Цитомегаловирус мазок или анализ крови
Вирус герпеса 5 типа – цитомегаловирус (ЦМВ) – поражает клетки головного мозга, слизистую органов дыхания, систему кроветворения, половые и урологические органы, опасен для беременных женщин и развивающегося плода. Обнаружение следов цитомегаловируса в мазке из цервикального канала – надежный способ выявить инфекцию.
Вирус герпеса 5 типа – цитомегаловирус (ЦМВ) – поражает клетки головного мозга, слизистую органов дыхания, систему кроветворения, половые и урологические органы, опасен для беременных женщин и развивающегося плода.
Когда сдают мазок на цитомегаловирус
Если причины воспалительного процесса в урогенитальных органах выявить не удается, пациентке предлагают сдать мазок на ЦМВ. Поводом для обследования являются:
- зуд и жжение в половых путях, сопровождающиеся выделениями;
- воспаление яичников и зева матки;
- выявление бактериальных половых инфекций;
- незащищенная половая близость;
- уже имеющаяся герпесная инфекция;
- присутствие симптомов острых респираторных заболеваний (слабость, повышение температуры, головные боли, увеличение лимфоузлов).
Необходимо обследоваться на цитомегаловирус женщинам, планирующим беременность, и тем, кто вынашивает ребенка, а иногда и после родов. Берут мазок у ВИЧ-инфицированных и онкобольных. Желательно сдать анализ, если герпесом инфицированы члены семьи.
Как подготовиться
Чтобы результат был достоверным, нужно правильно подготовиться к сдаче мазка. Подготовка состоит из 3 этапов:
- За 2 недели прекращается прием противовирусных препаратов.
- В течение 3-4 дней до взятия мазка нельзя выполнять спринцевания, пользоваться тампонами и заниматься сексом.
- В день процедуры не подмываются. Сходить в туалет можно не позже чем за 2 часа до взятия мазка.
Алкоголь, жареная и острая пища, принятые накануне, могут повлиять на результат анализа. Если пациент проходит медикаментозное лечение, которое нельзя прервать, об этом нужно сообщить врачу.
Мазок не берется во время менструации. Лучшее время для процедуры – сразу после окончания кровотечения.
Мазок не берется во время менструации. Лучшее время для процедуры – сразу после окончания кровотечения, а, чтобы результат был достоверным, нужно правильно подготовиться к сдаче мазка.
Расшифровка результатов
Легче всего диагностировать вирус герпеса 5 типа по результатам анализа мазка. Для этого используется метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Эта диагностика определяет наличие ДНК вируса с точностью 99%, даже когда инфекция находится в латентном состоянии, а анализ крови на наличие герпесвируса – отрицательный. Не существует нормы показателей, по которой определяется цитомегаловирус. Результат указывает только на его отсутствие либо наличие (положительный ответ).
Если обнаружен цитомегаловирус в мазке методом ПЦР, нужно определить концентрацию вируса и его состояние (спящий или активный), а также давность инфицирования. Для этого проводится дополнительное исследование на антитела к цитомегаловирусу. С помощью иммуноферментного анализа их можно выделить и в мазке, но по общепринятой практике назначается исследование крови на выявление иммуноглобулинов (антител).
В мазке также определяется число лейкоцитов. Их количество более 15 обозначает, что инфекция могла распространиться из влагалища в матку и яичники.
Цитологическое исследование мазка выявляет цитомегалические клетки, измененные вирусом.
Легче всего диагностировать вирус герпеса 5 типа по результатам анализа мазка. Для этого используется метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Эта диагностика определяет наличие ДНК вируса с точностью 99%.
Чем грозит
От цитомегаловируса избавиться нельзя, но чтобы подавить его активность, лечение необходимо. Патогенный микроорганизм может быть опасен для любого органа, а не только репродуктивной системы. Он вызывает увеличение печени, провоцирует пневмонию, энцефалит.
Цитомегаловирус у женщин, вызывая воспалительный процесс, ведет к изменению слизистого слоя матки (эндометрия). В результате образуются эрозии, создается почва для размножения других микробов: трихомонад, хламидий, гонококков. В маточных трубах возникают спайки, ведущие к бесплодию.
Ослабление иммунитета грозит присоединением папилломавируса, который становится причиной образования остроконечных генитальных бородавок (кондилом).
