Иммуноферментный анализ крови ифа паразитов
Иммуноферментный анализ крови – метод диагностики, который практикуется для выявления гельминтов у детей и взрослых. Это исследование отличается максимально точным определением не только наличия, но и вида, количества паразитов, а также стадии развития вызываемых ими заболеваний.
Иммуноферментный анализ крови – метод диагностики, который практикуется для выявления гельминтов у детей и взрослых.
Показание к проведению
Врачи назначают выполнение ИФА на инвазию в следующих случаях:
- число лейкоцитов у пациента существенно превышает норму при отсутствии симптоматики других патологий;
- беспокоят частые головокружения или головные боли без очевидных причин;
- возникают аллергические реакции;
- одолевают мышечные боли, упадок сил;
- долго не излечивается кашель;
- временами появляется лихорадочное состояние;
- у домашних животных выявляется наличие глистов;
- в регионе проживания ухудшается эпидемиологическая ситуация;
- профессия пациента связана с высоким риском заражения глистами (проводится плановая диагностика).
При активизации паразитов в организме увеличивается количество антигенов – токсичных продуктов, которые они вырабатывают в результате своей жизнедеятельности. Вследствие этого показаниями к проведению ИФА становятся и такие симптомы:
- расстройства пищеварения с изменением стула и его периодичности;
- боли в животе;
- колики в области печени;
- тошнота, переходящая в рвоту;
- признаки поражения центральной нервной системы: бессонница, повышенная нервозность, резкие перепады настроения.
Виды ИФА
На вторжение паразитов и на их антигены организм отвечает защитной реакцией, вырабатывая в плазме крови антитела (или иммуноглобулины). ИФА позволяет выявить наличие этих специфических белковых соединений. С момента заражения гельминтами количество иммуноглобулинов классов G, М и А накапливается в разные сроки. Их комплекс и определяют при проведении анализа крови.
Основу методики исследования этих белков составляют иммунный ответ и ферментативная реакция. По иммунному ответу можно устанавливать наличие паразитов и определять их разновидность.
По иммунному ответу можно устанавливать наличие паразитов и определять их разновидность.
Ферментативная реакция позволяет изучать установленные лаборантами виды гельминтов с визуальным измерением данных о них.
В лабораториях практикуются различные виды ИФА:
- Прямой.
- Непрямой.
- Типа «сэндвич».
- Твердофазный гетерогенный.
Эти варианты отличаются различными технологическими способами обнаружения комплексов антиген-антитело. Чаще всего применяется твердофазный гетерогенный анализ (ELISA). С его помощью определяют наличие антител классов IgG, IgA, IgM к антигенам возбудителей болезней, вызванных паразитами.
Как сдавать
Анализ ИФА на паразитов может быть проведен с исследованием образцов спинномозговой или околоплодной жидкости, слизи из мочеиспускательного канала, стекловидного тела. Но чаще всего у пациента берут кровь из вены утром натощак. В лаборатории образец пропускают через центрифугу и изучают отделившуюся сыворотку.
За 3 суток до сдачи крови следует прекратить прием всех медикаментов, кроме жизненно необходимых.
Чтобы результаты исследования оказались максимально достоверными, следует неукоснительно выполнять все требования лаборатории. Необходимо:
- за 3 суток до сдачи крови прекратить прием всех медикаментов, кроме жизненно необходимых;
- за 2 суток приостановить физиотерапевтические процедуры;
- за 1 сутки отказаться от алкоголя и кофе;
- накануне не подвергаться физическим нагрузкам и эмоциональным стрессам;
- поужинать не позднее 19-20 часов (утром можно выпить немного воды).
Расшифровка
Вариант №1. IgM-, IgA+, IgG-: первичное заболевание (2 недели с момента инфицирования).
Вариант №2. IgM+, IgA+, IgG-: первичная болезнь (2,5-3 недели со времени заражения).
Вариант №3. IgM+, IgA+, IgG+: первичная инфекция (3-4 недели с момента заражения).
Вариант №4. IgM-, IgA+, IgG+: обострение хронической болезни (2 недели от начала обострения).
Вариант №5. IgM-, IgA+/-, IgG+: хроническая фаза.
Вариант №6. IgM-, IgA-, IgG+: вылеченная (прошедшая) инфекция, наличие иммунитета.
