Сдать анализ крови на вич пцр
Полимеразную цепную реакцию (Polymerase chain reaction, ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году американский биохимик Кэри Б. Мюллис. В 1993 году за это открытие он был удостоен Нобелевской премии.
Сегодня области применения ПЦР как современного метода молекулярной биологии чрезвычайно широки. Особое место диагностика ПЦР занимает в медицинской практике. И причина этому достаточно проста: полимеразная цепная реакция делает невозможное возможным.
Часто диагностику ПЦР образно описывают как метод, с помощью которого можно находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл. «Иглой» является крошечный фрагмент генетического материала клеток (ДНК или РНК).
Таким образом, открытие этого метода — одно из наиболее выдающихся событий в области молекулярной биологии за последние десятилетия. Развитие метода ПЦР позволило медицинской диагностике в целом подняться на качественно новый уровень.
Основы ПЦР
Основа метода — многократное избирательное копирование (амплификация) определённого участка ДНК с целью получения такого количества генетического материала, которого будет достаточно для визуальной детекции. При этом многократно копируется (амплифицируется) только заданный участок ДНК при условии, что он присутствует в исследуемом биоматериале.
Кроме того, исследование помимо простого увеличения количества копий участков ДНК позволяет проводить другие манипуляции с генетическим материалом. Поэтому метод широко применяется в научных исследованиях, биологической и медицинской практике: в диагностике инфекционных и наследственных заболеваний, при выявлении мутаций, генотипировании, установлении отцовства, идентификация личности и др.
ПЦР в диагностике инфекционных болезней
Сегодня ПЦР-диагностика инфекций — один из самых точных, чувствительных и эффективных клинических лабораторных методов. Причём спектр выявляемых возбудителей практически неограничен – была бы разработана тест-система для ПЦР-анализа искомого возбудителя.
Благодаря своей высокой чувствительности, ПЦР позволяет выявить возбудителя даже при его минимальном содержании (то есть в исследуемом биоматериале присутствуют всего несколько молекул его ДНК).
ПЦР выявляет возбудителей инфекционных заболеваний тогда, когда это невозможно сделать другими методами (иммунологическими, культуральными, микроскопическими). Поэтому для целого ряда возбудителей инфекций метод полимеразной цепной реакции стал «золотым стандартом», он проверен временем и апробирован клинически. В современной лабораторной диагностике инфекционных болезней ПЦР — самый чувствительный и специфичный метод прямого обнаружения возбудителей. Это позволяет не только установить этиологию заболевания, но и контролировать течение инфекционного процесса и оценивать эффективность проводимого лечения.
Анализ на ИППП методом ПЦР особенно актуальны при бессимптомном течении инфекционного процесса, вызванного безусловно-патогенными микроорганизмами (Хламидия , качественное определение ДНК; Микоплазма, качественное определение ДНК; Возбудитель гонореи, качественное определение ДНК; Возбудитель трихомоноза, качественное определение ДНК). Например, при хронической гонорее у женщин даже с помощью бактериологического метода часто не удается выявить гонококк, несмотря на имеющиеся симптомы хронического воспалительного процесса в шейке матки или уретре.
Современная ПЦР-диагностика позволяет не только выявить генетический материал возбудителей инфекций, но и определить концентрации их ДНК/РНК (количественный формат исследования). Определение количества возбудителей имеет важное значение в решении вопроса о назначении лечения, особенно если выявлены условно-патогенные микроорганизмы (Микоплазма, количественное определение ДНК; Типирование уреаплазмы, количественное определение ДНК) .
Одним из основных направлений развития метода ПЦР является разработанный в CMD формат «Мультипрайм», позволяющий выявить в одной пробирке (и одной реакции) нескольких патогенов.
- Комплексное исследование ИППП
- Урогенитальные инфекции у мужчин
- Урогенитальные инфекции у женщин
- Возбудители кишечных инфекций
- Возбудители кишечных инфекций
- Возбудители коклюша/паракоклюша
- Диагностика ОРВИ
- Возбудители инфекций, передающихся иксодовыми клещами
- Герпесвирусы
ПЦР-диагностика гепатитов
В настоящее время известно как минимум 5 вирусов, способность которых вызывать поражение печени доказана. Это возбудители гепатита А, В, С, D, Е. В редких случаях гепатит может быть вызван вирусами Эпштейна-Барр и простого герпеса. Способность поражать печень таких агентов как вирусы ТТ и гепатита G сегодня признается не всеми. Все эти вирусы относятся к различным семействам, имеют разные биологические свойства и соответственно, тактика лечения будет тоже значительно отличаться в зависимости от этиологии гепатита.
