Антиген в биохимическом анализе крови

В данной статье подробно описано, что такое австралийский антиген и объясняется его роль в диагностике заболевания гепатитом В. Приведены показания к проведению анализа, поясняется расшифровка результатов

Анализ на австралийский антиген. Как сдавать? Норма. Расшифровка

В современной медицине для диагностики различных инфекционных заболеваний широко используется серологический метод исследования. Этот способ подразумевает введение в организм специальных маркеров соответствующих заболеваний. Наиболее распространенным маркером считается австралийский антиген (HBsAg), который позволяет медицинскому специалисту выявить заболевание пациента гепатитом В.

Австралийский антиген. Описание

Такое инфекционное заболевание как гепатит В обладает определенной структурной особенностью: в его составе содержаться белковые соединения – антигены. Антигены, находящиеся на краю вирусной цепочки называются поверхностными (HBsAg – антигены). Когда защитная система организма обнаруживает HBsAg – антиген, иммунные клетки сразу включаются в борьбу с вирусом гепатита В.

С проникновением в кровеносную систему человека вирус гепатита В переносится в ткани печени, где активно размножается, заражая клетки ДНК. На начальном этапе вируса из-за слишком низкой концентрации австралийский антиген не обнаруживается. Самовоспроизведенные клетки вируса снова попадают в кровеносную систему, тем самым провоцируя синтез HBsAg – антигенов, содержание которых уже можно выявить посредством серологического анализа. Спустя определенный промежуток времени чужеродные микроорганизмы провоцируют выработку защитных антител (анти-HBs-антитела) к соответственному возбудителю инфекции.

Суть метода серологического исследования на гепатит В заключается в выявлении антител Ig и Mg в разные периоды течения заболевания.

Как проводят анализ на антиген?

Чтобы выявить присутствие в организме пациента HBsAg–антигена, используются два главных способа: экспресс-исследование и серологическое исследование. Экспресс-тесты не требуют особых условий подготовки, их можно произвести дома. Такой способ предполагает взятие образца крови из пальца и его тестирование с помощью специального тест-прибора. Экспресс-тест на гепатит В можно купить в любой аптеке нашей страны. Серологический способ подразумевает обязательное наличие специальных медицинских препаратов и инструментов, что делает его недоступным для домашнего использования – такой анализ проводится в специализированных диагностических центрах.

Экспресс-диагностика отличается простотой выполнения и быстротой получения результатов, однако достоверность таких тестов значительно уступает лабораторным исследованиям. Поэтому экспресс-метод не является достаточным условием для постановки диагноза, а может использоваться лишь как вспомогательная информация.

В лабораторном серологическом исследовании используют два главных способа диагностики: радиоуммунный анализ (РИА) и реакция флюоресцирующих антител (РФА). Оба эти способа предполагают забор пробы биоматериала из локтевой вены. Далее с помощью центробежной силы в центрифуге отделяют плазматическую часть крови, которую и используют для исследования.

Экспресс-метод

Выявление наличия в организме HBs-антигенов с применением наборов реагентов домашнего применения – метод определения качественной характеристики вируса. То есть, такой способ может дать примерную информацию о нахождении австралийского антигена в крови, но не дает сведений о его титрах и процентах его концентрации. Если результат экспресс-теста на антиген положительный, следует безотлагательно записаться на прием к компетентному медицинскому специалисту для проведения дополнительного обследования.

Из положительных качеств экспресс-метода можно отметить его неприхотливость в использовании и скорость определения результата. С его помощью довольно точно выявляются стандартные прецеденты заражения инфекцией. Также большим плюсом является то, что экспресс-тест содержит все необходимое для проведения анализа – нет необходимости покупать что-то лишнее.