Вариант №7. IgM-, IgA, IgG не определяются (или снижение титра в 2-4 раза по окончании лечения, в 5-8 раз через 1-1,5 месяца после лечения): выздоровление.
Вариант №8. IgM-, IgA-, IgG-: отсутствие иммунитета к инфекции.
Расшифровка анализа антител классов IgG, IgA, IgM показывает о наличии или отсутствии паразитов.
Преимущества и недостатки
Иммуноферментный анализ не идет ни в какое сравнение с исследованием кала, которое еще недавно было единственным способом выявления гельминтов. Но такой анализ является ненадежным, т. к. паразиты часто не откладывают яйца длительное время. Для подтверждения диагноза нередко приходится сдавать кал повторно. Кроме того, достоверность результата анализа во многом зависит от опыта работы лаборанта, который должен научиться видеть микроскопические яйца гельминтов.
Методы исследования на наличие паразитов с помощью ИФА обладают целым рядом достоинств:
- выполненный по установленным правилам анализ выявляет паразитов всех видов, которые обитают в организме;
- результаты теста отличаются высокой степенью достоверности;
- качественные и количественные показатели позволяют установить этиологию и стадию заболевания;
- врач имеет возможность диагностировать заражение паразитами на ранней стадии и наблюдать динамику развития болезни;
- для проведения теста не требуется много времени благодаря автоматизации всех этапов анализа;
- поскольку метод ИФА унифицирован, с его помощью допускается проводить массовые обследования населения.
Используя ИФА анализ крови, врач имеет возможность диагностировать заражение паразитами на ранней стадии и наблюдать динамику развития болезни.
Крайне редко тест выдает ложноположительные или ложноотрицательные результаты. Причинами этого недостатка могут оказаться технические ошибки. Такие результаты возможны при ревматоидном факторе, при нарушениях обмена веществ и других хронических заболеваниях, вследствие которых вырабатываются защитные антитела, а также при приеме некоторых препаратов, например инсулина.
Кроме того, проведение этого теста доступно не любой поликлинике. В сельских медучреждениях нередко бывают перебои с поставками химических реактивов для ИФА. Кроме того, иммуноферментный анализ везде выполняется только платно.
Каких паразитов можно выявить
Методом ИФА определяются:
- ленточные черви (свиные цепни);
- круглые черви (аскариды, острицы, токсокары, стронгилоидиты);
- плоские черви (цестоды, сосальщики, нематоды);
- трихинеллы;
- гигантские и печеночные двуустки;
- описторхи;
- лямблии;
- амебы;
- токсоплазмы;
- лейшмании.
Паразиты внутри нас. Аскариды. Жить здорово! (23.05.2016)
Стоимость и сроки выполнения
Диапазон цен широк. Стоимость ИФА зависит от категории медучреждения и вида анализа. Комплексное исследование может обойтись в несколько тысяч рублей. Определение отдельных антител, например, в клиниках «Инвитро» будет стоить:
- к трихинеллам и токсокарам – 540 руб.;
- к лямблиям – 650 руб.;
- к дизентерийным амебам – 815 руб.;
- к описторхам и стронгилоидитам – 845 руб.;
- к аскаридам – 935 руб.;
- к токсоплазмам – 715-1000 руб.
Результаты иммуноферментного анализа на паразитов при наличии оборудования в рабочем состоянии и всех необходимых реактивов чаще всего выдаются через 2 суток после дня сдачи крови. Однако исследование некоторых видов гельминтов может занять и 1-1,5 недели. Экспресс-тест, проводимый в режиме cito (срочно), выполняется за 4-5 часов.
Источник
Диагностика – первый и важный этап медицинской помощи, от успешности которого зависит эффективность назначаемой терапии при любом заболевании. Это утверждение справедливо и для паразитарных болезней, большинство из которых не вызывают специфических симптомов, поэтому поиски причин полностью сводятся к назначаемым анализам. Из самых современных и высокоинформативных следует выделить иммуноферментный анализ. Он даёт представление не только о наличии антител к определённому виду паразитов, но выявляет количественную характеристику этих антител, которая даёт информацию о стадии заболевания или о ходе лечения.
