Инвитро анализы крови на боррелиоз
Метод определения
Хемилюминесцентный иммуноанализ.
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Специфические антитела к возбудителю боррелиоза (болезни Лайма, Lyme Disease), свидетельствующие о текущей или перенесённой в прошлом инфекции.
Боррелиоз или болезнь Лайма (по названию местечка, в котором в 1975 г. было впервые выявлено заболевание) – распространённая, переносимая клещами инфекция. Возбудитель – очень маленькая спирохета Borrelia burgdorferi, единственная из всех боррелий патогенная для человека. Хозяевами являются многие позвоночные животные: собаки, овцы, птицы, коровы и лошади, но основной хозяин и переносчик – иксодовые клещи, у которых инфекция длится на протяжении всей жизни клеща. В России — это I.ricinus и I.persulcatus. Заболевание характерно для весенне-летнего периода. Чаще наблюдается в Московской, Ленинградской, Тверской и других, преимущественно северных областях, а также в Прибалтике.
Заболевание системное, имеющее 3 стадии
- I стадия возникает через одну неделю после укуса клеща и длится от 3 до 33 дней. Для неё характерна лихорадка и мигрирующая эритема. Если терапию начинают в этой стадии, то дальнейшее развитие заболевание удаётся предотвратить.
- Через 4 недели после укуса развивается II стадия. Для неё характерны поражение сердца и неврологическая «триада»: асептический менингит, паралич лицевого нерва и периферические невропатии.
- Через 6 недель, а иногда через несколько лет у нелеченных больных развиваются тяжёлые поражения суставов.
Лабораторная диагностика. При классической картине мигрирующей эритемы диагноз ставится по клиническим признакам, в остальных случаях его подтверждают лабораторными методами. Посев, выявление антигена возбудителя и гистологическое исследование кожи недостаточно чувствительны и специфичны, гистологическое исследование, кроме того, инвазивно. Поэтому диагноз подтверждают, в основном, серологическими методами — выявлением в крови специфических IgG и IgM антител к возбудителю (в лаборатории ИНВИТРО, соответственно, тесты № 243 и № 244).
ПЦР-тестирование на наличие генетического материала возбудителя в данном случае малоэффективно, но используется при необходимости у пациентов с отрицательными результатами серологических тестов, но вескими клиническими подозрениями на инфицирование, а также у пациентов с иммунодефицитом.
Специфические антитела к Borrelia burgdorferi начинают обнаруживаться на 2-4 неделе после начала инфекции (сначала IgM, потом IgG), максимальное количество IgG синтезируется через 1,5 — 3 месяца после инфицирования. Антитела к Borrelia burgdorferi часто не выявляются на ранней, локализованной стадии заболевания или при рано назначенной антимикробной терапии.
Таким образом, отрицательный результат серологических тестов на ранних стадиях инфекции не является подтверждением её отсутствия и требует перепроверки в динамике через 2 — 4 недели. На диссеминированной и хронической стадиях специфические антитела к возбудителю имеются практически всегда. Антитела класса IgG циркулируют в крови длительный срок (от нескольких месяцев до нескольких лет), даже после успешной антимикробной терапии и излечения инфекции. Поэтому по присутствию и титру антител об успехе лечения судить нельзя. Иммунитет против Borrelia burgdorferi не является стерильным. У переболевших людей возможно повторное заражение через несколько лет. Выявление антител к Borrelia burgdorferi не всегда сопровождается клиническими признаками болезни Лайма.
По оценкам, специфичность ИФА тестирования антител к Borrelia burgdorferi в настоящее время достигает 95% (т. е. неспецифические реакции, перекрёстное реагирование с антигенами других бактерий могут примерно в 5% случаев давать ложноположительные результаты).
В сомнительных случаях для подтверждения результатов ИФА-тестов используют иммуноблот.
Литература
- Инфекционные болезни у детей. Ред. Д. Марри. М. Практика, 2006. 928 с.
- В.И. Офицеров. Лайм-боррелиоз и его диагностика. Новости «Вектор-Бест» N 2 (28).
Июнь 2003. - Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B.- USA,W.B Sounders Company, 2006. 1798 p.
