе планирования аналитического качества необходимо выбрать аналитический метод исследования аналита у производителя, оценив его характеристики:

— АППЛИКАЦИОННЫЕ (типы анализируемых образцов-сыворотка, данный тест возможно выполнять на модульной платформе cobas 6000, биохимическом модуле  с501 в соответствии с его техническими возможностями, специально обученнного персонала  для выполнения данного теста  не требуется);

—МЕТОДОЛОГИЧЕСКИЕ (метод измерения-ферментативный колориметрический в соответствии со стандартами IFCC (International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, Международная федерация клинической химии и лабораторной медицины), реакция протекает при 37оС, для калибровки прибора используется универсальный калибратор CFAS, каталожный номер 10759350 190. Калибратор прослеживаем к мастер калибратору фирмы Roche.

-РАБОЧИЕ (нижний предел обнаружения — 3Е/л, диапазон измерений          3-1500 Е/л, межсерийная воспроизводимость теста, заявленная производителем, с применением контрольных материалов 1,3-1,5%, интерференция: иктеричность не оказывает значимого влияния на результаты до 60 индекса иктеричности, гемолиз-до 500 индекса гемолиза, липемия-до 1500 индекса липемии).

Данные характеристики аналитического метода определения общей амилазы в сыворотке крои удовлетворяют потребностям лаборатории.

3.2 Данный метод необходимо адаптировать в прибор через систему cobas LINK. Для этого необходимо зайти  в меню «UTILITY» — «APPLICATION» -«SERCH» — «AMYL2» — «DOWNLOAD». Затем провести адаптацию калибратора и контрольного материала: зайти в меню «Calibration» -«SERCH» — «CFAS» —   «DOWNLOAD» — «QC» — «SERCH» — «PPU, PNU» —   «DOWNLOAD».

4. Подтверждение спецификаций производителя (верификация) аналитического метода — определение общей амилазы в сыворотке с использованием протокола, разработанного на основе CLSIEP15-A2 «UserVerificationofPerformanceforPrecisionandTrueness; ApprovedGuideline—SecondEdition»

                           Протокол EP15-A2 необходимо скачать в виде таблицы Exсelс сайта 15189.ru

                 4.1 Ежедневно в течение 5 рабочих дней проводить в трех повторах измерение 2-х уровнего контрольного материала фирмы Roche (Precinorm U, Precipath U) с интервалом не менее 2-х часов в одной аналитической серии. Если, вследствие проведения внутрилабораторного контроля качества (ВКК) или по техническим причинам аналитическая серия была отклонена, то необходимо удалить данные и провести новую аналитическую серию.

      4.2 В процессе выполнения протокола также необходимо проводить ежедневный ВКК в соответствии с приказом № 45 от 07.02.2000 г «О системе мер по повышению качества клинических лабораторных исследований в учреждениях здравоохранения Российской Федерации» и ГОСТ Р 53133-2008 «Контроль качества клинических лабораторных исследований. Правила проведения внутрилабораторного контроля качества количественных методов клинических лабораторных исследований с использованием контрольных материалов».

      4.3 Все полученные результаты измерений контрольного материала внести в протокол стандарта EP5-A2, указав в столбце «Date»-даты проведения исследования, в столбцах «Rep1», ««Rep2», ««Rep3»  внести значения ежедневных измерений контрольного материала в трех повторах. Протокол верификации приведен в приложении № 1.

4.4 В нижней части протокола напротив коэффициента вариации (CV) внести значение межсерийного СV(%), а напротив среднего значения «mean», указать среднее значение контрольного материала производителя. Данные CV(%) и среднее значение контрольного материала указано в инструкции производителя для определения общей амилазы в сыворотке крови. См. таблицу № 1

Таблица № 1

Межсерийная воспроизводимость (Intermediate precision) и среднее значение (mean) контрольного материала, указанные в инструкции производителя фирмы Roche для определения общей амилазы в сыворотке крови.

      4.4 Внеся в протокол выше перечисленные данные мы получили, что «верификационное значение» (VV) больше лабораторного SD (Laboratory CV). Соответственно, наш метод определения общей амилазы в сыворотке крови был верифицирован, поэтому лаборатория имеет полное право выдавать результаты исследований общей амилазы в сыворотке крови своим клиентам.

      4.5 После подтверждения спецификаций производителя определения общей амилазы в сыворотке крови необходимо переходить к установлению требований к качеству данного аналита.

5. Предварительная оценка достигнутого качества на основе данных по биологической вариации.

         5.1 На первом этапе установления требований к качеству аналита необходимо набрать установочную серию из 20 измерений согласно приказу № 45 от 07.02.2000 г «О системе мер по повышению качества клинических лабораторных исследований в учреждениях здравоохранения Российской Федерации», но для объективной оценки работы аналитической системы необходимо набрать не менее 50 контрольных измерений в зоне принятия клинического решения.