Преимущества и недостатки
Иммуноферментный анализ крови (ИФА) на паразитов произвёл настоящую революцию в лабораторной аналитике паразитологии, на что есть целый ряд причин:
- Высокая чувствительность метода. Даже если в образец попадёт единственный элемент организма паразита, этого будет достаточно, чтобы получить удовлетворительный результат. Другие лабораторные методы анализов не могут конкурировать с ИФА по этому показателю.
- Специфичность метода. Безошибочность диагностики исключает неправильную идентификацию возбудителя, поскольку за реакцию отвечают специфические антитела. То есть, вид паразитов, вызвавший заболевание, при ИФА не может быть спутан даже с очень близким по внешнему виду или хромосомному набору.
- ИФА с успехом заменяет бактериологический метод, который требовал более длительного периода до получения данных и подразумевал проведение лечения вслепую до ознакомления с результатами. Иммуноферментный метод позволяет получить данные в течение двух суток.
- Высокий уровень технологичности сводит к минимуму ошибки, вызванные влиянием человеческого фактора, который остаётся неизменно высоким при других методах. Это гарантирует высокую точность диагностики и исключает значительные погрешности.
- ИФА даст результаты даже на начальных стадиях заражения, когда остальные анализы ещё не выявят ни возбудителей, ни их продуктов жизнедеятельности.
- Можно узнать, на какой стадии развития в момент забора крови находился возбудитель: циста, личинка или взрослая особь.
У метода есть и определённые недостатки:
- Расшифровкой полученных данных должен заниматься только квалифицированный специалист.
- В назначении на анализ должен быть безошибочно указан тип возбудителя, то есть врач должен заранее предполагать, наличие какого паразита могло вызвать начало болезни.
- Для проведения иммуноферментного определения гельминтов необходима высокотехничная лаборатория со специализированным оборудованием и высококвалифицированным персоналом, прошедшим специальную подготовку и получившим соответствующие сертификаты о праве выполнения ИФА. Такие лаборатории встречаются далеко не в каждой больнице.
- Высокая стоимость. Аналогичные методики стоят в разы дешевле, поэтому иммуноферментный анализ иногда недоступен по цене для пациентов из социальных групп с низкой платежеспособностью.
Иммуноферментный анализ крови на паразитов выполняют только по направлению от специалиста, в котором указано, на какой тип гельминтов или группу необходимо проверить пациента. Без направления пробу крови в лаборатории попросту не возьмут.
Принцип действия
Основной принцип заключается в образовании комплекса антигенов с антителами. Процесс зависит от двух составляющих:
- Иммунный ответ. Он означает, что искомая часть в пробе связывается с молекулами того препарата, который добавляется по методике. Это приводит к образованию особого комплекса, не возникающего, если добавляемый препарат не будет рассчитан на имеющийся тип паразитов.
- Ферментативная реакция. После образования комплекса лаборант судит о результате по появлению определённой окраски. После этого результаты можно увидеть, оценить и измерить.
Такой подход обеспечивает очень высокую результативность – около 99,97%.
Биоматериал для анализа
Для проведения иммуноферментного анализа на паразитов у пациента берут пробу венозной крови в объёме 3-5 см3. Дальше в лаборатории все форменные элементы (эритроциты, гемоглобин и пр.) отделяют, а для теста оставляют только сыворотку желтоватого цвета, в которой содержатся необходимые антигены.
Биоматериал отбирают из локтевой вены. Чтобы избежать ложных результатов, кровь сдаётся натощак. За две недели до анализа для достоверности результатов нужно отказаться от любых антибиотиков и алкоголя. Также просят перед исследованием не пить газированную воду.
В тех случаях, когда исследование проводят для новорожденных детей, биоматериалом может быть плацента или пуповинная кровь.
Как проводится
Кровь помещают в стерильную лабораторную пробирку. К имеющемуся образцу добавляют лабораторные заготовки с антителами к тем паразитам, которые пытаются определить у пациента. На образование комплекса уходит несколько суток.
В сложных случаях, когда для начала лечения нужны срочные данные, применяют лабораторные методы катализа процесса для ускорения реакции. Цена таких методик ещё выше, но они немного уступают классическим в точности. Зато эти экспресс-методики позволяют получить ответ уже через 2-3 часа после отбора биологического материала.
Расшифровка полученных данных
Заниматься интерпретацией результатов ИФА может только специалист, направивший пациента на тестирование. Иногда для того, чтобы получить реальную картину, необходим сравнительный анализ свежих данных с теми, которые были получены раньше.
