Пцр анализ крови мазок на хламидии
Среди инфекций, заражение которыми происходит преимущественно половым путем, одна из ведущих ролей принадлежит хламидиям. Эти внутриклеточные паразиты. Они легко проникают в организм человека при незащищенном сексуальном контакте, поражая мочеполовой тракт.
Опасны не только местными симптомами, но и системной реакцией иммунной системы. Поэтому даже при отсутствии клинической симптоматики, важно своевременно выявлять опасный микроорганизм. Наиболее подходящим способом является анализ ПЦР на хламидии.
К чему приводит заражение
Хламидия трахоматис – это паразиты, располагающиеся внутриклеточно в эпителии мочеполового тракта. Такое паразитирование приводит к затяжному инфицированию, так как клиническими симптомами заболевание не проявляется.
В организме появляются антитела к хламидиям. Это приводит к поражению не только урогенитального тракта, но и суставов, сердца и внутренних органов. Заражение происходит мгновенно при незащищенном половом контакте, если один из партнеров инфицирован. Далее паразиты проникают в эпителий и интенсивно размножаются.
Возникает острая инфекция, которая зачастую сопровождается мучительными симптомами:
- жжением при мочеиспускании
- болями внизу живота
- снижением либидо
- неприятными выделениями из половых путей
- дискомфортом при сексуальном контакте
- общей интоксикацией (редко)
Но поражается не только мочеполовой тракт. Часто возникают проблемы с органом зрения и суставами.
При долгом персистировании хламидий возможно развитие контрактур крупных сочленений, что приводит к резкому снижению качества жизни. Кроме того, хламидии часто являются спутниками бесплодия и импотенции. Поэтому выявление микроорганизмов – важная цель для сохранения здоровья на долгие годы.
Кому показано обследование
Абсолютно всем людям, которые хотя бы однократно совершали сексуальные контакты без средств индивидуальной защиты. Следует провести исследование методом полимеразно-цепной реакции. Кроме того, обследование желательно проводить у большого контингента граждан.
Наиболее целесообразна ПЦР на хламидии в следующих ситуациях:
- любые симптомы неблагополучия в мочеполовой сфере
- субфебрилитет без четкой причины
- снижение трудоспособности
- частая смена половых партнеров
- бесплодие
- простатит
- снижение ощущений от сексуальной близости
- низкое либидо или эректильная дисфункция
- беременность
В последнем случае ПЦР нужно проводить обязательно. Так как микроорганизмы могут вызвать нарушения во время вынашивания ребенка.
Лучше выполнить исследование до зачатия, и в случае положительного результата, провести лечение. Однако даже при беременности адекватная терапия поможет избежать выкидыша.
Анализ ПЦР на хламидии: что можно исследовать
Так как хламидиоз поражает множество различных органов и систем, то материал для диагностики берут из разных мест.
Ниже рассмотрены основные варианты взятия биоматериала:
- Мазок со слизистой урогенитального тракта. Наиболее распространенный метод диагностики. Для исследования подходит отделяемое влагалища, слизистая уретры или соскоб с наружных половых органов
- Мазок из горла. Инфекция может попадать и распространяться через дыхательные пути. Поэтому при наличии гиперемии полости рта и часто возникающих простудных заболеваний используется мазок с задней поверхности глотки и миндалин
- Мазок с конъюнктивы. Метод исследования возможен только в том случае, если есть клинические проявления поражения органа зрения. В остальных ситуациях в практической работе не используется
- Исследование спермы. Хламидии часто поражают мужскую репродуктивную систему. Поэтому анализа эякулята применяется часто
- Анализ мочи. Так как хламидии паразитируют в слизистой уретры, то зачастую дополнительно требуется поиск ДНК хламидий в моче. Исследование высокоинформативно и служит основой для назначения специфического лечения. Важно лишь помнить, как собирается мочаправильно. Только первая порция подходит для ПЦР, так как затем хламидии смываются
- Анализ синовиальной жидкости. В нем возникает необходимость при наличии экссудативного воспаления в полости сустава, вызванного хламидиями. Пункция сочленения выполняется только в асептических условиях, чаще врачом-хирургом или травматологом
Выбор способа исследования материала зависит от клинической симптоматики. При отсутствии симптомов при подозрении на скрытую половую хламидийную инфекцию предпочтение отдается анализу мазка из урогенитального тракта.
