Какая пробирка для биохимического анализа крови
Вакуумная пробирка — основной инструмент для забора венозной крови. Она может быть наполнена реагентом, который позволит провести быстрый и точный анализ. В таком случае каждая пробирка имеет колпачок своего цвета. Цветное кодирование соответствует международному стандарту ISO 6710.
Вакуумные пробирки для получения сыворотки (биохимия, серология). Цвет крышечки – коричневый или красный
Сыворотка крови – жидкая часть крови лишенная форменных элементов и некоторых белков (фибрин и др.) в отличие от плазмы, в которой сохраняются все элементы жидкой части крови кроме форменных элементов.
Получение сыворотки крови является результатом двухступенчатого биохимического процесса: свертывания (коагуляции) крови и ретракции (уплотнения) сгустка. Для запуска коагуляционного каскада необходимо наличие внешнего активатора, каковым может служить кремния диоксид, поэтому процесс свертывания крови быстрее происходит в стеклянных пробирках, так как кремния диоксид является базовым материалом стекла или в пластиковых пробирках с активатором свертывания. Активатор свертывания (clot activator) выполнен в виде напыления на внутренней стенке пробирки.
После образования сгустка начинается этап его уплотнения и выделения сыворотки. На практике ретракция сгустка ускоряется центрифугированием пробирок с кровью.
Для получения максимально чистой сыворотки рекомендуется соблюдение трех условий:
1. После забора крови в пробирку в соответствии с инструкцией необходимо осторожно однократно перевернуть пробирку для более полного контакта крови с активатором свертывания;
2. Дождаться завершения процесса свертывания крови в течение 20-30 минут при комнатной температуре и вертикальном положении пробирки;
3. Центрифугировать пробирку со свернувшейся кровью не менее 10 минут с ускорением 1500 G (примерно 3000 об/мин) для максимального выдавливания сыворотки из сгустка. При необходимости допускается центрифугирование с ускорением 4000G c крышечкой и до 12000G без крышечки.
После центрифугирования и полной ретракции сгустка сыворотка располагается над сгустком, но в контакте с ним. Сохраняется опасность загрязнения сыворотки составляющими сгустка при неосторожном обращении с пробиркой (встряхивание, опрокидывание и пр.). Для лучшего очищения сыворотки и более полного разграничения сыворотки и сгустка применяются специальные пробирки, содержащие биологически инертный олефиновый гель. Последний представляет собой тиксотропный кополимер, который тяжелее сыворотки, но легче кровяного сгустка, поэтому после центрифугирования гель в виде тонкой полоски занимает промежуточное положение и служит разделительным барьером. Стабильность такого барьера гарантирована в течение 5-7 дней при хранении пробирки с кровью при комнатной температуре.
Оптимальные сроки сохранности образца крови в данных пробирках составляет при комнатной температуре 6 часов, при хранении в холодильнике (+4ºС) – 24 часа. Повторное центрифугирование пробирок, особенно с гелем, не допускается.
Полученная сыворотка крови применяется для очень широкого спектра лабораторных биохимических, ИФА и иммунологических исследований:
белковый состав, ферменты, гормоны, онкомаркеры, ВИЧ-инфицирование, гепатиты и пр.
Вакуумные пробирки для получения цельной крови или плазмы
Не все анализы в клинике делаются из сыворотки крови. Для многих видов исследований необходима цельная кровь, содержащая форменные элементы, или плазма, освобожденная от клеток крови центрифугированием. С целью получения несвернувшейся крови разработаны пробирки с определенными добавками – антикоагулянтами. На практике используют два вида антикоагулянтов:
ингибиторы (вещества, вызывающие торможение) тромбина. Тромбин является ключевым игроком в коагуляционном каскаде. Он принимает участие в формировании ряда факторов свертывания крови и способствует трансформации фибриногена в фибрин. Добавление биохимических ингибиторов тромбина эффективно активирует антикоагуляционные свойства крови.
связывание (удаление) ионов Ca2+. При прочих равных условиях свертывание крови происходит при активном участии ионов Ca2+. Удаление их является эффективным механизмом сохранения крови в жидком состоянии.