Источник
Метод определения
Иммуноблот (Western blot)
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Бактерии, относящиеся к совокупности видов Borrelia burgdorferi sensu lato, являются возбудителями болезни Лайма (бореллиоза) у человека. Это заболевание относится к числу наиболее распространенных в России природно-очаговых инфекций с трансмиссивным путем передачи. Сегодня во всем мире известно более десяти видов Borrelia burgdorferi sensu lato, в том числе девять, строго связанных с Евразией (B. afzelii, B. garinii, B. japonica, B. lusitaniae, B. spielmanii, B. sinica, B. tanukii, B. turdi и B. valaisiana), три вида ассоциируется только с США (B. andersonii, B. californiensis и B. carolinensis).
Возбудитель Borrelia burgdorferi попадает в организм человека с укусом инфицированного клеща. Инкубационный период заболевания после инфицирования составляет 1-2 недели. В течение болезни Лайма выделяют стадии ранней (локальной и диссеминированной) и поздней инфекции. В месте проникновения возбудителя появляется мигрирующая эритема (порой это единственное проявление ранней стадии), которая держится около месяца. К сожалению, у 20-45% больных возможна безэритемная форма заболевания. Далее у 10-15% пациентов при диссеминации развиваются признаки поражения нервной системы (менингит, менингополирадикулоневрит, периферический паралич лицевого нерва) и/или сердечно-сосудистой системы, опорно-двигательного аппарата (у 60% пациентов). Поздняя стадия формируется на протяжении первых двух лет от начала заболевания, клинически характеризуется общей слабостью, поражением суставов и нервной системы. Патогномоничным поражением кожи является хронический атрофический акродерматит.
Клинические и лабораторные особенности, выявленные у больных с признаками персистенции боррелиозной инфекции (например, обнаружение ревматоидного фактора в крови), свидетельствуют о возможности аутоиммунных процессов, развивающихся в результате молекулярной мимикрии между эпитопами антигенов боррелии и тканями хозяина и обусловливающих варианты болезни Лайма, резистентные к лечению антибиотиками.
Диагностика болезни Лайма основывается на серологических (ИФА, иммуноблот) и молекулярно-генетических (ПЦР) методах анализа. Совершенствование серологического метода для диагностики боррелиоза позволило в последнее время в большинстве стран мира перейти от принципа трехшагового лабораторного подтверждения диагноза на двухшаговый – ИФА, иммуноблоттинг.
Отрицательный результат серологических тестов на ранних стадиях инфекции не является подтверждением ее отсутствия и требует перепроверки в динамике через 2-4 недели. Обнаружение антител класса IgM и дальнейшее появление IgG-антител является диагностическим критерием течения боррелиоза. На диссеминированной и хронической стадиях специфические антитела к возбудителю класса IgG присутствуют практически всегда. Антитела класса IgG циркулируют в крови длительный срок (от нескольких месяцев до нескольких лет) даже после успешной антимикробной терапии и излечения болезни. Поэтому по присутствию и титру антител об успехе лечения судить нельзя. Иммунитет к Borrelia burgdorferi носит нестерильный характер. У переболевших людей возможно повторное заражение через несколько лет. Выявление антител к Borrelia burgdorferi не всегда сопровождается клиническими признаками болезни Лайма. Поэтому, согласно принципу двухшагового лабораторного подтверждения данного диагноза, положительные результаты, полученные методом ИФА, обязательно должны подтверждаться другим методом.
Для исключения ложноположительных результатов ИФА, подтверждения диагноза, дифференцированной диагностики, мониторинга заболевания рекомендуется использовать метод иммуноблота, который позволяет раздельно определять IgM и IgG к отдельным белкам боррелии. Для быстрой интерпретации дифференциально-диагностическое значение имеет выявление IgM: OspC и IgG: VlsE (Variable major protein-like sequence, Expressed). Для референс-исследований наряду с этими белками имеет значение определение и других специфических антигенов.