Цитомегаловирус в мазке при беременности
При планировании беременности показано обследование на цитомегаловирус, потому что он, передаваясь плоду через плаценту, вызывает патологии внутренних органов, а на ранних сроках беременности приводит к выкидышу.
Если обострение инфекции случается на поздних сроках, может произойти заражение ребенка во время родов. Поэтому наличие в анализе антител является показанием для кесарева сечения, которое исключает заражение новорожденного при его прохождении по родовым путям.
Цитомегаловирусная инфекция может вызвать отслоение плаценты, большую кровопотерю при родах (подробнее читайте тут).
Цитомегаловирус в мазке
Цитомегаловирус
Диагностика цитомегаловируса: методы исследования
Как передается цитомегаловирус?
Источник
Очень много людей слышали о таком заболевании как герпес и знают, что оно передаётся при помощи поцелую, но это далёко не всё. Порой герпес может быть смертельно опасен и передаётся он отнюдь не только через поцелуй. В данной статье подробно описаны причины инфицирования цитомегаловирусом, негативные последствия, к которым он приводит, а также способы диагностики, лечения и профилактики.
Что же такое цитомегаловирус?
Цитомегаловирус – это целый род вирусов (бетагерпевирусное подсемейство) герпевирусного семейства. Человеческий бетагерпевирус 5-го типа – один из видов цитомегаловируса – инфицирующий человека вирус, вызывающий цитомегалию.
Цитомегалия или цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) – это заболевание человека, вызванное вирусом бетагерпевиса 5-го типа, известное как герпес-вирус. У человека вирус-герпеса может быть обнаружен на всех участках тела, но чаще всего ассоциируется именно с железами выделяющими слюну. Также цитомегалия может протекать бессимптомно.
Если немного отойти от научных определений и выражаться простым языком, то цитомегаловирус у человека известке как герпес. Чаще всего распространение герпеса ассоциируется со слюной, но транспортировкой может служить любая жидкость, это важно знать. Для своевременного обнаружения герпеса необходимо брать мазок на цитомегаловирус.
Чем опасен герпес
Цитомегаловирус поражает огромное количество органов человека. Поражённые участки:
- головной мозг и его оболочки;
- слизистые ЛОР-органов и носоглотки;
- легкие, бронхиальный тракт, эпителий бронх;
- мочеполовая сфера, эпителий мочевого пузыря, эпителий урогенитальных органов;
- система кроветворения.
Стоит отметить, что 80% людей старше 18 лет являются носителями герпеса. Вирус герпеса находится и, можно сказать, живёт в теле человека. Даже у детей до 7 лет показатели наличия в их организме вируса, вызывающего герпес, порядком 15%.
Большую опасность цитомегаловирус представляет людям с очень слабой иммунной системой, ВИЧ-инфицированным, людям подверженным химиотерапии, лучевой терапии или гормональную терапию. В таких тяжёлых случаях цитомегаловирус может вызывать воспаление лёгких, печени, головного мозга, поражение кишечника, снижение зрения и даже смерть.
Цитомегаловирусная инфекция у беременных
Сам герпес наибольшую опасность представляет именно беременным женщинам. Если вирус поражает женщину в момент беременности, а именно в первый триместр, то с огромной долей вероятности (приблизительно 85%) вирус поражает и плод. Дети при этом могут родиться с сыпью, различными типами везикулитов, задержками роста и развития, нарушением зрения и даже с различными проблемами, связанными с задержкой умственного развития. Именно поэтому очень важно провести обследование на цитомегаловирус до беременности, во время беременности и после беременности.
Передаётся цитомегаловирус беременными женщинам ребёнку через плаценту. Новорождённому же может достаться вирус через инфицированные пути во время родов или через грудное молоко.
Как происходит инфицирование цитомегаловирусом
Цитомегаловирусная инфекция, может передаваться при помощи любых биологических жидкостей человека. Передачей вируса может служить поцелуй, половой контакт, использование одной посуды или столовых приборов. Также передачей вируса герпеса может послужить переливание крови или трансплантация органов.
Содержащие цитомегаловирус биологические жидкости:
- моча;
- слюна;
- грудное молоко;
- вагинальные секреции;
- сперма;
- слёзы;
- кровь.