Иммуноферментная методика предоставляет данные о трёх типах иммуноглобулинов (антител):
- IgM. Появляются в крови на четвёртые сутки после заражения и наращивают свою концентрацию, потом она идёт на спад, и после шести недель эти вещества уже могут не присутствовать в пробе. Их наличие показывает, что процесс протекает остро, и паразиты активно размножаются в кишечном тракте или других органах и системах органов.
- IgG. Начинают вырабатываться после третьей-четвёртой недели заражения и могут сохраняться на протяжении нескольких месяцев или лет. Такая картина говорит о том, что заболевание приняло хроническую форму и протекает скрыто. При рецидивах уровни IgМ и IgG параллельно увеличиваются.
- IgA. Этот тип иммуноглобулинов начинает появляться после двух недель присутствия паразитов в организме, а исчезает после одного-двух месяцев. Значительное повышение уровня может указывать на начало рецидива.
Адекватно оценить все эти показатели, их взаимодействие и реальную картину может далеко не каждый врач, а только высококвалифицированный специалист. Поэтому категория врача в этом отношении играет не меньшую роль, чем уровень лаборатории, где проводят исследования.
Результаты пациенту предоставляют на стандартном бланке лаборатории в виде таблицы, в которой перечислены все антитела, а напротив них указаны плюсы (в случае обнаружения) или минусы (если элементы не выявлены). Также указываются данные в количественном выражении, свидетельствующие о концентрации найденных веществ в условных единицах.
Стоимость
Иммуноферментный анализ входит в категорию дорогостоящих, но его цена отличается в зависимости от региона и уровня лаборатории.
Стоимость варьирует в зависимости оттого, на какой вид паразита направлено исследование. В сети медицинских лабораторий «Гемотест» цена на ИФА стартует от 520 рублей (на токсокароз) и доходит до 1120 рублей (дифференциальная диагностика гельминтозов).
В независимой лаборатории «Invitro», которая имеет представительства во многих крупных и средних городах России, цена на иммуноферментное определение паразитов начинается от 650 рублей (на лямблиоз) и достигает 1000 рублей (на токсоплазмоз).
Читайте также:
- Норма и расшифровка анализа крови на антитела IgG к аскаридам
- Как сдавать анализ крови на хламидии, его расшифровка
- Кому нужно сдавать анализ крови на наличие глистов и как он называется
Источник
Автор: ДАНИИЛ ДАВЫДОВ, медицинский журналист
Люди преувеличивают вероятность заражения паразитами. На этом любят играть мошенники, продающие быстрые способы диагностики паразитарных заболеваний.
В статье рассказываем, как провериться на глистов и не потерять деньги.
Почти все паразитарные заболевания протекают без симптомов и неприятных ощущений. Обнаруживают их часто случайно, когда человек приходит на рентген или на МРТ по другому поводу. И это логично: если пациент не знает, что болен, ему не приходит в голову сдать анализ.
Но иногда подозрение на глистов все-таки возникает: у вас или у лечащего врача. Это может быть связано с плохим самочувствием или выявлением паразитарного заболевания у члена вашей семьи, с которым вы вместе путешествовали или ели строганину. В таком случае вам придется отправиться сдавать анализы.
Читайте также
9 заразных мифов про глистов
Какие бывают методы диагностики глистов
1. Иммуноферментный анализ крови (ИФА)
Во время ИФА-анализа в крови ищут особые белки — антитела. Иммунная система создает антитела к каждому чужеродному организму, с которым встречается, чтобы при следующей встрече было легче узнать и уничтожить врага. Если в крови есть антитела к паразитам — значит, паразит либо когда-то жил в организме, либо живет в нем до сих пор. Отличить свежее заражение от старого ИФА-анализ не позволяет.
Однако паразитические черви научились управлять «заводом по производству антител» человека. Вместо антител IgE, которые похожи на яркий плакат: «Это аскарида! Уничтожить!», глисты заставляют организм увеличивать выработку антител IgE/IgG4, которые вносят путаницу в работу иммунной системы. Когда в крови одновременно есть и IgE, и IgG4, клетки иммунитета получают не конкретный приказ, а туманное сообщение: «Где-то здесь есть паразиты. Но это не точно».
