Ртга анализ крови что это
Одним из наиболее важных анализов крови для организма является анализ на РПГА. С помощью него можно определить наличие в организме возбудителей такого заболевания как сифилис. Данный анализ признан одним из наиболее достоверных способов определения поражения организма сифилисом. Познакомимся с ним более подробно.
Как расшифровывается РПГА?
Расшифровка анализа крови РПГА
Под аббревиатурой РПГА подразумевается особая реакция, выявляющая в организме пассивную гемагглютинацию. С помощью такой реакции можно обнаружить процесс агглютинации эритроцитов в организме. При чем в ходе данного процесса выявляется наличие на поверхностных слоях многих из них антигенов бледной трепонемы. Данный организм является возбудителем сифилиса.
Попадая в организм здорового человека, бледная трепонема провоцирует развитие иммунного ответа. В ходе этого в организме наблюдается выработка не специфического или нетрепонемного и специфического или трепонемного видов антител.
Наличие в сданном образце крови антител бледной трепонемы и является основательным подтверждением сифилиса в лабораторных условиях.
Все проводимые в лаборатории серологические исследования подразделяются на две группы:
- Специфический тип исследования (трепонемный);
- Неспецифический тип исследования (нетрепонемный).
Подразделение исследований на данные группы основывается на виде антител, которые обнаруживаются в образце сданной крови при анализе на РПГА. Определение реакции пассивной гемагглютинации или РПГА, является специфическим типом проведения исследований в отношении возбудителя сифилиса.
Реакция протекает в присутствии антител антитрепонемной природы. Впервые данную реакцию начал практиковать с 1965 года один из ученых и сразу получил широкое признание среди коллег и пациентов. Сегодня с помощью данного метода с успехом диагностируют такое заболевание человеческого организма как сифилис. А сама методика его определения относится к категории специфических (трепонемных) тестов.
С помощью этого высокочувствительного способа диагностирования с легкостью определяется наличие в организме любой стадии сифилиса:
- Первичной
- Латентной
- Вторичной
- Третичной
Больше информации о сифилисе можно узнать из видео.
При сдаче крови на РПГА с точностью до мельчайших долей подтверждаются данные от реакций микропреципитации. РПГА позволяет выявить ложноположительные случаи развития заболевания, полученные в ходе проведения скрининговых тестов.
В некоторых случаях, метод РПГА может спровоцировать ложноположительный результат у больного.
Это бывает если у человека развиты аутоиммунные заболевания. При поражении организма человека определенной группой вирусных болезней, в ходе развития которых, у больного увеличивается число неспецифических антител, данные РПГА также могут быть ложными. Причиной этому является использование данным методом сенсибилизированных эритроцитов.
Когда необходима сдача крови на РПГА?
Назначение анализа крови РПГА
Анализ РПГА назначается больному в случае возникновения подозрений на развитие в его организме любых стадий сифилиса. Кроме этого данный анализ необходим перед планированием беременности отдельным категориям женщин. Именно на ранних сроках выявление данного заболевания позволит назначить соответствующее лечение и планировать беременность, с целью рождения здорового малыша.
Сдача крови на определение в организме сифилиса назначается и при подготовке пациента к назначенной операции. Именно в этом случае возможен удачный исход оперативного вмешательства в организм. Также подтверждение наличия в организме возбудителей сифилиса позволит врачам планировать ход предстоящей операции таким образом, чтобы ожидаемый лечебный эффект был максимальным.
Определение в крови агентов сифилиса методом РПГА важно и для проверки доноров перед сдачей ими крови.
Благодаря РПГА в данном случае удается предотвратить сотни случаев заражения реципиентов кровью больных сифилисом. В тоже время, известно много случаев, когда люди приходят в пункты сдачи крови в качестве доноров, а сдав ее на РПГА узнают, что больны сифилисом.
Получение результатов от анализа на РПГА
После сдачи пациентом крови на определение в его организме возбудителей сифилиса, проходит некоторое количество времени и становятся известны его результаты. Обычно, РПГА дает положительный показатель по прошествии четырех недель, следующих за первичным инфицированием.
Во многих случаях, первичная стадия развития болезни характеризуется пониженными показателями, ее данные таковы: меньше 1:320. Вторичная стадия сифилиса сопровождается увеличением показаний от титрования: чуть больше 1:320. Скрытый сифилис дает вновь заниженные показатели титров.
Пройдя назначенный курс лечения установленной стадии сифилиса, анализ крови на РПГА у данного больного по-прежнему показывает положительный результат.
И это является не единичным случаем, а массовым и подтверждается на протяжении всей жизни у данной категории людей.
Подготовка и сама процедура анализа
Процедура сдачи крови РПГА
Перед сдачей крови на наличие в ней возбудителей такого заболевания как сифилис, необходимо как следует подготовиться.
