Бланк анализа крови на малярию
МУК 4.2.3222-14
Лабораторная диагностика малярии и бабезиозов
Обозначение: | МУК 4.2.3222-14 |
Обозначение англ: | MUK 4.2.3222-14 |
Статус: | взамен |
Название рус.: | Лабораторная диагностика малярии и бабезиозов |
Дата добавления в базу: | 05.05.2017 |
Дата актуализации: | 01.02.2020 |
Область применения: | Методические указания регулируют порядок применения метода отбора проб и методов лабораторных исследований биологического материала людей с целью обнаружения возбудителей малярии и бабезиозов, определения их видовой принадлежности, и носят рекомендательный характер. Методические указания предназначены для специалистов паразитологических, микробиологических лабораторий Роспотребнадзора, медицинских организаций, индивидуальных предпринимателей, а также научно-исследовательских институтов, осуществляющих лабораторную диагностику малярии и бабезиозов. |
Оглавление: | 1. Область применения 2. Общие положения 3. Методы лабораторной диагностики малярии и бабезиозов 4. Техника паразитологической (микроскопической) диагностики малярии и бабезиозов 4.1. Подготовка предметных стекол 4.2. Приготовление и хранение реактивов 4.3. Взятие проб крови для исследования на малярию 4.4. Приготовление препаратов крови, их маркировка и фиксация 4.5. Окраска препаратов крови 4.6. Микроскопия окрашенных препаратов крови 5. Микроскопическая диагностика возбудителей малярии и бабезиозов 5.1. Морфологические признаки возбудителей малярии 5.2. Алгоритм просмотра препаратов крови на малярию 5.3. Изменения морфологии паразита и пораженных эритроцитов, возникающие в процессе приготовления и окраски препаратов крови 5.4. Изменения морфологии паразита, связанные с воздействием химиотерапевтических препаратов 5.5. Источники диагностических ошибок 5.6. Оценка интенсивности паразитемии 5.7. Учет результатов исследования и оформление ответа 5.8. Порядок исследования препаратов крови, контроля и направления результатов на подтверждение 5.9. Паразитологический контроль за эффективностью лечения 5.10. Морфологические признаки возбудителей бабезиозов 6. Иммунохроматография в лабораторной диагностике (экспресс-тесты). 7. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) Приложение 1. Необходимые реактивы и оборудование Приложение 2. Возбудители паразитозов под воздействием противомалярийных препаратов в тонких мазках и толстых каплях Приложение 3. Элементы крови, контаминанты и образования, симулирующие малярийных паразитов Приложение 4. Приготовление толстой капли на плёнке для создания учебных коллекций по А. Е. Беляеву (1981) |
Разработан: | Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Управление Роспотребнадзора по г. Москве ФБУЗ Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора ГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования Минздрава России ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Научно-исследовательский институт медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И. Марциновского ГБОУ ДПО РМАПО Инфекционная клиническая больница № 2 города Москвы |
Утверждён: | 22.09.2014 Главный государственный санитарный врач Российской Федерации |
Издан: | Роспотребнадзор (2015 г. ) |
Расположен в: | |
Заменяет собой: |
|
Источник
Бланк направление на малярию
Поиск формы по наименованию:
Поиск формы по содержанию:
Бланки
Формы бланков подготовлены в формате Word и полностью готовы к распечатке на бумаге А4 формата, реже А3 формат.
Если бланк имеет размер А5 формата, то в основном макет будет содержать два бланка на листе А4 формата. Соответственно бланк А6 формата, имеет повторение 4 раза на листе А4 формата. В некоторых случаях будет не стандартное расположение, например 3, 6 или 8 бланков на листе А4 формата.
Возможно Вы увидите 2-а , а может быть более бланка с одинаковым названием. Посмотрите все, и выберите для себя наиболее подходящий по оформление и дизайну нужной Вам формы бланка.
Уважаемые пользователи, не все макеты бланков подготовлены идеально и если Вы обнаружили, неработающие ссылки, неправильная загрузка по наименованию макета, а также если Вы видите неправильность оформления какого-то макеты, оставьте пожалуйста свои комментарии, тем самым, Вы сохраните время другим пользователям, ведь мы все рабочие люди и время для нас дорого.
