Сдать анализ крови на пцр диагностику
Полимеразную цепную реакцию (Polymerase chain reaction, ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году американский биохимик Кэри Б. Мюллис. В 1993 году за это открытие он был удостоен Нобелевской премии.
Сегодня области применения ПЦР как современного метода молекулярной биологии чрезвычайно широки. Особое место диагностика ПЦР занимает в медицинской практике. И причина этому достаточно проста: полимеразная цепная реакция делает невозможное возможным.
Часто диагностику ПЦР образно описывают как метод, с помощью которого можно находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл. «Иглой» является крошечный фрагмент генетического материала клеток (ДНК или РНК).
Таким образом, открытие этого метода — одно из наиболее выдающихся событий в области молекулярной биологии за последние десятилетия. Развитие метода ПЦР позволило медицинской диагностике в целом подняться на качественно новый уровень.
Основы ПЦР
Основа метода — многократное избирательное копирование (амплификация) определённого участка ДНК с целью получения такого количества генетического материала, которого будет достаточно для визуальной детекции. При этом многократно копируется (амплифицируется) только заданный участок ДНК при условии, что он присутствует в исследуемом биоматериале.
Кроме того, исследование помимо простого увеличения количества копий участков ДНК позволяет проводить другие манипуляции с генетическим материалом. Поэтому метод широко применяется в научных исследованиях, биологической и медицинской практике: в диагностике инфекционных и наследственных заболеваний, при выявлении мутаций, генотипировании, установлении отцовства, идентификация личности и др.
ПЦР в диагностике инфекционных болезней
Сегодня ПЦР-диагностика инфекций — один из самых точных, чувствительных и эффективных клинических лабораторных методов. Причём спектр выявляемых возбудителей практически неограничен – была бы разработана тест-система для ПЦР-анализа искомого возбудителя.
Благодаря своей высокой чувствительности, ПЦР позволяет выявить возбудителя даже при его минимальном содержании (то есть в исследуемом биоматериале присутствуют всего несколько молекул его ДНК).
ПЦР выявляет возбудителей инфекционных заболеваний тогда, когда это невозможно сделать другими методами (иммунологическими, культуральными, микроскопическими). Поэтому для целого ряда возбудителей инфекций метод полимеразной цепной реакции стал «золотым стандартом», он проверен временем и апробирован клинически. В современной лабораторной диагностике инфекционных болезней ПЦР — самый чувствительный и специфичный метод прямого обнаружения возбудителей. Это позволяет не только установить этиологию заболевания, но и контролировать течение инфекционного процесса и оценивать эффективность проводимого лечения.
Анализ на ИППП методом ПЦР особенно актуальны при бессимптомном течении инфекционного процесса, вызванного безусловно-патогенными микроорганизмами (Хламидия , качественное определение ДНК; Микоплазма, качественное определение ДНК; Возбудитель гонореи, качественное определение ДНК; Возбудитель трихомоноза, качественное определение ДНК). Например, при хронической гонорее у женщин даже с помощью бактериологического метода часто не удается выявить гонококк, несмотря на имеющиеся симптомы хронического воспалительного процесса в шейке матки или уретре.
Современная ПЦР-диагностика позволяет не только выявить генетический материал возбудителей инфекций, но и определить концентрации их ДНК/РНК (количественный формат исследования). Определение количества возбудителей имеет важное значение в решении вопроса о назначении лечения, особенно если выявлены условно-патогенные микроорганизмы (Микоплазма, количественное определение ДНК; Типирование уреаплазмы, количественное определение ДНК) .
Одним из основных направлений развития метода ПЦР является разработанный в CMD формат «Мультипрайм», позволяющий выявить в одной пробирке (и одной реакции) нескольких патогенов.
