Иммуноферментный анализ крови на а вгс
Автор: Олег Мальцев
Краткое содержание статьи:
Практически при каждом обращении в больницу, а тем более перед стационарным лечением или оперативным вмешательством нам предлагают сдать ВГС-анализ. Что это такое для человека, далекого от медицины, не совсем понятно. Однако отказываться от такого предложения точно не стоит.
Анализ Анти-ВГС
Основной целью вируса является печень. По кровеносным сосудам ген добирается до места назначения. В печени вирус начинает свое действие, проникая внутрь клеток печени и заставляя их работать на себя. В результате длительного отсутствия диагностики и лечения клетки печени разрушаются, что при водит к печальным последствиям.
Термин «Анти-ВГС» используется при выполнении иммуноферментного анализа и помогает определить наличие патогенных клеток и антител в крови, выработанных для борьбы с гепатитом С.
- Первыми в ответ на возникновение вируса начинают вырабатываться антитела класса М. Наибольшей концентрации они достигают в первые дни после заражения;
- Далее в действие вступают IgG и начинают активно бороться с вирусом до полного его подавления;
- Реакция антител класса А также показательна, так как их количество повышается при возникновении угрозы слизистым оболочкам организма.
Суть анализа заключается в следующем:
- Из взятой крови у пациента выделяют сыворотку;
- В заранее подготовленный стерильный планшет с углублениями вносят очищенные клетки патогена;
- Добавляют к клеткам сыворотку крови и наблюдают.
В случае если наблюдается реакция присоединения антител из исследуемой крови к клеткам гепатита С, они окрашиваются благодаря специальному веществу и дают возможность сделать выводы.
Результат такого анализа может однозначно сказать вам есть или нет в вашей крови антитела определенного типа. Он позволит выявить количество этих антител для понимания стадии течения болезни.
Самостоятельное определение ВГС
В первую очередь о неполадках в организме сообщит вам он сам. Основными внешними признаками инфицирования являются:
- Желтизна кожного покрова;
- Вялость;
- Тошнота и рвота.
Кроме того, в аптеках продаются экспресс-тесты, которые отпускаются без рецепта врача:
- Существуют тесты, в которых в качестве биологического материала используется слюна, которая наносится на специальную полоску – индикатор. Однако вероятность ошибки такого теста крайне высока. При его применении нужно за полчаса ничего не есть и не пить, и не пользоваться никакими гигиеническими средствами для полости рта;
- Тесты, основанные на заборе крови снабжены специальными иглами и пипетками. Далее собранную кровь нужно капнуть на кассету, при необходимости добавить растворитель и подождать некоторое время.
Результат такого исследования, как правило, определяется по количеству полосок на индикаторе. В случае если спустя некоторое время на индикаторе появилась одна полоска – тест отрицательный, если две – положительный, если полосок нет – тест сделан неправильно.
Как это связано с гепатитом С?
Сам термин ВГС – расшифровывается как вирус гепатита С. Следовательно ВГС-анализ делают для выявления заражения крови гепатитом С. Подобный вид гепатита сложен и содержит генетический материал в виде рибонуклеиновой кислоты. Его относят и к животному и к растительному происхождению.
Особенностью таких патогенных клеток являются их высокая склонность к мутациям. Медициной определено 6 основных генотипов вируса, однако в конкретном организме или конкретных условиях вирус способен мутировать настолько, что насчитывается около 45 различных подвидов каждого штамма.
Именно из-за способности к мутациям часто возникают хронические заболевания гепатитом. Организм не успевает блокировать патогенные клетки, пока антитела борются с одним подвидом вируса, он уже мутирует и превращается в иной.