Я потратил часть соей молодости (а возможна она уже и прошла) над созданием и загрузкой этой базы макетов на сайт для бесплатного скачивания. Будьте критичны и объективны, смело оставляйте комментарии. Возможно моя база макетов бланков и журналов , все таки кому-то помогла.
Использованные источники: xn——6kcbbb1b4ahfmfdrzf8bxa.xn--p1ai
ПОХОЖИЕ СТАТЬИ:
Эпидемии малярии
Вирус малярия признаки
Лекарство от малярии из полыни
Болезней малярия
Выписка из Методических указаний по забору и исследованию крови на малярию
Страницы работы
Содержание работы
Выписка из Методических указаний по забору и исследованию крови на малярию
Приказа №34 от 06.01.98г.»Об усилении мероприятий по профилактике завоза
Малярии в С.Петербурге».
Подтвердить диагноз малярии можно только исследовав кровь под микроско-
пом .Кровь для исследования берут при первом же подрзрении на малярию вне
зависимости от наличия или отсутствия лихорадки в этот момент.
Кровь на малярию исследуют методом толстой капли и тонкого мазка.
основной метод исследования –изучение толстой капли.
Процедура исследования крови с целью обнаружения малярийных
паразитов включает три этапа:
1.приготовление препаратов крови.
Толстая капля и тонкий мазок должны быть приготовлены на обезжиренных предметных стеклах с неповрежденной поверхностью.
Подготовка предметных стекол
Предметные стекла ,не бывшие в употреблении, подвергают предстерилизационной обработке согласно ОСТ42-21-2-85 от 10.07.85.г. после чего помещают в сосуд с
водопроводной водой , которую меняют 6-7 раз, затем прополасктвают дистилли-
рованной водой ,вытирают чистой хлопчатобумажной тканью и помещают в смесь
Никифорова ( для приготовления смеси Никифорова берут равные количества этилового
спирта-ректификата эфира из расчета 1мл.спирта на одно стекло) Через сутки обезжиренные стекла извлечь из спирто-эфирной смеси,высушить хлопчатобумажной тканью, завернуть в чистую бумагу не более 10 штук в упаковке и подвергнуть стерилиззации в сухожа-
ровом шкафу при 180 – 1час. Стекла, бывшие в употреблении,требуют более тщательной обработки. Если на стеклах имеется иммерсионное масло, его следует удалить
бензолом или другим растворителем жира (ксилол, толуол), вату и ветошь, применяемые
для снятия иммерсионного масла, подвергают обеззараживанию с последующей утилизацией. Стекла замачивают в 3% растворе хлорамина на 60 минут или любом другом
дезинфектанте. Дальнейшая предстерилизационная обработка и стерилизация сходны
с обработкой и стерилизацией стекол, не бывших в употреблении.
Во время всех манипуляций с предметными стеклами их нужно брать так, чтобы
Не касаться пальцами поверхности стекла.
При работе с препаратами крови медработник должен соблюдать правила по про-
филактике профессионального заражения:
· работать в резиновых перчатках;
· не допускать приема пищи и курения в помещенях для проведения забора корви
· иметь в наличии антисептики
· поверхности рабочих столов и использованные емкости в конце рабочего дня или в случае загрязнения кровью обеззараживать 3% раствором хлорамина.
Приготовление препарата крови.
Приготовление препаратов крови складывается из следующих зтапов:
· распределение крови по стеклу;
Очистка кожи
Обычно кровь берут из третьего или четвертого пальца левой руки (можно брать из мочки уха, а у грудных
детей – из большого пальца ноги или пятки ). Очень важно , чтобы кожа в месте прокола была чистоой , так
как попавшие в препарат микроорганизмы могут привести к диагностическим ошибкам .Грязные руки моют мылом. Кожу в месте укола тщательно протирают 70% этиловым спиртом. Первую каплю крови ,
выделившуюся после прокола , удаляют стерильной ватой . При этом удаляют остатки алкоголя , которые
могут способствовать фиксации крови в препарате.
Необходимо пользоваться иглами –копьями разового пользования.
