Диагностика эпштейн барр в анализе крови

Вирус Эпштейна-Барр (эпштейн барр, ВЭБ) при ухудшении иммунитета способен привести к развитию для организма различных патологий – от кожных проявлений и синдрома хронической усталости до злокачественных новообразований. Одна из самых распространенных проблем, вызванных ВЭБ – это патология инфекционный мононуклеоз. Варианты того, как проявит себя инфекция, разнообразны и индивидуальны. Ввиду этого при подозрении на заражение таким возбудителем, как вирус эпштейна барр диагностика должна проводиться комплексно, на основе проведенных в лаборатории анализов.

Какие диагностические процедуры применяют

Диагностировать развитие какой-либо формы заболевания, врач может на основании жалоб пациента, по результатам его клинической картины и, кроме того, результатов лабораторных анализов.

Чтобы выявить инфекцию, проводят такую диагностику:

• серологические реакции;
• ПЦР;
• анализы крови общий и биохимический (печеночные пробы).

Исследование крови поможет узнать об изменениях показателей и наличии атипичных мононуклеаров. Биохимический анализ помогает определить в крови повышение ферментов АСТ и АЛТ, ЛДГ и других. Проведение серологических реакций с помощью метода иммуноферментного анализа определяет содержание и тип иммуноглобулинов IgM и IgG – антител к ВЭБ.

При проведении анализов на вирус эпштейна необходимо учитывать, что он обитает в организме почти каждого взрослого человека и, у значительного количества детей. Поэтому положительный результат после проведенной диагностики может означать всего лишь наличие вируса, но не развитие патологии.

Общий анализ крови

В случае, когда ВЭБ активен, исследования крови обязательно будут меняться. Происходит это в связи с особенностью патогенеза герпетической инфекции. Какие изменения в крови характерны для этого состояния?

Для эритроцитов норма 4-5.1 млн. на мкл у мужчин и 3.7- 4.7 млн. на мкл у женщин. Они остаются в этих пределах или немного меньше. Показатели гемоглобина также остаются в пределах нормы или слегка понижаются. Но в особо сложных случаях его уровень может спуститься ниже 90 г/л., вплоть до анемии. А вот уровень лейкоцитов при таком вирусе обычно высокий, то есть больше, чем 9 Г/л. Типичным считается повышение лейкоцитов в разгар обострения инфекции. Увеличение показателя количества этих элементов называется лейкоцитоз. Его наличие считается одним из основных признаков развития в организме инфекции.

Норма содержания базофилов – 0-1%. Выраженная реакция лимфоузлов иногда приводит к тому, что выявляется повышенный уровень содержания таких клеток в крови. Показатель эозинофилов при ВЭБ обычно не повышается. Незначительное увеличение количества этих элементов может находиться в крови уже на этапе выздоровления. Вследствие повышения уровня лимфоцитов может немного понизиться уровень сегментоядерных нейтрофилов. Их повышение обычно означает присоединение на фоне вирусной болезни бактериальной инфекции. Примером такого положения служит появление, например, ангины с осложнениями.

Уровень лимфоцитов в период активизации инфекции повышается. Причиной такого хода событий служит то, что эпштейн барр провоцирует более активную выработку таких элементов, как В-лимфоциты. Такие данные лимфоцитов обычно остаются стабильными в течение всего периода болезни. Лимфоцитоз можно найти у 80-90% пострадавших от Эпштейн-Барр.

Распознать развитие мононуклеоза можно, в частности, по изменениям элементов моноцитов. При болезни их уровень всегда повышен, а дополнительные исследовании часто замечают наличие моноцитов изменившейся формы и размеров. Их назвали атипичными мононуклеарами. В большинстве случаев при ВЭБ в крови находится приблизительно 20-40% этих частичек. Но иногда содержание атипичных мононуклеаров составляет меньше 10%. При этом другие признаки развития патологического процесса могут быть найдены, а значит, вероятность инфекции не исключается.

Пока длится период активного инфекционного процесса, характерно ускорение процесса оседания эритроцитов.

Печеночные пробы

При активизации ВЭБ часто увеличивается селезенка, а вместе с ней и печень. В связи с этим появляется необходимость в контроле биохимических показателей крови. Довольно часто болезни типа мононуклеоза, сопровождает появление желтухи.

Как выглядят результаты печеночных проб, если ВЭБ в организме активизировался?