Правила подготовки к процедуре
Чтобы получить наиболее достоверный результат, пациент должен ответственно подойти к подготовке к исследованию.
Для взятия мазка у женщин существуют следующие правила:
- последнее мочеиспускание за 3 часа до взятия материала
- идеальный период – с 5 дня месячных
- при наличии обильного кровянистого отделяемого исследование лучше отложить
- гигиенические мероприятия не менее чем за 2 часа до взятия мазка
- спринцевания запрещены
- за 48 часов желательно воздержаться от употребления алкоголя, если не сказано врачом иное
Как сдавать мужчинам анализ?
Для мужчин правила отличаются в связи с физиологическими особенностями строения половых органов.
Последнее мочеиспускание не менее, чем за 2 часа до исследования. Алкоголь нежелательно употреблять за 72 часа до процедуры. После любых инструментальных обследований, например цистоскопии, должно пройти не менее 5 дней.
Мазок из горла берется обычно утром натощак, принимать пищу и пить воду нежелательно, так как хламидии могут быть смыты. Анализ синовиальной жидкости не требует специальной подготовки. Так как материал получают непосредственно в кабинете врача.
Кровь обычно для ПЦР не используется. составляют случаи, когда подозревается генерализация и распространение микроорганизмов с током крови или лимфы.
Гемотест подтверждает лишь наличие антител, а ПЦР подразумевает определение самой ДНК хламидии. Для выявления антител применяется метод ИФА, но он менее информативен.
ПЦР мазок на хламидии
Универсальным способ получения материала является мазок. Его делают нативно, то есть непосредственно в кабинете врача и сразу отправляют в лабораторию. Это обеспечивает высокую точность диагностики и минимум ошибочных результатов.
Исследование методом ПЦР позволяет обнаружить ДНК хламидии. Это означает 100%-ную специфичность анализа, так как ДНК является уникальной и принадлежит конкретному возбудителю.
Проблемы в урогенитальном тракте могут вызывать не только хламидии. Часто появляется герпес, уреаплазма или микоплазма. Они могут сопутствовать хламидиям и утяжелять течение болезни, но иногда персистируют изолированно. Поэтому параллельно можно исследовать мазок методом ПЦР не только на хламидийную инфекцию, но и на многие другие микроорганизмы.
Однако обследование выполняется обычно с материалом из половых органов, кровь для мазка, как правило, не пригодна. О том, как сдавать мазок, лучше посоветоваться с лечащим специалистом.
Многих людей волнует вопрос, могут ли не определяться в мазке хламидии? Метод ПЦР выявляет конкретную ДНК. Поэтому при наличии этих возбудителей в организме человека, результат будет положительным.
Хламидии не обнаружат в том случае, если неверно проведена подготовка. Либо с момента заражения прошло недостаточно времени для их размножения.
Этапы выполнения анализа
От того, сколько дней делается анализ, немало зависит от последовательности и быстроты проведения забора материала и доставки его в лабораторию. Даже временной фактор будет иметь значение, так как субстрат, полученный утром, будет проанализирован в этот же день.
Полная последовательность этапов анализа ПЦР на хламидии следующая:
- осмотр специалиста
- взятие биоматериала
- упаковка в физиологическую для хламидий среду
- доставка в лабораторию
- проведение теста
- врачебная верификация
- выдача результата
Непосредственная продолжительность тестирования не превышает 4 часов. Однако из-за задержек при транспортировке или позднем взятии материала, анализ бывает готов только на следующий день.
