Что такое микроскопия в клиническом анализе крови

Микроскопия мазка крови – исследование под микроскопом препарата, приготовленного из капли крови.

Выполнение микроскопии мазка крови является опциональной частью общего анализа крови или лейкоцитарной формулы и отдельно не производится.

Синонимы русские

Микроскопическое исследование мазка крови, мазок крови, микроскопия крови, ручной подсчет лейкоцитарной формулы, мазок периферической крови.

Синонимы английские

Blood Smear, Peripheral smear, Manual differential, Red blood cell morphology, White Blood cell morphology, Peripheral blood smear, Blood Film Examination, Blood Film

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную или капиллярную кровь.

Общая информация об исследовании

Исследование позволяет морфологически оценить клетки (форменные элементы) крови, а также выполнить их подсчет. Клетки крови образуются и созревают в красном костном мозге и затем выбрасываются в общий кровоток. У каждой разновидности клеток свои функции. В физиологических условиях количество и морфологические признаки клеток крови стабильны и не выходят за рамки референсных значений. При различных заболеваниях количество и свойства (форма, объем, цвет, наличие включений, их количество и пр.) закономерно изменяется. По этой причине оценка клеточных элементов в мазке крови является универсальным тестом при диагностике многих патологических состояний и широко применяется в практике врача практически любой специализации.

Мазок периферической крови – это «моментальный снимок» клеток крови в том виде, в каком они находятся в момент взятия образца. Для выполнения исследования венозную или капиллярную кровь помещают на предметное стекло, которое должно быть тщательно обезжирено. Затем другое стекло ставят на предметное стекло под углом 45′ и проводят вдоль капли крови так, чтобы она растеклась тонким слоем по ширине шлифованного стекла. Затем мазок фиксируют, чтобы форменные элементы крови были более устойчивы. После этого мазок окрашивают специальным красителем, который делает клетки и их элементы более яркими, и высушивают. После чего врач в лаборатории изучает мазок под микроскопом.

Для чего используется исследование?

Пока не появились автоматические анализаторы, каждый раз, когда выполнялся общий анализ крови, проводилось микроскопическое исследование мазка крови, так как определить процентное соотношение различных форм лейкоцитов (лейкоцитарную формулу) по-другому было нельзя. В современных анализаторах подсчет лейкоцитарной формулы осуществляется автоматически. Однако при подозрении на наличие патологических форменных элементов крови микроскопия мазка крови опытным врачом по-прежнему является лучшим способом выявления и оценки атипичных и незрелых клеток.

Когда назначается исследование?

Существует достаточно широкий круг заболеваний и расстройств, при которых могут изменяться свойства клеток, циркулирующих в кровяном русле. В норме в кровь из костного мозга попадают только зрелые клетки, однако при ряде заболеваний, например при лейкозах, в кровь могут попадать незрелые клетки – бласты. При некоторых состояниях, например при массивной инфекции, в лейкоцитах могут появляться характерные примеси, сами клетки могут становиться атипичными, как при инфекционном мононуклеозе. Обнаружение в мазке патологических клеток в большом количестве позволяет заподозрить вызвавшее их заболевание и назначить дополнительное обследование.

Мазок крови может регулярно назначаться пациентам с онкологическими заболеваниями костного мозга, лимфоузлов для наблюдения за динамикой состояния и контроля за эффективностью лечения.

Что означают результаты?

Референсные значения

Нейтрофилы — палочк.: 0 — 5 %.

Нейтрофилы — сегмент.

Возраст	Референсные значения
До 1 года	16 — 45 %
1-2 года	28 — 48 %
2-5 лет	32 — 55 %
5-7 лет	38 — 58 %
7-8 лет	41 — 60 %
8-12 лет	43 — 60 %
12-16 лет	45 — 60 %
Больше 16 лет	47 — 72 %

Лимфоциты, %

Возраст	Референсные значения
До 1 года	45 — 75 %
1-2 года	37 — 60 %
2-4 года	33 — 55 %
4-6 лет	33 — 50 %
6-8 лет	30 — 50 %
8-10 лет	30 — 46 %
10-16 лет	40 — 45 %
Больше 16 лет	19 — 37 %

Моноциты, %

Возраст	Референсные значения
До 1 года	4 — 10 %
1-2 года	3 — 10 %
Больше 2 лет	3 — 12 %

Эозинофилы, %

Возраст	Референсные значения
До 1 года	1 — 6 %
1-2 года	1 — 7 %
2-4 года	1 — 6 %
Больше 4 лет	1 — 5 %

Базофилы, %: 0 — 1 %.

