Проведение общего анализа крови ручными методами
Методика исследований
Забор крови, с последующим её исследованием производился у мужчин в возрасте от 20-ти до 35-ти лет, до и после физической нагрузки. В исследовании приняла участие группа из тридцати трёх человек, каждый из которой, после взятия пробы до физической нагрузки, проходил стандартную тренировку в течение часа. В таблице 3 сведены типы и продолжительность упражнений, которым подвергались все испытуемые.
Таблица 3 — типы физической нагрузки, применяемой в исследовании
Тип физической нагрузки | Продолжительность, мин | Темп выполнения |
Бег | 15 | Средний |
Комплекс упражнений | 15 | Ускоренный |
Спарринг | 30 | Средний |
Тренировка включала в себя 15 минут бега в нормальном темпе (один тридцатиметровый круг в минуту); выполнение комплекса упражнений (подтягивания, отжимания от пола, приседания) в течение 15 минут в ускоренном темпе (20 подтягиваний в минуту, 50 приседаний в минуту, 30 отжиманий в минуту); 30 минутный спарринг в нормальном темпе (20-25 бросков в минуту). По окончанию тренировки вновь бралась проба такого же объёма, у тех же испытуемых, что и до тренировки.
Техника проведения общего анализа крови
Основные этапы выполнения общего анализа крови:
1 взятие материала;
2 приготовление мазков крови;
3 проведение анализов на гематологическом анализаторе;
4 фиксация мазков крови;
5 окраска мазков крови;
6 подсчёт лейкоцитарной формулы.
Взятие материала. Кровь для исследования получили путём прокола четвёртого пальца левой руки обследуемого слева от срединной линии на некотором расстоянии от ногтя. В зависимости от толщины кожи глубина прокола составляет 2-3 мм. Обработанная кожа пальца высыхает несколько секунд. Цель этого «высыхания» — исключить растекание крови по пальцу, а также гемолитического воздействия антисептика на эритроциты. Скарификатор одноразового использования плотно зажимается между указательным и большим пальцами правой руки; производится прокол. Прокол произвели перпендикулярно рисунку кожных покровов пальца, так как в этом случае происходит повреждение нескольких капилляров, ход которых совпадает с ходом линий кожного рисунка. Учитываем, что разрез произведённый параллельно кожным линиям, спадается, что затрудняет забор крови. Первую, выступившую каплю крови удалили ватным тампоном, а последующие были взяты на исследование. Взятую кровь поместили в пронумерованные и обработанные раствором антикоагулянта. Трилоном-Б, пластиковые микрокюветы. На следующем рисунке показаны одноразовые пластиковые микрокюветы, более удобные и безопасные в использовании, чем стеклянные пробирки.
Все манипуляции связанные с забором крови проводились используя стерильные комплекты инструментов для взятия крови (капилляры Панченкова, предметные стёкла, скарификаторы и микрокюветы). Для каждого обследуемого использовалась индивидуальная пара перчаток и стерильных ватных укладок. Все манипуляции проводились в соответствии с требованиями приказа №165 МЗ РБ от 25.11.2002 г «О методах стерилизации и дезинфекции в медицинских учреждениях» [21].
Рисунок 1 — Микрокюветы с раствором антикоагулянта
Приготовление мазков крови. Для изготовления мазка крови использовались тщательно обезжиренные предметные стёкла. Мазок крови готовился шлифованным стеклом с идеально ровным краем, ширина которого была приблизительно на 2-3 мм уже предметного стекла. К куполу свеже выпущенной из прокола капли было сделано прикосновение предметным стеклом на расстоянии 1,5-2 см от его края, не касаясь кожи в месте прокола. Размер капли на стекле не менее 2-3 мм в диаметре. Шлифованным стеклом, приставленным к предметному под углом 45°, быстрым движением справа налево был сделан мазок. Критерием правильности выполненного мазка является его полупрозрачность и желтоватый цвет. Техника приготовления мазка крови представлена на следующем рисунке.
