Отрицательный анализ крови при мрп
Микрореакция на сифилис является наиболее распространенным методом диагностики заболевания и основывается на образовании связи между особыми белковыми структурами — фосфолипидами и антителом. Доступность и простота проведения исследования позволяет за короткий промежуток времени обследовать большое количество пациентов.
Что из себя представляет данный анализ?
В организме в ответ на внедрение патогенной микрофлоры или при повреждении собственных клеток образуются особые белковые элементы – антитела. При диагностике сифилиса методом микрореакции (МРП) в крови пациента пытаются найти связь между антителами и фосфолипидами — белками, входящими в состав всех клеточных мембран.
Иммунный ответ в виде выработки антител формируется как раз тогда, когда фосфолипиды из клеточных мембран попадают в кровь. Это происходит при проникновении в ткани человека бледной трепонемы – возбудителя сифилиса и ряда других инфекций.
Чтобы при заражении сифилисом антитела начали вырабатываться, требуется определенное время. Это происходит не мгновенно, а, самое раннее, спустя 3-4 недели после инфицирования. Именно поэтому этот анализ не подходит для ранней диагностики. Но благодаря легкости проведения и невысокой стоимости МРП относится к скрининговым исследованиям, предназначенным для выявления болезни среди широких масс населения.
Диагностика сифилиса этим методом состоит из следующих этапов:
- подготовка больного к сбору материала;
- сдача крови в лаборатории. Для анализа требуется кровь пациентов, которую чаще всего берут из вены, но в некоторых лечебных учреждения используется и из пальца;
- на специальном оборудовании отделяют плазму крови от клеточных элементов;
- в полученную биологическую жидкость добавляют антиген с визуализирующим агентом. Чаще всего для этого используется уголь;
- при наличии в сыворотке фосфолипидных антител происходит их склеивание с введенным антигеном, что проявляется образованием черных хлопьев, указывающих на положительную реакцию. При отсутствии в организме антител к фосфолипидам хлопья не образуются.
Также проводится количественная оценка наличия бледной трепонемы в организме с вычислением показателей титра. Для этого микрореакцю на сифилис выполняют в разведениях. В процессе исследования сыворотку крови пациента разводят физиологическим раствором сначала в два раза, потом в четыре и так далее, каждый раз удваивая разведение и проводя тест на выявление антител в материале. При этом отмечается разведение, на котором микрореакция последний раз остается положительной. Например, 1:320 означает, что даже при разведении в 320 раз в сыворотке крови еще содержатся антитела. Это цифра является показателем титра и указывается в анализе. Чем выше значение титра, тем активнее протекает патологический процесс в организме.
Количественное определение титра важно для контролирования результативности терапии и диагностирования окончательного излечения сифилиса. В течение года после курсовой терапии должно отмечаться падение титров в 4 раза. Контрольные анализы проводят через 3 месяца, полгода и год после лечения.
Показания к исследованию
Микрореакция преципитации на сифилис выполняется в диагностических целях и при проведении скрининговых исследований. Для выявления и констатации наличия инфицирования бледной трепонемой анализ МРП назначают следующим группам пациентов:
- имеющие клинические проявления болезни. В первую очередь, это больные с характерными изъязвлениями на половых органах и участках тела, контактирующих с партнером в процессе полового акта. Также обращается внимание на увеличенные близкорасположенные к очагу лимфатические узлы;
- лицам с любыми высыпаниями или язвочками в области гениталий;
- сексуальным партнерам и членам семьи больного;
- новорожденным, родившимся от матерей, болеющих или имеющих сифилис в анамнезе;
- больным любой другой патологией, передающейся при интимных контактах.
Для установления заболеваний используются разные способы, в том числе и лабораторные методы. Микрореакция крови — это вид анализа в ходе диагностики сифилиса для выявления повреждения клеток.
Цель микрореакции крови
Исследование не является специфическим анализом, поскольку не ставит задачей найти возбудителя. Разрушение клеток может происходить и при других заболеваниях. Поэтому если результаты теста распознаются как положительные, необходимо проведение других лабораторных тестов.
Что выявляет анализ
Заболевания, передающиеся половым путём, вызываются различными возбудителями. Когда они попадают в организм, иммунитет реагирует на это повышением синтеза веществ, которые должны бороться с ними. В ответ на размножение возбудителя вырабатываются антитела, связывающие его. Сколько бактерий, столько должно быть и антител.
В ходе борьбы бледная трепонема или другой возбудитель разрушает мембрану собственных клеток. Эти остатки также требуется удалить, на что и реагирует антитело.
Анализ показывает наличие таких компонентов, их комплексов, антител и антигенов. Каждый из них можно количественно определить.
Виды исследования
Все неспецифические исследования можно разделить на две большие категории: макро- и микрореакции. Первая осуществляется без дополнительного оборудования, оценивается визуально. Вторая требует оборудования в виде микроскопа высокой степени увеличения.
Электронная микроскопия позволяет выявить разрушенные клетки без использования реактива.