Причины изменения показателей

Изменения в мазке крови не всегда позволяют поставить диагноз. Как правило, они указывает на наличие некоего заболевания, что предполагает дальнейшее обследование в целях постановки точного диагноза.

Также рекомендуется

Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)
Гематокрит
Эритроцитарные индексы
Ретикулоциты
Эритропоэтин
Эритроциты
Гемоглобин

Кто назначает исследование?

Врач общего профиля, терапевт, хирург, инфекционист, гематолог.

Источник

Клинический анализ крови означает подсчет количества клеток в образце венозной крови. Капиллярная кровь не является рекомендуемой средой исследования для подсчета клеток, однако исследование гемограммы часто выполняют из образца капиллярной крови в отделениях интенсивной терапии.

Определение лейкоцитарной формулы, исследование среднего размера эритроцитов, тромбоцитов, определение количества предшественников эритроцитов (ретикулоцитов) и степени их зрелости, оценка скорости оседания эритроцитов и т.д., все это входит в понятие «клинический анализ крови».

Клинический анализ крови выполняется как первое скрининговое исследование при обращении и жалобах пациента на недомогание. Может быть выполнен сокращенный клинический анализ крови, так называемая «тройка» – подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов и определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Сокращенный клинический анализ крови малоинформативен, т.к. может охарактеризовать только выраженные патологические процессы.

Более целесообразно из того же объема образца крови выполнить развернутую гемограмму: подсчет количества эритроцитов с оценкой их среднего размера (MCV), подсчет общего количества лейкоцитов и оценку лейкоцитарной формулы (подсчет нейтрофилов, базофилов, эозинофилов, моноцитов, лимфоцитов), подсчет количества тромбоцитов и оценку среднего размера тромбоцита (MPV), ретикулоцитов и их среднего размера (MRV), степени зрелости ретикулоцитов (IRF).

Многочисленные характеристики клеток в настоящее время могут быть получены в автоматическом режиме в течение 3-5 минут после взятия крови. На основании развернутого исследования гемограммы может быть сделано не только заключение о наличии воспалительной реакции, анемии, но и характере других патологических процессов, возможной перенесенной или продолжающейся кровопотере, дефиците не только железа, но и витамина В12, фолиевой кислоты.

Показания к исследованию

Скрининговое обследование при профилактическом осмотре, диспансеризации;
первичное обследование при госпитализации;
диагностика анемий;
диагностика болезней системы кроветворения;
инфекционные заболевания;
воспалительные процессы;
гемато-онкологические заболевания;
контроль эффективности терапии.

Метод исследования

Метод исследования зависит от требуемых параметров гемограммы.

В ручном режиме, из образца крови (3–5 мл) часть отбирается в капилляр для определения СОЭ, часть образца крови используется для определения гемоглобина, капля крови – для приготовления мазка и дальнейшего подсчета лейкоцитарной формулы. Отдельное количество крови требуется для приготовления мазка и подсчета тромбоцитов, а также часть образца крови необходима для исследования количества эритроцитов и отдельно – ретикулоцитов. В ручном режиме, при необходимости окраски и визуальной оценки мазка, результат развернутой гемограммы пациента в многокоечном стационаре, может быть получен в конце рабочего дня или позднее.

В условиях автоматизированного подсчета клеток и оценки различных популяций требуется от 150 до 300 мкл крови и 100 мкл для определения СОЭ. Исследование в автоматическом режиме основано на импедансном методе Культера (1956), в основе которого лежит принцип замыкания электрической цепи каждой клеткой, последовательно проходящей через апертуру пробоотборника. В последующем метод автоматизированного подсчета получил ряд усовершенствований, в современных анализаторах каждая клетка оценивается по нескольким параметрам: проводимости, светорассеиванию, размеру, наличию на поверхности CD-маркеров, соответственно, принадлежности к различным популяциям. Количество параметров определяется моделью прибора.

