Hcv ифа анализ крови что это
Тест на определение антител к возбудителю гепатита С в настоящее время используется в качестве «золотого стандарта» первичной диагностики заболевания. Исследование получило название анти-HCV. Методика выполнения теста позволяет определить титр иммуноглобулинов, что определяет активность иммунного ответа.
Некоторые разновидности анализа способны дифференцировать различные типы антител, что является определяющим фактором в постановке диагноза острого или хронического гепатита С. При наличии показаний возможно выявление иммуноглобулинов к специфическим структурным протеинам патогена. Такое исследование проводят редко, но оно помогает определить причину резистентности к терапии и оценить возможность развития осложнений.
Что значит Анти-HCV?
Анализ крови анти-HCV предназначен для обследования человека на предмет гепатита С. Что это за тест? Принцип исследования состоит в выявлении антител (иммуноглобулинов или АТ). Иммуноглобулины – специфические вещества протеиновой структуры, которые вырабатываются для защиты организма от бактерий и вирусов. Антитела способны «распознать» частицы болезнетворных патогенов, которые могут нанести необратимый урон здоровью.
Такие частицы именуют антигенами. Задача АТ – уничтожить их до наступления необратимых изменений. Иммуноглобулины отличаются высокой специфичностью. Иными словами, к каждому антигену вырабатываются определенные, уникальные по структуре антитела. Соответственно, если в организме обнаружены АТ к гепатиту С, то это свидетельствует о произошедшем инфицировании.
Пациенты часто спрашивают, если анализ анти-HCV положительный, что это значит? Зачастую такие результаты говорят о заражении. Но при проведении скрининга на иммуноглобулины возможно получение ложных (как позитивных, так и негативных) анализов. Дело в том, что результаты исследования Anti-HCV зависят от особенностей работы иммунной системы. К примеру, беременность и аутоиммунные заболевания могут продемонстрировать ложные маркеры теста.
Когда пациенты интересуются, что это за анализ, доктора разъясняют, что существует несколько разновидностей исследования. Типы тестов для выявления антител описаны в таблице.
| Тип анализа на иммуноглобулины | Описание |
| Anti-HCV суммарный | Исследование определяет весь спектр циркулирующих в крови иммуноглобулинов. Показано в качестве средства для первичной диагностики |
| Анти-HCV IgG и IgM | Тест применяется для дифференцирования острой формы гепатита С от хронической |
| Определение HCV core Antigen | Протеин core – один из основных структурных элементов капсида возбудителя вируса гепатита С. Полагают, что это исследование может заменить качественную ПЦР, так как наличие антигена core является 100% признаком присутствия вируса в организме и его репликации. Но из-за сложности выполнения теста и высокой стоимости проведения доктора отдают предпочтение именно ПЦР |
Достоверность
Практически все современные клинические лаборатории сейчас перешли на тест-системы последнего поколения. Их точность и специфичность превышает 98%. Поэтому возможные сомнительные результаты обычно связаны не с человеческим фактором либо качеством используемого для диагностики набора реактивов, а с особенностями работы иммунной системы больного.
Именно из-за этого положительный анализ на гепатит С иммуноферментным методом (ИФА) не служит основанием для постановки диагноза. Результат ИФА требует обязательного подтверждения более специфичным тестом на наличие РНК патогена в крови, выполняемого способом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Точность последнего также приближается к 100%.
Сравнительно недавно в продаже в аптеках появились экспресс-тесты, направленные на выявление антител и позволяющие провести анализ HCV самостоятельно дома. Их преимуществом служит возможность выполнения без медицинской помощи. Подобный набор не заменит полноценного лабораторного анализа, но поможет провести самодиагностику и вовремя обратиться к врачу. Точность экспресс-тестов составляет порядка 95%. Но для минимизации риска неправильных результатов нужно соблюдать все правила выполнения анализа. Подробная инструкция по использованию тест-системы прилагается к набору. Существуют экспресс-тесты для выявления антител как в крови, так и в слюне.
Как проводят анализ на гепатит С
Серологический анализ на гепатит С выполняется с использованием одной из следующих методик:
- ELISA (от английской аббревиатуры «enzyme linked immunoadsorbent assay), исследование проводят при помощи реагентов-адсорбентов, которые обладают специфической способностью связывать иммуноглобулины в биологическом образце;
- EIA (enzyme immunoassay), результаты теста основаны на биохимической реакции антител с содержащимися в реактивах специфическими ферментами.