Ведь именно искажение данных такого важного анализа может стать причиной назначения больному неправильного лечения, а это, как известно, может стать причиной развития в организме других патологий.
Подготовку к проведению данного анализа довольно проста:
- Для начала следует отказать от любого приема пищи перед сдачей крови на РПГА. Другими словами на анализ следует приходить натощак.
- Употреблять значительное количество жидкостей перед сдачей крови на РПГА также не желательно. Компоненты принимаемых больным напитков также могут отразиться на результатах данного анализа.
- Сдавать данный анализ лучше всего в первой половине дня, так как вам будет довольно сложно обходиться без пищи и воды в течение всех суток.
- Перед проведением анализа на РПГА пациенту рекомендуют воздержать от курения в течение тридцати минут. Содержащиеся в табачном дыме вещества, способны искажать достоверность результатов данного анализа.
- Употреблять перед сдачей крови спиртные напитки также категорически воспрещается.
Придя на анализ в соответствующий кабинет, необходимо освободить от одежды руку выше локтя. Кровь на данный анализ берется именно из области локтевой вены.
В некоторых случаях (когда вены в данном месте лежат довольно глубоко), забор крови берут из венозных сосудов, расположенных на кисти или в районе предплечья.
Сама процедура взятия образца крови довольно простая, и практически безболезненна. После процедуры, специалист лаборатории обязательно назначает время, когда можно будет прийти за готовыми результатами.
Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.
Источник
Реакция
ставится:
1) для
обнаружения полисахаридов, белков,
экстрактов бактерий и других
высокодисперстных веществ, риккетсий
и вирусов, комплексы которых с агглютининами
в обычных РА увидеть не удается,
2) для
выявления антител в сыворотках больных
к этим высокодисперстным веществам и
мельчайшим микроорганизмам.
Под непрямой,
или пассивной, агглютинацией понимают
реакцию, в которой антитела взаимодействуют
с антигенами, предварительно
адсорбированными на инертных частицах
(латекс, целлюлоза, полистерол, оксид
бария и др. или эритроциты барана,
I(0)-группы крови человека)
В реакции
пассивной гемагглютинации (РПГА) в
качестве носителя используют эритроциты.
Нагруженные антигеном эритроциты
склеиваются в присутствии специфических
антител к данному антигену и выпадают
в осадок. Сенсибилизированные антигеном
эритроциты используют в РПГА как
эритроцитарный диагностикум для
обнаружения антител (серодиагностика).
Если нагрузить эритроциты антителами
(эритроцитарный антительный диагностикум),
то можно применять для выявления
антигенов.
Рис. 3. Схема
РПГА: эритроциты (1), нагруженные антигеном
(3), связываются специфическими антителами
(4).
Постановка.
В лунках полистироловых планшетов
готовят ряд последовательных разведений
сыворотки. В предпоследнюю лунку вносят
— 0,5 мл заведомо положительной сыворотки
и в последнюю 0,5 мл физиологического
раствора (контроли). Затем во все лунки
добавляют по 0,1 мл разведенного
эритроцитарного диагностикума,
встряхивают и помещают в термостат на
2 ч.
Учет.
В положительном случае эритроциты
оседают на дне лунки в виде ровного слоя
клеток со складчатым или зазубренным
краем (перевернутый зонтик), в отрицательном
— оседают в виде пуговки или колечка.
Рис.4. Учет
РНГА (РПГА).
Учет результатов рнга, поставленной с целью обнаружения ботулотоксина.
Возбудитель
ботулизма — Clostridium botulinum вырабатывает
токсины семи сероваров (А, B, C, D, E, F, G),
однако чаще других встречаются серовары
А, В, Е. Все токсины отличаются по
антигенным свойствам и могут быть
дифференцированы в реакциях
типоспецифическими сыворотками. Для
этой цели можно поставить реакцию
пассивной (непрямой) гемагглютинации
с сывороткой больного, в которой
предполагается наличие токсина, и
эритроцитами, нагруженными антителами
антитоксических противоботулинических
сывороток типов А, В, Е. Контролем служит
нормальная сыворотка.
Рис. 3.
Постановка и результат РНГА.
Учет. В
положительном случае эритроциты оседают
на дне лунки в виде ровного слоя клеток
со складчатым или зазубренным краем
(перевернутый зонтик), в отрицательном
— оседают в виде пуговки или колечка.
Вывод: В
сыворотке больного обнаружен ботулотоксин
тип Е.
Реакция торможения гемагглютинации (ртга).
Рис. 8.
Реакция торможения гемагглютинации
(РТГА) (схема).
Принцип
реакции основан на способности АТ
связывать различные вирусы и нейтрализовать
их, лишая возможности агглютинировать
эритроциты. Визуально этот эффект и
проявляется в «торможении» гемагглютинации.