- Комплексное исследование ИППП
- Урогенитальные инфекции у мужчин
- Урогенитальные инфекции у женщин
- Возбудители кишечных инфекций
- Возбудители кишечных инфекций
- Возбудители коклюша/паракоклюша
- Диагностика ОРВИ
- Возбудители инфекций, передающихся иксодовыми клещами
- Герпесвирусы
ПЦР-диагностика гепатитов
В настоящее время известно как минимум 5 вирусов, способность которых вызывать поражение печени доказана. Это возбудители гепатита А, В, С, D, Е. В редких случаях гепатит может быть вызван вирусами Эпштейна-Барр и простого герпеса. Способность поражать печень таких агентов как вирусы ТТ и гепатита G сегодня признается не всеми. Все эти вирусы относятся к различным семействам, имеют разные биологические свойства и соответственно, тактика лечения будет тоже значительно отличаться в зависимости от этиологии гепатита.
Учитывая вышеизложенное, весьма актуальной проблемой является адекватная этиологическая диагностика вирусных гепатитов с выявлением конкретного возбудителя. Без использования современных молекулярно-биологических методов это невозможно. Поэтому диагностика гепатитов методом полимеразной цепной реакции — один из самых важнейших шагов в установлении причины заболевания и определения дальнейшей тактики лечения.
- Вирус гепатита А, качественное определение
- Вирус гепатита В, количественное определение ДНК
- Вирус гепатита В, качественное определение генотипа
- Вирус гепатита С, качественное определение РНК
- Вирус гепатита С, количественное определение РНК
- Вирус гепатита С, определение генотипа
- Вирус гепатита D, качественное определение РНК
ПЦР в диагностике ВИЧ-инфекции
В настоящее время для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции используется наиболее доступный и одновременно чувствительный подход — обнаружение в крови антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) – с последующим подтверждением положительных результатов анализа методом иммуноблоттинга (ИБ). Эффективность выявления лиц, инфицированных ВИЧ, с помощью данного подхода может достигать 99% и более.
Но серологическая диагностика ВИЧ-инфекции имеет ряд ограничений:
- Неэффективность в период т.н. «серологического окна» (в первые недели после заражения антитела не выявляются по причине их отсутствия или низкой концентрации).
- Антитела к ВИЧ длительное время выявляются у всех детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей.
- Ложноположительные результаты ИФА из-за присутствия в крови антител к антигенам, сходным с антигенами ВИЧ.
- Ложноотрицательные и сомнительные результаты ИФА и иммуноблоттинга (особенно у пациентов в терминальной стадии заболевания).
Поэтому анализы ПЦР при обследовании на ВИЧ-инфекцию сегодня находят всё более широкое применение. Согласно «Методическим рекомендациям о проведении обследования на ВИЧ-инфекцию» (утв. Минздравсоцразвития РФ 06.08.2007) «при наличии эпидемиологических критериев, свидетельствующих о недавнем риске заражения ВИЧ для пациентов и при этом предположительно ложноположительных или ложноотрицательных результатов в ИФА и ИБ, например, при обследовании детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, или пациентов в периоде «серонегативного окна» используется метод ПЦР, при котором обнаруживается генный материал ВИЧ…..». А в случае уже установленного диагноза ВИЧ-инфекции анализ методом ПЦР используется для прогноза, динамического наблюдения и мониторинга проводимой терапии.
- Вирус иммунодефицита человека качественное определение ДНК провируса, ПЦР
- Вирус иммунодефицита человека количественное определение РНК, ПЦР
- Комплексная диагностика: качественное определение РНК вируса гепатита С/ ДНК вируса гепатита В/ РНК вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) 1 и 2 типа
В Центре молекулярной диагностики (CMD) можно сдать ПЦР-анализ на ВИЧ анонимно.
Где сдать анализы ПЦР?
Для этого обращайтесь к разделу сайта «Где сдать анализы».