Существуют и другие методики выполнения анализа ИФА анти-HCV (например, EMIT), но они используются гораздо реже. ELISA и EIA просты в применении, доступны в финансовом плане, подходят для работы с большим количеством образцов. Во время исследования находящиеся в крови антитела образуют соединения со специфическими реагентами. Впоследствии они обнаруживаются либо при микроскопическом исследовании, либо при обработке образца при помощи специальных компьютерных программ. Таким образом возможен двойной контроль результатов исследования.
В качестве реактивов могут использоваться различные соединения:
- лизатные, полученные путем очищения патогена (для этой цели обычно применяют ультразвук);
- рекомбинантные, когда реагенты получают генно-инженерным путем;
- пептидные с применением искусственно полученных веществ.
В зависимости от используемого реагента тест-системы могут определять либо суммарные антитела, либо дифференцировать иммуноглобулины на G и М. В качестве твердой фазы применяют луночные планшеты либо шарики, лидируют в производстве таких устройств корпорации Roche или Abbot.
Показания для исследования ИФА
Тестирование на HCV (Hepatitis C Virus) проводится как в качестве рутинного исследования для регулярного обследования работников некоторых сфер (образования, здравоохранения), при планировании зачатия и т.д. Также анализ ИФА Тотал на суммарные антитела к гепатиту С выполняется и при подозрении на вирусное поражение печени.
ИФА является основным первичным методом диагностики заболевания. Остальные тесты проводятся по результатам этого исследования.
Проведение ИФА строго показано в следующих случаях:
- перенесенные до 1992 года гемотрансфузионные процедуры и хирургические вмешательства по поводу трансплантации органов (до этого времени не были известны методы выявления HCV у доноров и в биологическом материале);
- пристрастие к внутривенным наркотикам: применение психоактивных веществ ослабляют иммунную систему и делают организм более восприимчивым к подобного рода заболеваниям;
- использование общих с инфицированным человеком предметов гигиены;
- половые контакты с больным (особенно, гомосексуальные);
- инфицирование ВИЧ;
- при беременности;
- повышение уровня печеночных ферментов;
- любые иммунодефицитные состояния;
- работа с сфере здравоохранения.
Людям из группы риска рекомендуют регулярно сдавать кровь на HBsAg, HCV и HIV (гепатиты В и С, ВИЧ ).
Также исследование показано и при появлении определенных клинических признаков, которые могут косвенно указывать на наличие поражения печени вирусной этиологии. Это:
- постоянное чувство слабости;
- головные боли;
- сонливость;
- расстройства пищеварения (тошнота, изжога, диспепсия, диарея либо запор, неприятный привкус во рту);
- желтуха;
- потемнение урины;
- осветление кала.
Относительными показаниями к проведению иммуноферментного теста на ВГС служат:
- нанесение татуировок, перманентного макияжа, выполнение пирсинга;
- ведение беспорядочной половой жизни;
- проведение частых лечебных процедур (гемодиализа, эндоскопии);
- планирование беременности (тестирование проходят оба партнера);
- регулярные посещения маникюрных кабинетов.
В некоторых структурах результаты ИФА требуют при приеме на работу и далее ежегодно. С этой целью оформляется медицинская книжка, куда вносится не только тест на гепатит С, но и другие обследования и рекомендации врача.
Как правило, это касается:
- работников здравоохранения, которые непосредственно контактируют с пациентами или донорским материалом;
- продавцов;
- поваров, официантов и других служащих сферы общественного питания;
- учителей, воспитателей в детских садах и другого персонала школ, интернатов, дошкольных детских учреждений, образовательных и развлекательных центров;
- косметологов и парикмахеров;
- мастеров в тату- и пирсинг-салонах.
В целом, риску заразиться гепатитом С подвергается почти каждый человек. Сейчас для выполнения теста вовсе не обязательно обращаться к врачу, брать направления и тратить несколько часов на ожидание в очереди. Анализ проводится практически в каждой частной лаборатории, а цена его вполне доступна. Забор крови занимает несколько минут, а результат выдают на руки либо присылают по указанному в бланке электронному адресу в течение 1–3 дней.
Правила подготовки к лабораторному тесту
Иммуноферментное исследование для выявления гепатита С зависит не только от качества используемых тест-систем и профессионализма лаборанта, проводящего анализ. На результаты также влияет и особенности подготовки к забору крови. В первую очередь это касается пациентов, страдающих от хронических заболеваний и вынужденных принимать медикаменты.
