Сколько стоит анализ крови на клещевого энцефалита

Информация об исследовании

Исследование иксодового клеща методом ПЦР на наличие генетического материала возбудителей боррелиоза (болезни Лайма), вирусного клещевого энцефалита, моноцитарного эрлихиоза, гранулоцитарного анаплазмоза. Формат представления результатов качественный.

Возбудитель клещевого энцефалита – РНК-содержащий вирус семейства Flaviviridae. Заражение происходит трансмиссивным путем при укусе клеща, инфицированного вирусом. В редких случаях возможно заражение алиментарным путем: при употреблении в пищу не прошедших термическую обработку продуктов из молока коров или коз, инфицированных вирусом. Возбудитель не передается от человека человеку.

Инфекция поражает клетки нервной ткани, в том числе оболочку головного мозга, серое и белое вещество, спинной мозг, а также клетки других тканей. Этим обусловлено множество форм клинического проявления заболевания. Начинается болезнь, как правило, остро со стремительным нарастанием выраженности симптомов:

чувство озноба из-за высокой температуры (38–39 оС);
сильная слабость, сонливость, заторможенность;
боли в мышцах шеи, спины, поясничной области, рук и ног;
подергивания или дрожь конечностей;
возможно чувство онемения конечности без потери двигательной функции;
ригидность затылочных мышц (невозможность согнуть голову и достать подбородком до груди).

Наиболее тяжелые формы клещевого энцефалита могут начинаться появлением бреда, внезапной потерей сознания, генерализованным судорожным синдромом, как при эпилепсии.

Выявление возбудителя клещевого вирусного энцефалита в клеще позволит своевременно провести экстренную профилактику инфекции. Применение противоэнцефалитной сыворотки показано в срок не позднее 96 часов от момента укуса. При этом инкубационный период инфекции, как правило, составляет 7–12 дней от момента присасывания клеща, но может длиться до 35 дней.
Перечень административных территорий субъектов Российской Федерации, эндемичных по клещевому вирусному энцефалиту в 2019 г.:

https://www.garant.ru/products/ipo/prime/doc/71803714/

Возбудитель болезни Лайма – спиралевидная бактерия (спирохета) рода Borrelia. Большая часть случаев заражения происходит трансмиссивным путем при укусе клеща, инфицированного боррелиями. Также возможен алиментарный путь, при употреблении молока инфицированных животных (молочных продуктов), не прошедших термическую обработку. В редких случаях возможно заражение из-за втирания в кожу фекалий инфицированного клеща при расчесах места укуса. Боррелии могут передаваться от инфицированной матери плоду через плаценту.

Лайм-боррелиоз – это самая распространенная болезнь на Европейском континенте, передаваемая иксодовыми клещами. Болезнь Лайма может длительное время протекать бессимптомно. Первые жалобы на недомогание могут появиться спустя месяцы или годы после заражения. Боррелии способны поражать различные органы и системы органов: суставы, миокард, органы центральной нервной системы и др. Этим обусловлена неспецифичность симптомов. К наиболее частым относят жалобы на боли в суставах.

Характерное для боррелиоза клиническое проявление – блуждающая эритема. Это покраснение на коже вокруг места укуса клеща, которое со временем расширяется и выглядит как кольцевидное красное пятно, в центре которого кожный покров сохраняет естественный цвет. Блуждающая эритема появляется в первые дни после укуса, однако ее отсутствие не исключает факта заражения боррелиями.

Возбудитель гранулоцитарного анаплазмоза человека – бактерия Anaplasma phagocytophilum, которая поражает гранулоциты – белые клетки крови. Заражение происходит трансмиссивным путем при укусе клеща, инфицированного анаплазмами. Инфицированность клещей анаплазмозом в европейской части России достигает 13,4%.

Клинические проявления неспецифичны и зависят от возраста человека, а также сопутствующих заболеваний. Как правило, это лихорадка, слабость, потливость, головная боль, боль в мышцах и суставах. Реже – кашель, тошнота и рвота, диарея. У инфицированных отмечают увеличение крупных лимфатических узлов, поражение почек, увеличение печени и селезенки. Возможно также воспаление оболочек головного и спинного мозга.

Инкубационный период в среднем составляет 14 дней. Болезнь протекает в тяжелой форме у пожилых людей и лиц с ослабленным иммунитетом.