Поскольку сигнал получается размытым, находить конкретные виды паразитов по IgE/IgG4 тяжело. Поэтому ИФА позволяет выявить паразитов только у 81—98% людей.
Кроме того, ИФА-тесты разработаны еще не для всех видов паразитических червей. Анализ позволяет выявить шистосомоз, токсокароз, трихинеллез, цистицеркоз, стронгилоидоз, фасциолез и тениоз, с трудом — эхинококкоз (возможны ложноположительные результаты). Точного ИФА-теста на остриц у нас до сих пор нет.
2. Мазок или анализ кала
Поскольку ИФА может ошибаться, а для части паразитов ИФА-методик просто нет, при аскаридозе и всех заболеваниях, которые вызывают круглые черви-нематоды (анкилостомоз, дифиллоботриоз и дикроцелиоз) приходится искать яйца паразитов в анализах кала под микроскопом. В случае остриц (энтеробиоз) микроскопируют не кал, а специальную липкую ленту, на которую собирают яйца с области вокруг ануса.
Поиск под микроскопом позволяет найти яйца в 42,8% случаев заболевания. Точность диагностики по калу зависит от:
- количества паразитов — чем больше червей, тем выше шанс обнаружить яйца;
- времени взятия анализа — паразит должен отложить яйца как раз в то время, когда берется анализ;
- внимания и опыта лаборанта, которому предстоит их найти и правильно опознать.
Причем анализ приходится делать не один, а целых три раза — иначе вероятность пропустить яйца достигает 70%. В некоторых случаях врач может назначить дополнительные диагностические процедуры. Так, эхинококкоз выявляют при помощи компьютерной томографии, ультразвукового обследования или магнитно-резонансной томографии, а подтверждают методом ИФА и ПЦР.
«А бывают универсальные тесты на всех глистов сразу?»
Обнаружить паразитов без исследования крови или кала невозможно, а комплексного анализа на всех паразитов сразу не существует. Найти глистов при помощи одного-единственного «домашнего» теста — например, по слюне — нельзя. Диагностика паразитарных заболеваний — популярная отрасль медицинского шарлатанства. Людей убеждают, что достаточно «измерения биорезонанса» или даже одной-единственной капли крови, чтобы выявить глистов в теле за несколько минут, после чего, основываясь на неизменно положительных результатах анализа, продают им биодобавки, призванные избавить от проблемы.
В реальности обнаружить паразитов в капле крови, взятой на анализ, у человека без высокой температуры и других симптомов малярии не выйдет: их там нет.
При этом врачи тоже могут начать диагностический поиск с общего (клинического) анализа крови. Это один из самых популярных тестов в медицине, который позволяет подтвердить проблемы со здоровьем. Признаком того, что в организме живут глисты, может быть анемия — снижение гемоглобина и эритроцитов, а также повышенное число эозинофилов в формуле крови, которое указывает на присутствие в организме чужеродных белков. Но это только косвенные подтверждения паразитарного заболевания, без ИФА или анализа кала поставить диагноз не получится.
Неспециалисту трудно отличить мошеннический тест от лабораторного. Тем более, что мошеннические технологии часто привлекательны визуально и интуитивно понятны.
Очень трудно объяснить человеку, что при просмотре мазка крови врач всегда находит определенное количество эритроцитов измененной формы или деформированных — это совершенно нормально.
Еще труднее пояснить, что эта деформация связана с физиологическим старением клеток или их повреждением в процессе взятия крови. Предположение, что паразиты в крови «понадкусали» эритроциты, звучит гораздо привлекательнее.
Пациентам можно посоветовать два способа отличить поддельный тест от настоящего:
Запросить официальные документы у производителя теста. Все лабораторные тесты получают регистрационные удостоверения или разрешение на соответствующую медицинскую технологию. Если официальных документов нет — есть большой шанс, что тест поддельный.
Проконсультироваться с врачом. Если вы подозреваете, что больны паразитарным заболеванием, нужно обращаться за помощью к врачу. Доктор назначит все необходимые анализы и обследования — это поможет избежать бессмысленной траты денег.
ОЛЬГА МАЛИНОВСКАЯ, руководитель медицинского департамента сети лабораторий KDL
Если эта статья была вам полезна — поделитесь ею с друзьями.
Источник