Различают несколько типов анализа крови на микрореакцию:
- экспресс-тест с макроскопией;
- классическое исследование с изучением осадка;
- количественное определение.
Первый метод не требует исследования материала под микроскопом, результат виден невооруженным глазом.
Суть проведения анализа в том, что кровь больного помещается в центрифугу, получается сыворотка, в которую необходимо добавить концентрат раствора. При наличии возбудителя происходит окрашивание жидкости.
При втором способе сыворотку крови исследуют под микроскопом, дополнительные вещества не используются. Для получения количественного значения сыворотка многократно разводится, потом направляется под микроскоп, и лаборант регистрирует количество связанных комплексов антиген-антитело в мазке.
Показания к проведению исследования
Ввиду простоты исследования и отсутствия необходимости использования дорогостоящих реагентов, микрореакция преципитации используется для больших групп населения, чаще всего при плановом обследовании.
Сдача анализа назначается:
- военнослужащим;
- беременным;
- больным перед операцией;
- при обследовании в тюрьме или следственном изоляторе;
- при осмотре медицинских работников, сотрудников общественного питания;
- перед сдачей крови на донорство;
- перед трансплантацией органов.
При лечении для контроля эффективности назначенной терапии исследование проводится несколько раз.
Тест на количественную реакцию показан лицам, у которых обнаружились признаки патологии, детям больных родителей, при язвах на половых органах. Также обследование нужно для подтверждения диагноза после первичных тестов или если пациент имеет другие венерические заболевания.
Подготовка
Чтобы получить достоверный результат, необходимо соблюдать правила сдачи крови. Есть несколько важных моментов, которые необходимо учитывать.
Чтобы не спровоцировать выброс излишка гормонов, обследуемый должен отказаться от значительной физической нагрузки перед забором крови, от курения, от алкоголя накануне, жирной пищи.
Сдача крови происходит натощак, поскольку липиды будут появляться пленкой сверху пробирки и могут исказить результат. Последний прием пищи должен происходит накануне около 19 часов вечера.
Забор крови для исследования
Для микрореакции необходимо взять капиллярную кровь, то есть из пальца. Она подвергается центрифугированию, то есть удаляется сгусток из форменных элементов, остается плазма. Дополнительно берут кровь из вены. Если ее невозможно взять, то подойдет спинномозговая жидкость.
Биологический материал отстаивается, плазма или сыворотка смешивается с антигеном. Одновременно с этим идет оценка протекания реакции. Медицинский работник должен следить, появляется ли изменение окраски жидкости.
Сколько годен анализ на микрореакцию крови
Венозная кровь показывает наличие следов возбудителя уже через 3-4 недели после заражения. Срок годности исследования зависит от его назначения и нормативов лечебного учреждения.
- В ходе лечения результат реакции оценивается каждые несколько недель.
- Действие анализа для медицинских работников при отрицательном результате составляет 12 месяцев.
- После контакта с потенциально больным человеком необходимо провести тест через месяц анализ независимо от того, как давно проводилось предыдущее исследование.
Расшифровка результата
Рассказывая, что это такое — микрореакция крови, необходимо также упомянуть о том, как происходит расшифровка результатов. Она может предполагать отрицательный, положительный или сомнительный итог.
Иногда определяется ложноположительный результат или ложноотрицательный. О причинах такого явления будет рассказано ниже.
Положительный результат
Такая реакция наблюдается, если на предметном стекле обнаруживаются хлопья. Значит, в сыворотке имеются антитела, которые вырабатывались к фрагментам антигена или разрушенным ими клеткам.
Результат “+” длительное время может наблюдаться даже после проведенного лечения, поскольку на очищение крови от всех фрагментов трепонем и остатков разрушенных клеток требуется немалый период. Но титр антигена будет иметь небольшое значение.
Положительная реакция может свидетельствовать о наличии у больного сифилиса, получении серорезистентности, остаточных явлениях после терапии. Бывает и ложноположительный результат.
Отрицательный результат
Отрицательная реакция наблюдается, если на предметном стекле не произошло никаких изменений, нет хлопьев. Это показывает, что нет заболевания или оно уже достигло поздней стадии.
В некоторых случаях реакция проводится слишком рано, когда еще нет антител или их фракция настолько мала, что оценить результат как положительный нет возможности. Это ложноотрицательная реакция.
Пациент успокаивается, считая, что не болен, и узнает об инфекции, когда разворачивается клиническая картина.
Ложноположительный итог
Исследование материала может выявить наличие незначительного осадка, то есть антител мало. Такой результат получается, если не соблюдать правила хранения или забора материала, использовать нестерильные материалы или нарушить правила подготовки. Достоверные результаты получаются, только если соблюдать все рекомендации перед тестированием.
Сомнительный анализ бывает и при наличии некоторых заболеваний или состояний, о которых пациент мог не знать или умолчать:
- беременность;
- опухоль;
- диабет;
- аутоиммунные процессы;
- острый воспалительный процесс легких;
- туберкулез;
- алкоголизм;
- подагра;
- наркозависимость.
