Проба вельтмана в биохимическом анализе крови

 Пробы коллоидоустойчивости

В клинико-диагностических лабораториях находят примене­ние методы, позволяющие с использованием простых коллоид­ных реакций выявлять изменения в белковом спектре сыворотки крови. В силу этого они получили известность под названием проб коллоидной устойчивости, или проб на лабильность белков сыворотки. Поскольку нарушение коллоидной устойчивости сы­воротки под действием какого-либо реактива выражается снача­ла коагуляцией (склеиванием), а затем флокуляцией (осажде­нием), коллоидноустойчивые пробы именуют нередко коагуляционными, или флокуляционными (коллоидноосадочными).

Флокуляция (коагуляция, осаждение) наступает мод влияни­ем двух основных факторов: 1) уменьшения электрического за­ряда коллоидных частиц (и, следовательно, содержания гидратационной воды в их оболочке); 2) увеличения размеров коллоид­ных частиц.

Преципитацию  коллоидных  частиц  вследствие  уменьшения толщины сальватационной оболочки белковых молекул обычно вызывают действием ацетона, алкоголя, концентрированных растворов электролитов.

Положительный результат коллоидно-химических проб чаще всего обусловлен характерными количественными изменениями в  содержании   отдельных  фракций                    α-,  β-,  γ-глобулинов  либо уменьшением соотношения альбумин/глобулины.  В случае от­сутствия сдвигов в показателях концентрации глобулинов и ко­эффициента альбумин/глобулины известное значение имеет воз­растание    содержания    более    грубо   дисперсных    подфракций (γ-глобулинов) в глобулиновой системе.

Тимоловая проба.

Принцип метода: при добавлении буферного раствора тимола (рН=7,55 при 250С) к сыворотке крови часть крупнодисперсных белков осаждаются, вызывая помутнении раствора, интенсивность которого измеряется.

Реактивы:

1. рабочий раствор (7,5 мл концентрированного раствора довести до 500 мл дистиллированной водой).

2. физиологический раствор.

Исследуемый материал:

1. негемолизированная сыворотка крови.

Ход определения:

Опытную и контрольную пробу перемешать и оставить стоять при комнатной температуре на 30 минут; измерить на ФЭКе при длине волны 670 нм, кювета 5 мм; опытную пробу измерить против контроля.

Норма: 0 – 5 единиц.

 

Клинико-диагностическое значение:  высокие цифры (единицы) тимоловой пробы отмечаются при острых гепатитах, циррозах печени в стадии обострения. Увеличенные цифры после перенесенного гепатита свидетельствуют о том, что патологический процесс в печени полностью не прекратился.

Проба Вельтмана

            Принцип метода: белки сыворотки крови в результате нагревания и действия раствора CaCl2  определенной концентрации выпадают в осадок в виде хлопьев.

            Реактивы:

раствор CaCl2 0,5% (готовится из ампульного, учитывая, что 10% ампульный раствор имеет удельный вес 1,040 который соответствует 5% безводному).

Исследуемый материал:

негемолизированная сыворотка крови.

Ход определения:

      К 0,1 мл сыворотки прибавляют 4,9 мл дистиллированной воды и 0,1 мл 0,5% раствора CaCl2. Опытную пробу перемешивают. Нагревают над пламенем горелки до однократного вскипания смеси. Остужают (под струей воды). Пробу смотрят на свет, если хлопьев нет, то в эту же пробирку добавляют еще 0,1 мл 0,5% раствора CaCl2. Вновь кипятят. Процедуру повторяют пока не выпадают хлопья.

      Интерпретация результатов:  результат оценивают, подсчитывая общее количество пошедшего на титрование CaCl2.

      Норма: 0,4 – 0,5 мл CaCl2.

Клинико-диагностическое значение: реакция коагуляции белков сыворотки может изменяться в двух направлениях: в сторону увеличения или уменьшения количества раствора CaCl2 пошедшего на реакцию. Применяют «сдвиг вправо» (уменьшение количества CaCl2 для реакции) и «сдвиг влево» (увеличение количества CaCl2 для реакции).

      Сдвиг вправо: отмечается при болезни Боткина, острой желтой атрофии печени, циррозах, многих воспалительных заболеваниях (пневмония, плеврит, туберкулез легких).

