Диагностика анализов крови на ифа
Иммуноферментный анализ (ИФА) — метод лабораторной диагностики, позволяющий обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях.
Где можно сдать анализ?
ИФА — один из самых распространенных и точных методов для выявления инфекций, передающихся половым путем, в частности ВИЧ, ВПЧ, гепатита В.
Узнать больше…
Для того чтобы результаты анализов были максимально достоверными, необходимо правильно подготовиться к их сдаче.
Как подготовиться?
Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.
Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа
Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, основанный на реакции «антиген-антитело», который позволяет выявить вещества белковой природы (в том числе ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей).
Чтобы понять, как устроен иммуноферментный анализ, попробуем разобраться в сути реакции «антиген-антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило, белкового происхождения, которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом. Частицы чужой крови (если она не совпадает с нашей по группе) также являются антигенами. В организме антигены способны вызывать иммунную реакцию, направленную на защиту целостности внутренней среды от чужеродных веществ. Поэтому наше тело синтезирует особые вещества — антитела (иммуноглобулины), способные по принципу «ключ к замку» соединяться с антигенами, связывая их в иммунный комплекс (этот процесс как раз называется реакцией «антиген-антитело»). Такие иммунные комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета.
Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.
Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.
Также существуют иммуноглобулины класса А (они в большом количестве содержатся в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму), Е (борются с паразитарными инфекциями) и другие. В лабораторной диагностике объектами интереса чаще всего являются IgM, IgG и IgA: по их концентрации можно оценить, на какой стадии находится инфекционный процесс, а также узнать, болел ли когда-либо человек тем или иным недугом (например, краснухой или ветряной оспой).
Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.
Реакцию «антиген-антитело» можно воспроизвести в лабораторных условиях: использовать уже готовые антитела или антигены, чтобы определить, есть ли в исследуемом образце соответствующее им соединение.
Для начала необходимо получить образец биологической жидкости — обычно, это сыворотка крови. Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или — антитела, в случае если задачей является поиск антигена). Образцы вносятся в лунки, где происходит — или не происходит — образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать выводе о результатах анализа.
ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.
Это интересно
Предшественником иммуноферментного анализа был радиоиммунный анализ, в котором для идентификации успешной реакции использовались меченые антитела и антигены. Поскольку проведение такой диагностики представляло потенциальную угрозу для здоровья сотрудников лаборатории, ученые озаботились поиском безопасной альтернативы по «окраске» образцов. Так в 1971 году был изобретен ИФА.
Преимущества метода
Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.
ИФА во многом заменил «золотой стандарт» микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке. Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни.
Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.
Недостатки метода
К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.
В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.
ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.
Показания к назначению и выявляемые заболевания
Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:
- Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
- IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
- IgG к ВИЧ;
- Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
- Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
- Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
- Ig M и IgG к токсоплазмозу;
- Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
- IgG к паразитарным заболеваниям;
- Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
- IgG к хеликобактерной инфекции.
Анализируемый биоматериал и особенности его забора
Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.
Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.
Сроки готовности результатов ИФА
При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.
Расшифровка иммуноферментного анализа
Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).
Анализируемые показатели
- IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
- IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
- IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
- IgG говорит либо о хронизации заболевания либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.
Возможные результаты ИФА
В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.
Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).
Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.
Источник
ИФА анализ крови, что это такое? Наверное, все помнят, что в ответ на проникновение вирусов для борьбы с ними организм начинает вырабатывать комплексы антител. Эти иммунологические соединения обладают способностью распознавать и уничтожать «свой» возбудитель. На этом и построено исследование, которое позволяет определить наличие и количество иммуноферментов, свойственное для определенного заболевания.
Немного общих сведений об анализе
ИФА, или иммуноферментный анализ крови, дает возможность определить специфические антитела (иммуноглобулины) к определенному виду возбудителя. Метод ИФА основан на следующем:
- в ответ на внедрение микроорганизма иммунная система начинает вырабатывать антитела;
- иммунокомплексы отличаются специфичностью и уничтожают только чужеродные клетки;
- при добавлении в сыворотку крови больного экстракта возбудителей, если имеются антитела, образуется стандартное соединение: антитело-антиген, при этом происходит активное выделение ферментов.
О положительном или отрицательном тестировании в лаборатории судят по тому, произошла ли реакция в плазме после добавления к ней возбудителя, и насколько интенсивным был процесс.