Состав используемых для выявления антител к Borrelia специфических антигенов
Источником антигенов для тестов Anti-Borrelia EUROLINE-WB является специально подобранный штамм Borrelia afzelii. Тестовый набор содержит тестовые стрипы с электрофоретически разделенными экстрактами, содержащими антигены Borrelia afzelii и мембранный чип с рекомбинантным антигеном VlsE (экспрессированная основная вариабельная белковоподобная последовательность).
| Полоса | Антиген | Специфичность |
| VlsE | Экспрессированная основная вариабельная белкопроводная последовательность | Специфичен |
| 83 кДа | Белок мембранных везикул, p83 | Специфичен |
| 39 кДа | BmpA, p39 | Специфичен |
| 31 кДа | OspA, p31 | Наружный поверхностный белок А, специфичен |
| 30 кДа | p30 | Специфичен |
| 25 кДа | OspC, p25 | Наружный поверхностный белок С, специфичен, маркер свежей инфекции |
| 21 кДа | p21 | Специфичен |
| 19 кДа | p19 | Специфичен |
| 17 кДа | p17 | Специфичен |
Литература
- Долгих Т.И. Современные возможности лабораторной диагностики инфекционных заболеваний (методы, алгоритмы, интерпретация результатов). — Омск. 2005:40.
- Зверева Н.Н., Шакарян А.К., Сайфуллин Р.Ф., Россина А.Л., Ртищев А.Ю., Белялетдинова И.Х. Современное состояние проблемы иксодового клещевого боррелиоза (болезни Лайма) у детей. Детские инфекции. — М. 2017;1:27-31.
- Информационно-методическое письмо «Профилактика и диагностика клещевых боррелиозов» № 17-22/65 17 мая 2005 г. Территориальное управление федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по городу Москве». 2005.
- Манзенюк И.Н., Манзенюк О.Ю. Клещевые боррелиозы (болезнь Лайма). Кольцово. 2005:85.
- Тимофеева Е.В., Дракина С.А., Орлова С.В. Лабораторная диагностика Лайм-боррелиоза на современном этапе. Медицинские новости. — Минск. 2012;12:9-14.
- Lyme disease. NICE guideline [NG95]. 2018. https://www.nice.org.uk/guidance/ng95.
- Материалы фирмы-производителя реагентов (Euroimmun).
Специальной подготовки не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.
- в дополнение и подтверждение результатов ИФА методов серологической диагностики боррелиоза (см. тесты №№243, 244 Антитела к боррелиям IgM, IgG), при подозрении на иксодовый клещевой боррелиоз (болезнь Лайма);
- ассоциированные патологические состояния: хроническая мигрирующая эритема, доброкачественный кожный лимфаденоз, атрофический хронический акродерматит, артрит, кардит, нейроборрелиоз.
Интерпретация результатов
Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Формат выдачи результата исследования качественный (описание наличия/отсутствия полос, характеризующих выявление антител к каждому из указанных антигенов, в форме «положительно», «слабоположительно» или «отрицательно»; общее заключение о результате исследования в форме «положительный»/«отрицательный»).
При общей оценке результата учитывают положение окрашенных полос (специфичность антигена) и интенсивность их окрашивания (поскольку иногда возможна неспецифическая слабая ложная реакция с отдельными антигенами).
Отрицательный: отсутствуют полосы специфических антигенов; наличие одной слабой или четкой полосы специфического антигена: р83, p39, p31, p30, OspC (p25), p21, p19, p17; наличие слабой полосы специфичного антигена VlsЕ.
Положительный: положительная полоса антигена VlsE; наличие полосы VlsE слабой интенсивности и четкой полосы другого специфического антигена; наличие двух и более полос специфических антигенов.
Дополнительную информацию по клинической значимости и интерпретации результатов исследования «Антитела класса IgG к Borrelia burgdorferi, выявляемые методом иммуноблоттинга (anti-Borrelia burgdorferi IgG, Immunoblot)» см. в тесте №243 Антитела класса IgG к Borrelia burgdorferi.
Артикул:
1190
Срок исполнения:
до 7 рабочих дней ?
Указанный срок не включает день взятия биоматериала
Цена:
1 920 руб
Взятие крови из вены:
- + 200 руб
В этом разделе вы можете узнать, сколько стоит выполнение данного исследования в вашем городе, ознакомиться с описанием теста и таблицей интерпретации результатов. Выбирая, где сдать анализ «Антитела класса IgG к Borrelia burgdorferi (sensu lato), исследование методом Вестерн-блот (anti-Borrelia IgG, Western blot)» в Москве и других городах России, не забывайте, что цена анализа, стоимость процедуры взятия биоматериала, методы и сроки выполнения исследований в региональных медицинских офисах могут отличаться.