Когда цитомегаловирус попадает в организм, то организм в этот момент старается побороть его и вырабатывает при этом антитела. В здоровом организме, при нормальной работе иммунной системы цитомегаловирус в дальнейшем переходит в неактивно спящее состояние, но при этом он остаётся в организме человека навсегда.
Из-за такого обширного перечня жидкостей чаще всего диагностировать герпес такого типа можно при помощи днк цитомегаловируса обнаруженного в мазке.
Симптомы цитомегаловируса
Зачастую вирус протекает бессимптомно и только в моменты обострения можно обнаружить небольшие признаки. Симптоматичные признаки напоминающие простуду: периодический озноб, головная боль и боль в мышцах и костях, значительно увеличение температуры. Также при обострении цитомегаловирус может привести к тяжёлым осложнениям, к примеру, вирус может увеличить печень, привести к пневмонии или энцефалиту. Также возможны временные нарушения, такие как уменьшение общей массы тела, кожаные высыпания на лице и слизистых участках, поражение печени или селезёнки.
Общие описания диагностики ЦМВ
У новорожденных детей, чтобы диагностировать общую цитомегаловирусную инфекцию, необходимо сдать на исследования кровь, мочу и слюну по истечению трёх недель после рождения.
У всех остальных пациентов берётся цитомегаловирусный мазок, а также другие биологические жидкости, после чего всё это сдаётся в лабораторию для дальнейшего изучения. Чаще всего берут кровь, мочу, мазок мокроты, грудное молоко. Значительно реже – соскоб из влагалища (уретры) и спинномозговую жидкость.
Лечение патологии вируса герпеса
Поскольку полное излечение человека от цитомегаловируса абсолютно невозможно, то все усилия применяют к ослаблению вируса и погружению его в спящее состояние, где он будет безвредно существовать вместе с человеком. При очень высоком уровне иммунитета у человека ему могут вовсе не назначать лечение. При более слабом уровне иммунитета в медицине принято назначать различные витаминные комплексные препараты, а также иммуностимуляторы. Также людям со слабой иммунной системой рекомендуются длительные прогулки на свежем воздухе, ведение активного образа жизни, а также сбалансированное разнообразное питание.
Важно! Лечение ЦМВ, в обязательном порядке, должно проводиться квалифицированными врачами, так как самостоятельное лечение может негативно сказываться на организме человека и привести к различным осложнениям.
При обострениях ЦМВ врачи зачастую назначают различные антивирусные препараты, предназначенные для подавления цитомегаловируса. Задачей врачей в случаях тяжёлых проявлениях цитомегаловируса – остановить репликацию (высокую активность) вируса. Необходимо обязательно сочетать аномальные нуклеозиды, задача которых – непосредственное уничтожение ЦМВ. Убить все вирусы не получится, так будет существовать доля вирусов, устойчивых к препарату. В критических случаях, где у человека очень высокая температура, множественные высыпания, увеличена печень и обнаружен ряд других симптомов, применяют внутривенные инъекции иммуноглобулинов. Иммуноглобулины – это концентрированные антитела к цитомегаловирусу.
Профилактика ЦМВ
В случаях, когда в мазке обнаружен цитомегаловирус, но при этом иммунная система человека на высоком уровне и цитомегаловирус находиться в латентной или, как принято называть, неактивной форме, не стоит забывать о профилактических мерах. Необходимо помнить, что на ЦМВ представляет наибольшую опасность в самые ранние этапы заражения.
Наибольшую осторожность следует уделять беременным женщинам, особенно, если они не являются носителем цитомегаловируса. Беременным женщинам в обязательном порядке рекомендуется, как минимум на период беременности, отказаться от случайных половых связей. Не стоит бояться каждого нового поцелуя, так как шанс заразиться от одного поцелуя достаточно мал, но всё же не стоит злоупотреблять данным видом контакта. Также не стоит пользоваться чужой посудой.
Больным со слабой иммунной системой, ВИЧ-инфицированным, беременным стоит помнить, что 85% окружающих людей скорее всего заражены цитомегаловирусом, поэтому следует относительно к этому достаточно серьёзно и вести наблюдение у врача.
Что касается других людей, то профилактика ЦМВ сводиться к поддержанию личной гигиены, защите во время половых контактов, использование исключительно персональных туалетных принадлежностей и собственной посуды. Также стоит поддерживать чистоту и порядок в доме.