Для проведения теста сначала обеззараживают участок кожи на пальце, из которого производят забор крови. С помощью имеющегося в тесте инструмента палец укалывают и наполняют сосуд необходимым количеством капиллярной крови. Затем взятую кровь капают на специальные тест-бумажки. Прикасаться непосредственно кожным покровом к тест-бумажке нельзя – это может исказить результаты исследования. Затем тест-полоса помещается в емкость со специальной жидкостью, содержащую реагент на пятнадцать минут. Если реакция произошла, тест-полоска с нанесенным реактивом поменяет цвет – это значит, тест на антиген положительный.

Серологический метод исследования

Серологический способ диагностики считается уникальным и характеризуется большой точностью результатов. С помощью такого способа наличие антигена в плазме крови можно выявить где-то на четвертой неделе инфицирования гепатитом В. Как правило, с попаданием вируса, HBs-антиген содержится в кровеносной системе несколько месяцев, однако случаются пациенты, носящие австралийский антиген всю жизнь. Серология также позволяет выявить наличие антител к вирусу гепатита В. Эти антитела начинают продуцироваться при тенденции к выздоравливанию пациента (на несколько недель позже удаления HBs-антигена из организма). Уровень содержания таких антител стабильно возрастает на протяжении всей жизни человека и защищает организм от повторного попадания возбудителя инфекции.

На серологическое исследование необходимо взять образец плазмы крови из локтевой вены. Десять миллилитров – достаточный объем биоматериала для проведения анализа. Результат исследования, как правило, можно получить уже через сутки.

 Причины пройти анализ на антиген

Причинами для проведения анализа на антиген к гепатиту В могут служить как подозрение на развитие инфекции, так и профилактика различных заболеваний. В обязательном порядке врачи назначают обследование на присутствие HBsAg для таких случаев:

• Профилактика заболеваний при вынашивании ребенка. Это обязательный анализ при постановке на учет в перинатальный центр.
• Плановый осмотр медицинского персонала, который имеет контакт с образцами крови;
• Осмотр пациентов перед операцией;
• Наличие заболевания гепатитом В и циррозом печени в различной стадии протекания;
• Плановое обследование пациентов с хроническим гепатитом либо пациентов-переносчиков возбудителя инфекций.

Расшифровка результатов анализа

Экспресс-методы определения наличия антигена показывают такие результаты:

• Появление одной сигнальной полосы свидетельствует об отрицательном результате анализа, то есть HBs-антиген не содержится в организме и пацмент не заражен вирусом;
• Появление двух контрольных полос  результат положительный, значит, антиген обнаружен в крови и пациент инфицирован гепатитом В. Требуется подтвердение такого результата лабораторными исследованиями;
• Если в тесте только одна тестовая полоса, такой тест считается несостоявшимся, его следует повторить.

Серологическое исследование дает следующие результаты:

• HBs-антиген не найден – это означает, что результат теста отрицательный. Такой результат считается нормой, то есть человек здоров;
• HBsAg идентифицирован в организме – это означает, что результат теста положительный. При таком результате пациент либо инфицирован вирусом гепатита В, либо он здоров, но носит его антиген. Также может, что пациент уже перенес ранее гепатит и в его крови есть антитела – тогда результат теста тоже будет положительным. В любом из случаев при получении положительного результата серологического исследования требуется более углубленное изучение диагноза;
• Ложный результат теста получается вследствие недобросовестной подготовки или несоблюдения условий процедуры исследования биоматериала.

Поражение печени гепатотропным вирусом гепатита В при поздней диагностике инфицирования приводит к необратимым фиброзным изменениям паренхимы и циррозу. Серологический анализ на HBs-антиген позволяет выявить возбудителя в крови до клинических проявлений и начать соответствующее противовирусное лечение.

Антиген HBsAg: что это такое?

Возбудитель гепатита В имеет сложное антигенное строение. Снаружи вирион покрыт липидной оболочкой, содержащей молекулы поверхностного HBs-антигена. Сердцевина и внутренняя часть вирусной частицы представлена другими антигенами (АГ): HBcAg, HBeAg, HBxAg.