Исследование в автоматическом режиме позволяет выявить патологические образцы, которые должны быть пересмотрены визуально специалистом лабораторной диагностики. Визуальный контроль гемограммы предполагает приготовления мазка крови, слайда, что может быть выполнено из капли крови уже взятого образца как в ручном, так и автоматическом режиме. Автоматизированное приготовление мазка крови предпочтительно, т.к. происходит равномерное распределение капли крови и стандартизированное окрашивание. Визуальная микроскопия мазка проводится в пяти полях зрения.

Исследование крови в автоматическом режиме занимает 3–5 минут, если не требуется дополнительное приготовление мазка и исследование СОЭ.

Условия взятия и хранения образца

Клинический анализ крови выполняется из венозной крови, стабилизированной калиевой солью ЭДТА, если не указано иначе в инструкции к анализатору. Взятие крови выполняется натощак. Образец крови должен быть немедленно после взятия перемешан 9 раз осторожным переворачиванием, следует избегать образования пены и резкого встряхивания. До исследования образец крови может храниться при комнатной температуре (23–24 °С) в течение 24 часов в штативе, в вертикальном положении, в удаленном от света месте.

При использовании образца капиллярной крови для клинического анализа необходимо получить свободнотекущие капли капиллярной крови из предварительно прогретой области прокола. Сбор капиллярной крови без сдавливания пальца обеспечивает сохранность клеток. Надавливание области прокола и сбор образца из охлажденной конечности приведут к искажению результатов гемограммы. Образцы капиллярной крови должны быть стабилизированы калиевой солью ЭДТА, поэтому для взятия образца следует использовать капилляры, обработанные K3ЭДТА. Образцы могут храниться при комнатной температуре (23–24 °С) в течение 24 ч в штативе, в вертикальном положении, в удаленном от света месте.

Источник

Развернутое исследование качественного и количественного состава крови, в ходе которого дается характеристика эритроцитов и их специфических показателей (MCV, MCH, MCHC, RDW), лейкоцитов и их разновидностей в процентном соотношении (лейкоцитарная формула) и тромбоцитов.

В составе анализа всегда выполняется микроскопия лейкоцитарной формулы.

Синонимы английские

Complete blood count (CBC) with differential.

Метод исследования

SLS (натрий лаурил сульфат) — метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную, капиллярную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
Не принимать пищу в течение 8 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 30 минут до исследования.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой – это один из наиболее часто выполняемых анализов в медицинской практике. Сегодня это исследование автоматизировано и позволяет получить подробную информацию о количестве и качестве клеток крови: эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов. С практической точки зрения врачу в первую очередь следует сосредоточить свое внимание на следующих параметрах этого анализа:

Hb (hemoglobin) – гемоглобин;
MCV (mean corpuscular volume) – средний объем эритроцита;
RDW (RBC distribution width) – распределение эритроцитов по объему;
общее количество эритроцитов;
общее количество тромбоцитов;
общее количество лейкоцитов;
лейкоцитарная формула – процентное соотношение разных лейкоцитов: нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов, эозинофилов и базофилов.

Определение этих параметров позволяет диагностировать такие состояния, как анемия/полицитемия, тромбоцитопения/тромбоцитоз и лейкопения/лейкоцитоз, которые могут как являться симптомами какого-либо заболевания, так и выступать в качестве самостоятельных патологий.

При интерпретации анализа следует учитывать следующие особенности:

У 5% здоровых людей показатели анализа крови отклоняются от принятых референсных значений. С другой стороны, у пациента может быть выявлено значительное отклонение от его обычных показателей, которые при этом сохраняются в пределах принятых норм. По этой причине результаты теста должны интерпретироваться в контексте индивидуальных обычных показателей каждого конкретного человека.
Показатели крови зависят от расы и пола. Так, у женщин количество и качественные характеристики эритроцитов ниже, а количество тромбоцитов выше, чем у мужчин. Для сравнения: мужчины – Hb 12,7-17,0 г/дл, эритроциты 4,0-5,6×1012/л, тромбоциты 143-332×109/л, женщины – Hb 11,6-15,6 г/дл, эритроциты 3,8-5,2×1012/л, тромбоциты 169-358×109/л. Кроме того, гемоглобин, нейтрофилы и тромбоциты ниже у темнокожих людей, чем у людей белой расы.