Огромный вес в профилактических мерах против цитомегаловируса играет работа над улучшением иммунной системы. Важно вести здоровый и активный образ жизни, постоянно давать организму небольшие физические и интеллектуальные нагрузки и много времени проводить на свежем воздухе. Не стоит забывать про разнообразное питание, а также в разные периода года стоит позаботиться о приёме витаминов.
Последним, но немаловажным фактором в профилактике от ЦМВ является регулярная (1 раз в пол года) сдача мазка на цитомегаловирус. Если у вы уже являетесь носителем, то необходимо отлеживать концентрацию вируса и его динамику роста.
Что в конечном итоге нужно знать о цитомегаловирусе
Важно всегда помнить, что цитомегаловирус передаётся через любые биологические жидкости человека. Также можно заразиться им, если использовать чужую посуду или какие-нибудь принадлежности интимной гигиены. По статистическим данным, большинство людей старше 18 лет (приблизительно 85%) являются носителями цитомегаловируса. Вирус зачастую протекает бессимптомно и ожидает падения иммунитета. Большой ущерб и сильные осложнения герпес может причинить беременным женщинам, плоду, больным ВИЧ-заболеваниями, людям со слабым иммунитетом и людям перенёсшим химиотерапию, лучевую терапию или гормональную терапию.
Если вы ощущаете видимые симптомы герпеса, то это прямой сигнал к обращению в больницу. Не стоит пренебрегать обследованием. Вам всего лишь нужно будет сдать кровь, мочу, слюну и мазок из влагалища или уретры. После чего врач порекомендует вам дальнейшие действия.
Также необходимо понимать, что победить цитомегаловирус практически невозможно, поэтому нужно постоянно заботиться о своём здоровье, а именно о иммунной системе. Ведите активный образ жизни с физическими нагрузками и прогулками на свежем воздухе. Питайтесь полезными и разнообразными продуктами. Не пренебрегайте личной гигиеной.
Помните, что с цитомегаловирусом можно прожить спокойную счастливую жизнь и даже ни разу не вспомнить о его наличии.
Источник
Цитомегаловирус (ЦМВ) или вирус герпеса 5 типа, – ДНК-содержащий вирус Cytomegalovirus hominis семейства Herpesviridae подсемейства Betaherpesvirinae. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) человека – хроническая антропонозная болезнь вирусной этиологии, характеризующаяся многообразием форм патологического процесса и клинических проявлений – от латентной инфекции до клинически выраженного генерализованного заболевания. Заболевание ЦМВИ классифицируют в зависимости от сроков и механизмов заражения (врожденная и приобретенная инфекция, пренатальная, интранатальная и постнатальная), степени активности вируса (латентная, персистирующая и реактивированная инфекция), первичного или повторного заражения (острая инфекция, реактивация вируса и реинфекция).
Отличительными особенностями инфекции являются возможность ЦМВ персистировать во многих органах и способность его к инфицированию практически всех клеток организма человека, что предопределяет многообразие клинических проявлений, как при врожденной, так и приобретенной формах инфекции. ЦМВ рассматривается в качестве основного возбудителя внутриутробной инфекции, имеющей самые различные исходы: от инфицирования без реализации инфекции, формирования пороков развития и заболевания новорожденных до гибели плода и мертворождения.
ЦМВИ – типичный антропоноз. Источником инфекции является больной человек либо вирусоноситель. Пути передачи: вертикальный, половой, воздушнокапельный, фекально-оральный, артифициальный (парентеральный). Факторами передачи являются кровь, цервикальный и вагинальный секреты, сперма, женское молоко. Вирус выделяется с мочой, фекалиями, слюной, мокротой, в меньшей степени – со слезной жидкостью. Заражение может происходить также при переливании крови, трансплантации органов и тканей. Цитомегалия — широко распространенная инфекция, среди взрослого населения РФ у 73–98% обнаружены АТ-ЦМВ.
ЦМВИ относится к оппортунистическим инфекциям, особую опасность представляет для больных с иммунодефицитами различной природы. Иммуносупрессия приводит к реактивации латентной инфекции и развитию манифестных вариантов болезни с поражением различных органов и систем, способных привести к летальному исходу. Манифестная ЦМВИ занимает одно из первых мест в структуре оппортунистических заболеваний у ВИЧ-инфицированных пациентов. Данная патология встречается у 20–40% больных СПИДом, не получающих антиретровирусной терапии. Клинически выраженная ЦМВИ — одно из серьезных инфекционных осложнений при трансплантации органов, инфекция обостряет процессы, приводящие к реакции отторжения трансплантата.