Учитывая вышеизложенное, весьма актуальной проблемой является адекватная этиологическая диагностика вирусных гепатитов с выявлением конкретного возбудителя. Без использования современных молекулярно-биологических методов это невозможно. Поэтому диагностика гепатитов методом полимеразной цепной реакции — один из самых важнейших шагов в установлении причины заболевания и определения дальнейшей тактики лечения.
- Вирус гепатита А, качественное определение
- Вирус гепатита В, количественное определение ДНК
- Вирус гепатита В, качественное определение генотипа
- Вирус гепатита С, качественное определение РНК
- Вирус гепатита С, количественное определение РНК
- Вирус гепатита С, определение генотипа
- Вирус гепатита D, качественное определение РНК
ПЦР в диагностике ВИЧ-инфекции
В настоящее время для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции используется наиболее доступный и одновременно чувствительный подход — обнаружение в крови антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) – с последующим подтверждением положительных результатов анализа методом иммуноблоттинга (ИБ). Эффективность выявления лиц, инфицированных ВИЧ, с помощью данного подхода может достигать 99% и более.
Но серологическая диагностика ВИЧ-инфекции имеет ряд ограничений:
- Неэффективность в период т.н. «серологического окна» (в первые недели после заражения антитела не выявляются по причине их отсутствия или низкой концентрации).
- Антитела к ВИЧ длительное время выявляются у всех детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей.
- Ложноположительные результаты ИФА из-за присутствия в крови антител к антигенам, сходным с антигенами ВИЧ.
- Ложноотрицательные и сомнительные результаты ИФА и иммуноблоттинга (особенно у пациентов в терминальной стадии заболевания).
Поэтому анализы ПЦР при обследовании на ВИЧ-инфекцию сегодня находят всё более широкое применение. Согласно «Методическим рекомендациям о проведении обследования на ВИЧ-инфекцию» (утв. Минздравсоцразвития РФ 06.08.2007) «при наличии эпидемиологических критериев, свидетельствующих о недавнем риске заражения ВИЧ для пациентов и при этом предположительно ложноположительных или ложноотрицательных результатов в ИФА и ИБ, например, при обследовании детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, или пациентов в периоде «серонегативного окна» используется метод ПЦР, при котором обнаруживается генный материал ВИЧ…..». А в случае уже установленного диагноза ВИЧ-инфекции анализ методом ПЦР используется для прогноза, динамического наблюдения и мониторинга проводимой терапии.
- Вирус иммунодефицита человека качественное определение ДНК провируса, ПЦР
- Вирус иммунодефицита человека количественное определение РНК, ПЦР
- Комплексная диагностика: качественное определение РНК вируса гепатита С/ ДНК вируса гепатита В/ РНК вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) 1 и 2 типа
В Центре молекулярной диагностики (CMD) можно сдать ПЦР-анализ на ВИЧ анонимно.
Где сдать анализы ПЦР?
Для этого обращайтесь к разделу сайта «Где сдать анализы».
Источник
Информация об исследовании
Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) – это возбудитель хронической системной вирусной инфекции (ВИЧ-инфекции). Его относят к семейству ретровирусов, или Retroviridae. Вирусная частица представляет собой генетический материал (РНК), упакованный в белковую капсулу – капсид вируса, которая в свою очередь покрыта вирусной оболочкой, или суперкапсидом. На сегодняшний день известны два типа вируса – ВИЧ-1 и ВИЧ-2. ВИЧ-2 распространен преимущественно в западноафриканских странах.
ВИЧ-инфекция – медленно прогрессирующее заболевание, при котором происходит поражение иммунной системы с развитием синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИДа). СПИД – это терминальная стадия развития ВИЧ-инфекции, которая сопровождается широким спектром вторичных (оппортунистических) заболеваний. При СПИДе оппортунистические инфекции поражают все органы и системы ВИЧ-инфицированных.
После заражения вирус проникает в клетки, на поверхности которых представлен рецептор CD4 (кластер дифференцировки 4) – трансмембранная гликопротеиновая молекула. Такой рецептор есть только у одного типа клеток – Т-хелперов. Это популяция белых клеток крови (Т-лимфоцитов), которая играет ключевую роль в поддержании необходимого уровня адаптивного иммунного ответа, то есть реакции организма на чужеродные агенты. Это приводит к нарушению функции иммунной системы у ВИЧ-инфицированных.
Вакцины, предотвращающей заражение ВИЧ-инфекцией, не существует. Однако разработаны препараты для антиретровирусной терапии, которая позволяет остановить развитие ВИЧ-инфекции и предотвратить иммунодефицитное состояние.