Для чего используется исследование?

Для диагностики и контроля лечения многих заболеваний.

Когда назначается исследование?

Во время профилактического осмотра;
при наличии у пациента жалоб или симптомов какого-либо заболевания.

Что означают результаты?

Интерпретация анализа:

Анемия

Снижение гемоглобина и/или эритроцитов свидетельствует о наличии анемии. С помощью показателя MCV можно провести первичную дифференциальную диагностику анемий:

MCV менее 80 fl (микроцитарная анемия). Причины:
1. железодефицитная анемия;
2. талассемия;
3. анемия хронического заболевания;
4. сидеробластическая анемия.

Учитывая, что самой частой причиной микроцитарной анемии является дефицит железа, при выявлении микроцитарной анемии рекомендуется определение концентрации ферритина, а также железа сыворотки и общей железосвязывающей способности сыворотки. Рекомендуется обратить внимание на показатель RDW (увеличен только при железодефицитной анемии) и количество тромбоцитов (часто увеличено при железодефицитной анемии).

MCV 80-100 fl (нормоцитарная анемия). Причины:
1. кровотечение;
2. анемия при хронической почечной недостаточности — ХПН;
3. гемолиз;
4. анемия при недостаточности железа или витамина B12.

Для исключения скрытого кровотечения рекомендуется анализ кала на скрытую кровь. Для исключения дефицита железа или витамина B12 как причины нормоцитарной анемии – определение железа и витамина B12 в крови. Для исключения ХПН проводят анализы на креатинин и мочевину крови. Для исключения гемолитической анемии – анализы на гаптоглобин, ЛДГ, непрямой билирубин и ретикулоциты.

MCV более 100 fl (макроцитарная анемия). Причины:
1. злоупотребление алкоголем;
2. лекарственные препараты (гидроксимочевина, зидовудин);
3. дефицит витамина B12 и фолиевой кислоты.

Выраженный макроцитоз (MCV более 110 fl), как правило, указывает на первичное заболевание костного мозга.

Для исключения дефицита витамина B12 как причины макроцитарной анемии проводят анализ на гомоцистеин и витамин B12.

Тромбоцитопения

Причины:

тромбоцитопеническая пурпура / гемолитико-уремический синдром;
ДВС-синдром (диссеминированное внутрисосудистое свертывание);
лекарственная тромбоцитопения (ко-тримоксазол, прокаинамид, тиазидовые диуретики, гепарин);
гиперспленизм;
идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура.

Для дифференциальной диагностики заболеваний, протекающих с тромбоцитопенией, также могут потребоваться коагулограмма, анализ на ВИЧ-инфекцию, антинуклеарные антитела и электрофорез белков крови.

Следует помнить, что у беременных женщин в норме тромбоциты могут снижаться до 75-150×109/л.

Лейкопения

Для дифференциальной диагностики лейкопений имеет значение как абсолютное количество каждого из 5 основных ростков лейкоцитов, так и их процентное соотношение (лейкоцитарная формула).

Нейтропения. Снижение нейтрофилов менее 0,5×109/л – тяжелая нейтропения. Причины:

врождённый агранулоцитоз (синдром Костманна);
лекарственная нейтропения (карбамазепин, пенициллины, клозапин и другие);
инфекции (сепсис, вирусная инфекция);
аутоиммунная нейтропения (СКВ, синдром Фелти).

Лимфопения. Причины:

туберкулез.
ХПН;
аутоиммунная лимфопения (СКВ, ревматоидный артрит, саркоидоз);
вирусная инфекция (ВИЧ);
лекарственная лимфопения (глюкокортикостероиды, моноклональные антитела);
приобретенный вариабельный иммунодефицит;
врождённая лимфопения (агаммаглобулинемия Брутона, тяжелый комбинированный иммунодефицит, синдром ди Джорджи);

Полицитемия

Увеличение концентрации Hb и/или Ht и/или количества эритроцитов:

истинная полицитемия – миелопролиферативное заболевание; в анализе крови кроме эритроцитоза наблюдается тромбоцитоз и лейкоцитоз;
относительная полицитемия (компенсаторный ответ костного мозга на гипоксию при ХОБЛ или ИБС; избыток эритропоэтина при почечно-клеточной карциноме).

