Ифа анализ крови на вич р24

Метод определения
Иммуноферментный анализ (ИФА).

Исследуемый материал
Сыворотка крови

Комбинированное выявление антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена р24 ВИЧ, качественный тест.

Внимание. При положительных и сомнительных реакциях, срок выдачи результата может быть увеличен до 10-ти рабочих дней. ВИЧ (вирус иммунодефицита человека), вызывающий СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита) — принадлежит к семейству ретровирусов. Передается от человека к человеку при использовании загрязненных игл и шприцев для внутривенного введения наркотиков или терапевтических процедур, при сексуальных контактах, как гетеро, так и гомосексуальных. Передача вируса может произойти при переливании инфицированной крови и ее продуктов, донорстве органов или семенной жидкости, у медицинских работников — при ранении инфицированными иглами или инструментами. Заражение ВИЧ возможно путем его передачи от инфицированной матери ребенку (вертикальный путь), хотя современные методы профилактики с применением антиретровирусной терапии, при выполнении всех рекомендаций, позволяют снизить такой риск до минимума.

В патогенезе заболевания основное значение имеет поражение CD4+ лимфоцитов (субпопуляция лимфоцитов, выполняющих важнейшие функции в регуляции и осуществлении иммунного ответа). Попадая в организм человека, ВИЧ поражает CD4+ лимфоциты, макрофаги и некоторые другие типы клеток. Присутствие ВИЧ со временем вызывает нарушение иммунной системы из-за избирательного уничтожения им иммунокомпетентных клеток. Это приводит к снижению иммунитета против вирусных, бактериальных, грибковых, протозойных, паразитарных, опухолевых заболеваний — развитию синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД). В соответствии со статистикой, раннее выявление инфекции и применение современной терапии значительно улучшают показатели выживаемости.

Процесс взаимодействия вируса с клеткой включает ряд стадий: связывание вируса с клеткой, освобождение его от оболочки, проникновение в цитоплазму, синтез ДНК по вирусной РНК, встраивание вирусной ДНК в геном клетки-хозяина. После этого начинается латентная стадия инфекции. В таком состоянии провирусная ДНК может существовать некоторое время, не проявляя активности и не влияя на жизнедеятельность клетки-хозяина. Пока нет экспрессии вирусных белков, нет и иммунного ответа на вирус. Антитела к ВИЧ, характеризующие иммунный ответ организма, появляются после активации вирусной ДНК и начала активного размножения вируса. Длительность латентного периода зависит от ряда факторов, включая и индивидуальные генетические особенности организма.

Антитела к ВИЧ могут появиться, начиная со второй недели после инфицирования; их содержание увеличивается в течение 2-4-х недель и сохраняется на протяжении многих лет. У 90-95% инфицированных они появляются в первые три месяца после заражения, у 5-9% – в период от трех до шести месяцев, у 0,5-1% – в более поздние сроки.

В первые недели инфекции, еще до появления антител к вирусу (т.е. до сероконверсии), в образцах сыворотки или плазмы можно выявить присутствие антигенов ВИЧ, в том числе его капсидного белка р24. Позже, после сероконверсии, он обычно становится недетектируемым.

Комбинированные тест-системы 4-го поколения, к которым относится тест HIV Ag/Ab Combo (Architect, Abbott), выявляют как антитела к ВИЧ 1 и 2 типов, так и антиген р24 ВИЧ, что позволяет проводить раннее обнаружение инфекции. К особым характеристикам применяемого в лаборатории ИНВИТРО скринингового теста для выявления ВИЧ-инфекции стоит отнести высокую специфичность исследования (> 99,5%); 100% чувствительность анализа к антителам, характерным для периода сероконверсии, и чувствительность теста к антигену р24 порядка 18 пг/мл.

Порядок проведения лабораторного обследования на ВИЧ строго регламентирован приказами МЗ РФ и включает в себя этап скринингового (отборочного) исследования наличия антител к ВИЧ иммуноферментными (ИФА) методами, разрешенными к использованию, и этап верификационного (подтверждающего) более развернутого исследования в лаборатории городского центра СПИД. Следует отметить, что даже лучшие скрининговые ИФА-системы не гарантируют 100% специфичности, то есть существует некоторая вероятность получения неспецифических, ложноположительных результатов, связанных с особенностями сыворотки крови пациента. Поэтому положительный результат скринингового ИФА обследования может не подтвердиться в подтверждающих тестах, после чего пациенту выдадут отрицательный или неопределенный результат. При неопределенном результате подтверждающего исследования тестирование следует повторить в динамике через 2-3 недели.