Качественное определение РНК позволяет обнаружить ВИЧ-инфекцию до обнаружения антител к возбудителю ВИЧ-инфекции.
Анонимный анализ на ВИЧ
Согласно п.2, ст.8 ФЗ РФ № 38-ФЗ, пациент может анонимно сдать анализ на ВИЧ и получить результат по индивидуальному номеру заказа, не подлежащему разглашению. Тем, кто по каким-либо причинам не имеет возможности приехать на обследование в одно из отделений Лаборатории Гемотест, мы рекомендуем воспользоваться услугой по выезду медсестры для взятия крови с последующей регистрацией взятой пробы как анонимного заказа.
Обращаем Ваше внимание: результаты анонимных анализов на СПИД (ВИЧ) не могут быть использованы для профессиональных осмотров, госпитализации или предоставления лечащему врачу в поликлинике.
Результаты исследования на ВИЧ независимо от их результата выдаются только при личном обращении пациента в лабораторное отделение. При обследовании несовершеннолетних (до 14 лет) детей — законному представителю, указанному в заказе.
Результаты выдаются при предъявлении договора, сметы и документа, удостоверяющего личность самого пациента или представителя пациента, указанного в заказе.
По телефону и электронной почте результаты исследований не сообщаются.
ЕСЛИ АНАЛИЗ НА ВИЧ НАЗНАЧЕН В ЦЕЛЯХ ПОДГОТОВКИ К ГОСПИТАЛИЗАЦИИ ИЛИ ДЛЯ ПРЕДОСТАВЛЕНИЯ В ЛПУ, РЕГИСТРАЦИЯ ЗАЯВОК НА ЕГО ПРОВЕДЕНИЕ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ при обязательном предоставлении пациентом следующих данных:
1) Для жителей Москвы и Московской области
- Фамилия, имя, отчество
- День, месяц и год рождения
- Сведения о регистрации
- Паспорт
2) Для жителей других регионов РФ и иностранных граждан дополнительно – ксерокопию (скан) паспорта.
- Фамилия, имя, отчество
- День, месяц и год рождения
- Сведения о регистрации
- Ксерокопия (скан) паспорта
Показания к назначению исследования
- Планирование беременности.
- Незащищенный половой контакт (не ранее, чем через 10–12 дней).
- Планирование донорства.
- Обследование лиц, принимающих инъекционные формы психоактивных веществ.
Противопоказания и ограничения.
Абсолютных противопоказаний нет.
Подготовка к исследованию
Специальной подготовки не требуется. Необходимо соблюдать общие требования подготовки к исследованиям.
Материал для исследования.
Плазма крови.
Метод исследования.
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Тест-система: Реал ВИЧ ПЦР Вектор-Бест (Россия)
Формат представления результатов.
Качественный
Амплификатор: RealTime CFX 96 Biorad (США)
Аналитические показатели.
Чувствительность: 20 МЕ/мл
Референсные значения (нормы)
- РНК не обнаружено
Интерпретация результата
РНК не обнаружено:
- отсутствие вирусных частиц в образце;
- концентрация возбудителя ниже предела чувствительности тест-системы.
РНК обнаружено:
- в образце присутствуют вирусные частицы ВИЧ 1.
Источник
Для большинства женщин и мужчин это венерическое заболевание вызывает наибольшее опасение. По этой причине после случайной интимной связи без барьерной контрацепции, а также при частой смене половых партнеров и после хирургических операций, разумный человек испытывает определенную настороженность. Самый надежный способ внести ясность — это обратиться в клинику и сдать ПЦР анализ на ВИЧ.
Тест по крови можно использовать для определения следующих показателей:
- Опровержение/подтверждение наличия ВИЧ в латентный период (в первые недели после заражения антитела в анализах ИФА не выявляются по причине их отсутствия или слишком низкой концентрации).
- Определение генотипа ВИЧ-1, ВИЧ-2.
- Выявление статуса у детей, которые родились от матерей-носителей (антитела к ВИЧ длительное время выявляются у всех детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных женщин. Определение ДНК вируса у детей желательно проводить в возрасте до 48 часов жизни, 1-2 месяца, 3-6 месяцев).
- Ложноотрицательные, ложноположительные и сомнительные результаты ИФА тестов.
- Диагностика количества ВИЧ и контроль за изменением вирусной нагрузки в динамике (в случае уже установленного диагноза СПИД анализ методом ПЦР используется для прогноза, динамического наблюдения и мониторинга проводимой терапии).