Для дифференциальной диагностики полицитемии рекомендуется исследование уровня эритропоэтина.

Тромбоцитоз

Причины:

первичный тромбоцитоз (злокачественное заболевание миелоидного ростка костного мозга, в том числе эссенциальный тромбоцитоз и хронический миелолейкоз);
вторичный тромбоцитоз после удаления селезенки, при инфекционном процессе, железодефицитной анемии, гемолизе, травме и злокачественных заболеваниях (реактивный тромбоцитоз).

Повышение Hb, MCV или общего количества лейкоцитов свидетельствует в пользу первичного тромбоцитоза. Степень тромбоцитоза, как правило, не позволяет провести дифференциальную диагностику первичного и вторичного тромбоцитоза, так как даже очень значительное повышение тромбоцитов (более 1000×109л) может наблюдаться и при реактивном тромбоцитозе. Также могут быть рекомендованы дополнительные анализы: ферритин крови и С-реактивный белок.

Лейкоцитоз

Первым шагом при интерпретации лейкоцитоза является оценка лейкоцитарной формулы. Лейкоцитоз может быть обусловлен избытком незрелых лейкоцитов (бластов) при остром лейкозе или зрелых, дифференцированных лейкоцитов (гранулоцитоз, моноцитоз, лимфоцитоз).

Гранулоцитоз – нейтрофилия. Причины:

лейкемоидная реакция (реактивная нейтрофилия при наличии инфекции, воспаления, применения некоторых лекарственных средств);
миелопролиферативное заболевание (например, хронический миелолейкоз).

Повышение процента палочкоядерных нейтрофилов более 6% свидетельствует о наличии инфекции, но также может наблюдаться при хроническом миелолейкозе и других миелопролиферативных заболеваниях.

Гранулоцитоз – эозинофилия. Причины:

первичная эозинофилия (гиперэозинофильный миелопролиферативный синдром);
вторичная эозинофилия (паразитозы, гельминтозы, аллергия, васкулиты, лимфома).

Дополнительные тесты зависят от особенностей анамнеза и истории заболевания, но по меньшей мере должны включать анализ кала на яйца гельминтов.

Гранулоцитоз – базофилия. Причины:

хронический базофильный лейкоз.

Моноцитоз. Причины:

миелопролиферативное заболевание, например ХМЛ;
реактивный моноцитоз (хронические инфекции, гранулематозное воспаление, лучевая терапия, лимфома).

Лимфоцитоз. Причины:

реактивный лимфоцитоз (вирусная инфекция); рекомендуется проведение специфических для вирусов лабораторных тестов;
лимфолейкоз (острый и хронический).

Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой – это скрининговый метод, с помощью которого можно предварительно оценить состояние функции костного мозга и заподозрить или исключить многие заболевания. Этот анализ, однако, не всегда позволяет установить причину изменений, при выявлении которых, как правило, требуются дополнительные лабораторные, в том числе патоморфологические и гистохимические исследования. Наиболее точная информация может быть получена при динамическом наблюдении изменений показателей крови.

Важные замечания

Результаты теста должны интерпретироваться в контексте индивидуальных обычных показателей каждого конкретного человека;
наиболее точная информация может быть получена при динамическом наблюдении изменений показателей крови;
результаты теста следует интерпретировать с учетом всех анамнестических, клинических и других лабораторных данных.

Также рекомендуется

[02-006] Общий анализ мочи с микроскопией осадка

[40-063] Клинический и биохимический анализ крови — основные показатели

Кто назначает исследование?

Терапевт, хирург, гинеколог, педиатр, врач общей практики.

Литература

Jolobe OM. How to interpret and pursue an abnormal complete blood cell count in adults. Mayo Clin Proc. 2005 Oct;80(10):1389-90; author reply 1390, 1392.
McPhee S.J., Papadakis M. CURRENT Medical Diagnosis and Treatment / S. J. McPhee, M. Papadakis; 49 ed. – McGraw-Hill Medical, 2009.

Источник