При персистенции ЦМВ в организме человека выделяют две стадии, которые сменяют друг друга – продуктивную (с репликацией вируса) и латентную. Выход вируса из латентной стадии означает реактивацию, что может быть предопределено снижением иммунорезистентности либо появлением иных факторов, способствующих его репродукции. Выявление прямых маркеров репликации вируса (виремия, ДНК или АГ) свидетельствует о наличии инфекции.
При первичном заражении на 5–7 день вырабатываются АТ IgM, через 10–14 дней – низкоавидные АТ IgG, затем постепенно авидность этих АТ увеличивается, они становятся высокоавидными. АТ IgM исчезают через один месяц, низкоавидные АТ IgG – через 1–3 месяца, высокоавидные АТ IgG циркулируют в крови носителя пожизненно. При первичном инфицировании в стадии “серологического окна”, до начала синтеза АТ, происходит активная репликация вируса, в этот период единственным маркером инфекции является ДНК вируса в крови. При реактивации возможно появление АТ IgM и/или IgA, а также низкоавидных АТ IgG; в пик реактивации выявляются ДНК либо АГ ЦМВ в плазме крови.
Решающим условием антенатальной ЦМВИ является виремия у матери вследствие первичного или повторного заражением вирусом или его реактивации. ЦМВ способен преодолевать плацентарный барьер и поражать плод в различные сроки беременности, вызывая врожденную инфекцию. По данным различных авторов, активная форма ЦМВИ выявляется у женщин с отягощенным акушерским анамнезом в 35–60% случаев. Входными воротами для вируса в антенатальном и интранатальном периодах течения беременности могут быть плацента и плодные оболочки, в неонатальном периоде и позже – дыхательные пути и пищеварительный тракт, возможно заражение и через кровь.
ЦМВ обладает преимущественно нейротропным, эпителиотропным, гепатотропным и кардиотропным действием на плод. Его воздействие может быть и опосредованным, приводящим к различным нарушениям в плаценте: расстройству маточно- плацентарного кровообращения, отклонению в эволюционном формировании плаценты. Клиническим эквивалентом этих расстройств могут быть сокращение продолжительности беременности и преждевременное родоразрешение, рождение детей с симптомами перенесенной гипоксии или признаками внутриутробной гипотрофии, общая задержка внутриутробного развития.
Наибольшее значение для развития ранних перинатальных поражений плода имеет гематогенный путь инфицирования. Кроме того, для интранатальных и более поздних поражений характерными являются вертикальный и контактный пути передачи ЦМВ, нередки также случаи смешанного инфицирования. Острая ЦМВИ может протекать в виде генерализованной формы с присоединением вторичных инфекций и иметь летальный исход уже в первые недели жизни ребенка. При инфицировании плода во время реактивации латентной ЦМВИ чаще имеют место поздние проявления инфекции в виде нарушений зрения, слуха, задержки психического развития, двигательных нарушений. При отсутствии выраженных иммунологических нарушений острая ЦМВИ переходит в латентную с пожизненным присутствием вируса в организме человека. Развитие иммуносупрессии, в частности связанной с ВИЧ-инфекцией, ведет к возобновлению репликации ЦМВ, появлению вируса в крови и манифестации заболевания. Летальность больных ВИЧ-инфекцией, страдающих ЦМВИ, составляет 25–27%.
Клинический диагноз ЦМВ-инфекции требует обязательного лабораторного подтверждения. Выявление в крови пациента АТ-ЦМВ IgМ и/или IgG недостаточно ни для установления факта активной репликации ЦМВ, ни для подтверждения манифестной формы заболевания.
Показания к обследованию
- Женщины, планирующие беременность;
- женщины с отягощенным акушерским анамнезом (перинатальные потери, рождение ребенка с врожденными пороками развития);
- беременные женщины (в первую очередь имеющие УЗИ-признаки внутриутробной инфекции, лимфоаденопатии, лихорадку, гепатит и гепатоспленомегалию неясного генеза);
- беременные женщины с иммунодефицитом, в т. ч. с ВИЧ-инфекцией;
- матери, родившие ребенка с признаками внутриутробной инфекцией или врожденными пороками развития;
- дети, имеющие симптоматику врожденной инфекции, пороки развития или рожденные женщинами из группы риска по внутриутробной передаче ЦМВ;
- пациенты (в первую очередь новорожденные) с сепсисом, гепатитами, менингоэнцефалитом, пневмонией, поражением ЖКТ;
- пациенты с наличием иммунодефицита с клинической картиной органных или генерализованных поражений.