Обычно при его развитии наблюдается повышение таких показателей (в скобках указана норма для здорового организма):

• трансаминазы значительно;
• билирубин общий (до 20 ммоль/л);
• тимоловая проба (до 5 ЕД);
• активность АлАТ и АсАТ;
• степень содержания щелочной фосфатазы (30-90 ЕД/л).

Быстрый рост этих показателей и развитие желтухи часто означает появление такого проявления болезни, как гепатит, при котором больной нуждается в интенсивной терапии.

Трансаминазы – внутриклеточные ферменты, которые содержатся в организме в незначительном количестве – аланинаминотрансфераза (АЛТ) и аспартатаминотрансфераза (АСТ) Высвобождение большого количества АЛТ и АСТ в кровь наблюдается, если произошли какие-то повреждения в печени. Так, повышенное содержание АЛТ и АСТ в кровотоке можно обнаружить еще до проявления желтухи.

Серологическая диагностика вируса Эпштейн-Барр

При мононуклеозе, если провести анализ в инкубационном периоде или в начале болезни, по крови возможно выявить IgM-антитела. По прошествии нескольких месяцев от исчезновения симптомов заболевания, IgM прекращают определяться.

Антитела класса IgG остаются внутри организма человека, который переболел инфекцией данного типа, навсегда.

Рассмотрим, какова норма содержания в организме этих антител, а какие результаты анализа свидетельствуют о развитии патологии.

Возможные причины выявленных результатов

1.      Наличие отрицательного результата сообщает о том, что иммунная система с данным вирусом еще не знакома. Наличие клинических признаков инфекции в этом случае может оказаться симптомом иммунодефицита, например при заражении ВИЧ. Чтобы разобраться, дополнительно назначается анализ крови на определение ДНК ВЭБ (ПЦР).
2.      Подобные результаты чаще устанавливают в течение инкубационного периода и в первые семь дней проявления признаков болезни. При таком положении необходимо срочно начинать лечение.
3.      Выявление этих показателей свидетельствует о перенесенной некоторое время назад инфекции. Появляются они не раньше, чем спустя полгода после инфицирования ВЭБ. При таких результатах в особом лечении пациент не нуждается.
4.      Показатели характерны для первых недель инфицирования вирусом, то есть, острого периода. Больному необходима консультация врача и лечении, которое заключается в приёме противовирусных препаратов и терапии антибиотиками.
5.      Этот результат обозначает наличие обострения хронического заболевания или латентной формы. Лечение необходимо.
6.      Положительный тест по всем параметрам, указывает на обострение хронической патологии. Это значит, что возникли осложнения от инфекции, спровоцированные пониженным иммунитетом. Пациенту необходимо дополнительное обследование и назначение лечения.

В редких случаях, если при выявлении антител IgG к капсидному АГ их всё-таки обнаружили, это может говорить о сформированном у человека иммунитете к исследуемому вирусу. Если один из результатов оказался сомнительным, через пару недель необходимо повторить исследование.

ПЦР-диагностика

При исследованиях на вирус эпштейна барр диагностика ПЦР (полимеразная цепная реакция) – это способ отыскать ДНК вируса. Принципиально важно применение этой методики у детей. В юном возрасте серологические исследования не могут предоставить полную клиническую картину, потому что иммунная система в этот период еще не сформировалась окончательно. При помощи ПЦР можно изучить ДНК ВЭБ и сравнить его с ДНК известных вирусов, чтобы точно определить тип инфекции.

Для обнаружения днк вируса эпштейна барра необходим образец биоматериала пациента, содержащий частицы вируса.

Для проведения исследования требуется цельная кровь. Её забор проводится в пробирку с 6% раствором ЭДТА в расчете 50 мкл ЭДТА на 1 мл крови. Могут быть исследованы и другие биологические жидкости: слюна, моча, спинномозговая жидкость.

Анализ полимеразной цепной реакции проводят утром натощак, также в течение нескольких недель до забора нельзя принимать медикаменты.

Обнаруженный по итогам исследования результат ДНК вируса, означает, что присутствует активный ВЭБ. Отрицательный показатель, или если не была выявлена ДНК вируса, означает отсутствие его для этого биоматериале

Если болезнь находится на начальной стадии, и вирус ещё не начал множиться, при диагностике обычно определяется норма, но этот результат является ложным.

Заключение

Вирус Эпштейна-Барр содержится в организме почти каждого человека. Именно поэтому при диагностировании его наличия необходимо уделить внимание сопутствующим симптомам, таким, как повреждение печени, о котором свидетельствуют результаты печеночных проб – увеличение показателей ферментов АЛТ и АСТ, билирубина и т.д.