Возбудители моноцитарного эрлихиоза – бактерии, относящиеся к роду Ehrlichia. Они попадают в организм человека со слюной клеща, проникают в кровоток и начинают размножаться в моноцитах (одной из разновидностей белых клеток крови) и в эпителиальных клетках, выстилающих внутреннюю поверхность кровеносных сосудов. Позже поражаются клетки других органов и тканей.

Симптомы эрлихиоза неспецифичны и схожи с симптомами гранулоцитарного анаплазмоза. При тяжелом течении болезни отмечают поражение кожи, печени, почек, центральной нервной системы, костного мозга.

Подготовка к исследованию

Присосавшегося клеща необходимо как можно быстрее удалить без использования масла! (при помощи нитки, пинцета или специального приспособления). Клеща с кусочком влажной ваты поместить в стерильный контейнер. Желательно проводить исследование живого клеща. Живого клеща до исследования допускается хранить в холодильнике при +2 +8 С до 1 мес.

Исследование мертвых клещей допускается при условии соблюдения правил доставки материала в лабораторию. После снятия клеща хранить в холодильнике при температуре +2 +8 С не более 5 суток

Использованная литература

Клещевой вирусный энцефалит у взрослых. Клинические рекомендации Национального научного общества инфекционистов, 2014 г.
https://www.rospotrebnadzor.ru/about/info/predpr/news_predpr.php?ELEMENT_ID=14010&sphrase_id…
Болезнь лайма у взрослых. Клинические рекомендации Министерства Здравоохранения Российской Федерации, 2016 г.
Климова Ю.А. и соавт. Гранулоцитарный анаплазмоз человека// Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Медицина, 2018 г.
Злобин В.И. Клещевые трансмиссивные инфекции // В.И. Злобин, Н.В. Рудаков, И.В. Малов. – Новосибирск: Наука, 2015. – 224 с.

Источник

Клещевой энцефалит – трансмиссивное вирусное заболевание с выраженной сезонностью, зависящей от периода активности иксодовых клещей, и природной очаговостью. Возбудитель – вирус клещевого энцефалита, относящийся к РНК-вирусам рода Flavivirus. В России клещевой энцефалит регистрируется в 46 субъектах, около 70% всех случаев заболевания приходится на Урал и Сибирь. Кроме того, вирус клещевого энцефалита широко распространен в Европе: прибалтийских странах, Чехии, Словакии, Австрии, Германии, Швеции, Норвегии и Финляндии, а также встречается в Казахстане, Монголии, Китае и Японии.

В течение эпидемического сезона в РФ ежегодно регистрируется около 3000 случаев заболевания, средняя летальность при клещевом энцефалите составляет 1,2%. Наиболее тяжелые его формы и летальность около 10% связаны с дальневосточным генотипом вируса, циркулирующем преимущественно на Дальнем Востоке.

Как и многие другие арбовирусные инфекции в 80–90% случаев клещевой энцефалит протекает в инаппарантной форме, в остальных случаях развиваются различные по степени тяжести варианты течения заболевания: лихорадка, вирусные менингит и энцефалит. Также выделяют полиомиелитическую форму заболевания. При неблагоприятном сценарии острая стадия инфекции переходит в прогредиентную (хроническую) форму. В большинстве случаев после очаговой энцефалитической формы развиваются стойкие нарушения деятельности ЦНС.

Показания к обследованию. Лихорадка, головная боль, боль в области мышц шеи и плечевого пояса, тошнота, рвота, гиперемия лица, шеи и верхней части туловища, возможные потеря сознания, бред, психомоторное возбуждение и судорожный приступ при наличии эпидемиологического анамнеза: присасывание клеща, посещение лесной зоны, употребление в пищу сырого козьего молока.

Дифференциальная диагностика

Другие иксодовые клещевые инфекции.
При хронической форме – заболевания ЦНС неинфекционной этиологии.

Материал для исследований

Сыворотка крови – выявление специфических АТ, изоляция вируса в культуре клеток;
плазма крови – выявление РНК вируса;
СМЖ – выявление РНК вируса, изоляция вируса в культуре клеток;
цельная кровь – изоляция вируса в культуре клеток.

Этиологическая лабораторная диагностика включает изоляцию вируса с использованием культуральных методов, обнаружение РНК вируса и его АГ, обнаружение специфических АТ к возбудителю.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Культуральный метод, основанный на изоляции вируса из цельной крови, сыворотки крови, тканей мозга в культуре клеток (СПЭВ, Vero, клещевых клеточных культурах) и с использованием чувствительных лабораторных животных не применяется как рутинный метод в диагностических лабораториях, т. к. требует соблюдения мер биологической безопасности при работе, связанной с накоплением вируса, относящегося ко II группе патогенности.