      Сдвиг влево: обнаруживается при острых воспалительных и экссудативных процессах – остром ревматизме, нефрозах, злокачественных опухолях, больших потерях жидкости и др.

Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!

Биохимический анализ крови — это лабораторный метод исследования показателей крови, отображающий функциональное состояние тех или иных внутренних органов, а так же указывающий на недостаток в организме различных микроэлементов или витаминов. Любое, даже самое незначительное, изменение биохимических показателей крови, говорит о том, что какой-то определённый внутренний орган не справляется со своими функциями. Результаты биохимического анализа крови используются докторами почти в каждой области медицины. Они помогают установить правильный клинический диагноз заболевания, определить стадию его развития, а также назначить и откорректировать лечение.

Подготовка к сдаче анализа

Биохимический анализ требует специальной предварительной подготовки пациента. Приём пищи производится не менее 6 — 12 часов до проведения анализа крови. Это основывается на том, что любой пищевой продукт способен оказывать влияние на показатели крови, изменяя тем самым результат анализа, что в свою очередь, может повлечь за собой неправильный диагноз и лечение. Так же, стоит ограничить приём жидкости. Противопоказан приём алкоголя, сладкого кофе и чая, молока, фруктовых соков.

Методика проведения анализа или забора крови

Во время забора крови пациент находится в положении сидя или лёжа. Кровь для биохимического анализа забирают из локтевой вены. Для этого немного выше локтевого сгиба накладывается специальный жгут, затем вводится игла непосредственно в вену и, производится забор крови (примерно, 5 мл). После чего кровь помещают в стерильную пробирку, на которой обязательно указывают данные пациента, и только после этого её направляют в биохимическую лабораторию.

Показатели белкового обмена

Показатели крови:
Общий белок – отображает содержание белка в сыворотке крови. Уровень общего белка может увеличиваться при различных заболеваниях печени. Снижение количества белка наблюдается при недостаточном питании, истощении организма.

В норме уровень общего белка изменяется в зависимости от возраста:

• у новорожденных он составляет 48 — 73 г/л
• у детей до года – 47 — 72 г/л
• от 1 до 4 лет – 61 — 75 г/л
• от 5 до 7 лет – 52 — 78 г/л
• от 8 до 15 лет – 58 — 76 г/л
• у взрослых – 65 — 85 г/л

Альбумин – простой белок, растворимый в воде, составляющий около 60% всех белков сыворотки крови. Уровень альбуминов снижается при патологиях печени, ожогах, травмах, заболеваниях почек (нефритический синдром), недостаточном питании, на последних месяцах беременности, при злокачественных опухолях. Количество альбуминов увеличивается при обезвоживании организма, а также после приёма витамина А (ретинола). Нормальное содержание сывороточного альбумина составляет 25 — 55 г/л у детей в возрасте до 3 лет, у взрослых – 35 — 50 г/л. Альбумины составляют от 56,5 до 66,8 %.

Глобулин – простой белок, легко растворимый в разбавленных солевых растворах. Повышаются глобулины в организме при наличии в нём воспалительных процессов и инфекции, снижаются при иммунодефиците. Нормальное содержание глобулинов составляет 33,2 — 43,5 %.

Фибриноген – бесцветный белок плазмы крови, вырабатываемый в печени, играющий важную роль в гемостазе. Уровень фибриногена в крови повышается при острых воспалительных процессах в организме, инфекционных заболеваниях, ожогах, оперативных вмешательствах, приёме оральных контрацептивов, инфаркте миокарда, инсульте, амилоидозе почек, гипотиреозе, злокачественных новообразованиях. Повышенный уровень фибриногена можно наблюдать при беременности, особенно в последние месяцы. Уровень фибриногена снижается после употребления рыбьего жира, анаболических гормонов, андрогенов и др. Нормальное содержание фибриногена составляет у новорожденных 1,25 — 3 г/л, у взрослых – 2 — 4 г/л.

Белковые фракции:
Альфа-1-глобулины. Норма 3,5 — 6,0 %, что составляет 2,1 — 3,5 г/л.

Альфа-2-глобулины. Норма 6,9 — 10,5 %, что составляет 5,1 — 8,5 г/л.

Бета-глобулины. Норма 7,3 — 12,5 % (6,0 — 9,4 г/л).