Лабораторная диагностика ВИЧ инфекции у детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, имеет свои особенности. В их крови до 18-ти месяцев с момента рождения могут циркулировать материнские антитела к ВИЧ (класса IgG). Отсутствие антител к ВИЧ у новорожденных не означает, что вирус не проник через плацентарный барьер. Дети ВИЧ-инфицированных матерей подлежат лабораторно-диагностическому обследованию в течение 36-ти месяцев после рождения.

Источник

Внимание! При положительных и сомнительных реакциях, срок выдачи результата может быть увеличен до 10-ти рабочих дней.

Антитела к ВИЧ 1, 2 типа, антиген p 24 — исследование специфических антител, возникших в организме в ответ на инфицирование вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) 1, 2 типов и антигена p 24 вируса иммунодефицита человека.

ВИЧ (вирус иммунодефицита человека) — вирус семейства ретровирусов (вирус с медленной репликацией), который поражает клетки иммунной системы человека (CD4, Т-хелперы) и вызывает синдром приобретенного иммунодефицита.

Длительность инкубационного периода обычно составляет 3–6 недель. В редких случаях антитела к ВИЧ начинают обнаруживаться только через несколько месяцев и более после инфицирования. Уровень их концентрации может заметно снижаться в терминальном периоде заболевания. В редких случаях антитела к ВИЧ-инфекции могут исчезать на длительный срок.

Антиген р 24 ВИЧ 1,2 типа, выявленный в сыворотке крове, свидетельствует о раннем этапе заболевания. В течение нескольких первых недель после заражения количество вируса и антигена р 24 в крови стремительно нарастает. Как только начинают вырабатываться антитела к ВИЧ 1, 2, уровень антигена р 24 начинает снижаться.

Определение антигена р 24 позволяет проводить диагностику ВИЧ-инфекции на ранних стадиях инфицирования, до выработки антител.

Одновременное выявление антител к вирусу ВИЧ-1,2 и антигена вируса р 24 повышает диагностическую ценность исследования.

Данный анализ позволяет обнаружить антитела к ВИЧ-1,2, а также антиген р 24 ВИЧ-1,2. Анализ позволяет диагностировать ВИЧ-инфекцию на ранних стадиях.

Пути передачи инфекции:

половой;
при переливании крови;
от зараженной матери к новорождённому.

Вирус присутствует в крови, эякуляте (сперме), предэякуляте, вагинальных выделениях, грудном молоке. На вероятность заражения ВИЧ-инфекцией влияет состояние слизистых оболочек половых органов/рта/прямой кишки (при половом пути передачи); количество вирусных частиц, поступивших в организм; состояние иммунной системы; общее состояние организма. При массивном поступлении вирусных частиц клинические признаки инфекции появляются раньше. При инфицировании HIV I первые симптомы заболевания возникают быстрее, чем при HIV II.

ВИЧ-инфекция — длительное и тяжёлое заболевание, которое сопровождается поражением клеток иммунной системы человека; против него пока еще не разработаны эффективные методы лечения и средства специфической профилактики (вакцины).

Вирус разрушает клетки иммунной системы человека — лимфоциты, называемые CD4 T-клетками. CD4 T-клетки — это субпопуляция лимфоцитов, которая выполняет важнейшие функции в регуляции и осуществлении иммунного ответа организма против бактерий, вирусов и других микроорганизмов. Опасность заболевания в том, что этот вирус проникает в клетки организма и «отключает» иммунную систему. Когда поражена иммунная система, организм человека становится полностью беззащитным перед сравнительно безобидными микроорганизмами, а также злокачественными опухолями. Поражение происходит постепенно, в течение нескольких (до 10–15) лет и приводит к снижению иммунитета против вирусных, бактериальных, грибковых, протозойных, паразитарных, опухолевых заболеваний.

Источником вируса иммунодефицита является человек. Вирус у человека можно выделить из семенной жидкости, секрета шейки матки, лимфоцитов, плазмы крови, спинномозговой жидкости, слез, слюны, мочи и материнского молока, но концентрация вируса в них различна. Наибольшая концентрация вируса содержится в следующих биологических средах: в сперме, крови, секрете шейки матки.

Пути, которыми вирус может передаваться от зараженного человека к незаражённому, ограничены.