Рисунок 2 — Техника приготовления мазка крови
Проведение анализов на гематологическом анализаторе. Для исследований использовался гематологический анализатор SISMYX-500. Взятую кровь в миниёмкастях тщательно перемешали и поместили в загрузочную часть аппарата. Предварительно была проведена калибровка данного аппарата, которая заключалась в проведении полного анализа микрокюветы с дистиллированной водой. Определение параметров исследуемой крови протекает в автономном режиме, без непосредственного участия человека. По завершению цикла исследования сняли выданные аппаратом результаты [22].
Изображение аппарата SISMYX-500, и момента отбора пробы для анализа, представлены на рисунке 3.
Фиксация мазков крови. Данный этап предохраняет форменные элементы от содержащейся в красителях воды, под влиянием которой в не фиксированных мазках происходит гемолиз эритроцитов и изменяется морфология лейкоцитов.
Фиксатор также вызывает коагуляцию белков и тем самым закрепляет препарат на стекле. В качестве фиксирующей жидкости использовали раствор эозинметиленового синего по Май-Грюнвальду. Высушенные мазки опускались в широкогорлую банку с фиксатором на 3-5 минут. Далее пинцетом мазки были извлечены и высушены на воздухе.
Рисунок 3 — Гематологический анализатор SISMYX-500
Окраска мазков крови. Фиксированные сухие мазки поместили в контейнер, который опустили в кювету с рабочим раствором красителя и выдержали в нём экспозицию в 30 минут.
Затем, контейнер был перенесён в кювету с водопроводной водой, а затем в вертикальный штатив для сушки. В качестве красящего раствора был использован краситель по прописи Романовского-Гимзы. В состав красителя входят: азур-2 (смесь равных количеств азура-1 и метиленового синего) и эозин. Критериями правильности данной окраски являются розово-оранжевые гранулы эозинофилов, светло-розовый цвет эритроцитов, нейтрофильная зернистость фиолетового цвета.
Подсчёт лейкоцитарной формулы производят с помощью иммерсионной системы микроскопа с увеличением Ч630. Для работы используется специальное иммерсионное масло, каплю которого наносят на препарат. Удобный обзор препарата настраивают с помощью микро- и макровинтов. Для регистрации клеток при подсчёте лейкоцитарной формулы использовался счётчик лабораторный СЛ-1.
Это простейший арифмометр снабжённый клавишами, обозначенными буквами для подсчёта соответствующих видов лейкоцитов, изображён на рисунке 4.
Рисунок 4 — Счётчик лабораторный СЛ-1
Подсчёт лейкоцитов производился в тонкой части мазка, где эритроциты располагаются одиночно. Препарат просматривают по зигзагообразной линии («линии Меандра») в количестве 3-5 полей зрения. Когда сосчитано 100 клеток, счётчик издаёт характерный сигнал, что означает окончание подсчёта лейкограммы данного препарата. Подсчитывались только целые, не разрушенные клетки.
Статистическая обработка результатов исследования
Для оценки влияния физической нагрузки на состояние показателей периферической крови использовались результаты общего анализа крови до и после физической нагрузки.
В ходе исследования нами были вычислены среднее арифметическое, стандартное отклонение, стандартная ошибка, коэффициент вариации по продуктивности и устойчивости внимания, а также по показателям темпа выполнения.
Средняя арифметическая вычисляется по формуле:
, (4)
где Xi — значение признака, варианта;
n — число значений.
Стандартное отклонение:
, (5)
где x2 — сумма квадратов центральных отклонений, т. е. квадратов разностей между каждым значением и средней арифметической;
n — 1 — число степеней свободы, равное числу объектов в группе без одного.
Ошибка стандартного отклонения:
(6)
где — дисперсия;
n — объём выборки.
Коэффициента вариации:
, (7)
где у — стандартное отклонение;
м — средняя арифметическая.
В результате обработки полученного материала, был проведён статистический анализ, построены графики зависимости показателей концентрации гемоглобина, количества эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, от воздействующего на них фактора физической нагрузки, а также таблицы результатов дисперсионного анализа, для каждого из исследуемых показателей.