Обнаружение АГ вируса в анализе на клещевой энцефалит методом ИФА в крови, взятой в инкубационный период, в случае отсутствия переносчика, позволяет провести адекватную профилактику клещевого энцефалита. В период острых клинических проявлений динамическое определение АГ в крови позволяет сделать прогноз о возможном переходе заболевания в хроническую форму, и в случае прогредиентного течения заболевания – дифференцировать клещевой энцефалит от заболеваний нервной системы другой этиологии.

Выявление РНК вируса методом ПЦР обладает высокой диагностической специфичностью, но недостаточной чувствительностью, которая не превышает 50% (относительно обнаружения специфических АТ методом ИФА); исследование проводят только в комплексе с выявлением специфических АТ. Для обнаружения РНК вируса используют пробы крови или СМЖ, взятые в первую неделю острой стадии заболевания или в случае уточнения развития персистенции вируса клещевого энцефалита, при расшифровке летальных исходов исследуют ткани мозга.

Определение специфических АТ IgM и IgG в сыворотке крови и/или в СМЖ выполняют преимущественно методом ИФА. Также для изучения в динамике титров нарастания гемагглютинирующих АТ в остром периоде заболевания используют метод РТГА. АТ IgM к вирусу клещевого энцефалита появляются с 3–4-го дня от начала заболевания, АТ IgG – в среднем на 10–14-й дни. Определенные сложности при лабораторном подтверждении диагноза, основанном на выявлении специфических АТ IgM и динамическом изменении титра АТ IgG в «парных сыворотках», возникают в случае заболевания вакцинированных лиц. Как правило, при этом можно наблюдать в основном нарастание АТ IgG. В этом случае целесообразно использовать методы прямого обнаружения возбудителя: изоляция вируса, обнаружение РНК вируса или его АГ.

Реакция нейтрализации (РН) является наиболее специфичной реакцией для обнаружения АТ. Ограничением для использования этого метода является необходимость работы с живым вирусом и соблюдения соответственных мер биологической безопасности.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Обнаружение РНК вируса клещевого энцефалита в крови и СМЖ пациента является основанием для предварительной постановки диагноза, выявление нарастания титров АТ к вирусу клещевого энцефалита в образцах крови, взятых в динамике (парные сыворотки), служит подтверждением этиологии заболевания.

Источник

Метод исследования: Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Рекомендации по подготовке к проведению исследования

Возбудители инфекций, передающихся иксодовыми клещами

Рис. 1 — Завязать нить вокруг хоботка клеща

Рис. 2 — Скручивая концы нити и подтягивая ее вверх, удалить клеща

При исследовании клещей число особей в одной емкости не должно превышать 5 голодных особей. Длина тела голодных самок клещей рода Ixodes составляет 3,5-4,5 мм.
Клещи крупных размеров исследуются и оплачиваются отдельно.
Исследованию подлежат клещи снятые только с человека.
Недопустимо клещей, снятых с нескольких человек, помещать в одну емкость.

Группа иксодовых клещевых инфекций, возбудители которых передаются клещами рода Ixodes, включает в себя клещевой энцефалит (вирус клещевого энцефалита), иксодовые клещевые боррелиозы (Borrelia burgdorferi sensu lato), гранулоцитарный анаплазмоз человека (Anaplasma phagocytophilum), моноцитарный эрлихиоз человека (Ehrlihia chaffeensis, Ehrlihia muris) и др. Сезон активности иксодовых клещей начинается в последней декаде апреля и продолжается в средней полосе России до октября, а в Приморье – до ноября. Исследование позволяет экстренно провести диагностику наличия опасных возбудителей в клеще и при получении положительного результата обратиться в специализированные учреждения.

Клещевой энцефалит. Возбудитель — Tick-borne encephalitis Virus, TBEV. Около 70% всех случаев клещевого энцефалита в РФ приходится на Урал и Сибирь. В преобладающей части случаев клещевой энцефалит протекает в инаппарантной форме, в остальных случаях развиваются различные по степени тяжести варианты течения заболевания: лихорадка, вирусные менингит и энцефалит. В большинстве случаев после очаговой энцефалитической формы развиваются стойкие нарушения деятельности ЦНС.