Источник
Гепатит А
Гепатит В
Гепатит С
Вирус гепатита C, генотип 1, 1а, 1b, 2, 3, 4, 5, 6, РНК (HCV, ПЦР ультрачувствит.) плазма, кач. | 19.129. | 10 дней |
Вирус гепатита C, генотип 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5a, 6, РНК (HCV, ПЦР) плазма, кол. | 19.97. | 3 дня |
Гепатит D
Гепатит G
Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ)
Гарднерелла вагиналис
Гарднерелла вагиналис (качественный анализ)
Гарднерелла вагиналис (количественный анализ)
Кандида альбиканс
Кандида альбиканс (качественный анализ)
Кандида альбиканс (количественный анализ)
Комплексное исследование на грибы рода Кандида
Микоплазма хоминис
Микоплазма хоминис (качественный анализ)
Микоплазма хоминис (количественный анализ)
Уреаплазма уреалитикум
Уреаплазма уреалитикум (качественный анализ)
Уреаплазма уреалитикум (количественный анализ)
Биовары U.Urealyticum (качественный анализ)
Биовары U.Urealyticum (количественный анализ)
Микоплазма гениталиум
Микоплазма гениталиум (качественный анализ)
Микоплазма гениталиум (количественный анализ)
Нейссерия гонореи
Нейссерия гонореи (качественный анализ)
Нейссерия гонореи (количественный анализ)
Трихомонас вагиналис
Трихомонас вагиналис (качественный анализ)
Трихомонас вагиналис (количественный анализ)
Хламидия трахоматис
Хламидия трахоматис (качественный анализ)
Хламидия трахоматис (количественный анализ)
Трепонема паллидум
Трепонема паллидум (качественный анализ)
Лактобактерии
Лактобактерии (качественный анализ)
Лактобактерии (количественный анализ)
Мобилункус
Мобилункус (качественный анализ)
Мобилункус (количественный анализ)
Бактероиды
Папилломавирусная инфекция
Папилломавирусная инфекция (качественный анализ)
Папилломавирусная инфекция (количественный анализ)
Цитомегаловирус (вирус герпеса 5 типа)
Цитомегаловирус (качественный анализ)
Цитомегаловирус (количественный анализ)
Вирус простого герпеса 1, 2 типов
Вирус простого герпеса 1,2 типов (качественный анализ)
Вирус простого герпеса 1,2 типов (количественный анализ)
Вирус простого герпеса VI
Вирус простого герпеса VI типа (качественный анализ)
Вирус простого герпеса VI типа (количественный анализ)
Варицелла Зостер (вирус герпеса 3 типа)
Вирус Варицелла-Зостер (качественный анализ)
Вирус Эпштейна-Барр (вирус герпеса 4 типа)
Вирус Эпштейна-Барр (вирус герпеса 4 типа) (качественный анализ)
Вирус Эпштейна-Барр (вирус герпеса 4 типа) (количественный анализ)
Краснуха
Краснуха (качественный анализ)
Краснуха (количественный анализ)
Клещевые инфекции
Клещевой энцефалит
Боррелия бургдорфери (качественный анализ)
Боррелия бургдорфери (количественный анализ)
Бордетелла пертуссис
Микоплазма пневмонии, Хламидия пневмонии
Нейссерия менингитидис, Гемофилус инфлюенца, Стрептококкус пневмонии
Острые кишечные инфекции
Микобактерии туберкулеза
Микобактерии туберкулеза (качественный анализ)
Хеликобактер пилори (Метод Real-Time)
Хеликобактер пилори (качественный анализ)
Хеликобактер пилори (количественный анализ)
Токсоплазма Гонди
Токсоплазма Гонди (качественный анализ)
Токсоплазма Гонди (количественный анализ)
Листерия моноцитогенес
Источник
3 апреля 2019778,2 тыс.
Полимеразная цепная реакция известна уже 30 лет. Ее широко используют во многих областях, начиная с археологии и заканчивая генетикой.
Именно метод пцр помогает установить отцовство, но наиболее часто его используют для выявления различных инфекционных болезней в организме человека.
Как проводят анализ методом пцр, и что это такое? На эти вопросы мы постараемся детально ответить.
Анализ ПЦР — что это такое?
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того, как заболевание может себя проявить.
Метод ПЦР — абсолютно специфичен и выполненный правильно не может дать ложноположительный результат. То есть, если инфекции нет, то анализ никогда не покажет, что она есть. Поэтому сейчас очень часто для утверждения диагноза дополнительно сдают анализ ПЦР, чтобы определить возбудителя и его природу.