Статистическая обработка результатов исследований выполнена с использованием прикладных программ MS Excel 2007 и Statistica for Windows 6.0. Оценка достоверности различий осуществлялась на основе критерия Фишера. Влияние физической нагрузки на показатели крови оценено методом однофакторного дисперсионного [23].
Источник
Содержание:
Главной функцией крови в организме человека является транспорт кислорода и питательных веществ к органам, тканям и клеткам. Доставляя очередную порцию необходимых для нормального функционирования веществ и кислорода, кровь принимает на себя продукты обмена и углекислый газ. В состав крови входит плазма, лейкоциты, эритроциты, тромбоциты и другие, соотношение и количество которых может многое сообщить о функционировании организма в целом. Именно поэтому анализ крови является неотъемлемой частью любого обследования и ни один врач не поставит пациенту диагноз, не попросив его до этого сдать анализы. В данной статье мы рассмотрим расшифровку общего анализа крови у взрослых и показатели нормы в таблице.
Для чего назначают общий анализ крови?
Общий анализ крови проводят пациентам с целью выявления инфекций, воспалительных процессов, данное исследование также помогает определить, есть ли в организме злокачественные новообразования или вирусная инфекция. С помощью общего клинического анализа крови врач оценивает эффективность назначенного лечения.
Данное исследование в обязательном порядке назначают беременным женщинам с целью определения уровня гемоглобина, эритроцитов, тромбоцитов и цветного показателя.
Расшифровка и нормы общего клинического анализа крови у взрослых
При изучении анализа крови из пальца обращают внимание на уровень и количество следующих форменных элементов:
- эритроциты;
- гемоглобин;
- гематокрит;
- ретикулоциты;
- среднее количество и % концентрации гемоглобина в эритроцитах;
- лейкоциты;
- тромбоциты.
Кроме того вычисляют СОЭ (скорость оседания эритроцитов), протромбиновое время и цветной показатель.
При выдаче результатов анализа врачу лаборант подробно расписывает лейкоцитарную формулу, в состав которой входят значения по шести типам лейкоцитов: эозинофилы, лимфоциты, моноциты, палочкоядерные, сегментоядерные нейтрофилы.
В таблице №1 представлены нормы показателей общего анализа крови у женщин и мужчин.
Таблица №1
Показатели анализа | Как обозначается в лаборатории | Норма у женщин | Норма у мужчин |
Эритроциты (× 10х12/л) | RBC | 3,6-4,6 | 4,1-5,2 |
Средний объем эритроцитов (фл или мкм3) | MCV | 82-98 | 81-95 |
Гемоглобин (г/л) | HGB | 122-138 | 128-150 |
Средний уровень HGB в эритроците (пг) | MCH | 26-32 | |
Цветной показатель | ЦП | 0,8-1,2 | |
Гематокрит (в % соотношении) | HCT | 35-44 | 40-50 |
Тромбоциты (× 10х9/л) | PLT | 178-318 | |
Средняя концентрация эритроцитов в гемоглобине (%) | MCHC | 31-38 | |
Ретикулоциты (%) | RET | 0,4-1,3 | |
Лейкоциты (× 10х9/л) | WBC | 4-10 | |
Средний объем тромбоцитов (фл или мкм3) | MPV | 8-12 | |
СОЭ (мм/ч) | ESR | 2-8 | 2-16 |
Анизоцитоз эритроцитов (%) | RFV | 11,3-14,6 | |
В таблице №2 представлены нормы лейкоцитарной формулы
Таблица №2
Показатель | × 10х9/л | % соотношение | |
Нейтрофилы | сегментоядерные | 2,1-5,4 | 43-71 |
палочкоядерные | 0,4-0,3 | 1-5 | |
Базофилы | до 0,063 | до 1 | |
Эозинофилы | 0,02-0,3 | 0,5-5 | |
Лимфоциты | 1,1-3,1 | 17-38 | |
Моноциты | 0,08-0,5 | 3-12 | |
Что влияет на повышение или снижение того или иного форменного элемента или показателя в общем клиническом анализе крови? Рассмотрим подробнее.
