Иммуноферментный анализ крови на аллерген

Лабораторная диагностика уже много десятилетий является неотъемлемой частью практической медицины — без нее невозможно представить себе качественное обследование пациента. Однако среди разнообразия методов необходимо выбирать те анализы при аллергии, которые дадут наибольшее количество полезной информации. О том, какие лабораторные тесты считаются лучшими и как расшифровать результаты, читайте в статье.

Всегда ли при аллергии нужны анализы?

Диагностика реакций индивидуальной чувствительности включает несколько базовых методов:

1. Сбор анамнеза (получение информации о заболевании путем опроса пациента).
2. Объективный осмотр.
3. Лабораторные тесты.
4. Кожные и провокационные пробы.

Все перечисленные способы диагностики дополняют друг друга и используются в сочетании, поэтапно.

Лабораторные анализы позволяют идентифицировать причинно-значимые аллергены, поэтому их рекомендуют проводить каждому пациенту.

От них не стоит отказываться даже тогда, когда диагноз можно установить уже на основании клинической картины (например, при острой крапивнице): без выявления веществ, провоцирующих аллергические реакции, невозможно планировать терапию.

Классификация

Понятие «анализ на аллергию» объединяет множество лабораторных тестов, которые делятся как:

• общеклинические (в ходе исследования выполняется оценка параметров, отражающих состояние всего организма в целом и не позволяющих привязать изменение нормы результатов исключительно к аллергической патологии – причиной может быть анемия или инфекция, а также любой другой процесс, влияющий на функциональные системы);
• специфические (предназначены для целенаправленного поиска изменений, свидетельствующих о наличии индивидуальной иммунной чувствительности; анализы этой группы служат только для диагностики аллергических заболеваний).

Материалом для исследования может быть:

1. Кровь.
2. Моча.
3. Кал.
4. Назальная слизь.
5. Отделяемое из глаз.
6. Мокрота.

Биологический материал должен быть свежим, его забирают после предварительной подготовки, требования к которой зависят от варианта теста. Взятие крови и других сред может выполняться как в лаборатории, так и в процедурном кабинете медицинского учреждения.

Общеклинические тесты

Используются, как правило, на начальном этапе обследования и нужны для поиска косвенных признаков, свидетельствующих о наличии индивидуальной чувствительности. Результаты, полученные с их помощью, не могут быть основанием для установления диагноза аллергии, однако полезны для обнаружения лабораторных симптомов инфекции или иной патологии, от которой необходимо отличать иммунную непереносимость. Кроме того, тесты этой группы применяются для оценки состояния наиболее важных функциональных систем и всего организма в целом.

Общий анализ крови при аллергии

Включает исследование таких показателей как:

• гемоглобин;
• эритроциты;
• цветной показатель;
• лейкоциты;
• гематокрит.

Для выполнения теста используется капиллярная или венозная кровь. При аллергии наиболее значимы изменения, касающиеся одного из видов лейкоцитов – клеток под названием «эозинофилы». Они принимают участие в реализации реакций гиперчувствительности, и их количество при этом резко возрастает. Однако такой признак, хотя и считается одним из базовых диагностических критериев аллергии, все же носит косвенный характер. Эозинофилия (этот термин принято использовать в научных источниках) может быть обусловлена также наличием иных патологических состояний:

1. Гельминтоз.
2. Опухоль.
3. Иммунодефицит.
4. Ревматоидный артрит.
5. Лимфогранулематоз.

При аллергии значимо увеличение эозинофилов в крови более 5%.

Следует также обращать внимание на уровень еще одного подвида лейкоцитов – базофилов. Они появляются в крови в большом количестве при чувствительности к чужеродному белку (антигену), попавшему в организм.

Исследование мазка из полости носа (риноцитограмма)

Материалом служит назальная слизь, нанесенная с помощью тампона или ватной палочки на предметное стекло; метод диагностики – микроскопия. Анализ широко применяется при воспалительном процессе в полости носа и позволяет дифференцировать, в первую очередь, инфекцию от аллергии при рините (насморке). Оцениваются такие показатели как:

• нейтрофилы;
• лимфоциты;
• эозинофилы;
• эритроциты.

На результаты может влиять применение интраназальных лекарственных препаратов (сосудосуживающих капель или спреев, содержащих глюкокортикостероиды, а также масляных составов), поэтому за 12 часов до исследования необходимо отказаться от их применения. Значимо нарастание уровня эозинофилов более 10%. Однако даже при нормальном содержании этих клеток нельзя отвергать диагноз индивидуальной чувствительности, если есть яркие клинические симптомы.

Анализ мокроты

Врач-аллерголог назначает этот тест, как правило, при подозрении на наличие у пациента бронхиальной астмы. Мокроту нужно собирать после полоскания рта и интенсивного кашля, избегать попадания в материал, предназначенный для отправки в лабораторию, слюны. Забор производится утром в чистую сухую посуду, которая плотно закрывается. Оцениваются вначале макроскопические характеристики:

1. Цвет.
2. Прозрачность.
3. Запах.
4. Количество.
5. Характер выделений (слизистый, с примесью гноя, кровянистый и др.).

Исследуется нативный (свежий) образец и материал, фиксированный и окрашенный на стекле. Лаборант, который выполняет анализ, осуществляет поиск клеточных элементов – это:

• нейтрофилы;
• лимфоциты;
• эозинофилы;
• эритроциты;
• моноциты;
• цилиндрический эпителий;
• альвеолярные макрофаги;
• эластические волокна.