Дифференциальная диагностика
- Врожденная ЦМВИ – краснуха, токсоплазмоз, неонатальный герпес, сифилис, бактериальная инфекция, гемолитическая болезнь новорожденных, родовая травма, наследственные синдромы;
- мононуклеозоподобное заболевание – инфекции, вызываемые вирусом Эпштейна-Барр, герпес-вирусами 6 и 7 типов, острая ВИЧ-инфекция, стрептококковый тонзиллит, дебют острого лейкоза;
- заболевание органов дыхания у детей раннего возраста – коклюш, бактериальный трахеит или трахеобронхит, РС-вирусной инфекция, герпетический трахеобронхит;
- у больных с иммунодефицитом – пневмоцистная пневмония, туберкулез, токсоплазмоз, микоплазменная пневмония, грибковые и герпетические инфекции, бактериальный сепсис, лимфопролиферативные заболевания, ВИЧ-энцефалит, нейросифилис, прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия;
- полинейропатия и полирадикулопатия – полирадикулопатия, вызванная герпесвирусами 2 и 6 типов, синдром Гийена-Барре, токсическая полинейропатия, связанная с приемом лекарственных средств, алкоголя, наркотических психотропных веществ.
Этиологическая лабораторная диагностика включает микроскопические исследования, выявление возбудителя в культуре клеток, обнаружение АГ или ДНК, определение АТ IgM, IgА, IgG, авидности АТ IgG.
Материал для исследования
- Кровь (сыворотка, плазма), лейкоциты крови, моча, слюна, СМЖ – культуральные исследования, выявление ДНК;
- пуповинная кровь, амниотическая жидкость – выявление ДНК;
- слюна, моча – выявление АГ;
- сыворотка/плазма крови – определение АТ.
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Использование метода ПЦР позволяет определить наличие ДНК вируса в тканях и биологических жидкостях. Исследование обладает высокой специфичностью (100%) и чувствительностью (85–100%). ДНК ЦМВ может быть выявлено и при латентной ЦМВИ, указывая на продолжающуюся репликацию вируса даже при полном отсутствии клинических симптомов болезни. Использование ПЦР в реальном времени позволяет определить уровень виремии («вирусную нагрузку») в крови и СМЖ.
Выделение вируса из лейкоцитов крови, мочи, слюны, ликвора, спермы и др. в культуре клеток долгое время называли «золотым стандартом» в диагностике ЦМВИ. В настоящее время, с появлением высокочувствительных и специфичных молекулярно-биологических методов, вирусологические исследования уже не занимают главного места в лабораторной диагностике ЦМВИ. Это обусловлено как особенностями вируса – на результат культивирования влияет неустойчивость ЦМВ к изменению температуры и замораживанию, так и необходимостью выполнения исследований в специально оборудованной вирусологической лаборатории, которыми обычно не располагают лечебно-профилактические учреждения. Кроме того, вирусологическое исследование не позволяет отличить первичное инфицирование от рецидивирующей формы ЦМВИ, особенно при бессимптомном течении. Некоторые лаборатории используют “быстрый культуральный метод” с предварительным внесением биоматериала в культуру фибробластов и выявлением цитопатического действия ЦМВ при применении РИФ.
Для обнаружения АГ вируса в слюне и моче используют метод РИФ, по количеству светящихся клеток можно приблизительно оценить интенсивность выделения вируса. В связи с персистенцией ЦМВ обнаружение АГ не указывает на активность инфекционного процесса, для ее оценки требуются дополнительные исследования – выявление отдельных АГ вируса (р55, рр65 и др.).
При проведении микроскопического исследования (световая микроскопия) основными морфологическими признаками ЦМВИ являются гигантские клетки с внутриядерными включениями (цитомегалы). Их можно обнаружить в эпителии почечных канальцев, желчных протоках, выводных протоках слюнных желез, поджелудочной железы, ткани легких, клетках глии, нейронах, эндотелиоцитах. Наличие таких клеток указывает на репродукцию вируса, однако они обнаруживаются не во всех случаях активной инфекции. Диагностическая чувствительность метода не превышает 50%.