Гепарин. Цвет крышечки – зеленый, светло-зеленый
Гепарин — кислый мукополисахарид с молекулярной массой 4000-40000 – является натуральным антикоагулянтом, присутствующем в любом здоровом организме. Гепарин активирует создание комплексных соединений между антитромбином III и такими факторами свертывания крови, как тромбин, факторы XIIa, XIa, Xa, IXa и VIIa. В таком комплексе факторы свертывания инактивируются необратимо.
Для целей получения плазмы крови в пробирки добавляют литиевую либо натриевую соль гепарина в пропорции к забираемой в пробирку кровью 15-20 МЕ/1 мл, что служит гарантией полной инактивации свертывания крови и не искажает исследуемые параметры. Эритроциты сохраняются в образце крови до 8 часов. Нельзя использовать для проведения анализов образец крови, хранившийся более 48 часов даже в условиях холодильника (+4ºС).
Для получения качественного результата анализа необходимо:
Немедленно после взятия крови осторожно перевернуть пробирку 5-7 раз для лучшего перемешивания крови и гепарина,
Плазма отделяется после центрифугирования. Нормальные скорости центрифугирования – 1000-1500G (2000-3000 об/мин). При необходимости допускается центрифугирование с ускорением 4000G c крышечкой и до 12000G без крышечки.
В клинике пробирки с гепарином применяются, в основном для проведения исследования:
электролитного состава крови,
газового состава крови,
содержания алкоголя в крови.
Не рекомендуется использовать гепарин для: морфологических исследований, так как кислотный характер гепарина способствует обесцвечиванию мазка крови, придавая ему голубоватый оттенок, подсчета лейкоцитов и тромбоцитов, поскольку гепарин стимулирует агрегацию этих клеток крови.
исследований по методике полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Для более чистого разграничения плазмы крови и сгустка применяются специальные пробирки, содержащие кроме гепарина инертный олефиновый гель. Последний представляет собой тиксотропный кополимер, который тяжелее плазмы, но легче форменных клеток крови, поэтому после центрифугирования гель в виде тонкой полоски занимает промежуточное положение и служит разделительным барьером.
Фторид натрия/ЭДТА калия. Цвет крышечки – серый
Добавление фторида натрия и ЭДТА калия в пробирку позволяет предотвратить разрушение глюкозы крови (процесс, называемый гликолизом) и сохранить ее уровень во взятом образце крови.
Фторид натрия и оксалат калия выступают в качестве антикоагулянтов, связывая ионы Са2+ и, кроме того, фторид натрия стабилизирует уровень глюкозы.
Глюкоза разрушается до пирувата и лактата при последовательном осуществлении различных энзиматических реакций. Фторид натрия ингибирует некоторые ферментативные реакции, включая превращение фосфоглицерата в фосфоенолпируватацид, и предотвращает гликолиз.
Для получения качественного результата анализа необходимо:
немедленно после взятия крови осторожно перевернуть пробирку 5-7 раз для лучшего перемешивания крови и антикоагулянта
плазма отделяется после центрифугирования. Нормальные скорости центрифугирования – 1000-1500G (2000-3000 об/мин).
Пробирки с добавлением фторида натрия и оксалата калия используют для проведения определения уровня сахара (глюкозы) в крови. Соотношение компонентов 1/1, общее количество добавляемых реагентов – 4,5 мг/1 мл забираемой в пробирку крови.
Замечания: Фторид блокирует активность уреазы и некоторых других ферментов. Образцы крови из данных пробирок нельзя использовать для прямого определения энзимов. Фторид натрия и ЭДТА калия связывают ион Са2+, заменяя в крови 1 ион кальция на 2 иона натрия или калия. Следствием этого является повышение напряжения ионов в межклеточной жидкости и выкачивание воды из внутриклеточного пространства в межклеточное, сморщивание клеток крови с умеренным «выдавливанием» из эритроцитов гемоглобина. Поэтому видимый гемолиз свойственен образцам крови с данной добавкой.
Глюкоза превращается в лактат в результате комплекса реакций, включающего в себя различные этапы. Фторид ингибирует один их последних этапов разрушения глюкозы, начальные этапы с участием гексокиназы и фосфофруктокиназы блокируются менее эффективно, поэтому можно наблюдать снижение содержания глюкозы в образце крови на 6-7% от первоначального.
После первоначального незначительного снижения уровня глюкозы ее количество остается постоянным при хранении крови в пробирке в течение 8-10 часов при температуре до 25ºС и в течение 2-3 дней в холодильнике (+4ºС).