Стерильные иглы-копья берутся стерильным пинцетом. В процессе работы не должна допускаться
расстерилизация пинцета, нельзя выкладвать пинцет на нестерильную поверхность стола. Для этого
используют стерильную прбирку или стерилизатор, в которых пинцет стерилизовался. Вата должна стерилизоваться в виде отдельных шариков , помещенных в пакет из крафтбумаги. Должна быть поставлена дата стерилизации. Нельзя допускать расстерилизацию ваты путем перекладывания из пакета в нестерильную емкость.
При заборе крови укладка должна быть условно разделена на чистую половину, где установлены емкости
со стерильными материалами, инструментами, и грязную половину (отработанные копья,стекла с мазками,
На стерильном материале и инструментарии должна быть указана дата стерилизации, наименование
инструментария и количество
Приготовление тонкого мазка
На предметное стекло с правой стороны, отступив от края на 1-1,5 см наносят маленькую капельку
крови.Стекло кладут на горизонтальную поверхность и фиксируют его левой рукой. В правую руку
берут шлифованное стекло , опускают его в каплю крови таким образом , чтобы кровь распределилась
ровной полоской между краем шлифованного стекла и поверхностью предметного. Затем легким
равномерным движением вдоль стекла распределяют кровь по предметному стеклу. Правильно
сделанный мазок должен быть равномерно тонким с бахромкой на конце , через него можно
прочитать печатный текст.
При приготовлении мазка большое значение имеет угол наклона шлифованного стекла.
Нормальной толщины мазок получается при наклоне стекла под углом 30-35. Если угол наклона
больше 45, мазок будет коротким и толстым. Если шлифованное стекло наклонить до 20-25, то получится
очень длинный мазок до самого края предметного стекла. Исследование таких мазков затруднено.
Тонкий мазок высыхает очень быстро. После высыхания его маркируют, с этой целью лучше использовать
ПРИГОТОВЛЕНИЕ ТОЛСТОЙ КАПЛИ
Исследуемая толстая капля должна быть определенной величины.Она должна быть не слишком толстой,
но и не слишком тонкой. Диаметр толстой капли должен быть около 20мм. Рекомендуется делать две
капли на одном стекле на случай , если одна из них окажется испорченной . Существует несколько
способов приготовления толстой капли .
1. К выступившей из прокола капле крови диаметром 3-4мм прикасаются предметным стеклом,
избегая касания поверхности кожи, и распределяют кровь по стеклу в кружок одним движением.
2. На предметном стекле сначала готовят мазок немного толще обычного, затем, пока он еще не высох,
на него наносят две капли крови, которые по влажному мазку растекаются правильными дисками.
Второй способ является наилучшим для приготовления толстой капли. Необходимо соблюдать
правила высушивания толстых капель: высыхать они должны постепенно, их нужно держать
вдали от нагревательных приборов или прямых солнечных лучей .
Недопустимо делать надписи на поверхности толстой капли. Для маркировки нужно провести дополнительную полоску кровью , расположив ее между толстыми каплями или ближе к концу
стекла .Капли, приготовленные на мазке, маркируют, используя свободную поверхность мазка.
маркировку делают простым карандашом после высушивания препарата . Неокрашенные толстые
капли не подлежат длительному хранению.
На препаратах крови указывать фамилию обследуемого, как было указано выше (между толстыми
каплями на штрихе крови и на тонком мазке простым карандашом).
Направление для исследования крови на малярию
Использованные источники: vunivere.ru
ПОХОЖИЕ СТАТЬИ:
Как быстро вылечить малярию на носу
Малярию кто разносит
Где сделать прививки от малярии и желтой
Малярия это антропоноз
Лабораторные методы диагностики малярии
Диагностика малярии основана на данных клинических проявлений, эпидемиологического расследования и лабораторных методах исследования, включающих методики выявления паразитов, их количества, видовую принадлежность и обнаружение антител в организме исследуемого. Обследованию в первую очередь подлежат пациенты из группы риска — прибывшие из эндемичных по малярии регионов, лихорадка у которых появилась в первые два года после выезда из этих регионов.