Пути передачи ВИЧ-инфекции
Существуют 3 способа передачи вируса иммунодефицита:

Половой путь — является наиболее частым. Заражение происходит при незащищённом сексуальном контакте, при этом вирус проникает внутрь организма через слизистые оболочки. Ранки на слизистой оболочке, язвочки, воспаления —повышают вероятность заражения. У лиц, страдающих инфекциями, передающимися половым путём, риск заражения при контакте с инфицированным человеком выше в 2–5 раз. Для передачи вируса важна не только степень интимности контакта, но и количество возбудителя. При незащищённом сексе вероятность заражения женщины от мужчины примерно в три раза выше, поскольку в её организм попадает большее количество вируса, и у женщины значительно больше площадь поверхности, через которую вирус может проникнуть в организм (слизистая влагалища). Риск заражения наиболее высок при анальном сексуальном контакте и наименее — при оральном.
Контакт с кровью инфицированного человека: а) при использовании общих игл, шприцев, посуды для приготовления наркотиков, нестерильного медицинского инструментария; б) введение наркотиков, в приготовлении которых используется кровь; в) использование, переливание инфицированной донорской крови и изготовленных из неё препаратов (риск крайне низок, поскольку все доноры, а также кровь тщательно проверяются).
От ВИЧ-инфицированной матери (вертикальный путь) к плоду в течение беременности, при прохождении через родовые пути, при кормлении грудью.

Вирус не стабилен и способен жить только в жидкостях организма человека и только внутри клеток. В связи с этим не существует опасности заразиться при поцелуях и бытовых контактах, при пользовании общим туалетом, через укусы насекомых, через слюну, питьевую воду и пищевые продукты.

СПИД — терминальная стадия ВИЧ инфекции
СПИД развивается не сразу. У большинства людей с наличием антител к вирусу иммунодефицита клинические признаки заболевания СПИД могут не проявляться от 2-х до 10 лет и более, а при успешном лечении данный срок значительно увеличивается. Это обусловлено тем, что необходимо достаточно длительное время для снижения количества CD4 T-клеток до уровня, при котором происходит ослабление иммунной системы.

Вирус поражает и другие виды клеток, в том числе клетки центральной нервной системы и клетки красной и белой крови, в которых вирус, видимо, находится в «дремлющем» состоянии в течение длительного времени, прежде чем начинает активно размножаться. Факторы, влияющие на прогрессирование заболевания, разнообразны: генетические особенности, штамм вируса, психологическое состояние пациента, условия жизни и другие.

Течение болезни и длительность стадий зависят также от того, получает ли человек лечение, и если «да», то какие препараты.

4 стадии ВИЧ инфекции

Инкубационный период («период окна») — это время от момента заражения до появления в крови человека антител (защитных белков иммунной системы) к вирусу. В этот период инфекция никак не проявляется, все анализы — отрицательны, однако человек уже заразен. Инкубационный период может длиться до 3 месяцев (в среднем 25 дней).
Стадия первичных проявлений. Продолжается в среднем 2–3 недели и характеризуется резким повышением количества вируса в крови. Данное состояние называют «сероконверсионной болезнью», так как в это время антитела к вирусу появляются в крови в количествах, достаточных для выявления при проведении анализов. Данный период у большинства лиц никак не проявляется, однако у 20–30% могут отмечаться гриппоподобные явления: повышение температуры тела, увеличение лимфатических узлов, головная боль, боль в горле, недомогание, усталость и боль в мышцах. Это состояние проходит спустя 2–4 недели без какого-либо лечения.
Бессимптомный период. Наступает после окончания первичных проявлений инфекции и длится при отсутствии лечения в среднем до 10 лет. В течение этого периода в организме человека идёт борьба иммунной системы с вирусом: постепенно увеличивается количество вирусных частиц и снижается иммунитет. К концу данной стадии у инфицированных лиц отмечается увеличение лимфатических узлов, ночные поты, общее недомогание и появляются первые проявления оппортунистических инфекций, возникающих у человека, при сильном ослаблении иммунной системы. Эти инфекции вызываются микроорганизмами, окружающими нас и не вызывающими инфекций у здоровых людей. Ослабление иммунной системы может также привести к развитию других заболеваний, например, рака.
СПИД — является последней стадией данной болезни и характеризуется появлением ряда заболеваний вследствие ослабления иммунной системы организма. Как правило, у больных наблюдается очень низкое количество CD4 T; одна или несколько тяжёлых оппортунистических инфекций (пневмоцистная пневмония, тяжёлая грибковая инфекция, туберкулёз и др.), которые и становятся причиной смерти в отсутствие лечения; онкологические заболевания; энцефалопатия (поражение мозга, сопровождающееся развитием слабоумия).

Диагностика носительства вируса иммунодефицита человека
Диагностика ВИЧ-инфекции — комплексный процесс, основанный на данных лабораторного, клинического и эпидемиологического обследования, причем главную роль в постановке диагноза играет лабораторное исследование крови.

Основным методом лабораторной диагностики является обнаружение антител к вирусу с помощью иммуноферментного анализа.