Лайм-боррелиоз, болезнь Лайма или иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ) – трансмиссивное полисистемное заболевание, приводящее к поражению опорно-двигательного аппарата, нервной и сердечно-сосудистой систем, кожи. Занимает по широте распространения и уровню заболеваемости одно из ведущих мест среди природно-очаговых заболеваний. В группу иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) входят заболевания, вызываемые в большинстве случаев тремя представителями комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato: B.burgdorferi, B.garinii и B.afzelii. В результате попадания боррелий в кожу у больных отмечается местное кожное воспаление – клещевая мигрирующая эритема. Но почти у 50% пациентов эритема отсутствует в начале заболевания, это так называемая безэритемная форма

Гранулоцитарный анаплазмоз человека относится к острым лихорадочным заболеваниям. Возбудителем заболевания является Anaplasma phagocytophillum. Размножение анаплазм в нейтрофилах приводит к ослаблению иммунных защитных реакций организма. Для данного заболевания характерно острое начало с высокой лихорадкой, слабостью, головной и мышечными болями.

Моноцитарный эрлихиоз человека вызывается микроорганизмами рода Ehrlichia: E.chaffeensis, E.muris. Эрлихии поражают кожу, печень, ЦНС (центральную нервную систему) и костный мозг, образуя в этих органах инфекционные гранулемы. Клинически выраженное заболевание чаще регистрируется у детей и в группе пациентов старше 40 лет. Для моноцитарного эрлихиоза человека характерно развитие выраженного общеинтоксикационного синдрома в острый период заболевания: высокая лихорадка, сопровождающаяся ознобом, головной и мышечной болью, артралгиями, абдоминальной болью.

ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:

Исследование клеща в случае присасывания с целью принятия мер экстренной профилактики
Эпидемиологические исследования

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения
B.burgdorferi sl (ИКБ)	Не обнаружено
A.phagocytophillum (ГАЧ)	Не обнаружено
E.chaffeensis / E.muris (МЭЧ)	Не обнаружено
TBEV (КЭ)	Не обнаружено

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

В случае отрицательного результата и наличия факта присасывания внимательно наблюдать за возможными клиническими признаками проявления заболеваний, передающихся иксодовыми клещами. При появлении клинических симптомов обратиться к врачу-инфекционисту.

Результат «ОБНАРУЖЕНО» означает, что в клеще присутствует соответствующий возбудитель инфекций, переносимых иксодовыми клещами. Рекомендуется срочно принять профилактические меры, которые позволят Вам предотвратить или существенно снизить тяжесть клинических проявлений вышеописанных заболеваний.

1. При обнаружении в клеще вируса клещевого энцефалита проводится экстренная серопрофилактика в специализированных ЛПУ.

Адреса специализированных Центров экстренной профилактики против клещевого энцефалита г. Москвы:

Для взрослых: Инфекционная клиническая больница №2 Департамента здравоохранения города Москвы, Москва, 8-я ул. Соколиной горы, д. 15. Справочная служба: +7(495) 365-00-58. Городской консультативный кабинет по вакцинно-сывороточной профилактике клещевого вирусного энцефалита: тел. +7 (495) 366-84-68, +7 (495) 365-01-47 ( www.mosgorzdrav.ru/ikb2)

Для детей: Детская городская клиническая больница №13 им. Н.Ф.Филатова, Москва, ул. Садовая Кудринская, д.15. Справочная служба: +7 (499) 254-91-29.

Жители Московской области могут получить специализированную помощь по месту жительства в ЦРБ или по вышеуказанным адресам.

2. При обнаружении в клеще патогенных видов боррелий, анаплазм и эрлихий проводится антибиотикопрофилактика, назначаемая врачом-инфекционистом.

При подозрении на клещевые инфекции, для наблюдения за возможным развитием заболевания рекомендуется исследовать кровь на наличие специфических антител в первые дни заболевания и в динамике с интервалом 10-14 дней. (Согласно СП 3.1.3310-15 Профилактика инфекций, передающихся иксодовыми клещами).

Источник

Информация об исследовании

Биологический материал: кровь

Клещевой энцефалит – менингоэнцефалит — вирусная инфекция нервной системы поражает не только человека, но и других млекопитающих. Вирус может инфицировать мозг, мозговые оболочки или то и другое вместе (менингоэнцефалит). Клещевой энцефалит — природноочаговое заболевание распространённое в России в основном в Сибири, Урале и на Дальном Востоке. В природе вирус имеет хозяина — клеща.
Этиология: возбудитель вирус клещевого энцефалита — член семейства флавивирусов (род flavivirius).