При аллергии увеличивается количество эозинофилов. Кроме того, для астмы типичны спирали Куршмана (беловатые извитые тяжи) и кристаллы Шарко-Лейдена (объемные образования из мелких бронхов).

Специфические исследования

Материалом служит преимущественно кровь. Однако если общеклинические тесты могут при необходимости быть выполнены в каждой лаборатории, группа специфических исследований не всегда доступна при поликлиниках. Сдать анализы на аллергию можно в крупных центрах или частных медицинских учреждениях:

1. Инвитро.
2. Гемотест.
3. Синево.
4. СИТИЛАБ и др.

Стоимость исследований колеблется в широком диапазоне – в среднем, от 600 до 2000 рублей за базовый пакет: определение общего иммуноглобулина E (IgE) и специфических комплексов этого класса, иллюстрирующих чувствительность к отдельным антигенам (например, арахису, пыльце березы, латексу и др.). Существует большое количество тестов, предлагающихся пациентам; рассмотрим наиболее популярные из них.

Иммуноферментный анализ крови на аллергию

Сокращенно звучит как «ИФА»; считается «золотым стандартом» современной лабораторной диагностики заболеваний, связанных с иммунными реакциями. Анализ предназначен для выявления антител – специфических белков, циркулирующих в крови и выполняющих защитную функцию. Иначе они называются иммуноглобулинами; при аллергии исследуются отдельные классы – IgE, IgG, способные взаимодействовать с антигенами и создавать комплексы.

Материал для исследования – сыворотка крови пациента. Она наносится на специальную поверхность (чаще всего это планшет с ячейками), где готовится реакционная смесь; по изменению окраски, фиксируемому прибором-фотометром, судят о наличии либо отсутствии иммунных комплексов. Количество антител определяют с помощью фермента, являющегося специальной «меткой».

Тест Шелли

В основе метода лежит фиксация изменений состояния базофилов после добавления к образцу биологического материала испытуемого вещества. Если оно действительно является аллергеном, произойдет выброс содержимого гранул клеток, и они станут «истощенными», что хорошо видно при визуальной оценке под микроскопом.Существует две модификации исследования:

• прямой тест (используется кровь пациента и вещество, рассматриваемое как аллерген; биологический материал должен быть свежим, его смешивают с провокатором и специальным фиксирующим раствором, затем фильтруют полученную смесь через целлюлозную мембрану);
• непрямой тест (дополнительно используются клетки кролика).

Анализ оценивается как положительный (слабо, умеренно, резко) или отрицательный; для получения результата нужно посчитать дегранулированные базофилы под микроскопом и определить, каков процент «истощенных» клеток.

Иммуноблот

Это один из наиболее чувствительных методов, позволяющих обнаружить антитела и подтвердить наличие индивидуальной непереносимости. С его помощью можно разрешить сомнения, возникающие при использовании иных, менее специфичных тестов.

В основе лежит иммуноферментный анализ крови на аллергию, проводимый на специальных нитроцеллюлозных мембранах. Они снабжены полосами, содержащими белки; после контакта с сывороткой, взятой у пациента, запускается реакция, и в случае положительного результата участок, где располагается причинно-значимый аллерген, окрашивается. Показатели сравниваются с контролем, после чего фиксируются аналитические данные.

Обнаружение антител к исследуемым веществам означает лишь факт наличия сенсибилизации, но еще не формирует окончательный диагноз.

Если в крови пациента выявлены специфические иммуноглобулины, это свидетельствует, в первую очередь, о свершившемся иммунном ответе – то есть формировании сенсибилизации, чувствительности к конкретному антигену. Нередко бывает так, что анализы показывают непереносимость пера птиц, но пациент продолжает чихать и жалуется на насморк даже после отсутствия любого контакта с этим провокатором. В таком случае нужно задумываться об ином триггере, который не был учтен при первичном обследовании (например, домашней пыли или пищевом продукте).

Расшифровка результатов

Проводится при сравнении данных, полученных из лаборатории, со стандартными нормами значений; наиболее важные показатели можно описать в таблице:

Следует помнить, что повышение общего IgE на сегодняшний день не считается достоверным маркером наличия аллергии и может быть связано с гельминтозами, острыми инфекциями и другими патологиями. В то же самое время нормальный уровень в сыворотке крови не говорит об отсутствии сенсибилизации. Поэтому стоит ориентироваться на специфические антитела класса IgE, так как нарастание их концентрации более показательно.

Подготовка к обследованию

Чтобы результаты анализов были достоверными, нужно следовать нескольким основным правилам:

1. По возможности сдавать биологический материал в утренние часы – с 7 до 11.
2. Предупреждать врача о приеме лекарственных средств.
3. Не посещать перед анализами процедуры физиотерапии, рентгенкабинет.
4. Есть за 8–12 часов до сдачи крови, приходить в лабораторию или процедурный кабинет натощак (воду пить можно).

Сутки до взятия материала из вены нужно придерживаться диеты – исключить блюда, содержащие жир, отказаться от алкоголя.

Следует также избегать интенсивных физических нагрузок и стрессов. Если планируется соскоб из полости носа, запрещено пользоваться каплями и спреями за 12 часов до анализа. Перед сдачей на исследование мокроты нужно прополоскать рот.

Автор: Татьяна Торсунова

Источники: medscape.com, mdlinx.com,
health.harvard.edu.

Как и где можно сдать пробу на заболевание.

Каким образом проводится и как определяется аллерген.

Анализы на аллергены: современные методы выявления.

Источник