Обязательным условием достоверности исследования является врачебная верификация. Это означает, что врач-лаборант лично осматривает тест и проверяет наличие хламидийной ДНК.
Существует два варианта проведения полимеразно-цепной реакции – количественный и качественный.
Во втором случае результат будет получен быстрее, так как не требуется подсчет геномных эквивалентов микроорганизма. От этого же зависит, сколько стоит исследование. При получении количественного результата цена будет выше.
Однако в практической медицине ценовой диапазон на ПЦР не слишком высок. Так как проводить обследование требуется многим людям.
Интерпретация результата
Расшифровка анализа не представляет трудностей.
Качественный вариант исследования подразумевает только подтверждение наличия микроорганизма. Поэтому в заключении будет написано, отрицательный или положительный результат обнаружения ДНК.
Количественный вариант требует подсчет геномных эквивалентов (ГЭ). Чем их больше, тем серьезнее поражение человека.
Общепринятой градацией является следующая:
- менее 10 в 4 степениГЭ/мкл – низкая распространенность хламидий
- от 10*4 до 10*5 ГЭ/мкл – средняя степень
- более 10*5 ГЭ/мкл – очень высокий уровень заражения
Зависимость прямая. Чем больше хламидий, тем тяжелее протекает заболевание и вероятнее развитие системных негативных реакций.
Положительный результат свидетельствует о наличии инфекции.
Это значит, что необходимо проводить антимикробную терапию.
Отрицательный ответ свидетельствует лишь о том, что в настоящий момент возбудители не обнаружены. Однако при наличии факторов риска, обследование желательно повторить через 1 месяц.
Ложноположительных реакций не бывает, так как ДНК уникальна и типична только для одного конкретного возбудителя. Для получения достоверной картины инфицирования анализ лучше сдавать обоим партнером. В этом случае, даже при выявлении у одного из них, лечебные мероприятия потребуются каждому. Таким образом, анализ ПЦР на хламидии является незаменимым для точной диагностики половых инфекций.
Проводить обследование лучше в клинике, где имеются профильные специалисты. В кожно-венерологическом диспансере непосредственно занимаются проблемами пациентов с хламидийной инфекцией. Это означает, что в наличии имеются «свежие» реактивы и надежная современная лаборатория. Поэтому в КВД результаты выдаются в течение суток после взятия материала. Это позволяет в кратчайшие сроки начать лечение, которое предложат опытные врачи-венерологи, работающие в клинике.
Выявление и излечение хламидий – важнейший этап оздоровления организма.
Источник
От точности и скорости диагностики напрямую зависит, как быстро можно будет начать лечение хламидиоза. Это заболевание не дает специфичных симптомов, поэтому лабораторные методы диагностики выходят на первый план для определения возбудителя.
Метод полимеразной цепной реакции — один из самых современных методов диагностирования. Врачи оценили его точность и скорость получения результатов, поэтому часто назначают этот тип анализа в ходе детального обследования и выявления хламидиоза.
Что представляет собой анализ
Данный тип исследования используют для всех возрастных категорий, его можно назначать даже новорожденным детям, не говоря о взрослых мужчинах и женщинах.
Объектом исследования при анализе является хламидия трахоматис — патогенный микроорганизм, присутствие которого в организме вызывает развитие хламидиоза.
По международной системе классификации заболеваний МКБ-10, которую используют медики всего мира, хламидийной инфекции присвоен код А74.
Болезнь может давать различные симптомы, а может протекать абсолютно бессимптомно, но ПЦР-исследование способно выявить бактерию даже в этом случае, чем не могут похвастаться остальные инструментально-клинические методы.
Суть анализа заключается в том, чтобы точно скопировать и быстро размножить фрагменты цепочки ДНК того микроорганизма, который стал причиной заболевания. Чтобы ускорить этот процесс, в лаборатории применяют специальные ферменты, способные активизировать постройку новых генетических цепочек.