Таким больным следует:
- за 7–10 дней до предполагаемого обследования предупредить врача о необходимости сдачи анализов и возможности сделать перерыв в приеме лекарств;
- если прием медикаментов не требует соблюдения временного режима, пить препараты (делать укол) следует после забора крови;
- некоторые средства обладают иммуносупрессивной активностью (лекарства, назначаемые для терапии онкологических заболеваний, цитостатики, иммунобиологические медикаменты);
- длительный прием антибиотиков, противомикробных, противопаразитарных средств и некоторых других препаратов может негативно отразиться на состоянии печени, поэтому о курсе такого лечения следует известить доктора.
На консультации перед сдачей крови либо при обращении к врачу по поводу расшифровки анализа необходимо обязательно сообщить о любых проблемах со здоровьем, а тем более, об известных диагнозах и принимаемых лекарствах.
Чтобы снизить вероятность сомнительных, неопределенных результатов доктор и консультанты в клинической лаборатории неоднократно предупреждают о необходимости соблюдать определенные правила.
К числу обязательных врачебных рекомендаций относят:
- Специальную диету – за 3 дня до обследования. Питание по столу №5 рекомендовано при подтвержденном поражении печени вирусного либо другого генеза. Но на этапе подготовки к проведению исследования также нужно придерживаться диеты. Не следует есть жирные сорта птицы, мяса и рыбы, молока и кисломолочных продуктов, некоторые сыры, мясные субпродукты, соусы, колбаса, ветчина, сосиски, консервы. Рекомендуют ограничить употребление соли, противопоказаны маринованные овощи и фрукты, жареные блюда, фаст-фуд, сдоба.
- Полное исключение алкоголя вне зависимости от объема и крепости напитков. Такое правило соблюдают как минимум 2 недели до забора крови.
- Воздержание от приема пищи (разрешена только негазированная вода) за 12 часов до посещения лаборатории.
- Не курить 8–10 часов до сдачи крови.
- Посещение лаборатории утром после пробуждения.
- За сутки до исследования ограничить тяжелые физические нагрузки.
Исследование лучше перенести, если:
- развилась бактериальная инфекция (вне зависимости от этиологии, например, ангина, пневмония, пиелонефрит);
- возникла необходимость в приеме антибиотиков, противоглистных средств, фунгицидных препаратов (анализ лучше выполнять через 7–10 дней после окончания курса терапии).
Симптомы ОРЗ и других заболеваний следует дифференцировать от признаков гепатита С. Зачастую вирусное поражение печени дает о себе знать гриппоподобной симптоматикой.
При нарушении правил подготовки к проведению исследования, лучше перенести анализ. Если же это по каким-либо причинам сделать невозможно, нужно известить доктора. Иногда подобные обстоятельства могут стать причиной получения ложноположительных либо ложноотрицательных результатов.
Расшифровка результатов анализа крови
Идеально, если расшифровка Anti-HCV проводится профильным специалистом. Но при сдаче анализа в частной лаборатории пациент получает результаты лечения еще до посещения врача. Редкий человек сможет дождаться консультации доктора и не поинтересоваться, выходят ли показатели за пределы физиологически допустимых значений.
В норме Anti-HCV Total отрицательный, это значит, что антител к возбудителю гепатита С в крови человека не обнаружено.
Основные принципы интерпретации различных вариантов результатов серологического исследования приведены в таблице. Также указана цель выполняемого теста.
| Наименование анализа | Возможный результат и описание |
| Anti-HCV суммарный (тотал) | Является основой диагностики гепатита С. Возможные результаты:
|
| Дифференцированный анализ на антитела к HCV | Может выполняться как вместо Anti-HCV Total, так и при обнаружении суммарных антител. Возможные результаты:
|
| ИФА HCV Ag At | Исследование проводят для обнаружения вирус-антигенов (как правило это ядерный протеин core) либо структурных протеинов (NS3, NS4 и др.). В рутинной клинической практике тест назначают редко. Анализ на core-антиген успешно заменяется более быстрой и простой в выполнении ПЦР, а исследование на антитела к антигенам прочих структурных протеинов целесообразен в сложных случаях, когда необходимо выяснить причину резистентности и т. д. Но выявление любого из перечисленных антигенов на гепатит С служит однозначным признаком инфицирования |
Как и любое другое исследование, ИФА на антитела к HCV сопряжены с риском получения ошибочных результатов.