Из-за распространения гепатита С и сложности его лечения анализ ВГС стал очень распространен среди населения. Его делают:
- Перед госпитализацией в стационар;
- При планировании или во время беременности;
- Медицинские работники и учителя ежегодно проходят диспансеризацию и сдают это анализ;
- Регулярный медосмотр предполагает сдачу такого анализа;
- Каждый желающий может самостоятельно обратиться в стационар для сдачи анализа. Это следует сделать, если вы часто меняете половых партнеров, страдаете наркоманией и просто в целях профилактики, так как заражение может произойти даже в косметологическом кабинете.
Таким образом, анализ ВГС очень распространен в наше время и позволяет избежать эпидемии этого вируса.
Вирус гепатиа С – не приговор
Вирус гепатита С – самый опасный среди вирусов гепатита, хотя и не самым распространенным. Все чаще медики не могут определить источник заражения. Это говорит о том, что опасны не только незащищенные половые контакты или взаимодействие с кровью зараженного человека, но и другие контакты, например, через слюну или пот.
Несмотря на всю сложность борьбы с вирусом, излечение возможно. Лечащим врачом является специалист – гепатолог. Основной задачей медиков становится недопущение развития необратимых патологий печени.
При быстром выявлении болезни назначается сложная схема медикаментозного лечения. Пациент при этом должен неукоснительно соблюдать рекомендации врача и наладить рацион питания, исключив соленые продукты и алкоголь.
Лечение будет длительным и сложным из-за применения препаратов со многими побочными эффектами. Однако в случае излечения и регулярного отрицательного анализа ВГС на протяжении пяти лет, вирус можно считать побежденным.
ВГС положительно: что это?
Положительный результат Анти-ВГС не является окончательным и требует дополнительного более расширенного исследования крови.
- При обнаружении IgM можно судить о недавнем инфицировании и активном развитии патогенных клеток;
- При повышении IgG имеет место хронический гепатит С.
Этот анализ является предварительным и не отражает полной картины. Он указывает на присутствие либо отсутствие антител, но не дает представления о наличии самого вируса.
При положительном результате Анти-ВГС необходимо проводить повторный более глубокий анализ крови. При этом исследуются группы антител и рибонуклеиновая кислота вируса.
В случае положительного результата расширенного анализа необходимо немедленно приступать к лечению.
Как правило, для определения степени тяжести болезни делают биопсию печени, определяют штамм вируса и предлагают варианты излечения: от медикаментозного до трансплантации печени в зависимости от тяжести поражения.
Таким образом, одним из способов определить наличие вируса гепатита С является ВГС анализ. Что это самый быстрый, легкий и наиболее точный метод определения наличия патологии вы теперь знаете, а предупрежден – значит вооружен.
Видео: ошибочные результаты анализов и последствия
В данном ролике врач Роман Олегов расскажет, как анализ на антитела (ВГС) может быть ошибочным и к чему это может привести:
Источник
Вирусом гепатита С заражено около 170 миллионов человек по всему миру. Болезнь коварная – при смазанной симптоматике начала заболевания ее дебют проходит незамеченным. Часто развиваются хронические формы, которые приводят к разрушению клеток печени.
Исходом гепатита С становятся цирроз или рак печени. Для выявления маркеров заболевания в первую очередь назначают иммуноферментный анализ – ИФА на гепатит С.
Что такое ИФА?
Анализ основан на способности специфических антител (белков крови) связываться с антигеном (частицами вируса), при этом один из них «помечен» ферментом. Образовавшийся комплекс реагирует с подкрашенным субстратом, что фиксируется спектрофотометрическими методами.
Иммуноферментный анализ (ИФА) на гепатит С показывает не присутствие самого вируса-возбудителя в крови, а ответ иммунной системы на столкновение с ним. Количество вируса в крови на момент проведения ИФА может быть ничтожно мало, за порогом определения. А антитела – иммуноглобулины, которые выработались при встрече с «агрессором», продолжают циркулировать в кровеносной системе.
Именно присутствие антител определяется при ИФА. Появляются они в срок от нескольких дней до нескольких недель после заражения гепатитом С.