РТГА применяют при диагностике вирусных
инфекций для выявления специфических
антигемагглютининов и идентификации
различных вирусов по их гемагглютининам,
проявляющим свойства Аг.
Типирование
вируса проводят в реакции РТГА с набором
типоспецифических сывороток. Результаты
реакции учитывают по отсутствию
гемагглютинации. Подтипы вируса типа
А с антигенами H0N1, H1N1, H2N2, H3N2 и другие
могут быть дифференцированы в РТГА с
набором гомологичных типоспецифических
сывороток
Рис. 9.
Результаты РТГА при типировании вируса
гриппа
Условные
обозначения: — торможение гемагглютинации
(пуговка) ; — гемагглютинация (зонтик).
Выводы:
Исследуемый материал содержит вирус
гриппа тип А с антигеном H3N2
Соседние файлы в папке Экзамен
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
- #
Источник
В основе РГА лежит способность эритроцитов склеиваться при адсорбции на них определенных антигенов. В качестве исследуемого материала при гемагглютинации используют аллантоисную, амниотическую жидкость, суспензию хорионаллантоисных оболочек куринных эмбрионов, взвеси и экстракты из культур или органов животных, зараженных вирусами, нативный инфекционный материал. РГА не является серологической, поскольку происходит без участия иммунной сыворотки и используется для выбора рабочего разведения антигена для постановки РТГА или наличия антигена (вируса) в исследуемом материале (например, при гриппе). В реакции используются эритроциты животных, птиц, человека I (0) группы крови.
Для постановки ориентировочной РГА на предметное стекло наносят каплю 5% взвеси эритроцитов и каплю испытуемого материала, тщательно смешивают. При положительном результате через 1-2 минуты макроскопически наблюдают появление хлопьевидной агглютинации эритроцитов.
Для постановки РГА в развернутом ряду в лунках полистероловых планшетов готовят двукратно возрастающие разведения исследуемого материала на физиологическом растворе в объёме 0,5 мл. Во все пробирки вносят по 0,5 мл 0,25 — 1% взвеси эритроцитов. Результаты учитывают после полного оседания эритроцитов в контроле (эритроциты + физиологический раствор). Реакцию учитывают по характеру осадка эритроцитов. В положительных случаях степень агглютинации отмечают плюсами. Четырьмя плюсами оценивают реакцию, имеющую вид тонкой пленки из склеившихся эритроцитов, покрывающей дно пробирки (зонтик), реакцию с просветами в пленке отмечают тремя плюсами, наличие пленки с фестончатыми кружевными краями из склеившихся эритроцитов обозначают двумя плюсами, хлопьевидный осадок эритроцитов, окруженный зоной комочков агглютинированных эритроцитов соответствует одному плюсу. Резко очерченный осадок эритроцитов, неотличимый от контроля показывает отсутствие агглютинации. За титр принимают предельное разведение исследуемого материала, вызвавшее агглютинацию эритроцитов на два плюса.
При положительном результате РГА исследование продолжают, определяя тип выделенного вируса с помощью реакции торможения гемагглютинации типоспецифическими сыворотками.
РТГА основана на свойстве антисыворотки подавлять вирусную гемагглютинацию, так как нейтрализованный специфичными антителами вирус утрачивает способность агглютинировать эритроциты. При ориентировочном типировании вирусов используют капельный метод на стекле. Для окончательного установления типовой принадлежности выделенного вируса и титрования антител в сыворотках ставят развернутую РТГА в пробирках или в лунках. С этой целью готовят двухкратные разведения сывороток на физиологическом растворе и разливают по 0,25 мл. К разведениям сыворотки прибавляют по одной капле материала, содержащего вирус и по одной капле 1% взвеси эритроцитов.
При использовании РТГА для определения типа вируса, используют типоспецифические сыворотки, которые добавляют к равному объему рабочего разведения антигена. Типовую принадлежность выделенного вируса устанавливают по специфической иммунной сыворотке, показавшей наивысший титр антител к этому вирусу.
РГА и РТГА широко применяется для диагностики вирусных инфекций (клещевой энцефалит, грипп и др.) с целью обнаружения специфических антител и для идентификации многих вирусов по их антигенам.
Источник
Оглавление темы «Методы обнаружения вирусов. Методы диагностики микозов ( грибковых заболеваний ). Методы обнаружения простейших.»:
1. Биологические методы диагностики бактерий. Животные при диагностике инфекций. Какие животные используются для диагностики инфекций?.
2. Методы обнаружения вирусов. Лабораторные методы при диагностике вирусных инфекций. Забор материала для выявления вирусов. Культуры клеток для выявления вирусов.