Цена анализа ПЦР на ВИЧ
Методы | Тип ПЦР анализа | Цена |
ДНК ВИЧ 1 типа | качественный | 2 950 |
РНК ВИЧ 1 типа в плазме | количественный | 8 850 |
РНК ВИЧ, определение резистентности ВИЧ к ингибиторам протеазы и обратной транскриптазы (заказывается вместе с «РНК вируса ВИЧ в плазме») | генотип. | 17 550 |
РНК ВИЧ, определение резистентности ВИЧ к ингибиторам интегразы (заказывается вместе с «РНК вируса ВИЧ в плазме») | генотип. | 18 550 |
РНК/ДНК HIV-1, определение тропизма ВИЧ | генотип. | 18 550 |
Мультипрайм исследование | ||
РНК гепатита С + ДНК гепатита В + РНК ВИЧ 1 и 2 типа (ультрачувствительный метод) | качественный | 3 950 |
АНАЛИЗ ПЦР НА ВИЧ — КОГДА СДАЮТ, ЗАЧЕМ И В КАКИЕ СРОКИ
- ДНК ВИЧ. Диагностика ДНК вируса иммунодефицита человека возможно использовать для раннего определения возможного инфицирования после случая повышенного риска (анализы крови сдаются в сроки, начиная через 10-й день после потенциального инфицирования). Однако для полного исключения инфекции, необходимо в последующем проведение повторного исследования и ИФА диагностики в сроки 4 и 12 недель.
Результаты анализа: ДНК ВИЧ (качественный анализ) — «не обнаружено» или «обнаружено». В последнем случае требуются повторные дополнительные исследования для подтверждения ВИЧ-инфекции. При отрицательном результате, но высоком риске инфицирования, требуется повторное обследование — пересдача крови методом ПЦР или ИФА спустя некоторое время. - РНК ВИЧ. Определение РНК ВИЧ методом ПЦР количественный (так называемая «вирусная нагрузка») — один из показателей для оценки прогноза течения ВИЧ-инфекции и самый ранний показатель эффективности противовирусной терапии. Тест показан для мониторинга течения болезни, решения вопроса о начале терапии, оценки её эффективности.
Исследование РНК ВИЧ методом ПЦР возможно использовать у взрослых при ранней достоверной диагностики возможного инфицирования после эпизода высокого риска (примерно через 7-10 дней после вероятного инфицирования). Присутствие высокого титра РНК ВИЧ в отсутствие антител позволяет диагностировать острую ВИЧ-инфекцию. Однако для уточнения диагноза необходимо проведение повторного исследования и ИФА диагностики в сроки через 1 и 3 месяца.
Сдача ПЦР РНК ВИЧ у беременных с этой инфекцией за 3-4 недели до предполагаемого срока родов показана для решения вопроса о методе родоразрешения (через естественные родовые пути или путём кесарева сечения).
Результаты анализа: РНК ВИЧ HIV 1 типа (количественный анализ) — «не обнаружено» (это в норме). - Резистентность ВИЧ. Анализ на определение резистентности ВИЧ к ингибиторам протеазы и обратной транскриптазы показан ВИЧ-инфицированным при неэффективности проводимой терапии, а также в период острой инфекции перед началом противовирусного лечения. Исследование позволяет определить резистентность ВИЧ к лекартсвенным препаратам. По результатам проведенного анализа инфекционист узнаёт о наличии мутаций устойчивости к ингибиторам протеазы, нуклеозидным и ненуклеозидным ингибиторам обратной транскриптазы, а также информацию по каждой аминокислотной позиции, ассоциированной с мутацией лекарственной устойчивости.
- Мультипрайм комплексная диагностика: качественное определение РНК вируса гепатита С / ДНК вируса гепатита В / РНК вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) 1 и 2 типа (ультрачувствительный метод). Анализ позволяет проводить диагностику ВИЧ-инфекции, вирусных гепатитов С и В на ранних сроках. Исследование показано для раннего выявления вирусных гепатитов В и С, ВИЧ 1/2 типа у лиц из группы риска. Выявление ДНК или РНК вирусов свидетельствует об инфицировании.
Сроки готовности данных анализов крови — от 3 до 7 календарных дней. Сдать качественный и количественный анализ ПЦР для диагностики ВИЧ инфекции в Москве можно в нашем медицинском центре. Взятие крови ежедневно, с 10-00, в том числе на анонимные анализы на СПИД.
Все анализы крови на ПЦР
Источник
Метод определения
Иммуноферментный анализ (ИФА).
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Комбинированное выявление антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена р24 ВИЧ, качественный тест.