ИФА выявляет циркулирующие иммуноглобулины даже в малой концентрации. По их типу можно судить о давности заболевания. В острый период, когда вирус гепатита активно размножается, определяют иммуноглобулины класса М.
В хронической стадии (спустя 6 мес. от начала заболевания) при ИФА обнаруживают иммуноглобулины класса G. Последний тип также может свидетельствовать не о хронизации процесса, а о самом факте столкновения иммунной системы с вирусом гепатита С в прошлом.
Показания к ИФА на гепатит С
Обследование на маркеры гепатита С, к которым относятся антитела – иммуноглобулины, давно стала рутинной процедурой. ИФА назначают при:
- острых и хронических заболеваниях печени;
- желтухе неясного генеза;
- обследовании перед хирургическими вмешательствами;
- стандартном обследовании доноров крови;
- постановке на учет в женской консультации при беременности. Повторно анализ сдают за 2-4 недели до предполагаемой даты родов;
- прохождении гемодиализа;
- профилактических осмотрах медработникам, контактирующим с компонентами крови и другими биологическими жидкостями;
- незащищенном сомнительном половом контакте;
- рождении детей от инфицированных матерей.
В порядке рекомендаций анализ на гепатит С назначают родственникам больного, близко с ним контактирующим. В 50% случаев парентеральный источник заражения выявить не удается. Инфекционисты предполагают бытовой путь передачи, когда зараженная кровь может попадать в кровоток здорового человека через кожные ранки и трещины. У этой версии много противников.
Как проводится анализ?
За 48 часов до ИФА исключают из пищи алкоголь, жареное, жирное и соленое. За 12 часов до забора крови из вены пациенту необходимо воздержаться от приема каких-либо лекарств. Анализ сдают утром натощак.
Наибольшее распространение получил «твердофазный» ИФА. Твердая фаза – это материал, на котором фиксируют антитела или антигены. В этом качестве используют мембраны, активно собирающие на себя белки (лабораторные планшеты, стенки пробирки, шарики и бусины из полипропилена или поливинилхлорида, нитроцеллюлозу и пр.).
Вне зависимости от разновидности ИФА, в его проведении существует строгая этапность:
- На первой стадии исследуемый материал «узнается» специфическим антителом и связывается с ним, образуя иммунный комплекс;
- На второй стадии с образовавшимся иммунным комплексом реагирует помеченный ферментом так называемый конъюгат – антитело или антиген;
- Заключительная стадия ИФА позволяет уловить и зарегистрировать сигнал от ферментной метки.
Виды ИФА
Вариантов выполнения анализа достаточно много. Их классифицируют:
- По типу реагентов, используемых на первом этапе ИФА:
a) конкурентный;
b) неконкурентный;
- По степени однородности среды, в которой происходят реакции ИФА:
a) гомогенные;
b) гетерогенные;
- 3) По принципу определения исследуемого вещества:
a) прямой;
b) непрямой. Именно непрямой метод ИФА используется при выявлении маркеров гепатита С.
Прямой метод ИФА
При этом методе используют стандартные антитела к вирусу гепатита С, помеченные меткой – ферментом.
- В лунки лабораторного планшета (если выбрали именно его в качестве твердой фазы) помещают сыворотку крови пациента. Выдерживают 20 минут, чтобы антигены (белки вируса гепатита С) успели прикрепиться к стенкам.
- Добавляют стандартные помеченные ферментом антитела к гепатиту С. Выдерживают еще несколько часов – за это время образуются иммунные комплексы антиген-антитело с меткой. Чем больше антигенов в исследуемой сыворотке, тем больше таких комплексов образуется.
- Содержимое лунок промывается от несвязанных белков. Затем добавляют субстрат. Это вещество при реакции с ферментом-меткой меняет цвет. Чем больше комплексов при ИФА образовалось, тем большее количество фермента может воздействовать на субстрат и тем ярче хроматографическая реакция. Она считывается ИФА-ридером и оценивается количественно.