Норма для здорового человека – это единичные иммунокомплексы или их отсутствие.
Анализ ИФА не указывает на какое-то определенное заболевание, он позволяет лишь предположить примерно тип возбудителя, вызвавшего появление иммунокомплексов и определить стадию воспалительного процесса. Это позволяет скорректировать дальнейшие методы диагностики.
Об иммуноглобулинах
Что такое иммуноглобулин, многим понятно: иммунный комплекс, образовавшийся в ответ на проникновение чужеродных клеток. Но какими они бывают?
ИФА метод позволяет выделить 5 разновидностей иммуноглобулинов:
- IgA;
- IgM;
- IgG;
- IgD;
- IgE.
Основными для диагностики считаются A, M и G (некоторые источники по диагностике указывают только три этих иммунных комплекса), поэтому стоит рассмотреть их особенности:
- А – отвечает за защиту слизистых. При острых патологиях он появляется в крови спустя 14 дней после инфицирования, а иногда и позже и исчезает через 8 недель от начала проявления признаков болезни. Если иммунокомплекс IgA сохраняется дольше, то можно предположить переход заболевания в хроническую форму. Антивирус А указывает на поражение слизистой мочевого пузыря, кишечника или органов дыхания.
- М – служит указателем острой фазы заболевания. Отмечается в плазме спустя 5 дней от момента проникновения инфекции (даже если нет выраженных признаков заболевания) и исчезает через 6 недель, если происходит разрешение острого процесса.
- G – остаточная реакция и иммунокомплексы сохраняются длительное время (иногда на протяжении всей жизни) и предотвращает повторное инфицирование или возникновение рецидивов. На формировании антител G основан принцип вакцинации, когда при введении ослабленных микробов и вирусов у человека вырабатывается длительный иммунитет. Повышение G – показатель того, что возбудитель повторно проник в организм или обострилась хроническая инфекция.
Иммуноферментный анализ крови на E и D не входит в обязательную программу обследования. Он назначается в следующих случаях:
- Е – когда предполагают, что патология вызвана паразитами;
- D – если есть вероятность, что патология имеет системный характер или возникла по причине возникшего иммунодефицита.
Анализ крови методом ИФА дает возможность обнаружить специфические антитела к чужеродным агентам уже на ранних стадиях патологии. В основе тестирования лежит стандартная реакция антиген-антитело, позволяющая определить наличие антител к возбудителю заболевания.
Показания для лабораторной диагностики
Анализ крови на иммуноферментный анализ показано проводить при подозрении на возникновение следующих патологий:
- онкология;
- вирусные гепатиты (при всех типах вируса);
- герпетические поражения слизистой или кожи;
- некоторые инфекционные процессы (сальмонеллез, корь, энцефалит, дизентерия);
сифилис; - инфекции, передающиеся половым путем (гонорея, хламидиоз, микоплазмоз и др.);
- атопические процессы (аллергии);
- цитомегаловирус;
- эндокринные сбои;
- иммунодефицит;
- бесплодие;
- глистные инвазии.
Также ИФА анализ крови позволяет спрогнозировать течение некоторых неинфекционных заболеваний:
- инфаркта;
- инсульта;
- неврологических расстройств;
- почечных патологий.
Также с профилактической целью проводят ИФА во время медосмотров.
ИФА диагностика позволяет выявить более 600 антител к инфекционным и неинфекционным антигенам, что делает исследование незаменимым при выявлении болезни на раннем этапе. Методика ИФА считается наиболее информативной при обследовании на ВИЧ и на онкологию.
На чем основана методика
Кажется, что иммуноглобулинов всего пять, а с их помощью определяется большое количество патологических процессов. Возможно ли такое?
Возможно. Это происходит потому, что подсчет иммуноглобулиновых соединений делается по разным тестам:
- антинуклеарные тела (указывают на аутоиммунные процессы);
- ревматоидный фактор (выявляет ревматические поражения);
- двуспиральные ДНК (выявляется группа белков, появляющихся при системных болезнях);
- ENA скрин (определяет несколько видов антигенов, свойственных при ревмофакторе или при системных соединительнотканных поражениях);
- антикардиолипиновые антитела (иммунокомплексы образуются при ВИЧ, эпилепсии и некоторых системных процессах);
- ANGA скрин (соединения характерны для аутоиммунных процессов);
- цитрулиновый пептид (антитела появляются при ревматоидном артрите);
- С-реактивный белок (С-реактивный протеин свидетельствует о наличие острого или обострении хронического процесса);
- иммунофлюоресцентный анализ (укажет на гормональный сбой или на наличие злокачественных новообразований).