3. Культуры органов для обнаружения вирусов. Куриные эмбрионы при диагностике вирусных инфекций. Заражение вирусом куриного эмбриона. Методы заражения вирусом куриного эмбриона.
4. Животные модели для обнаружения вирусов. Идентификация вирусов. Качественное определение вирусов. Цитопатические эффекты вирусов. Бляшкообразование вируса. Тельца включений вирусов.
5. Отсутствие цитопатического эффекта вируса. Феномен гемадсорбции вирусов. Цветная реакция. Экспресс-диагностика вирусной инфекции.
6. Количественное определение вирусов. Определение инфекционности вирусов. Выявление вирусных антигенов ( Аг ). Выявление вирусных частиц. Морфология вирусов.
7. Серологические методы диагностики вирусных инфекций. Торможение гемагглютинации. Торможение цитопатического эффекта интерференцией вирусов. Прямая иммунофлюоресценция. Иммуноэлектронная микроскопия.
8. Выявление противовирусных антител ( AT ) в сыворотке крови. РТГА. РСК. РИФ. Иммуносорбционные методы выявления противовирусных антител.
9. Выявление вирусных антигенов ( Аг ). ИФА. Гибридизация ДНК. ПЦР. Методы диагностики микозов ( грибковых заболеваний ).
10. Выделение грибов. Неселективные среды для грибов. Селективные среды для грибов. Выявление противогрибковых антител ( AT ). Выявление грибковых антигенов ( Аг ).
11. Методы обнаружения простейших. Микроскопия простейших. Материал для выявления простейших. Выделение простейших. Серологические исследования при диагностике простейших.
Выявление противовирусных антител ( AT ) в сыворотке крови. РТГА. РСК. РИФ. Иммуносорбционные методы выявления противовирусных антител.
Более простой и доступный подход — выявление противовирусных антител ( AT ) в сыворотке. Образцы крови необходимо отбирать дважды: немедленно после появления клинических признаков и через 2~3 нед. Чрезвычайно важно исследовать именно два образца сыворотки. Результаты однократного исследования нельзя считать окончательными из-за невозможности связать появление AT с настоящим случаем. Вполне возможно, что эти AT циркулируют после предшествующей инфекции. В подобной ситуации роль исследования сыворотки, полученной в период рекон-валесценции, трудно переоценить. На наличие заболевания в период отбора первой пробы указывает не менее чем четырёхкратное увеличение титра AT, выявленное при исследовании второй пробы.
Перечисленные ниже методы не позволяют дифференцировать антитела ( AT ), образующиеся во время болезни и циркулирующие после выздоровления (продолжительность этого периода вариабельна для различных инфекций). Поскольку для адекватной диагностики необходимо подтвердить достоверное увеличение титров AT в двух пробах, то первую пробу исследуют в острой фазе, а вторую — в период выздоровления (через 2-3 нед). Полученные результаты носят ретроспективный характер и более пригодны для проведения эпидемиологических обследований.
РТГА выявляет AT, синтезируемые против гемагглютининов вирусов (например, вируса гриппа). Метод позволяет легко выявлять подобные антитела ( AT ) в сыворотке больного.
РСК — основной метод серодиагностики вирусных инфекций (среди доступных). Реакция выявляет комплементсвязывающие IgM и IgG, но не дифференцирует их; для оптимизации получаемых результатов постановка реакции требует определённых навыков персонала.
РИФ. При возможности получить биоптат инфицированной ткани и доступности коммерческих наборов AT, меченных флюоресцеином, диагноз может подтвердить реакция прямой иммунофлюоресценции. Постановка реакции включает инкубацию исследуемой ткани с AT, их последующее удаление и люминесцентную микроскопию образца.
Иммуносорбционные методы выявления противовирусных антител
Иммуносорбционные методы (например, ИФА и РИА) более информативны, поскольку выявляют IgM и IgG по отдельности, что позволяет делать определённые выводы о динамике инфекционного процесса или состоянии реконвалесценции. Для выявления AT известный Аг сорбируют на твёрдом субстрате (например, на стенках пробирок, пластиковых микропланшетах, чашках Петри) и вносят различные разведения сыворотки пациента. После соответствующей инкубации несвязавшиеся AT удаляют, вносят антисыворотку к Ig человека, меченную ферментом, повторяют процедуру инкубирования и отмывания несвязанных AT и вносят какой-либо хромогенный субстрат (чувствительный к действию фермента). Поскольку изменение окраски пропорционально содержанию специфических AT, то вполне возможно определение их титра спектрофотометрическим способом. В диагностике ВИЧ-инфекции наи- большее распространение нашёл метод иммуноблотннга.
— Также рекомендуем «Выявление вирусных антигенов ( Аг ). ИФА. Гибридизация ДНК. ПЦР. Методы диагностики микозов ( грибковых заболеваний ).»
Источник