Полимеразную цепную реакцию (ПЦР) в 1983 году разработал Кэри Мюллис (США), за что в 1993 году он удостоен Нобелевской премии в области химии.
В чем преимущество данного метода?
Диагностика этим методом позволяет найти возбудителя непосредственно в гене, который содержится в исследуемых материалах. Это самый точный анализ на половые инфекции, скрытые инфекции, различные венерические заболевания.
Отличия ПЦР-диагностики от других методов лабораторного исследования заключаются в следующем:
- метод нацелен на выявление самого возбудителя;
- диагностика методом ПЦР отличается универсальностью: для обнаружения возбудителей нескольких;
- заболеваний достаточно только одного биологического образца больного;
- метод обладает высокой чувствительностью и не сопровождается другими перекрестными реакциями.
Кроме этого, преимуществом ПЦР-диагностики является то, что для анализа пригоден любой биологический материал пациента: кровь, выделения из половых органов, моча, сперма.
Какие инфекции позволяет выявить мазок на ПЦР?
В организме может присутствовать большое количество возбудителей инфекций, сюда относятся и «скрытые», которые длительное время никак себя не проявляют.
Анализ мазка на ПЦР позволяет выявить такие инфекции:
- гепатит;
- уреплазмоз половых органов;
- кандидоз (молочница);
- хламидиоз половых путей;
- папиллома вирусная инфекция;
- герпес;
- наличие раковых клеток;
- микоплазмоз;
- бактериальный вагиноз;
- инфекционный мононуклеоз;
- трихомониаз;
- оценить гормональное состояние;
- СПИД (ВИЧ).
Исследуемым материалом для ПЦР обычно являются мокрота, слюна, моча, кровь. Перед проведением анализа необходимо тщательно подготовиться к нему, получив предварительную консультацию у врача.
Кровь для ПЦР обычно сдается натощак. Хорошие результаты показывает проведение анализа, когда материал для исследования взят из цервикального канала или уретры. В этом случае лучше всего провести ПЦР-диагностику не позже, чем через сутки после полового акта.
Разновидности ПЦР
ПЦР используется во многих областях для проведения анализов и в научных экспериментах. Существуют разные методики проведения анализа:
- ПЦР с обратной транскрипцией (Reverse Transcription PCR, RT-PCR (англ.)) — используется для амплификации, выделения или идентификации известной последовательности из библиотеки РНК.
- Инвертированная ПЦР (Inverse PCR (англ.)) — используется в том случае, если известен лишь небольшой участок внутри нужной последовательности. Этот метод особенно полезен, когда нужно определить соседние последовательности после вставки ДНК в геном.
- Вложенная ПЦР (Nested PCR (англ.)) — применяется для уменьшения числа побочных продуктов реакции. Используют две пары праймеров и проводят две последовательные реакции.
- Асимметричная ПЦР (англ. Asymmetric PCR) — проводится тогда, когда нужно амплифицировать преимущественно одну из цепей исходной ДНК. Используется в некоторых методиках секвенирования и гибридизационного анализа.
- Количественная ПЦР (Quantitative PCR, Q-PCR (англ.)) или ПЦР в реальном времени — используется для непосредственного наблюдения за измерением количества конкретного ПЦР продукта в каждом цикле реакции.
- Ступенчатая ПЦР (Touchdown PCR (англ.)) — с помощью этого подхода уменьшают влияние неспецифического связывания праймеров.
- Групп-специфическая ПЦР (англ. group-specific PCR) — ПЦР для родственных последовательностях внутри одного или между разными видами, используя консервативные праймеры к этим последовательностям.
Если нуклеотидная последовательность матрицы известна частично или неизвестна вовсе, можно использовать вырожденные праймеры, последовательность которых содержит вырожденные позиции, в которых могут располагаться любые основания. Например, последовательность праймера может быть такой: …ATH…, где Н — А, Т или С.
Какие биологические материалы исследуются?
Материалом для ПЦР-исследования, в котором можно выявить чужеродную ДНК бактерии или ДНК или РНК вируса могут служить различные биологические среды и жидкости человека:
- Моча. Может использоваться при инфекционном поражении мочеполового тракта у мужчин и мочевыделительных органов у женщин (у мужчин использование в качестве материала мочи заменяет эпителиальный соскоб).