Помимо технической ошибки в проведении анализа, ложные позитивные либо негативные данные возможны при:
- беременности;
- аутоиммунных заболеваниях (особенно, аутоиммунном гепатите);
- лейкемии и других видах онкологии;
- ВИЧ;
- ранее перенесенном гепатите С (как после противовирусной терапии, так и при самостоятельном выздоровлении, которое отмечают в 10–15% случаев инфицирования);
- тяжелых системных инфекциях, когда в кровь происходит постоянный выброс большого количества антител, что и является причиной погрешности в анализе;
- любых состояниях, связанных с серьезным иммунодефицитом (включая медикаментозный).
Еще одной причиной ложного результата является так называемое «диагностическое окно». Это период с момента инфицирования до накопления в крови человека антител в количестве, необходимом для лабораторной диагностики. Сроки, когда выявляется HCV методом ИФА, индивидуальны, но в среднем составляют 6–8 недель.
Проведение серологического исследования нецелесообразно для диагностики патологии у ребенка, рожденного от больной матери. Если вероятность внутриутробной и интранатальной передачи вируса не превышает 5–7% (исключение составляют женщины с ВИЧ, у них риск составляет порядка 20–25%), то IgG проходят через плаценту и обнаруживаются в крови ребенка. Поэтому в данном случае исследование на HCV всегда проводят при помощи ПЦР.
Учитывая возможность получения ложных результатов, доктора всегда назначают подтверждающий тест по методике качественной ПЦР.
ИФА остается главным рекомендуемым методом быстрой диагностики гепатита С. Данный тест проводится повсеместно. Но во избежание ошибок с результатами анализа лучше обратиться к врачу за более комплексным обследованием (особенно при негативном ИФА на фоне ухудшающегося самочувствия).
Источник
Современная медицина устроена на принципах гипердиагностики, это связано с тем, что очень часто истинная причина тех или иных симптомов не выявляется при первичном осмотре или проведении лабораторных тестов. Вирусные агенты поражающие клетки печени — не исключение, а гепатит С, лечение которого есть дорогостоящим и не всегда дает положительный исход, необходимо выявлять со стопроцентной вероятностью с целью предупредить его дальнейшее распространение.
HCV анализ крови, что это?
Это иммуноферментное исследование, которое позволяет обнаружить антитела к вирусу гепатита С и в направлении врача обычно указывается как Анти-HCV. При проведении этого исследования, возможно выявление трех классов иммуноглобулинов, которые дают понимание о:
- Наличии заболевания.
- Стадии развития — имеется в виду инкубационный период, острое течение или хроническая форма, а так же наличие уже перенесенного без госпитализации и лечения заболевания.
Анализ на HCV основывается на выявлении различных классов иммуноглобулинов и позволяет определить антитела к возбудителю гепатита С. Специалисты выделяют два класса глобулярных белков, которые дают информацию о стадии заболевания — это M и G.
Первый свидетельствует об острой фазе развития болезни и его титр нарастает на протяжении первых нескольких месяцев после инфицирования. На этой стадии, излечение от инфекции при помощи современной трехкомпонентной схемы, наблюдается в более чем девяноста пяти процентах случаев.
Второй класс говорит о давней персистенции вируса в клетках печени. Хроническая форма гепатита С считается наиболее прогностически-неблагоприятной, так как она хуже поддается лечению и редко удается полностью элиминировать вирусные частицы из гепатоцитов.
Способы обнаружения вируса гепатита С
Помимо HCV анализа, возможно определение наличия так называемого «ласкового убийцы» в крови еще несколькими способами, среди которых:
- Полимеразно-цепная реакция — считается одним из наиболее эффективных и точных диагностических методов. Он позволяет выявить РНК вируса в организме человека и проводится даже при положительном результате HCV анализа для окончательного установления диагноза.
- Проведение экспресс-теста на наличие возбудителя гепатита С — чувствительность данного метода около девяносто шести процентов, что позволяет в кратчайшие сроки дать информацию о присутствии возбудителя в биологических средах человека.
Так же существуют методы исследования, которые обычно предшествуют направлению больного на HCV анализ. Именно эти диагностические инструменты дают информацию, которая наталкивает специалиста на мысль о наличии воспаления клеток печени вирусной этиологии:
- Ультразвуковая диагностика и эластометрия.