Гамма-глобулины. Норма12,8 — 19,0 % (8,0 — 13,5 г/л).

Тимоловая проба – вид осадочной пробы, используемой для исследования функций печени, в которой в качестве реагента используют тимол. Норма составляет 0 — 6 ед. Значения тимоловой пробы повышаются при вирусных инфекциях, гепатите А, токсическом гепатите, циррозе печени, малярии.

Сулемовая проба – осадочная проба, применяемая при функциональном исследовании печени. Норма 1,6 — 2,2 мл. Проба положительна при некоторых инфекционных болезнях, паренхиматозных заболеваниях печени, новообразованиях.

Проба Вельтмана – коллоидно-осадочная реакция для исследования функций печени. Норма 5 — 7 пробирка.

Формоловая проба – метод, предназначенный для выявления нарушения равновесия протеинов, содержащихся в крови. В норме проба отрицательная.

Серомукоид – является составной частью белково-углеводного комплекса, участвует в белковом обмене. Норма 0,13 — 0,2 ед. Повышенное содержание серомукоида указывает на ревматоидный артрит, ревматизм, опухоли и др.

С-реактивный белок – белок, содержащийся в плазме крови, является одним из белков острой фазы. В норме отсутствует. Количество С-реактивного белка увеличивается при наличии в организме воспалительных процессов.

Гаптоглобин – белок плазмы крови, синтезируемый в печени, способный специфически связывать гемоглобин. Нормальное содержание гаптоглобина составляет 0,9 — 1,4 г/л. Количество гаптоглобина увеличивается при острых воспалительных процессах, применении кортикостероидов, ревмокардите, неспецифическом полиартрите, лимфогранулематозе, инфаркте миокарда (крупноочаговом), коллагенозах, нефротическом синдроме, опухолях. Количество гаптоглобина снижается при патологиях, сопровождаемых различными видами гемолиза, заболеваниях печени, увеличении селезёнки и др.

Креатинин в крови – является продуктом белкового обмена. Показатель, отображающий работу почек. Содержание его сильно варьирует в зависимости от возраста. У детей до 1 года в крови содержится от 18 до 35 мкмоль/л креатинина, у детей от 1 до 14 лет – 27 – 62 мкмоль/л, у взрослых – 44 – 106 мкмоль/л. Повышенное содержание креатинина наблюдается при поражении мышц, обезвоживании организма. Низкий уровень характерен для голодания, вегетарианской диеты, беременности.

Мочевина – вырабатывается в печени в результате белкового обмена. Важный показатель для определения функциональной работы почек. Норма 2,5 – 8,3 ммоль/л. Повышенное содержание мочевины указывает на нарушение выделительной способности почек и нарушение фильтрационной функции.

Показатели пигментного обмена

Общий билирубин – жёлто-красный пигмент, который формируется в результате распада гемоглобина. В норме содержится 8,5 — 20,5 мкмоль/л. Содержание общего билирубина встречается при любом виде желтухи.

Прямой билирубин – Норма 2,51 мкмоль/л. Повышенное содержание данной фракции билирубина наблюдается при паренхиматозной и застойной желтухе.

Непрямой билирубин – Норма 8,6 мкмоль/л. Повышенное содержание данной фракции билирубина наблюдается при гемолитической желтухе.

Метгемоглобин – Норма 9,3 — 37,2 мкмоль/л (до 2 %).

Сульфгемоглобин – Норма 0 — 0,1 % от общего количества.

Показатели углеводного обмена

Глюкоза – является первостепенным источником энергии в организме. Норма составляет 3,38 — 5,55 ммоль/л. Повышенное содержание глюкозы в крови (гипергликемия) указывает на наличие сахарного диабета или же на нарушенную толерантность к глюкозе, хронические заболевания печени, поджелудочной железы и нервной системы. Уровень глюкозы может снижаться при усиленных физических нагрузках, беременности, долгом голодании, некоторых заболеваниях желудочно-кишечного тракта, связанных с нарушенным всасыванием глюкозы.

Сиаловые кислоты – Норма 2,0 — 2,33 ммоль/л. Увеличение их количества связано с такими заболеваниями, как полиартрит, ревматоидный артрит и др.

Связанные с белком гексозы – Норма 5,8 — 6,6 ммоль/л.