- Мокрота. Применяется для диагностики туберкулеза и реже для диагностики респираторных форм хламидиоза и микоплазмоза. Мокроту в количестве 15-20 мл собирают в стерильный (одноразовый) флакон.
- Биологические жидкости. Сок простаты, плевральная, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж, слюна забираются по показаниям.
- Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек. Обычно используются для диагностики заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП), таких как гонорея, хламидиоз, микоплазмоз, уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез, герпетическая и другие инфекции, поражающие слизистые оболочки.
- Биоптаты. Чаще всего используют биоптаты желудка и двенадцатиперстной кишки для выявления хеликобактерной инфекции.
- Кровь, плазма, сыворотка. Используются для ПЦР анализа вирусов гепатитов B, C, D, G, герпеса, ЦМВ, ВИЧ, исследования генов человека.
Как подготовиться к сдаче анализа?
Достоверность результата ПЦР напрямую зависит от правильности сдачи материала на обследование. Материал не должен быть загрязнен, иначе результат исследования не будет объективен. К наиболее важным рекомендациям перед сдачей анализа ПЦР относятся следующие требования:
- Моча сдается утром в стерильный контейнер.
- Анализ крови на инфекции необходимо сдавать на голодный желудок в утреннее время.
- Не стоит проявлять половую активность за сутки до проведения анализа.
Результат анализа будет готов через 1,5-2 суток после проведения рассматриваемой процедуры. Встречаются такие ситуации, когда результат может быть подготовлен в тот же день.
Расшифровка анализа ПРЦ
Процесс интерпретации представленного исследования отличается своей простотой. Результаты пцр анализа можно получить через 1,5-2х суток после сдачи материала. В некоторых случаях результат готов в первый же день, и вот что они могут означать:
- Отрицательный результат показывает, что в диагностируемом материале отсутствует искомый инфекционный возбудитель.
- Пцр положительный обозначает, что в организме человека присутствует ДНК или РНК возбудителя.
В некоторых случаях производят количественное определение микроорганизмов. Это особенно актуально при заболеваниях, вызванных условно-патогенными микроорганизмами. Так как данные бактерии проявляют свое негативное воздействие лишь при избыточном количестве.
Также количественный анализ ПЦР важен для выбора терапевтической тактики и с целью контроля над лечением таких вирусных инфекций, как ВИЧ и вирусы гепатита.
Насколько точна ПЦР диагностика инфекций?
Метод ПЦР отличается высокой точностью, специфичностью и чувствительностью. Это означает, что данный анализ способен:
- точно определить наличие или отсутствие инфекции;
- точно указать, что именно это за инфекция (специфичность);
- обнаружить инфекцию даже при очень низком содержании ДНК микробов в биологическом материале,
- который был подвергнут исследованию (чувствительность).
ПЦР анализ: цена и сроки
Цена конкретного анализа будет зависеть от того, на какую инфекцию вы будете проверяться. Примерные цены и сроки:
- ИППП: 300-500 руб, сроки – 1 день;
- Вирус Эпштейна-Барра, вирус папилломы человека, герпеса, цитомегаловирус: 300-500 руб, сроки – 1 день;
- Гепатит A, B, C, D, G: качественный анализ 650 руб, количественный анализ 2000 руб. Сроки – до 5 дней;
- Антитела к вирусу гепатита С, суммарные ( Anti-HCV ) – 420 руб;
- Антитела к вирусу гепатита C, IgM ( Anti-HCV IgM ) – 420 руб;
- Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori): 300-400 руб, сроки – 1 день;
- ВИЧ (антитела и антигены) – 380 руб;
- РНК ВИЧ, качественно – 3 500 руб;
- РНК ВИЧ, количественно – 11 000 руб.
Чтобы сэкономить средства, можно выбирать фиксированный пакет анализов. Такую услугу предоставляет большинство клиник где можно сдать анализ методом ПРЦ (инвитро, онклиник и т.д).
Источник