ЭДТА-К2. Цвет крышечки — сиреневый
Этилендиаминтетраацетат (ЭДТА) является предпочтительным антикоагулянтом для гематологических исследований. ЭДТА и его щелочные соли способны создавать хелатные соединения с ионами кальция с образованием растворимых высокостабильных комплексов. Наиболее эффективная концентрация ЭДТА – 1,2 мг/мл крови. Во всем мире используют три варианта солей ЭДТА: ЭДТА-К3, ЭДТА-К2 и ЭДТА-Na2. Наиболее предпочтительной и рекомендуемой Международной Комиссией по Стандартизации в Гематологии является двукалиевая соль ЭДТА:
ЭДТА-К3 показывает меньшую способность поддержания крови в жидком состоянии, также ЭДТА-К3 влияет на подсчет лейкоцитов, занижая их количество.
различия между ЭДТА-К2 и ЭДТА-Na2 в клиническом плане незначительны и ими можно пренебречь, но ЭДТА-Na2 хуже растворим.
Для получения качественного результата анализа необходимо:
немедленно после взятия крови осторожно перевернуть пробирку 5-7 раз для лучшего перемешивания крови и антикоагулянта;
плазма отделяется после центрифугирования. Нормальные скорости центрифугирования – 1000-1500G (2000-3000 об/мин). При необходимости допускается центрифугирование с ускорением 4000G c крышечкой и до 12000G без крышечки.
Наиболее широко используются пробирки, содержащие 1,95 мг ЭДТА/1мл крови. Они нашли свое применение в таких областях лабораторной практики, как:
гематологические исследования – подсчет клеток крови, определение СОЭ и пр.
ПЦР-исследования (качественные и количественные методики).
Пробирки с образцами крови можно хранить до 6-10 часов при 4ºС, хранение свыше 24 часов не рекомендуется из-за снижения числа эритроцитов и лейкоцитов.
Цитрат натрия. Цвет крышечки — голубой
Цитрат натрия является антикоагулянтом для сбора венозной крови с це6лью проведения исследований коагуляционных свойств крови.
Процесс свертывания крови представляет собой последовательность сложных реакций, в которых результатом первых реакций (с участием активных ферментов) является активация следующих, первоначально неактивных энзимов. Последним активным ферментом в этой цепочке присутствует тромбин, который осуществляет превращение фибриногена в фибрин. Нити фибрина опутывают клетки крови и окончательно формируют кровяной сгусток. Крайне важную роль на этом этапе играют ионы Са2+. Антикоагуляционные свойства цитрата проявляются в формировании комплекса с ионами Са2+ и эффективном удалении их из крови.
Общее исследование свертывания крови определяется временем, необходимым для последовательной активации ферментов, участвующих в коагуляционном процессе. Проводится определение времени активации и количественное измерение различных составляющих коагуляционного каскада, для чего создаются так называемые «обходные пути» добавлением некоторых промежуточных продуктов свертывания.
Наиболее часто используются пробирки с 3,8% или 3,2% раствором цитрата натрия (0,129 моль/л), соотношение цитрата к количеству забираемой крови 1/9.
Для максимально качественного проведения коагулологических исследований рекомендуется соблюдение определенных правил:
нельзя использовать пробирку для взятия крови на коагуляционные тесты первой, сразу после венепункции, так как на результаты может повлиять выделяющийся при пункции тканевой тромбопластин;
венозный жгут во время взятия крови в пробирку должен быть снят;
немедленно после взятия крови пробирку аккуратно переворачивают 5-6 раз для лучшего перемешивания крови и антикоагулянта;
сразу после этого надо проверить количество взятой крови: ее верхняя граница должна быть на уровне голубой полоски на этикетке.
Оптимальными условиями хранения пробирки с образцом крови является температура 20-24ºС и исследование коагуляционных свойств и факторов свертывания крови должно быть проведено в течение 2-х часов с момента взятия крови
Источник
Вакуумная система для забора крови, или вакутейнер, – это одноразовое приспособление для быстрого и безопасного взятия венозной крови. Изделие содержит добавки и реагенты для проведения анализа в строгом соответствии с необходимой дозировкой. Для изготовления используется прочный пластик, препятствующий газообмену.
Устройство вакуумных пробирок
В комплектацию изделий входит пробирка, стерильная игла, держатель. Емкость используется для забора, перевозки и хранения биоматериала. Внутри – вакуум и разные реагенты для получения необходимого материала (цельная кровь, плазма, сыворотка).