Источник
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме реального времени.
Важно! Необходимость исследования спинномозговой и суставной жидкостей определяется лечащим врачом; взятие биологического материала осуществляется в условиях стационара квалифицированным медицинским персоналом.
Исследуемый материал
Спинномозговая жидкость
Определение ДНК патогенных для человека видов боррелий комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato (Borrelia afzelii, Borrelia garinii, Borrelia burgdorferi sensu stricto), выделенной из спинномозговой жидкости методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.
Лайм-боррелиоз (ЛБ), болезнь Лайма или клещевой боррелиоз − трансмиссивная инфекция, занимающая по широте распространения и уровню заболеваемости одно из ведущих мест среди природно-очаговых заболеваний. Возбудитель ЛБ − спирохета Borrelia burgdorferi − передается человеку при укусе иксодовых клещей, которые распространены в лесных и лесостепных зонах Северного полушария в Америке, Европе и Азии. Хозяевами являются многие позвоночные животные: собаки, овцы, птицы, коровы и лошади, но основной хозяин и переносчик – иксодовые клещи, у которых инфекция присутствует в организме на протяжении всей жизни. В России это I. ricinus и I. persulcatus. Заболевание характерно для весенне-летнего периода, чаще наблюдается в Московской, Ленинградской, Тверской и других, преимущественно северных, областях, а также в Прибалтике. Клещевой боррелиоз – это системное заболевание, характеризующееся полиморфизмом клинических проявлений и часто имеющее хроническое и рецидивирующее течение. При боррелиозной инфекции поражаются кожные покровы, нервная и сердечно-сосудистая система, опорно-двигательный аппарат. Поэтому болезнь Лайма называют новым «великим имитатором» различных человеческих болезней.
Заболевание системное, имеет три стадии: I стадия возникает через неделю после укуса клеща и длится от 3 до 33 дней. Для неё характерны лихорадка и мигрирующая эритема. Если терапию начинают на этой стадии, то дальнейшее развитие заболевания удаётся предотвратить.
Через 4 недели после укуса развивается II стадия. Для неё характерны поражение сердца и неврологическая «триада» : асептический менингит, паралич лицевого нерва и периферические невропатии. III стадия возникает обычно через 6 недель, иногда − через несколько лет, у больных, не получавших адекватного лечения, развиваются тяжёлые поражения суставов.
Лабораторная диагностика.
При классической картине мигрирующей эритемы диагноз ставится по клиническим признакам, в остальных случаях его подтверждают лабораторными методами. Посев, выявление антигена возбудителя и гистологическое исследование кожи недостаточно чувствительны и специфичны, гистологическое исследование, кроме того, инвазивно. Поэтому диагноз подтверждают, в основном, серологическими методами (№ 243 Антитела класса IgG к Borrelia burgdorferi, № 244 Антитела класса IgM к Borrelia burgdorferi, № 1191 Боррелии, антитела класса IgM методом Вестерн-блота). Исследование возможности ПЦР-диагностики при боррелиозах сосредоточено, в основном, на тех стадиях инфекционного процесса, где серологический метод диагностики недостаточно информативен, прежде всего, в раннем периоде заболевания и нейроборрелиозе. ПЦР можно рассматривать как дополнительный метод диагностики боррелиозов, который в ряде случаев позволяет получить результат до формирования серологического ответа у обследуемого пациента. При этом отрицательный результат ПЦР не исключает заболевания, а положительный результат не свидетельствует однозначно о наличии активного инфекционного процесса, поскольку ПЦР выявляет ДНК как жизнеспособных, так и инактивированных боррелий.
Аналитические показатели:
- определяемый фрагмент − специфичный участок ДНК- комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato;
- специфичность определения − 100%;
- чувствительность определения − 100 копий ДНК возбудителя в образце.
Литература
- Манзенюк И.Н., Манзенюк О.Ю., Клещевые боррелиозы (болезнь Лайма) Пособие для врачей, Кольцово, 2005. – 45 c.