Внимание. При положительных и сомнительных реакциях, срок выдачи результата может быть увеличен до 10-ти рабочих дней. ВИЧ (вирус иммунодефицита человека), вызывающий СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита) — принадлежит к семейству ретровирусов. Передается от человека к человеку при использовании загрязненных игл и шприцев для внутривенного введения наркотиков или терапевтических процедур, при сексуальных контактах, как гетеро, так и гомосексуальных. Передача вируса может произойти при переливании инфицированной крови и ее продуктов, донорстве органов или семенной жидкости, у медицинских работников — при ранении инфицированными иглами или инструментами. Заражение ВИЧ возможно путем его передачи от инфицированной матери ребенку (вертикальный путь), хотя современные методы профилактики с применением антиретровирусной терапии, при выполнении всех рекомендаций, позволяют снизить такой риск до минимума.
В патогенезе заболевания основное значение имеет поражение CD4+ лимфоцитов (субпопуляция лимфоцитов, выполняющих важнейшие функции в регуляции и осуществлении иммунного ответа). Попадая в организм человека, ВИЧ поражает CD4+ лимфоциты, макрофаги и некоторые другие типы клеток. Присутствие ВИЧ со временем вызывает нарушение иммунной системы из-за избирательного уничтожения им иммунокомпетентных клеток. Это приводит к снижению иммунитета против вирусных, бактериальных, грибковых, протозойных, паразитарных, опухолевых заболеваний — развитию синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД). В соответствии со статистикой, раннее выявление инфекции и применение современной терапии значительно улучшают показатели выживаемости.
Процесс взаимодействия вируса с клеткой включает ряд стадий: связывание вируса с клеткой, освобождение его от оболочки, проникновение в цитоплазму, синтез ДНК по вирусной РНК, встраивание вирусной ДНК в геном клетки-хозяина. После этого начинается латентная стадия инфекции. В таком состоянии провирусная ДНК может существовать некоторое время, не проявляя активности и не влияя на жизнедеятельность клетки-хозяина. Пока нет экспрессии вирусных белков, нет и иммунного ответа на вирус. Антитела к ВИЧ, характеризующие иммунный ответ организма, появляются после активации вирусной ДНК и начала активного размножения вируса. Длительность латентного периода зависит от ряда факторов, включая и индивидуальные генетические особенности организма.
Антитела к ВИЧ могут появиться, начиная со второй недели после инфицирования; их содержание увеличивается в течение 2-4-х недель и сохраняется на протяжении многих лет. У 90-95% инфицированных они появляются в первые три месяца после заражения, у 5-9% – в период от трех до шести месяцев, у 0,5-1% – в более поздние сроки.
В первые недели инфекции, еще до появления антител к вирусу (т.е. до сероконверсии), в образцах сыворотки или плазмы можно выявить присутствие антигенов ВИЧ, в том числе его капсидного белка р24. Позже, после сероконверсии, он обычно становится недетектируемым.
Комбинированные тест-системы 4-го поколения, к которым относится тест HIV Ag/Ab Combo (Architect, Abbott), выявляют как антитела к ВИЧ 1 и 2 типов, так и антиген р24 ВИЧ, что позволяет проводить раннее обнаружение инфекции. К особым характеристикам применяемого в лаборатории ИНВИТРО скринингового теста для выявления ВИЧ-инфекции стоит отнести высокую специфичность исследования (> 99,5%); 100% чувствительность анализа к антителам, характерным для периода сероконверсии, и чувствительность теста к антигену р24 порядка 18 пг/мл.
Порядок проведения лабораторного обследования на ВИЧ строго регламентирован приказами МЗ РФ и включает в себя этап скринингового (отборочного) исследования наличия антител к ВИЧ иммуноферментными (ИФА) методами, разрешенными к использованию, и этап верификационного (подтверждающего) более развернутого исследования в лаборатории городского центра СПИД. Следует отметить, что даже лучшие скрининговые ИФА-системы не гарантируют 100% специфичности, то есть существует некоторая вероятность получения неспецифических, ложноположительных результатов, связанных с особенностями сыворотки крови пациента. Поэтому положительный результат скринингового ИФА обследования может не подтвердиться в подтверждающих тестах, после чего пациенту выдадут отрицательный или неопределенный результат. При неопределенном результате подтверждающего исследования тестирование следует повторить в динамике через 2-3 недели.
Лабораторная диагностика ВИЧ инфекции у детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, имеет свои особенности. В их крови до 18-ти месяцев с момента рождения могут циркулировать материнские антитела к ВИЧ (класса IgG). Отсутствие антител к ВИЧ у новорожденных не означает, что вирус не проник через плацентарный барьер. Дети ВИЧ-инфицированных матерей подлежат лабораторно-диагностическому обследованию в течение 36-ти месяцев после рождения.
Источник