Этот метод исследования при положительном результате не говорит о том, что сифилис подтвержден. Это только общий, первичный анализ, который требует уточнения. Реакция может показать наличие антител к другим возбудителям.
Для подтверждения диагноза требуется проведение трепонемных тестов — ИФА или РИА, основанных на комплексе антиген-антитело. Они позволяют определить трепонему, результат ее активности и следы жизнедеятельности.
Таким образом, анализ на микрореакцию позволяет определить наличие антител к трепонеме, но не является специфическим. Он применяется для обследования широких групп населения и позволяет выявить здоровых людей и тех, кому нужны дополнительные, более сложные анализы.
Кровь на микрореакцию (микрореакция преципитации) – это, так называемый, нетрепонемный тест. Данная реакция имеет цель определить в крови человека антитела, которые вырабатываются на липиды клеток, поврежденных возбудителем сифилиса – бледной трепонемой (антилипидные антитела).
Следует отметить, что эти антитела вырабатываются организмом не только при сифилисе, но и при многих других болезнях, которые сопровождаются тканевыми разрушениями. Следовательно, микрореакция преципитации не может подтвердить сифилис, а является только лишь отборочным тестом.
Название микрореакция преципитации связано с тем, что для ее проведения необходимо минимальное количество реагента и исследуемого материала, а комплекс антиген – антитело, который образуется в результате реакции, выпадает в осадок (преципитация).
Виды анализа
Различают следующие виды микрореакции:
- Микроскопический тест. Оценка его результатов производится с помощью светового микроскопа.
- Макроскопический тест. Оценка результатов в данном случае происходит невооруженным глазом. Другие названия этого теста – отборочная реакция на сифилис или экспресс – диагностика сифилиса.
Реакция преципитации используется в основном для обследования населения на сифилис, для диагностики и контроля лечения данной болезни.
Кому надо сдавать анализ на микрореакцию крови?
При массовых обследованиях, обязательной сдаче крови на микрореакцию подвергаются следующие группы людей:
- Доноры крови.
- Доноры внутренних органов, используемых для пересадки.
- Беременные женщины.
- Медицинский персонал.
- Военнослужащие.
- Работники пищевой промышленности.
- Любой человек, проходящий лечение в стационаре.
- Пациенты, которых ожидает оперативное лечение.
- Заключенные в тюрьмах и колониях.
Для того чтобы поставить диагноз сифилиса, необходимо провести серологические исследования (трепонемные тесты на сифилис и количественную микрореакцию преципитации).
Данные виды исследования назначаются следующим лицам:
- С наличием клиническим симптомов сифилиса.
- Людям, имеющим язвы на половых органах.
- При контакте с больным человеком или при наличии полового партнера с данной болезнью в анамнезе.
- Детям, которые родились от больных родителей.
- При наличии других половых инфекций.
- Для того чтобы подтвердить результаты скринингового исследования (отборочной реакции).
Для контроля за лечением сифилиса тоже используют реакцию микропреципитации. Даже после клинического выздоровления болевшего сифилисом человека и снятия его с учета, специфические реакции могут еще долго быть положительными. Это следующие реакции: ИФА, РИТ, РПГА и другие. Они и являются критерием излеченности.
Для проведения микрореакции исходным материалом может служить – кровь из пальца, из вены или спинномозговая жидкость. Перед забором крови не следует кушать.
Реакция преципитации может быть:
- Отрицательной,
- Положительной,
- Сомнительной.
О чем же может говорить положительная реакция преципитации?
- Наличие у человека сифилиса (первичного, вторичного или третичного).
- Вылеченный сифилис (у небольшого количества людей в течение всей жизни не происходит негативация).
- Приобретенная после лечения серорезистентность.
- Реакция может оказаться ложноположительной.
О чем говорит отрицательный результат реакции?
- Отсутствие болезни сифилиса.
- Не исключен поздний сифилис.
- Наличие первичного серонегативного сифилиса.
- Реакция может оказаться ложноотрицательной.
Причинами появления ложноположительной реакции:
- Причины, связанные с неправильной техникой проведения реакции (неправильный забор крови, заражение бактериями исходного материала, использование грязной посуды для проведения реакции, недостаточное перемешивание, неправильное хранение материала и реагентов).
- Причины, связанные с некоторыми заболеваниями, такими как: туберкулез, сахарный диабет, онкологические болезни, хронический алкоголизм, вирусные гепатиты, пневмонии, аутоиммунные заболевания, подагра, инфекционный мононуклеоз и многие другие.
- Беременность тоже может явиться причиной ложноположительного результата.
Ложноотрицательные результаты встречаются гораздо реже. Они связаны, чаще всего, с высоким количеством антител в крови. Нужно отличать ложноотрицательный результат от отрицательного, который бывает в самом начале болезни, когда организм еще не успел ответить на внедрение инфекции выработкой антител или при последней стадии сифилиса (третичный сифилис), когда количество антилипидных антител существенно снижается.
Важно знать, что, в случае получения положительного результата реакции (при контроле лечения сифилиса), необходим осмотр врачом дерматовенерологом и проведение трепонемных тестов.
Источник