Порядок проведения лабораторного исследования на наличие антигенов вируса иммунодефицита человека и антител к этому вирусу строго регламентирован приказами Министерства здравоохранения Российской Федерации и включает в себя:

этап скринингового (отборочного) исследования иммуноферментными (ИФА) методами, разрешёнными к использованию;
этап верификационного (подтверждающего) исследования методом иммуноблота в лаборатории городского центра СПИД.

В скрининговых лабораториях положительный результат проверяется методами ИФА дважды, после чего, при наличии хотя бы одного положительного результата, материал направляется на подтверждение методом иммуноблота, принцип которого заключается в выявлении антител к целому ряду белков вируса.

Лабораторная диагностика наличия вируса иммунодефицита у детей, рождённых от инфицированных этим вирусом матерей имеет свои особенности. В крови детей до 15 месяцев от момента рождения могут циркулировать материнские антитела к вирусу (класса Ig G). Отсутствие антител к вирусу у новорождённых не означает, что он не проник через плацентарный барьер. Дети матерей, инфицированных вирусом иммунодефицита, подлежат лабораторно-диагностическому обследованию в течение 36 месяцев после рождения.

До получения положительного результата в иммуноблоте и при отрицательном результате исследования человек считается здоровым и противоэпидемические мероприятия с ним не проводятся.

Материалом для исследования на антитела к вирусу иммунодефицита является венозная кровь, сдавать которую желательно на голодный желудок.

Разумеется, тест на наличие вируса — это добровольное дело каждого человека. Анализы на носительство вируса иммунодефицита не могут назначаться принудительно, без согласия пациента. Но нужно понимать и то, что чем скорее будет поставлен правильный диагноз, тем больше шансов прожить долгую и полноценную жизнь, даже являясь его носителем.

Показания:

увеличение лимфатических узлов более двух областей;
лейкопения с лимфопенией;
ночная потливость;
резкое похудание неясной причины;
диарея более трех недель неясной причины;
лихорадка неясной причины;
планирование беременности;
предоперационная подготовка, госпитализация;
выявление следующих инфекций или их сочетаний: туберкулез, манифестный токсоплазмоз, часто рецидивирующая герпес-вирусная инфекция, кандидоз внутренних органов, повторные невралгии герпес-zoster, вызванная микоплазмами, пневмоцистой или легионеллами пневмония;
саркома Капоши в молодом возрасте;
случайные половые контакты.

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак или спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.

Правила оформления на ВИЧ:
Оформление заявок для проведения исследований в ДНКОМ осуществляется по паспорту или документу, его заменяющему (миграционная карта, временная регистрация по месту жительства, удостоверение военнослужащего, справка из паспортного стола при утере паспорта, регистрационная карта учёта из гостиницы). Предъявленный документ в обязательном порядке должен содержать информацию о временной или постоянной регистрации на территории РФ и фотографию. При отсутствии паспорта (документа его заменяющего) пациент вправе оформить анонимную заявку для сдачи биоматериала. При анонимном обследовании, заявке и полученному от клиента образцу биоматериала присваивается номер, известный только пациенту, и медперсоналу, оформлявшему заказ.

Результаты исследований, выполненных анонимно, не могут быть представлены для госпитализации, профессиональных осмотров и не подлежат регистрации в ОРУИБ.

Интерпретация результатов
Тест на антитела к ВИЧ 1/2 является качественным. При отсутствии антител выдается ответ «отрицательно». В случае обнаружения антител к ВИЧ исследование ставится повторно в другой серии. При повторении положительного результата в иммуноферментном тесте проба отсылается для исследования подтверждающим методом иммуноблота, который является «золотым стандартом» в диагностике ВИЧ.

Положительный результат:

ВИЧ-инфекция;
ложноположительный результат, требующий повторных или дополнительных исследований*;
исследование неинформативно у детей до 18 мес, рождённых от ВИЧ-инфицированных матерей.

*Специфичность скрининговой тест-системы антитела к ВИЧ 1 и 2 и антиген ВИЧ 1 и 2 (HIV Ag/Ab Combo, Abbott), по оценкам, представленным производителем реагентов, составляет около 99,6% как в общей популяции, так и в группе пациентов с потенциальными интерференциями (инфекции HBV, HCV, Rubella, HAV, EBV, HNLV-I, HTLV-II, E.coli, Chl.trach. и др., аутоиммунные патологии (включая ревматоидный артрит, присутствие антинуклеарных антител), беременность, повышенный уровень IgG, IgM, моноклональные гаммапатии, гемодиализ, множественные гемотрансфузии).

Отрицательный результат:

не инфицирован (соблюдены диагностические сроки проведения анализа);
серонегативный вариант течения инфекции (антитела вырабатываются поздно);
терминальная стадия СПИД (нарушено образование антител к ВИЧ);
исследование не информативно (диагностические сроки не соблюдены).

Источник