Расшифровка анализа проводится с учетом применяемых методик. Оценка полученных данных довольно сложная и проводится врачом, а для пациентов, желающих перед посещением доктора самостоятельно проанализировать полученные из лаборатории данные, можно предложить следующую таблицу:
В таблице указаны лишь общие сведения. В анализе ИФА при расшифровке врачом учитывается не только наличие иммуноферментных соединений, но и их количество, а также методики, применяемые для проведения исследования.
Преимущества метода
ИФА анализатор довольно часто применяется при дифференциальной диагностике болезней и для контроля качества лечения. Методика имеет ряд преимуществ:
- Дешевизна. Диагностические наборы стоят относительно недорого.
- Простота. Нет необходимости в оснащении сложной аппаратурой, и исследование может быть проведено в любой лаборатории.
- Высокая информативность. Достоверность определения вида антигена около 90 %.
- Быстрота. Анализатор ИФА автоматизирован, в экстренной лаборатории данные исследования можно получить уже через несколько часов после сдачи биоматериала.
- Ранняя диагностика. Иммуноглобулины появляются в крови на начальной стадии заболевания.
- Длительность хранения. Взятый у пациента материал может сохраняться до года.
- Стадия болезни. Соотношение и основные характеристики обнаруженных в плазме иммуноглобулинов дают возможность определить тяжесть течения и стадию заболевания.
- Контроль динамики. При проведении лечения ИФА иммуноферментный анализ позволяет проводить коррекцию проводимой терапии в зависимости от лабораторных показателей.
- Легкость забора биоматериала. Для диагностики достаточно небольшого количества венозной крови.
Анализ крови ИФА высокоинформативен и позволяет выявить патологию на начальном этапе развития, но только на основании лабораторного исследования диагноз не ставится. Окончательная диагностика возможна лишь после полного обследования пациента.
Недостатки методики
Несмотря на ряд преимуществ, исследование крови методом иммуноферментации имеет некоторые недостатки:
- невозможность со 100% точностью определить вид возбудителя (при некоторых заболеваниях вырабатываются похожие иммуноглобулины);
- вероятность получения ложноположительного результата (бывает у беременных или при несоблюдении правил подготовки к анализу).
На достоверность диагностики может повлиять следующее:
- табакокурение и употребление спиртного;
- нервное перенапряжение или стресс;
- физические нагрузки;
- прием некоторых лекарств (кровь сдавать можно только спустя 10 дней после отмены препаратов).
Эти недостатки анализа крови на ИФА не мешают врачам признавать методику наиболее удобной и информативной для выявления болезней на ранних стадиях. При необходимости, для уточнения полученных из лаборатории данных, больным могут назначаться более специфические анализы, позволяющие вернее определить тип возбудителя.
ИФА в паразитологии
IgE свойственен глистным инвазиям, но может появляться в плазме и при некоторых аллергиях (находится в крови в небольшом количестве). Несмотря на вероятность получения ложноположительных реакций, кровь на ИФА часто назначается паразитологами для обнаружения следующих видов паразитов:
- гельминты;
- токсоплазма;
- амебы;
- трихинеллы;
- лямблии;
- простейшие;
- плоские черви.
Глистные инвазии, как и инфекционные возбудители, вызывают выработку антител Е. Рост в крови этого маркера почти всегда указывает на наличие в организме паразитов (при атопических реакциях он остается на прежнем уровне или незначительно повышается).
Паразиты не обязательно располагаются на слизистой кишечника, они могут проникать в ткани почек, сердца и других органов. Если паразитирование в кишечнике легко выявляется наличием в исследуемом кале яиц, личинок или взрослых особей, то поражение других тканей определяется только при помощи иммуноферментной реакции.
Теперь многим стало понятно, что такое ИФА и уже не пугает загадочное лабораторное сокращение. Действительно, исследование назначается не только для подтверждения заболеваний. Некоторые иммуноферментные тесты (сифилис, ВИЧ) входят в обязательную программу медицинского обследования, и получение отрицательного результата служит показателем здоровья. А если тестирование окажется положительным, то и это не повод для паники: чем раньше начнется лечение обнаруженной болезни, тем благоприятнее прогноз.
Источник