Для определения АТ-ЦМВ обычно используют метод ИФА. Наличие АТ IgM свидетельствует в пользу острой инфекции или реактивации. Реактивация гораздо чаще сопровождается гиперпродукцией АТ IgА, чем IgM. Выявление АТ IgG имеет низкое диагностическое значение. Диагностическую ценность теста повышает определение авидности АТ IgG: выявление низкоавидных АТ IgG свидетельствует о текущей или недавно перенесенной ЦМВИ, снижение индекса авидности возможно и при реактивации. Обнаружение высокоавидных АТ позволяет исключить первичную инфекцию, однако реактивация может протекать при наличии высокоавидных АТ, что подтверждается обнаружением ЦМВ, его АГ («ранних белков») или ДНК, а также выявлением АТ IgА.
Определение специфических АТ к вирусу помогает в распознавании заражения человека ЦМВ, но ввиду длительного периода нарастания титра АТ от момента инфицирования, последующего долгого сохранения их в крови, трансплацентарного перехода АТ IgG от матери к плоду (выявляются у ребенка до 1,5 лет) диагностическая ценность исследования ограничена. При наблюдении в динамике (2–4 недели) повышение титра АТ IgG в 4 раза указывает на активную ЦМВИ. Однако необходимость длительного периода наблюдения (до 4 недель) и возможность сохранения повышенного титра АТ на протяжении ряда лет лимитирует использование такого подхода к диагностике.
Дополнительным исследованием при поражении мозга, вызванного ЦМВ, может быть параллельное обнаружение АТ IgG в периферической крови и СМЖ методом ИФА с последующим расчетом их соотношения. Значение соотношения позволяет выявить интратекальную продукцию АТ и соответственно вовлечение в инфекционный процесс ЦНС.
Иммуноблот позволяет детектировать АТ IgM и IgG к отдельным белкам ЦМВ, подтвердить специфичность исследования, следить в динамике за появлением и исчезновением отдельных белков, что имеет высокое диагностическое и прогностическое значение. Наличие АТ к отдельным АГ вируса подтверждает формирование иммунного ответа к ЦМВ.
Показания к применению различных лабораторных исследований и интерпретация их результатов у разных категорий обследуемых
Диагностика первичного заражения, в т. ч. в период беременности, возможна только у пациентов, в крови которых отсутствуют АТ-ЦМВ. Независимо от клинических вариантов заболевания, при первичной ЦМВИ выявляются прямые (присутствие вируса, его ДНК или АГ) и косвенные (АТ-ЦМВ) лабораторные маркеры активной репликации ЦМВ. При обследовании больных при подозрении на активную ЦМВИ и манифестную форму заболевания (ЦМВ-болезнь) необходимо количественное определение содержания ДНК ЦМВ в крови. Определение ДНК ЦМВ в ликворе, плевральной жидкости, БАЛЖ, биоптатах бронхов, биоптатов органов выполняют при наличии соответствующей органной патологии.
Выявление прямых маркеров репликации вируса (виремия, ДНК или АГ) свидетельствует о наличии инфекции. Выявление ДНК ЦМВ или АГ вируса в крови беременной женщины – основной маркер высокого риска заражения плода и развития врожденной ЦМВИ.
Отсутствие АТ-ЦМВ IgM, IgА и IgG означает отсутствие ЦМВ в организме. Однако у лиц с выраженным иммунодефицитом при активной репликации ЦМВ продукция специфических АТ может быть снижена до неопределяемого уровня.
Выявление АТ-ЦМВ разных классов позволяет определить фазы инфекционного процесса (репликативная или латентная). АТ IgM чаще оценивают как маркер первичной герпес-вирусной инфекции. При выявлении АТ IgM для подтверждения инфицирования ЦМВ рекомендуются дополнительные исследования: определение АТ IgА или авидности АТ IgG, выявление АТ к отдельным белкам с использованием иммуноблота; повторное обследование женщины или ребенка через 2 недели. Выявление АТ IgА и(или) низкоавидных АТ IgG подтверждает наличие инфекции. При повторном выявлении АТ IgM и отсутствии IgА и(или) низкоавидных IgG результат выявления АТ IgM считают ложноположительным.