Эритроциты
Повышение уровня эритроцитов в общем анализе крови чаще всего возникает при таких состояниях:
- кислородное голодание организма;
- перенесенное обезвоживание и нарушение водно-солевого баланса;
- приобретенные пороки сердца, например, после перенесенного тяжелого инфекционного заболевания;
- нарушение функции коры надпочечников;
- передозировка препаратами из группы глюкокортикостероидов;
- эритремия.
Снижение показателей уровня эритроцитов от описанной нормы наблюдается при таких состояниях:
- железодефицитная анемия;
- беременность в 2 и 3 триместрах;
- перенесенные кровопотери и снижение ОЦК (объема циркулирующей крови);
- заболевания красного костного мозга;
- хронические воспалительные заболевания в организме.
Гемоглобин
Повышенное содержание гемоглобина в анализе крови указывает на:
- повышенное содержание тромбоцитов в крови;
- нарушение водно-солевого баланса в организме в результате длительной диареи или рвоты;
- сгущение крови вследствие нарушений функции свертывания;
- передозировка противоанемическими лекарственными препаратами;
- эритремия.
Понижение уровня гемоглобина в анализе крови свидетельствует о таких состояниях:
- железодефицитная анемия;
- внутренние кровотечения;
- онкологические новообразования;
- поражение костного мозга;
- заболевания почек, характеризующиеся нарушением их функции.
Гематокрит
Гематокрит – это количество эритроцитов в плазме крови, именно по данному показателю устанавливают степень тяжести железодефицитной анемии. Повышение уровня гематокрита свидетельствует о таких состояниях:
- обезвоживание организма;
- перитонит;
- тяжелые обширные ожоги;
- полицитемия.
Снижение гематокрита свидетельствует о таких состояниях:
- анемия, связанная с дефицитом железа в организме;
- патологии сердца;
- заболевания сосудов и патологии почек;
- хроническая гиперазотемия (повышение уровня азота в крови)
Цветной показатель
Соотношение количества гемоглобина в одном эритроците согласно нормальным параметрам и представляет собой цветной показатель. Повышение ЦП свидетельствует:
- недостаток в организме цианокобаламина;
- дефицит витамина В9;
- полипы в желудке;
- опухолевые злокачественные заболевания.
Снижение цветного показателя встречается при таких состояниях:
- анемия у беременных;
- увеличение ОЦК (во время беременности, когда добавляется третий плацентарный круг кровообращения);
- отравление свинцом.
Тромбоциты
Тромбоциты ответственны за нормальное свертывание крови. Снижение уровня тромбоцитов наблюдается при:
- лейкоз;
- СПИД;
- отравления алкоголем, лекарственными препаратами, химическими веществами;
- длительная терапия антибиотиками, эстрогенами, гормональными средствами, Нитроглицерином, антигистаминными препаратами;
- апластическая анемия;
- заболевания костного мозга.
Повышение уровня тромбоцитов в анализе крови указывает на возможные следующие состояния:
- колит;
- туберкулез;
- остеомиелит;
- заболевания суставов;
- злокачественные новообразования;
- цирроз печени;
- миелофиброз;
- период реабилитации после перенесенных хирургических вмешательств.
СОЭ
Снижение скорости оседания эритроцитов наблюдается при таких состояниях:
- анафилактический шок;
- заболевания сердца;
- патологии сосудов.
Повышение СОЭ характерно для:
- беременность;
- обострение хронических заболеваний;
- отравления;
- анемия;
- заболевания соединительной ткани;
- инфекционно-воспалительные заболевания;
- болезни печени и почек.
Среднее количество тромбоцитов
В крови присутствует молодые и зрелые тромбоциты, причем первые крупнее, а вторые несколько уменьшены в размерах. Продолжительность жизни тромбоцитов в среднем составляет примерно 10 дней, после чего им на смену приходят новые молодые клетки. Чем ниже показатель MPV, тем меньше в крови зрелых тромбоцитов и также наоборот.
Повышение уровня MPV характерно при таких состояниях:
- сахарный диабет;
- системная красная волчанка;
- период реабилитации после хирургического удаления селезенки;
- алкоголизм;
- закупорка просветов кровеносных сосудов атеросклеротическими бляшками;
- талассемия (генетическая патология, характеризующаяся нарушением строения гемоглобина);
- тромбоцитодистрофия.