Выделяют 3 разновидности вируса:
1.Дальневосточный подвид
2.Центральноевропейский подвид
3.Возбудитель двухволнового менингоэнцефалита

Вирионы возбудителя клещевого энцефалита имеют сферическую форму с диаметром 40-50 нм. Внутренним компонентом является нуклеокапсид. Вирус длительное время сохраняется при низких температурах (оптимальный режим — 60 градусов и ниже). Быстро инактивируется при комнатной температуре.
Эпидемиология. Основными переносчикам вируса являются иксодовые клещи (Ixodes persulcatus, Ixodes nicinus). Во всех природных очагах вирус циркулирует между клещами и дикими животными (главным образом грызунами и птицами), которые являются дополнительным резервуаром. В антропурических очагах (местности сильно изменённые деятельностью человека) резервуаром могут служить домащние животные — козы и коровы. Вирус клещевого энцефалита может передоваться клещами трансовариально через яйцеклетки их потомству.

Пути передачи.
— Трансмисивный путь — через укус клеща.
— Алиментарный путь — при употреблении в пищу сырого молока и молочных продуктов инфецированных коз и коров.
Максимальный подъём заболеваемости в мае-июне. Второй менее выраженный подъём заболеваемости регистрируется в августе-сентябре, что сязанно с активностью и численностью клещей.
Клиническая картина.
Инкубационный период: при укусе клеща длится от 1-й до 2-х-3-х недель, при алиментарном способе заражения 4-7 дней. Клещевой энцефалит начинается внезапно с лихорадки, интоксикации. Температура тела повышается до 38-39 градусов. Больных беспокоят сильная головная боль, слабость, тошнота, рвота, нарушение сна. Характерен внешний вид больного — кожа лица, шеи, верхней половины грудной клетки, коньюктивы — гиперемированы, склеры инъецированы. Заболевание может завершиться в 3-5 дней.
Такая форма называется лихорадочной. Является одной из самых частых, но редко диагностируется. Поражение нервной системы при этой форме отсутствует. Менингиальная форма клещевого энцефалита характеризуется общемозговым синдромом, появляются регидность мышц затылка, симптомы Кернига и Брудзинского. Изменения в цереброспинальной жидкости свидетельствует о серозном менингите. Лихорадка длиться 10-14 дней.
Менингоэнцефалитическая форма протекает значительно тяжелее. Больной становиться вялым, заторможенным, сонливым. Усиливаются головные боли, тошнота, рвота, нередко наблюдается бред, галлюцинации, психомоторное возбуждение, нарушение сознания, у некоторых больных могут быть судороги, эпилептиформные припадки. Поражаются нервы иннервирующие лицевую и глазодвигательную мускулатуру и другие черепномозговые нервы.
Полирадикулоневритическая форма протекает с поражением периферических нервов и корешков с болями по ходу нервных стволов, нарушением чувствительности.
Полиэнцефаломиелитическая форма — наблюдаются проявления полимиелитического синдрома в виде симптома ‘’свисающей головы’’, ’’опущенных надплечий’’, ’’свисающих вдоль тела рук’’. Также периодически возникают подёргивания мышц фибриллярного или фасцикулярного характера. Полиэнцефаломиелитические нарушения могут сочетаться с проводниковыми, обычно пирамидными, вялые парезы рук и спастические ног. Комбинации амиотрофии и гиперфлексии в пределах одной паретической конечности.
Одним из методов диагностики клещевого энцефалита является ПЦР.
ПЦР (полимеразная цепная реакция) — это метод, который позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации (ДНК) любого организма среди огромного количества других участков и многократно размножить его.

Достоинства метода:
-Более высокая чувствительность по сравнению с другими методами
-Высокая специфичность метода
-Позволяет выявить возбудитель в малом количестве пробы
-Позволяет выявить только живые микроорганизмы
-Является ранним контролем результатов проведенного лечения
-Скорость проведения анализов

Показания к исследованию.
-Выявление возбудителя при латентном и бессимптомном течении воспалительного процесса .
-Является единственным подтверждающим тестом, так как другие методы лабораторной диагностики (микроскопия и бактериологический) обладают более низкой чувствительностью по сравнению с ПЦР .
-Контроль эффективности проведенного лечения.

Источник