Выявление АТ IgM и IgG к предранним белкам-антигенам и низкоавидных АТ IgG свидетельствует о первичном инфекционном процессе.
Обнаружение только АТ IgG не позволяет охарактеризовать период заболевания. При наличии иммуносупрессии классического (4-х кратного) увеличения АТ IgG во время рецидива не наблюдают.
Установление факта инфицирования плода осуществляется на основании обнаружения ДНК ЦМВ. Выбор биологического материала определяется с учетом срока гестации, обусловливающего возможность проведения того или иного метода инвазивной пренатальной диагностики: амниотическая жидкость – 16–23 недели, пуповинная кровь – 20–24 недели. Косвенным подтверждением факта инфицирования плода является обнаружение АТ IgM и/или АТ IgА в пуповинной крови (проведение исследования возможно с 22 недели беременности).
Лабораторная диагностика врожденной ЦМВИ основана на обнаружении ЦМВ, его ДНК или АГ в различном биологическом материале (периферическая кровь, моча, слюна, смывы и мазки от ротоглотки, СМЖ) и выявлении в сыворотке или плазме крови АТ IgМ и IgА в течение первых 7 дней после рождения. Проведение исследования в более поздние сроки не позволяет дифференцировать врожденную и приобретенную инфекцию. Выявление ДНК ЦМВ или АГ вируса в крови, моче, соскобах со слизистой ротовой полости через 4–6 недель жизни ребенка при отсутствии вируса в первые 2 недели говорит об интранатальном или раннем постанатальном заражении. Подтверждением манифестной ЦМВИ у детей первых месяцев жизни является наличие ДНК ЦМВ в крови.
При сомнительных результатах дополнительную диагностическую информацию может дать выявление АТ IgМ к отдельным белкам-антигенам вируса методом иммуноблота. Отсутствие АТ-ЦМВ у детей с врожденной ЦМВИ может быть связано с развитием иммунологической толерантности к АГ вируса цитомегалии (инфицирование ЦМВ не сопровождается эффективным синтезом АТ-ЦМВ).
При обследовании детей в постнеонатальном возрасте показано выявление возбудителя (классический или модифицированный вирусологический метод), его ДНК или АГ («ранних белков») и АТ IgМ и IgА. Выявление анти-ЦМВ IgМ у детей первых недель жизни считают критерием внутриутробного заражения вирусом. Недостатком определения АТ IgМ служит их частое отсутствие в крови при наличии активного инфекционного процесса и не менее частые ложноположительные результаты. При обследовании детей в возрасте до 4–6 месяцев жизни целесообразно одновременное определение АТ у ребенка и матери с последующим сопоставлением величины их уровня (титра) и характера авидности. При обследовании ребенка в возрасте старше 6 месяцев может быть исследована только кровь ребенка. Для исключения ЦМВИ у детей первого года жизни рекомендуется определение ДНК или АГ в моче.
Выявление АТ IgG в сыворотке крови новорожденного без сопоставления с уровнем АТ в крови матери не является диагностически значимым вследствие возможности их трансплацентарного переноса из материнского организма. Только при динамическом (с интервалом в 14–21 день) сравнении уровня АТ IgG новорожденного ребенка с уровнем АТ IgG в крови матери можно судить об их природе. Если титры АТ IgG у ребенка при рождении равны материнским, а при повторном исследовании через 3–4 недели снижаются приблизительно в 1,5–2 раза, то АТ, выявленные у ребенка, являются материнскими.
Скрининг беременных женщин – выявление АТ IgМ и низкоавидных АТ IgG. Для исключения реактивации целесообразно определение АТ IgА и низкоавидных АТ IgG.
Обследование больных с наличием иммунодефицита при подозрении на активную ЦМВИ и манифестную форму заболевания (ЦМВ-болезнь) включает гистологическое исследование биопсийных материалов для выявление цитомегалов (окраска гематоксилином и эозином), обнаружение ДНК ЦМВ в ликворе, плевральной жидкости, БАЛ, биоптатах бронхов, биоптатов внутренних органов при наличии соответствующей органной патологии; выявление АГ ЦМВ в крови, определение концентрации ДНК ЦМВ в крови методом ПЦР. В диагностике ЦМВИ у ВИЧинфицированных наиболее информативно наличие в крови ДНК ЦМВ в высокой концентрации (в плазме крови >100