5.2 На основе полученных данных рассчитать CV(%) по формуле CV(%):

, где:

S-среднеквадратичное отклонение;

x-среднее арифметическое значение результатов n измерений .

Наше CV=135/50=2,7%.

   5.3 Рассчитать свою общую аналитическую ошибку (TЕa) по формуле: TEa=Bias+1,96*CV(%), где:

    Bias-смещение, предоставленное программой ВОК (EQAS).

    Наша TEa=0,6+1,96*2,7%=9,54%.

5.4 Рассчитать количество сигм для метода определения общей амилазы в сыворотке крови по формуле: Sigma=(TEa-B)/CV. Для автоматического расчета сигмы на сайте https://15189.ru/data/documents/MEDxChart.xls представлена таблица «Normalized Metod Evalution Desion Chart», в которую в столбец «F» необходимо внести свое значение CV(%), полученное при проведении ВКК и в столбец «G» внести смещение, полученное из ВОК.

Наша сигма=(14,6-0,6)/2,7=5,18. Данные ТEa указаны на сайте: https://www.westgard.com/biodatabase1.htm.

        6. Установление требований к аналитическому качеству метода определения общей амилазы в сыворотке крови на основе данных по биологической вариации

 6.1. Внесем в таблицу № 2 полученные статистические характеристики при проведении ВКК и сравним их с мировыми рекомендациями по биологической вариации Ricos C, представленные на сайте : https://www.westgard.com/biodatabase1.htm.

Таблица № 2

Сравнительная таблица достигнутого аналитического качества определения общей амилазы в сыворотке крови с мировыми рекомендациями базы данных Ricos C по биологической вариации.

CVi — внутрииндивидуальная биологическая вариация

        Достигнутое аналитическое качество определения общей амилазы в сыворотке крови соответствует мировым требованиям Ricos по биологической вариации.

       7.0 Алгоритм определения требований к аналитическому качеству количественных методов исследований в лаборатории.

7.1 Проведя предварительную оценку достигнутого в лаборатории аналитического качества определения общей амилазы в сыворотке крови и рассчитав сигму, которая равна 5,18, устанавливаем требования к качеству на базовом уровне. Для этого оцениваем следующие статистичекие показатели:

a)                CVмакс<0,5*CVi. Подставив наши данные, получаем, что CVмакс=0,5*8,7=4,35. Наш внутрилабораторный CV(%)=2,7%, что соответствует базовым требованиям к качеству определения общей амилазы в сыворотке крови.

b)                Bмакс<0,25* √(CVi2+CVG2). Вмакс для базового уровня качества определения общей амилазы в сыворотке крови соответствует 7,4. Наше смещение не выходит за пределы смещения (В(%)), установленных с учетом базовых требований к качеству.

c)                 TEa<1,65*(0,5*CVi)+0,25*√(СVi2+CVG2). ТЕа для базового уровня качества определения общей амилазы в сыворотке крови соответствует 14,6. Наше ТЕа=9.54, что соответствует базовым требованиям к качеству определения общей амилазы в сыворотке крови

7.2 Внесем все полученные данные в таблицу № 3.

Таблица № 3

Сравнительная таблица достигнутого аналитического качества на базовом уровне требования к качеству определения общей амилазы в сыворотке крови с мировыми рекомендациями базы данных Ricos C по биологической вариации качества на базовом уровне требования к качеству.

           8. Оценка результатов сигмаметрии и планирование проведения ВКК.

        Наша Sigma равна 5,18. Поэтому для проведения ВКК выбираем  запрещающее правило 12,5S для двух уровней контрольного материала, анализируемых ежедневно.

1. Выбор системы внешней оценки качества (ВОК).

   В соответствии с рекомендациями по выбору ВОК, описанные в учебном пособии Мошкина А. В. (А. В. Мошкин, В. В. Долгов «Обеспечение качества в клинической лабораторной диагностике», М.2004,-с.117-118), мы выбрали EQAS (External Quality Assurance Services, Внешнее служба обеспечения качества), Clinical Chemistry (Monthly) Program (Ежемесячная программа по биохимии).

10. Проведение исследование биоматериала на аналитической системе.

  Исследование биоматериала на анализаторах, его калибровка проводится строго согласно инструкции производителя.

11. Выдача результатов.

  Решение о приемлемости результатов проведения ВКК решает врач ответственный за качество исследований. В случае получения неудовлетворительных результатов ВКК, аналитическая серия признается неприемлемой, результаты пациентов бракуются, делается запись в журнале «Регистрация отбракованных результатов внутрилабораторного контроля качества», останавливается работа аналитической системы и выясняется причина возникновения ошибки. После устранения причин, повлекших за собой возникновение данной ошибки, измерение контрольного материала и образцы пациентов повторяются.

  Алгоритм выда?