Связанные с серомукоидом гексозы — Норма 1,2 — 1,6 ммоль/л.

Гликозилированный гемоглобин – Норма 4,5 — 6,1 молярных %.

Молочная кислота – продукт распада глюкозы. Является источником энергии, необходимой для работы мышц, мозга и нервной системы. Норма 0,99 — 1,75 ммоль/л.

Показатели липидного обмена

Общий холестерин – важное органическое соединение, являющееся компонентом липидного обмена. Нормальное содержание холестерина составляет 3,9 — 5,2 ммоль/л. Повышение его уровня может сопровождать следующие заболевания: ожирение, сахарный диабет, атеросклероз, хронический панкреатит, инфаркт миокарда, ишемическая болезнь сердца, некоторые болезни печени и почек, гипотиреоз, алкоголизм, подагра.

Холестерин альфа-липопротеидов (ЛПВП) – липопротеиды высокой плотности. Норма 0,72 -2, 28 ммоль/л.

Холестерин бета-липопротеидов (ЛПНП) – липопротеиды низкой плотности. Норма 1,92 – 4,79 ммоль/л.

Триглицериды – органические соединения, выполняющие энергетическую и структурную функции. В норме содержание триглицеридов зависит от возраста и пола.

• до 10 лет 0,34 — 1,24 ммоль/л
• 10 – 15 лет 0,36 – 1,48 ммоль/л
• 15 – 20 лет 0,45 – 1,53 ммоль/л
• 20 – 25 лет 0,41 – 2,27 ммоль/л
• 25 – 30 лет 0,42 – 2,81 ммоль/л
• 30 – 35 лет 0,44 – 3,01 ммоль/л
• 35 – 40 лет 0,45 – 3,62 ммоль/л
• 40 – 45 лет 0,51 – 3,61 ммоль/л
• 45 – 50 лет 0,52 – 3,70 ммоль/л
• 50 – 55 лет 0,59 – 3,61 ммоль/л
• 55 – 60 лет 0,62 – 3,23 ммоль/л
• 60 – 65 лет 0,63 – 3,29 ммоль/л
• 65 – 70 лет 0,62 – 2,94 ммоль/л

Увеличение уровня триглицеридов в крови возможно при остром и хроническом панкреатите, атеросклерозе, ишемической болезни сердца, гипертонии, сахарном диабете, алкоголизме, гепатите, циррозе печени, ожирении, тромбозе сосудов мозга, подагре, хронической почечной недостаточности и др.

Фосфолипиды – Норма 2,52 – 2,91 ммоль/л

Неэтерифицированные жирные кислоты 400 — 800 мкмоль/л

Ферменты

АЛАТ – аланинаминотрансфераза. Фермент, необходимый для определения функционального состояния печени. Нормальное содержание в крови 28 -178 нкат/л. Повышенное содержание АЛАТ характерно для инфаркта миокарда, поражения сердечных и соматических мышц.

АСАТ – аспартатаминотрансфераза. Норма 28 – 129 нкат/л. Увеличивается при патологиях печени.

Липаза – фермент, участвующий в расщеплении липидов, синтезируемый поджелудочной железой. Норма 0 – 190 ед/мл. Липаза повышается при панкреатите, опухолях, кистах поджелудочной железы, хронических заболеваниях желчного пузыря, почечной недостаточности, эпидемическом паротите, инфаркте, перитоните. Понижается – при любых опухолях, за исключением рака поджелудочной железы.

Амилаза – пищеварительный фермент, расщепляющий крахмал, синтезируемый поджелудочной железой и слюнными железами. Норма альфа-амилазы 28 – 100 ед/л, панкреатической амилазы – 0 – 50 ед/л. Уровень повышается при панкреатитах, кистах поджелудочной железы, сахарном диабете, холецистите, травме живота, прерывании беременности.

Щелочная фосфатаза – фермент, оказывающий влияние на обмен фосфорной кислоты и участвующий в переносе фосфора в организме. Норма у женщин до 240 ед/л, у мужчин до 270 ед/л. Уровень щелочной фосфатазы увеличивается при различных заболеваниях костей, рахите, миеломной болезни, гиперпаратиреозе, инфекционном мононуклеозе, заболеваниях печени. Снижение её характерно для гипотиреоза, нарушений роста костей, анемии, авитаминоза.