- Клинический анализ крови.
- Коагулограмма.
- Биохимический с печеночными пробами.
Точность анти-HCV анализа крови
Anti-HCV диагностика является современным и достаточно точным методом, он позволяет определить наличие возбудителя гепатита С начиная с пятой-шестой недели после заражения. Вирус не будет обнаруживаться в плазме при условии его репликации менее чем двухсот копий в миллилитре. Если расчет проводить в международных единицах, это — менее сорока международных единиц в миллилитре. При наличии более миллиона вирусных частиц в одном миллилитре плазмы, устанавливается наличие виремии.
Ложноположительный результат на носительство вируса гепатита С устанавливается примерно в каждом десятом случае. Причиной такой статистики является нарушение методики забора крови и проведения анализа, изменение в гормональном фоне или несоблюдение рекомендаций врача по подготовке к сдаче анализа. В соответствии с данными ВООЗ, четыре процента населения планеты — реконвалесценты по гепатиту С.
Возможные показания для проведения HCV анализа
Для прохождения исследования на предмет наличия гепатита С, не нужны разрешения или направления от лечащего врача, на сегодняшний день существует масса лабораторий и медицинских центров, где любой желающий может пройти HCV анализ крови. Тем не менее, существует перечень состояний, которые являются показанием к проведению данного исследования, к ним относят:
- Желание стать донором.
- Наличие в анамнезе жизни заменного переливания крови или ее компонентов.
- Рост уровня АлАТ и АсАТ на фоне медицинского вмешательства.
- Исключение гепатита С при наличии его вторичных признаков.
- Выяснение эффективности лечения гепатита С.
Рекомендации при подготовке к сдаче HCV анализа
Первичных рекомендаций по подготовке к сдаче крови именно для данного исследования — нет. Однако, к общим приготовлениям при биологических жидкостей на анализ, являются следующие:
- Сдавать HCV анализ крови необходимо не ранее чем через 5-6 недель после первичного предполагаемого заражения, в противном случае даже при наличии инфекции в организме, иммуноглобулины могут выработаться не в достаточном количестве и дать ложноотрицательный результат.
- Необходимо сдавать после двенадцатичасового перерыва в еде — прием пищи влияет на реологические характеристики плазмы.
- Забор проводить утром — это связано с тем, что большинство нормативных показателей рассчитывались в утренние часы, так что для снижения вероятности ложноположительного результата, необходимо следовать этому правилу.
- Необходимо исключить за сутки прием гормональных, антивирусных и цитостатических препаратов.
- Так же следует воздержаться от приема алкоголя вечером перед посещением лаборатории.
Методика проведения HCV анализа крови и оценка результата
Для проведения анализа необходимо проведение забора биологического материала, в данном случае — это кровь. После забора двадцати миллилитров крови из периферической вены, производится ее центрифугирование с целью получения жидкого ее компонента — плазмы, который и будет подвергаться исследованию. С целью предупредить развитие ложных положительных результатов, рекомендуется проводить забор крови в утреннее время до приема еды. Полученные при HCV-анализе результаты, следует трактовать так:
- Отрицательный — это говорит об отсутствии антител к гепатиту С в организме пациента, как следствие — человек здоров.
- Положительный — значит, что в крови пациента обнаружены антитела к вирусным частицам гепатита С, что может свидетельствовать о наличии заболевания в острой или хронической форме. Тем не менее, даже при получении положительного результата, необходимо проведение ПЦР-диагностики.
- Наличие IgG свидетельствует о хронической форме патологии.
- Количество выявленного IgM говорит о степени остроты процесса — чем его больше, тем более ранним считается заболевание.
ПЦР диагностика гепатита С
Полимеразно-цепная реакция считается наиболее точным и современным методом выявления РНК и ДНК цепей любого характера. Вирусный гепатит С содержит рибонуклеиновую кислоту, а частое наличие ложно положительных результатов при проведении анти-HCV-анализа крови делает его идеальным кандидатом для проведения данного исследования.
Выделяют проведение качественного и количественного вида диагностики, из которых наиболее показательным является второй. Отрицательной стороной этого диагностического инструмента является его дороговизна, а так же длительность проведения исследования, в связи с чем HCV анализ крови является наиболее доступным, а при правильном его выполнении, количество ошибок является минимальным.
Источник