Рис. 1. Забор крови для приготовления препарата «толстая капля».
Рис. 2. Окраска и вид препаратов «толстая капля» и тонкий мазок.
Диагностика малярии с использованием микроскопического метода
Микроскопия препарата «толстая капля» и тонкого мазка, позволяющая обнаружить паразитов, их количество и видовую принадлежность, является ведущим методом диагностики малярии. Она проводится при малейшем подозрении на это заболевание, независимо от температурной реакции пациента. Для определения видовой принадлежности паразитов и стадии заболевания используется тонкий мазок крови. В толстой капле локализуется больше паразитов, чем в мазке. Этот метод диагностики превосходит методику определения наличия возбудителей малярии в тонком мазке крови в 20 — 40 раз.
В периферической крови паразиты обнаруживаются через определенное время после заражения:
- при 3-х дневной малярии — через 8 — 12 дней,
- при тропической — от пяти с половиной дней до 12,
- при 4-х дневной — через 15 — 21 день,
- при малярии, подобной 3-х дневной — через 9 — 15 дней.
Паразиты в крови присутствуют как во время лихорадочного приступа, так и в межприступный период и при паразитоносительстве.
Рис. 3. Техника приготовления тонкого мазка.
Техника приготовления «толстой» капли
Полученная при проколе пальца капля крови наносится на предварительно очищенное и сухое предметное стекло и размазывается до получения пятна 1 см в диаметре. После подсушивания на воздухе предметное стекло заливается краской Романовского—Гимзы. По истечении 40-минутной экспозиции препарат ополаскивается под проточной водой и подсушивается при комнатной температуре, установленный в вертикальное положение.
Под микроскопом исследуется не менее 100 полей зрения. Более эффективным считается исследование 2-х толстых капель в течение 2,5 минут, чем 1-й капли в течение 5-и минут. 100 полей зрения просматриваются даже в том случае, когда малярийные плазмодии выявились уже в первых полях. Это производится для того, чтобы не пропустить микст-инфекцию.
Рис. 4. Микроскопия препарата «толстая капля» и тонкого мазка является ведущим методом диагностики малярии.
Порог обнаружения паразитов
Порогом обнаружения малярийных плазмодиев называется минимальная концентрация возбудителей, которую возможно выявить при микроскопировании препарата «толстая капля». При заболевании этот показатель составляет 5 паразитов в одном микролитре крови. При просмотре 100 полей зрения обследуется 0,2 мкл крови.
При наличии косвенных признаков малярии (пребывание в эндемичных зонах, гипохромная анемия, обнаружение пигмента в моноцитах) и отрицательных результатов исследования препаратов «толстая капля», исследование вновь повторяется более тщательно, и не одно, а серия, состоящая из 4 — 6 препаратов при одном уколе, либо полученных при заборе крови, который производится 4 — 6 раз в сутки в течение 2 — 3 дней.
Интенсивность паразитемии определяется знаком «+».
- 1 (+) обозначает выявление от 1 до 100 паразитов в 10 п/зр, что соответствует 5 — 50 плазмодиям в одном мкл крови;
- 2 (+) обозначает выявление от 10 до 100 паразитов в 10 п/зр, что соответствует 50 — 500 плазмодиям в одном мкл крови;
- 3 (+) обозначает выявление от 1 до 10 паразитов в 1 п/зр, что соответствует 500 — 5000 плазмодиям в одном мкл крови;
- 4 (+) обозначает выявление от 10 до 100 паразитов в 1 п/зр, что соответствует 5000 — 50000 плазмодиям в одном мкл крови;
- 5 (+) обозначает выявление более 100 паразитов в 1 п/зр, что соответствует более 50000 плазмодиям в одном мкл крови.
Интенсивность паразитемии можно вычислить по количеству паразитов на 100 эритроцитов в 10 полях зрения, либо по соотношению числа паразитов и лейкоцитов в 1 мкл крови.
По интенсивности паразитемии определяется прогноз при тропической малярии. При других видах заболевания более 2% эритроцитов не поражается.
Формы малярийных плазмодиев в разные фазы развития
В препарате крови «толстая капля» возможно определить плазмодии малярии, находящиеся на разных стадиях развития — трофозоида, кольца, шизонта, морулы, и гаметы.