Но основными тестами, которые могут выявить в организме ВЭБ, считают анализ крови, серологические исследования, и метод, определяющий наличие ДНК вируса – ПЦР. Именно результаты этих реакций помогут определить состояние вируса в организме конкретного человека и определить необходимость лечения.

Вирус Эпштейна – Барр (ВЭБ) это один из возбудителей семейства герпесвирусов. Он передаётся несколькими путями:

• воздушно-капельным,
• контактно-бытовым, через поцелуи и общую посуду,
• при переливании крови или пересадке органов,
• во время беременности и родов от больной матери к ребенку.

Способ заражения

После попадания в организм вирус в первую очередь поражает слизистые рта и носа. Затем он проникает в кровоток и распространяется по всему организму. Его главное отличие от остальных видов герпеса – сохранение клетки и стимулирование роста аналогичных клеток.

В качестве ответной реакции иммунная система уничтожает зараженные клетки при помощи Т-лимфоцитов. Из-за этого процесса увеличиваются в размерах лимфатические узлы.

Если иммунитет человека слаб, то ВЭБ переходит в хроническую или скрытую форму, поражая при этом слюнные железы, печень и селезенку. Если же человек ранее болел ветрянкой, то в его организме присутствуют антитела, реагирующие на присутствие вируса и частично подавляющие его. Но такие случаи происходят редко. Поэтому заражение приводит к инфекционному мононуклеозу, который успешно лечится.

Выработанные антигены к ВЭБ удерживают его внутри зараженных В-лимфоцитов. И большую часть пребывания в организме он находится в латентном состоянии. Ослабление иммунитета приводит к рецидиву заболевания и превращает человека из пассивного носителя вируса в активный источник инфекции.

Заболевания и их симптомы

Основная вызываемая ВЭБ, это инфекционный мононуклеоз. По симптомам он очень похож на простуду или ангину. Для него характерно постепенное повышение температуры, боль в мышцах, горле, общее недомогание, отсутствие аппетита.

В результате активирования вируса возникают тяжелые заболевания нервной системы: менингит, энцефалит, менингоэнцефалит. Они могут сопровождаться сыпью в виде папул, покраснений, небольших подкожных кровоизлияний. Если терапия подобрана верно и в нужное время, то эти осложнения проходят бесследно.

ВЭБ поражает лимфатическую ткань. Этот процесс носит название полиаденопатии. Главным симптомом этого заболевания является значительное увеличение лимфатических узлов, находящихся на шее, в области ключицы, в паху. Воспаление сопровождается болью.

Вирус также может инфицировать гланды и вызвать ангину, которая проявляется с характерными симптомами:

• высокая температура,
• гной на миндалинах,
• общая интоксикация организма,

Также может проявиться болезнь Ходжкина, в результате которой возникают злокачественные образования (опухоли) в лимфатических узлах, сопровождающиеся тяжелым отравлением продуктами распада воспаленных тканей организма, сильными головными болями, слабостью и быстрой утомляемостью. Близкие узлы могут объединяться между собой в более крупные новообразования.

Подтверждением отсутствия иммунитета может стать и волосатая лейкоплакия. Сопровождается она образованием в ротовой полости белых наростов, со временем преобразующихся в бляшки.

Кроме этих заболеваний ВЭБ вызывает множество других:

• генерализованная инфекция на фоне ВИЧ/СПИД,
• системный гепатит,
• заражение или рак крови,
• синдром хронической усталости,
• раковые опухоли органов пищеварения верхнего круга и ротовой полости,
• артрит,
• сахарный диабет,
• рассеянный склероз,
• аллергия.

Способы диагностики и расшифровка результатов

Для определения в организме ВЭБ используют несколько видов анализа крови:

• общий,
• биохимический,
• иммуноферментный анализ (ИФА),
• полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Первый метод считается базовым анализом при диагностике любого заболевания. Если результаты подтверждают увеличение числа тромбоцитов и лимфоцитов и одновременное уменьшение количества эритроцитов и уровня гемоглобина, то они являются косвенным симптомом активности вируса в организме.

Второй метод позволяет проследить за текущим состоянием внутренних органов. Так как ВЭБ поражает печень, то особенное внимание уделяется изменению количества ферментов и белков, выделяемых ею. К ним относится трансаминазы, билирубин, щелочная фосфатаза. Их контроль позволяет предотвратить развитие желтухи как последствия токсического гепатита.