Результатом таких воспроизведений становится увеличение генетического материала в пробе, доходящее до миллиона раз, что значительно облегчает его выявление. После того, как ДНК микроорганизма обнаружено, его тщательно исследуют под микроскопом и безошибочно определяют. Определение выполняет лаборант, сравнивая полученный образец с эталонными, имеющимися в лаборатории, которые заказывают в исследовательских институтах.
Нередко ПЦР используется при поиске причин бесплодия или неспособности к вынашиванию плода или осложнениях в ходе беременности. Также человек может пожелать провести диагностику после незащищенного полового акта с партнером, в здоровье которого не уверен.
Плюсы и минусы метода ПЦР
Среди неоспоримых преимуществ анализа выделяются такие:
- высокая чувствительность методики (не менее 95%);
- возможность применения в инкубационном, латентном или хроническом периоде хламидиоза, а также при носительстве;
- перечень материала для исследования строго не определяется, поэтому при невозможности использовать, к примеру, кровь можно легко заменить ее мокротой или слизью с половых органов;
- скорость получения данных после анализа (в среднем протокол выдают на руки на следующий день, но при острой необходимости возможно получить его и в день взятия пробы);
- анализ является прямым и позволяет выявить саму бактерию хламидии трахоматис, а не косвенные показатели ее присутствия — антитела.
Немаловажным фактором является то что полимеразная цепная реакция во время обследования позволяет одновременно выявлять некоторые сопутствующие заболевания, имеющие общую симптоматику с хламидиозом. Такими инфекциями являются практически все урогенитальные инфекции, многие вирусные и бактериальные болезни (уреаплазмоз, кандидоз, микоплазмоз, цитомегалия и пр.).
К недостаткам относятся:
- высокие требования по санитарным нормам к лаборатории паолимеразной цепной реакции, которые необходимо соблюдать, чтобы не получить ложноположительных результатов из-за загрязнения пробы;
- незначительная вероятность ложноотрицательного результата (для того, чтобы избежать этого явления необходимо тестирование сразу нескольких видов биоматериала);
- сложность интерпретации результатов, которые должен оценивать квалифицированный специалист, учитывая динамику хламидиоза и обладая достаточными знаниями в сфере иммунологии и инфекционных болезней;
- высокая стоимость исследования, что объясняется особыми требованиями к оснащению лаборатории и квалификацией персонала.
Несмотря на наличие недостатков, в настоящее время ПЦР признан самым удачным в плане диагностики хламидиоза.
Какой материал необходимо сдать для анализа
Для того, чтобы успешно провести тестирование образца при помощи полимеразной цепной реакции на хламидии, достаточно небольшого объема материала, что является еще одним преимуществом. Для диагностики подходит большинство биологических жидкостей, кровь и образцы мягких тканей.
У мужчин для определения хламидий берут:
- мазок из уретры;
- мазок из конъюнктивы;
- сперму;
- мочу;
- жидкость из предстательной железы;
- синовиальную жидкость.
Материалом, который берут для исследования у женщин, является:
- соскоб из уретры;
- эпителий из цервикального канала;
- моча;
- мазок из конъюнктивы;
- синовиальная жидкость.
Кровь берется из локтевой вены на руке, достаточно 10-15 мл. В современных лабораториях для этого используют специальные вакуумные системы, которые предотвращают попадание посторонних микробов в образец, увеличивая тем самым точность результатов.
Если необходим образец синовиальной жидкости, то делают пункцию суставного аппарата специальной толстой иглой с диаметром 0,8 мм. Введение этой иглы проходит болезненно, поэтому иногда перед введением применяют местное обезболивание.
Биоматериал могут отобрать в лаборатории, а могут делать отбор проб непосредственно в поликлинике или больнице, после чего направлять его на тестирование в ПЦР лабораторию. Некоторые частные диагностические центры за дополнительную плату берут образцы для исследования на дому у пациента.