- Офицеров В.И. Лайм-боррелиоз и его диагностика. Новости «Вектор-Бест» № 2 (28), июнь 2003.
Источник
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме реального времени.
Важно! Необходимость исследования спинномозговой и суставной жидкостей определяется лечащим врачом; взятие биологического материала осуществляется в условиях стационара квалифицированным медицинским персоналом.
Определение ДНК патогенных для человека видов боррелий комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato (Borrelia afzelii, Borrelia garinii, Borrelia burgdorferi sensu stricto), выделенной из синовиальной жидкости методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени.
Лайм-боррелиоз (ЛБ), болезнь Лайма или клещевой боррелиоз − трансмиссивная инфекция, занимающая по широте распространения и уровню заболеваемости одно из ведущих мест среди природно-очаговых заболеваний. Возбудитель ЛБ − спирохета Borrelia burgdorferi − передается человеку при укусе иксодовых клещей, которые распространены в лесных и лесостепных зонах Северного полушария в Америке, Европе и Азии. Хозяевами являются многие позвоночные животные: собаки, овцы, птицы, коровы и лошади, но основной хозяин и переносчик – иксодовые клещи, у которых инфекция присутствует в организме на протяжении всей жизни. В России это I. ricinus и I. persulcatus. Заболевание характерно для весенне-летнего периода, чаще наблюдается в Московской, Ленинградской, Тверской и других, преимущественно северных, областях, а также в Прибалтике. Клещевой боррелиоз – это системное заболевание, характеризующееся полиморфизмом клинических проявлений и часто имеющее хроническое и рецидивирующее течение. При боррелиозной инфекции поражаются кожные покровы, нервная и сердечно-сосудистая система, опорно-двигательный аппарат. Поэтому болезнь Лайма называют новым «великим имитатором» различных человеческих болезней.
Заболевание системное, имеет три стадии: I стадия возникает через неделю после укуса клеща и длится от 3 до 33 дней. Для неё характерны лихорадка и мигрирующая эритема. Если терапию начинают на этой стадии, то дальнейшее развитие заболевания удаётся предотвратить.
Через 4 недели после укуса развивается II стадия. Для неё характерны поражение сердца и неврологическая «триада» : асептический менингит, паралич лицевого нерва и периферические невропатии. III стадия возникает обычно через 6 недель, иногда − через несколько лет, у больных, не получавших адекватного лечения, развиваются тяжёлые поражения суставов.
Лабораторная диагностика.
При классической картине мигрирующей эритемы диагноз ставится по клиническим признакам, в остальных случаях его подтверждают лабораторными методами. Посев, выявление антигена возбудителя и гистологическое исследование кожи недостаточно чувствительны и специфичны, гистологическое исследование, кроме того, инвазивно. Поэтому диагноз подтверждают, в основном, серологическими методами (№ 243 Антитела класса IgG к Borrelia burgdorferi, № 244 Антитела класса IgM к Borrelia burgdorferi, № 1191 Боррелии, антитела класса IgM методом Вестерн-блота). Исследование возможности ПЦР-диагностики при боррелиозах сосредоточено, в основном, на тех стадиях инфекционного процесса, где серологический метод диагностики недостаточно информативен, прежде всего, в раннем периоде заболевания и нейроборрелиозе. ПЦР можно рассматривать как дополнительный метод диагностики боррелиозов, который в ряде случаев позволяет получить результат до формирования серологического ответа у обследуемого пациента. При этом отрицательный результат ПЦР не исключает заболевания, а положительный результат не свидетельствует однозначно о наличии активного инфекционного процесса, поскольку ПЦР выявляет ДНК как жизнеспособных, так и инактивированных боррелий.
Аналитические показатели:
- определяемый фрагмент − специфичный участок ДНК- комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato;
- специфичность определения − 100%;
- чувствительность определения − 100 копий ДНК возбудителя в образце.
Литература
- Манзенюк И.Н., Манзенюк О.Ю., Клещевые боррелиозы (болезнь Лайма) Пособие для врачей, Кольцово, 2005. – 45 c.
- Офицеров В.И. Лайм-боррелиоз и его диагностика. Новости «Вектор-Бест» № 2 (28), июнь 2003.
Источник