Непрямой метод
При этом методе ИФА стандартный антиген связывается с антителами сыворотки пациента. К образовавшемуся иммунному комплексу добавляют меченые ферментом стандартные антитела к иммуноглобулинам.
- В лунки лабораторного планшета помещают стандартный антиген гепатита С (частички вируса). Антиген прикрепляется к стенке, незакрепленные белки вымываются лаборантом.
- В подготовленные таким образом лунки помещают исследуемый материал (сыворотку крови), инкубируют. Есть обязательные контрольные лунки со стандартными реагентами. За время инкубации образуются комплексы антиген-антитело. Непрореагировавшие компоненты опять вымывают.
- В лунки добавляют меченые ферментом антитела к иммуноглобулинам М и G. Эти белки прореагируют с образовавшимся ранее комплексом, только если в исследуемом образце есть антитела к гепатиту С. Промывают.
- Добавляют еще один компонент – субстрат. Это химическое соединение разрушается ферментом из комплекса антиген-антитело. При этом образуется окрашенное вещество, количество которого фиксируют специальным прибором – ИФА-ридером. Чем больше фермента, тем сильнее он прореагирует с субстратом и тем ярче будет цветовой сигнал.
Расшифровка результатов
Высокая чувствительность ИФА иногда играет с пациентом злую шутку. Не каждый положительный результат означает заболевание и не каждый отрицательный – гарантия свободы от вируса.
При положительном ИФА определяют генотип вируса и определяют количество циркулирующих в крови вирусов с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).
Положительный
При ИФА выявляют маркеры острой фазы заболевания (иммуноглобулины класса М (IgM)) и иммуноглобулины класса G (IgG). Последние могут означать, что у пациента хронический гепатит С или то, что иммунная система хотя бы раз в прошлом сталкивалась с этим вирусом и выработался иммунитет.
Выявление одновременно двух типов иммуноглобулинов при ИФА говорит об обострении хронического гепатита С.
Отрицательный
Самый вероятный вариант – пациент не болен и его иммунная система никогда не сталкивалась с вирусом.
Псевдоотрицательный результат при ИФА можно получить в том случае, если пациент инфицировался относительно недавно и защитные антитела просто не успели выработаться. Это так называемое «диагностическое окно». Его срок – 6 месяцев.
Наконец, нельзя полностью исключить ошибку лаборатории.
Ложноположительный
ИФА реже дает погрешности по сравнению с ПЦР. Тем не менее, исследуемые вещества – белки. Реагент может связаться с неспецифическим белком сыворотки крови. Ложноположительный ИФА на гепатит С нередок в случаях:
- выполненной накануне вакцинации;
- при аутоиммунных патологиях или туберкулезе, рассеянном склерозе, склеродермии;
- опухолевом процессе;
- инфекциях, протекающих с гипертермией (грипп, ОРЗ и пр.).
Грешат ложноположительными результатами исследования на маркеры гепатита С у беременных. Довольно часто ИФА дает ложное заключение о наличии антител пациентам со II группой крови.
ИФА положительный, а ПЦР отрицательный: что это значит?
Полимеразная цепная реакция выявляет присутствие вируса в крови и его количество, помогает определить генотип. ИФА «видит» антитела – клетки, вырабатываемые спустя какое-то время после инфицирования и остающиеся в организме после уничтожения «врага».
Вариантов, при которых у пациентов с гепатитом С ПЦР отрицательный, а ИФА – положительный, два. Самый вероятный – сформировался иммунитет к вирусу, а сам он уничтожен иммунной системой или лекарствами.
Второй: нельзя исключить ошибку лаборатории при проведении ПЦР.
Диагностикой заболеваний должен заниматься врач. Он учитывает все нюансы обследования. А лабораторная диагностика, в том числе ИФА – только вспомогательный метод, не лишенный погрешностей.
Источник