Рис. 5. Plasmodium ovale имеет округлую форму.
Рис. 6. Молодой трофозоит Plasmodium vivax в эритроците.
Рис. 7. Юные трофозоиды Plasmodium falciparum.
Рис. 8. Кольцевидные трофозоиты Plasmodium vivax.
Рис. 9. Амебовидные шизонты Plasmodium vivax.
Рис. 10. Зрелые шизонты Plasmodium vivax.
Рис. 11. Женские гаметоциты возбудителей тропической малярии.
Рис. 12. Гаметоциты плазмодий тропической малярии имеют полулунную форму, плазмодии других видов заболевания — округлую.
Рис. 13. В процессе роста в цитоплазме паразитов накапливается пигмент. На фото Р. vivax.
Контроль эффективности лечения
При адекватном лечении малярии уровень паразитемии в течение суток снижается на 25% и более, а через 3 суток от начала лечения он должен составлять не более 25% от исходного. В случае обнаружения паразитов на 4-е сутки от начала лечения свидетельствует о развитии лекарственной резистентности возбудителей.
Кратность проведения исследования
При выявлении малярии микроскопическое исследование препаратов крови проводится ежедневно. При тяжелой форме тропической малярии микроскопия проводится 2 раза в день до исчезновения возбудителей в крови и далее еженедельно до 28 дня лечения с целью оценки его эффективности и выявления резистентности к противомалярийным препаратам.
Рис. 14. Эритроциты при инфицировании P. vivax и P. ovale увеличиваются, обесцвечиваются и деформируются, в них появляется токсическая зернистость.
При инфицировании P. malariae и P. falciparum форма и размеры эритроцитов не изменяется. На фото деформированные эритроциты больного малярией (микрофотография в сканирующем микроскопе).
Иммунологические методы диагностики малярии
С помощью серодиагностики малярии возможно выявить в сыворотке крови пациента антитела и растворимые паразитарные антигены. Серологические реакции показаны к применению в случаях появления у больных лихорадки неясного генеза, гепатоспланомегалии, анемии, а также для исследования крови донора — предполагаемого источника инфекции. Серологические реакции применяются при эпидемиологическом наблюдении за лицами, проживающими в неблагополучных по малярии в прошлом территориях.
Чаще всего при диагностике малярии применяется НРИФ — непрямая реакция иммунофлуоресценции. Используются так же ИФА, РИГА и др. Внедряется в практику использование реакции энзим-меченых антител (РЭМА).
В случаях очень низкой паразитемии показано применение ПЦР (полимеразной цепной реакции). Дороговизна и сложность применения данной методики не позволяет широко ее использовать.
Разработаны новые методы диагностики малярии — экспрессного микроскопического анализа препаратов крови с использованием флюоресцирующих красителей, позволяющие в течение двух минут выявить паразитов тропической малярии, количество которых более 60 в 1 мкл гемолизированой крови.
При малярии антитела появляются на 8 — 27 день паразитемии. Первыми появляются антитела IgM, затем — антитела IgG. Антитела после перенесенной малярии и успешного излечения могут длительно сохраняться в крови человека — от 0,5 до 2 и даже 20 лет.
Рис. 15. Чаще всего при диагностике малярии применяется НРИФ — непрямая реакция иммунофлуоресценции.
Дифференциальная диагностика малярии
Малярию следует отличать от гриппа и других ОРВИ, кишечных инфекций, лептоспироза, желтой лихорадки, злокачественных форм вирусных гепатитов, тифо-паратифозных заболеваний, сепсиса, бруцеллеза, сепсиса, геморрагических лихорадок, заболеваний крови.
При коматозном состоянии малярию следует отличать от эпидемического цереброспинального менингита, уремической, печеночной и диабетической комы.
Иногда малярию следует дифференцировать с холециститом, холангитом, абсцессом печени, пиелонефритом и лимфогранулематозом.
Рис. 16. Рутинное исследование препарата «толстая капля» в регионах эндемичных по малярии.
Использованные источники: microbak.ru
Источник