Третий метод исследует наличие в крови антител к молекулам вируса, называемых антигенами. Всего их существует 3 типа:

• EA – ранний антиген,
• VCA – капсидный антиген,
• EBVA – ядерный антиген.

Для каждого антигена в организме формируются иммуноглобулины 2 классов – IgG и IgM.

Обнаружение IgG к ЕА говорит о первичном инфицировании и остром течении заболевания. Он присутствует в крови вплоть до полного исчезновения симптомов. Его повторное появление свидетельствует о рецидиве или хронической форме заболевания.

Антитела IgM к EA появляются в первую неделю и пропадают на 8-12 неделе после проявления первых симптомов. Если срок их присутствия в крови превышает это значение, то это свидетельствует о переходе болезни в хроническую форму. Повторное обнаружение сигнализирует о вторичном развитии инфекции.

Наличие антител IgM к VCA (антиген капсидного белка) сигнализирует о начале острой фазы болезни. Также они появляются в случае рецидива. Их продолжительное наличие в крови – симптом хронической формы заболевания.

Обнаружение антител класса IgG к капсидному белку свидетельствует о том, что ВЭБ активен в течение 8 недель после первичного инфицирования. Также, это говорит о наличии у человека иммунитета к этому штамму.

Антитела типа IgG к ядерному или нуклеарному антигену (EBNA) появляются ближе к стадии выздоровления больного. Они сохраняются в крови продолжительное время.

Если в крови отсутствуют антитела к ядерному антигену класса IgG, но присутствует IgM против капсиного белка, то это сигнализирует об остром развитии инфекции.

Кроме IgG и IgM в бланке с результатами иногда присутствует обозначение IgA. Оно свидетельствует о скрытой или хронической форме болезни при условии отсутствия антител класса IgM.

В зависимости от используемого лабораторией метода, в таблице с итогами исследования может присутствовать количественная величина, называемая индексом авидности к антигену. Она измеряется в процентах и позволяет определить время, прошедшее с момента появления инфекции.

Использование иммуноферментного анализа для диагностики у детей малоэффективно. Это связано с тем, что их иммунная система реагирует на возбудителя очень медленно.

Полимеразная цепная реакция – это процедура, в ходе которой из любой биологической жидкости больного выделяют ДНК вируса и сравнивают его с обширной вирусной базой. Этот способ точный, но малоэффективен на начальной стадии заболевания. Если взять материал для анализа в этот промежуток времени, то результат будет ложно-отрицательным.

Положительный результат такого обследования – веский аргумент для постановки конечного диагноза. Также этот способ позволяет обнаружить ВЭБ в организме ребенка.

Подготовка к процедуре

Чтобы повысить точность методов исследования крови нужно выполнить несколько простых требований:

• сдать забор материалов на голодный желудок,
• за 12 часов до процедуры следует отказаться от жирной пищи, алкоголя и курения,
• прекратить приём противовирусных препаратов и антибиотиков,
• детям младше 5 лет за 30 минут до сдачи крови выпить теплую кипяченую воду.

Ложные результаты

Все методы исследований, не являются точными на 100%. Поэтому и при выявлении ВЭБ могут случаться ошибки. Основной причиной может стать раннее обследование, когда инфекция находится в состоянии развития. В этом случае обычно назначается повторное обследование через 14 дней.

Другой помехой для точного результата является присутствие родственного штамма – цитомегаловируса или герпесвируса 6-го типа.

Влияние заболевания на организм беременной женщины и плода

Перед планируемой беременностью женщина должна пройти обследование, выясняющее текущее состояние иммунитета. Если были обнаружены антитела класса IgG, это означает, что во время беременности реактивация ВЭБ маловероятна. А анализы, подтверждающие наличие антител класса IgM, желательно не игнорировать, и перед зачатием лучше дождаться полного выздоровления.

Наличие активной формы ВЭБ в организме будущей матери может вызвать следующие патологии плода:

• мертворождение,
• выкидыш или преждевременные роды,
• патологии развития нервной системы,
• маточное кровотечение, сепсис.

Вирус Эпштейна-Барр является причиной множества заболеваний, затрагивающих работу всех систем и органов. Для его выявления используется иммуноферментный анализ и полимеразная цепная реакция. Если в ходе первого в крови будут найдены антитела к вирусу Эпштейна-Барр класса IgG, то этот положительный результат означает, что у человека заболевание протекает в острой форме, но у него есть иммунитет к этому штамму. Трактовка зависит от того, против какого антигена возникли антитела.