Для оценки заражения околоплодных вод хламидиями во время беременности отбирают небольшое количество амниотической жидкости. Делают это только при острой необходимости, так как методика несет небольшую опасность для протекания беременности. Для этого производят прокол брюшной полости и под контролем УЗИ отбирают необходимое количество околоплодных вод.
Для всех беременных при постановке на учет в женскую консультацию назначают обследование на наличие хламидий в крови, для чего проводят ПЦР-тестирование, поскольку хламидиоз является тяжелой TORCH-инфекцией, способной нарушить ход беременности и осложнить развитие плода. Для такого типа обследования всегда используют кровь из вены.
Подготовка к анализу ПЦР
Правильная подготовка к обследованию на хламидии — одно из основных требований для получения корректных и точных результатов.
Для каждого типа биоматериала предусматривается специфичная подготовка. О всех требованиях, необходимых в процессе подготовки к ПЦР тестированию, пациенту должен подробно рассказать специалист, который выдает направление.
Перед сдачей мазков или мочи женщинам запрещено:
- на протяжении 3 суток пользоваться внутривагинальными свечами;
- применять вагинальные спринцевания, орошения или тампоны, пропитанные любыми настоями или отварами трав.
Сдавать мазок для ПЦР анализа на хламидиоз во время месячных нельзя.
Перед сдачей мазков или мочи как мужчинам, так и женщинам запрещается:
- ходить в туалет меньше, чем за 3 часа до отбора;
- выполнять гигиенические процедуры с применением дезинфицирующих или антибактериальных средств;
- заниматься сексом на протяжении 3-х предшествующих суток.
Для девочек возрастом до 14 лет мазок могут брать не из влагалища, а из слизистой оболочки преддверия влагалища, чтобы не повредить девственную плеву.
Перед сдачей крови для ПЦР на хламидии нужно не употреблять спиртные напитки, несколько дней не есть жирную пищу и жареные блюда, а также не курить за несколько часов до манипуляции.
Сдавая мочу, необходимо помнить, что показательнее всего — первая утренняя порция, первые и последние капли отбрасываются. Контейнер обязательно должен быть стерильным. Для исследования нужно предоставить около 50 миллилитров мочи.
Перед отбором материала любого типа для определения хламидий нельзя принимать антибиотики или уросептики. Это возможно только в том случае, если исследование проводится для определения эффективности лечения, в остальных случаях применять такие препараты на протяжении двух недель перед ПЦР-диагностикой запрещено.
Расшифровка результатов
Исследование на наличие хламидий при помощи полимеразной цепной реакции является качественным методом, то есть он показывает не количество бактерий в пробе, а их присутствие или отсутствие.
В протоколе ПЦР анализа указывается фамилия пациента, дата исследования, название бактерии (Chlamydia trachomatis) и полученный результат: положительный («обнаружено») или отрицательный («не обнаружено»). Иногда их описывают при помощи значков «+» или «-».
Если получен положительный результат, то это означает, что в организме присутствует острый процесс, или пациент является носителем заболевания.
В норме отрицательный результат означает, что в пробе не обнаружены такие бактерии, то есть, он здоров.
Если у взрослого человека обнаружена бактерия хламидия трахоматис, это означает, что половому партнеру обязательно нужно обследоваться даже в том случае, если клинических проявлений хламидиоза у него нет. Отсутствие симптомов не гарантирует отсутствие болезни, у него может быть бессимптомная форма, которая не исключает осложнений и возможности заразить других людей.
В завершение следует отметить, что ПЦР является одним из основных средств выявления хламидиоза в настоящее время, тогда как другие методы преимущественно используют в качестве дополнительных методов.
Об особенностях диагностики хламидиоза методом ПЦР на данном видео рассказывает врач-венеролог.
Источник