Крышка включает пробку и пластиковый корпус, защищает от проникновения воздуха. На ней выполняется маркировка, указывающая на назначение. По цвету крышки вакуумных пробирок определяют тип наполнителя. Этикетка вакутайнера содержит информацию для проведения исследований
Популярность продукции объясняется следующими преимуществами:
- разнообразие видов вакутейнеров для проведения различных лабораторных исследований;
- удобство идентификации, благодаря цветовой маркировке;
- точное дозирование материала и быстрое проведение процедуры;
- биосовместимость с кровью, увеличение времени свертываемости, благодаря наличию активаторов, гарантия точности результатов;
- длительное хранение проб, возможность применения глубокой заморозки;
- упрощение работы медперсонала, безопасность для медиков и пациентов.
Благодаря герметичности устройства, взятие материала проводится максимально безопасно – лаборант не контактирует напрямую с содержимым. Толстые прочные стенки изделия выдерживают падения без нарушения целостности.
Виды вакуумных пробирок
Цвета крышек указывают на состав реагентов, находящихся внутри и тип исследования, для которого предназначено изделие.
- Красный. Так маркируется прибор пробирка с активатором свертывания крови. Биоматериал – сыворотка крови. Активатор сокращает время свертывания, не влияя на результаты исследования.
- Желтый. Пробирки с желтой крышкой имеют активатор свертывания и разделительный гель, находящийся на дне. При обработке в центрифуге формируется барьер, разделяющий сыворотку и форменные элементы. В результате получают больший объем сыворотки, по сравнению с применением обычных емкостей.
- Зеленый. Изделия предназначены для анализа плазмы.
- Серый. Пробирки используются для определения содержания глюкозы в плазме. Образцы сохраняются длительное время, благодаря антикоагулянту и стабилизатору глюкозы. Изначальное состояние биоматериала не изменяется.
- Голубой. Данный вид пробирки предназначен для анализа коагуляции. В емкости содержится раствор цитрата натрия.
- Фиолетовый. Изделия используются для проведения гематологических исследований. ЭДТА блокирует свертывание и связывание ионов кальция. В результате концентрация клеточных и внеклеточных компонентов крови сохраняется.
- Розовый. Изделия разработаны для определения группы крови и проведения перекрестной пробы для переливания. Продукция выпускается с наполнителем или без.
- Черный. Пробирки содержат буферный раствор цитрата натрия. Изделия предназначены для исследования скорости оседания эритроцитов.
Компания «Корвэй» предлагает ассортимент одноразовых пробирок. Мы консультируем по выбору пробирок, быстро комплектуем заказы и осуществляем доставку по адресу в Санкт-Петербурге и Ленинградской области, а также до терминала транспортной компании при отправке в другие регионы России.
Источник
Вакутейнеры для забора крови изготавливаются в виде герметичной пластиковой пробирки с разряженным воздухом внутри – это альтернативный вариант старому методу забора, выполняемому обычным шприцем. Сегодня вакуумные системы стали применяться повсеместно, что удобно для больных и медицинского персонала.
В чем особенности?
Вакуумная система – комплект в составе из стерильных двусторонних, разных по диаметру игл с держателями и пробирок со специальными реагентами для взятия того или иного анализа. Вакуумный забор крови, в отличие от одноразового шприца, имеет ряд особенностей, к которым относят:
- получение точных ответов, ведь при проведении исследования венозную кровь уже не приходится переливать по разным пробиркам,
- исключение путаницы и подмены анализов, так как каждая пробирка снабжена номером,
- отсутствие битого стекла, ведь покрытие систем изготавливается из небьющегося пластикового материала, гарантирующего сохранность крови непосредственно в пробирке,
- выполнение процедуры менее чем за 10 секунд,
- отсутствие контактов биоматериала с окружающей средой и людьми, ведь ни одной капли крови не упадет на одежду, что немаловажно в целях защиты от заражения инфекцией для медработников и технического персонала больницы,
- отсутствие венозных травм, поскольку при проведении сразу 2-3 обследований не приходится извлекать иглу, искать и захватывать вену вновь – достаточно поменять контейнер.
Все пробирки для взятия биохимического анализа промаркированы с учетом таблицы по ГОСТу и имеют определенный цвет колпачка, который соответствует составу, содержащемуся в пробирке.