Снижение уровня MPV встречается при таких состояниях:
- цирроз печени;
- анемия (мегалобластная и пластическая);
- период реабилитации после лучевой терапии;
- синдром Вискота-Олдрича.
Лейкоциты
Повышение уровня лейкоцитов в крови называют лейкоцитозом, а снижении белых кровяных телец – лейкопенией. Лейкоциты выполняют непростую роль – при попадании в организм вирусов или возбудителей инфекции, эти клетки поглощают чужеродный объект и дают сигнал иммунной системы, чтобы начали вырабатываться антитела, которые в будущем сразу распознают постороннего объекта и уничтожат его. Лейкоцитоз может быть физиологическим и патологическим.
Физиологический лейкоцитоз характерен для:
- беременность;
- роды;
- период накануне менструации;
- усиленные физические нагрузки;
- перегрев или переохлаждение;
- повышенное психоэмоциональное перенапряжение.
Патологический лейкоцитоз наблюдается при:
- гнойные воспалительные заболевания;
- полученные тяжелые ожоги;
- применение гормона инсулина;
- злокачественные опухоли в организме;
- эпилепсия;
- сильное отравление;
- аллергические реакции.
Лейкопения характерна для:
- цирроз печени;
- системная красная волчанка;
- лимфогрануломатоз;
- лейкоз;
- гипоплазия костного мозга;
- прием некоторых лекарственных препаратов;
- лучевая болезнь;
- гепатит;
- малярия;
- акромегалия;
- корь.
Как изменяются показатели общего анализа крови при беременности?
У женщин во время беременности происходят серьезные изменения во всем организме, не остается в стороне и система крови. Добавляется третий круг кровообращения – плацентарный, в результате чего меняется количество и уровень форменных элементов. В таблице ниже представлены нормальные показатели крови беременной женщины.
Таблица №3
Форменные элементы крови | Триместры беременности | ||
1 | 2 | 3 | |
Гемоглобин (г/л) | 110-150 | 105-140 | 100-135 |
Лейкоциты (×10х9/л) | 5,8-10,1 | 7,0-10,3 | 6,7-10,5 |
Эритроциты (×10х12/л) | 3,4-5,4 | 3,2-4,9 | 3,5-5,0 |
Тромбоциты (×10х9/л) | 180-320 | 200-340 | |
СОЭ (мм/ч) | 22 | 40 | 51 |
Цветной показатель (ЦП) | 0,83-1,15 | ||
Когда необходим общий анализ крови: показания
Сдача общего анализа крови является обязательным при поступлении в стационар, во время беременности (не менее 4 раз при нормальном течении беременности), для контроля проведенного лечения.
Не обойтись без данного исследования крови при подозрении на такие патологии:
- железодефицитная анемия;
- злокачественные новообразования;
- воспалительно-инфекционные заболевания;
- заболевания крови;
- патологии красного костного мозга.
Общий анализ крови необходимо периодически сдавать пациентам, страдающим хроническими заболеваниями и состоящим на диспансерном учете.
Как проводят общий анализ крови: подготовка
Плановый общеклинический анализ крови лучше всего сдавать с утра натощак. Накануне вечером не рекомендуется злоупотреблять углеводами и жирной пищи, стараться избегать стрессов и повышенных физических нагрузок, за несколько дней до исследования не употреблять спитрное. Рекомендуется не принимать лекарственные препараты, которые могут искажать результаты исследования, например, НПВС, Ацетилсалициловую кислоту, антикоагулянты непрямого действия. Если прием этих лекарств необходим по жизненным показаниям, то обязательно стоит предупредить об этом врача.
В экстренных ситуациях, например, при остром хирургическом состоянии общий анализ крови проводят независимо от времени суток и давности приема пищи.
Для забора крови специалист осуществляет прокол безымянного пальца, который предварительно обрабатывают спиртовым раствором. Первую каплю крови удаляют ватным тампоном, смоченным спиртом, последующие забирают для анализа.
Источник