Так, если у вакуумной системы крышка:
- зеленая – содержит гепарин для иммунохимического, биохимического исследования,
- серая – используется она для забора на глюкозу, диагностики варикозного расширения вен,
- голубая– содержит цитрат натрия в виде геля для проверки сыворотки на коагуляцию, СОЭ,
- фиолетовая – реагент подходит для иммунохимического теста,
- синяя – содержит АДТА кислоту для выявления солей тяжелых металлов в крови,
- розовая применяется для исследования донорской крови,
- красная – для биохимии, иммунохимического теста, определения резус-фактора.
Вакуумная система состоит из набора стерильных игл, разных по размерам, длине и диаметру с учетом вен пациента. Для более удобного забора иглы двухсторонние и вводятся одной стороной в вену пациента, другой – в пробку эластичного колпачка пробирки для забора крови из полой вены. Допускается использование игл-бабочек с выступами, которыми удобно прокалывать тонкие и плохо доступные вены.
Как действует вакутейнер?
Принцип работы вакуумных систем схож с методом Вестергрена. После забора клинической крови емкость встряхивают, чтобы биологическая жидкость перемешалась с химическими компонентами для начала реакции. Это важно, особенно для выявления точной характеристики эритроцитов, скорости их оседания.
Сегодня вакуумные контейнеры применяются в педиатрии для взятия крови у ребенка, что делает процедуру безболезненной в отличие от обычного прокола иголкой. Дети и даже новорожденные ведут себя спокойно, без слез.
Вакуумная замкнутая система забора крови уверенно вытесняет традиционное взятие из пальца или вены, поскольку эффективна, удобна и безопасна. Забор выполняется быстро, и это тоже важно для получения точного результата анализа.
Техника забора крови из вены вакуумными пробирками
Забор крови из вены вакуумной системой практически ничем не отличается от использования обычного шприца с иглой. Только процедура стала безопасной и комфортной для пациентов и врачей. Когда материал поступает в пробирку, то создается объемный вакуум, позволяющий взять исключительно стерильную кровь и в нужном количестве. Посмотреть, как производится забор крови вакуумной системой, можно на картинках, видео.
Сегодня вакутейнер – самый безопасный способ взятия крови из пальца или вены. Это приспособление значительно упрощает процедуру забора, его можно приобрести для личных нужд в аптеке без всякого рецепта.
Это важно в первую очередь для лаборантов, поскольку достаточно выбрать нужную пробирку с соответствующей маркировкой и выполнить процедуру безопасно, удобно и быстро. Какие-либо контакты с биоматериалом отсутствуют. Главное – соблюдать алгоритм действий при работе с вакуумной системой.
Забор анализа крови вакутейнером производится медсестрой следующим образом:
- в условиях лаборатории распечатывается вакутейнер, снимается колпачок с одноразовой иглы,
- накладывается жгут чуть выше локтя,
- обрабатывается место для прокола медицинским спиртом,
- вводится игла одной стороной в пробирочный держатель, другой – в вену у пациента,
- остается смотреть, когда кровь сама наберется в вакуумную пробирку в нужном количестве, что немаловажно для проведения того или иного исследования,
- отсоединяется емкость с кровью без вынимания иглы из вены, что удобно для пациентов, ведь синяков и кровоподтеков на коже не останется,
- плотно и герметично закрывается емкость с жидкостью
- аккуратно вынимается игла, обрабатывается место прокола антисептиком, прикладывается ватный тампон.
После этого взятие крови вакутейнером можно считать завершенным.
Многие пациенты еще не знакомы с вакуумными системами, поэтому врачи должны проводить разъяснительную беседу непосредственно перед забором общего анализа крови или из вены, чтобы объяснить смысл и суть использования подобного метода, рассказывать о плюсах и минусах вакуумной системы. Обязательно требуется получить согласие пациента на вакуумный забор крови из вены, рассказать о ходе действий, возможно, дать прочесть письменную инструкцию или описание устройства вакутейнера.
Подготовка к проведению исследования имеет немаловажное значение, ведь это гарантия быстрой и безболезненной сдачи анализа, получения точной и информативной расшифровки результатов.
Подробнее о процессе забора биоматериала вакуумной системой можно узнать из видеоролика:
Загрузка…
Источник