Пути заражения гепатитом В

Возбудитель чрезвычайно устойчив во внешней среде. Инфицирующие свойства поверхностного антигена сохраняются в сухих каплях крови до нескольких месяцев. Щелочные дезрастворы (рН=10) не могут обезвредить вирус.

Репликация ДНК в гепатоциты завершается выработкой первых серологических маркеров HBsAg в кровяное русло. Иммуноферментный анализ на HBsAg способен подтвердить инфицирование на двадцатые сутки от проникновения в организм вируса. Увеличение титра наблюдается к четвертой неделе и сохраняется до полугода. Наличие в крови АГ больше 6 месяцев свидетельствует о переходе в хроническую форму.

S-антиген обладает гетерогенной структурой, поэтому ВГВ склонен к мутациям. Подобная изменчивость приводит к атипичному течению болезни. В разных географических регионах распространен один из десяти основных подтипов, к которому вырабатываются свойственные ему антитела.

Анализы на HBsAg

Из-за распространенности гемоконтактных инфекционных заболеваний всем пациентам, обратившимся за помощью в лечебно-профилактические учреждения, назначают анализы на гепатиты. Для выявления HBV-инфекции в диагностических лабораториях пользуются серологическим способом ИФА. Он основан на мечении вирусных антигенов ферментами.

Этот метод наиболее информативен, так как выявляет маркеры характерные для определенной стадии болезни. Регулярно сдавать (раз в год) анализ крови на HBsAg должны:

• медицинские работники;
• доноры биоматериалов;
• «здоровые носители»;
• беременные каждый триместр (вирус передается вертикальным путем к плоду);
• пациенты с повышенным уровнем АсАт и АлАТ в биохимическом анализе крови.

Экспресс-тест

Это иммунохроматографический высокоточный метод выявления поверхностного антигена HBsAg без обращения в клинико-диагностическую лабораторию.

Для тестирования используется капиллярная кровь из пальца, который прокалывают вложенным в набор стерильным скарификатором. Кровяную каплю наносят на впитывающий участок полоски или кассеты. Результат оценивают через 10—15 минут по проявившимся черточкам в контрольной (С) или тестовой (Т) зонах. Возможны 3 варианта ответа:

Слабоокрашенная полоска в тестовой зоне может указывать на пониженную концентрацию антигена или низкий уровень виремии.

Лабораторные исследования

Серодиагностика позволяет выявить специфические маркеры на разных стадиях инфекционного процесса. Первым об инфицировании человека свидетельствует поверхностный антиген, который можно обнаружить в инкубационном периоде (через 4-6 недель после заражения), в преджелтушной стадии и на протяжении острой фазы.

Расположение антигенов вируса гепатита В

Из существующих серологических методов исследования вирусных антигенов и антител наиболее информативен ИФА, потому что он:

• высокочувствителен;
• присутствует в виде инструментального (качественный и количественный вариант) и визуального учета;
• автоматизирован на всех этапах проведения реакции, что исключает ошибку лаборанта.

Определение антител анти-HBs

В крови anti-HBs появляются к концу 4—12 недели после внедрения вируса, но выявить их в иммуноферментном анализе можно только после исчезновения HBsAg. Этот период выпадает на 6-12 месяцы от момента заражения. Титры суммарных иммуноглобулинов растут медленно, IgM со временем пропадает, а постинфекционный IgG остается пожизненно.

У вакцинированного человека в результате развития эффективного иммунного ответа в сыворотке циркулируют anti-HBs. В отличие от постинфекционных, их защитные свойства прекращаются через 5—10 лет.

Качественный анализ

В результате ИФА регистрируется однозначный ответ: если anti-HBs и HBsAg кач отрицательный, вируса гепатита В в крови нет и контакта с ним ранее не было. Положительный результат требует дополнительного анализа для подтверждения или опровержения результата.

Неблагоприятный прогноз наблюдается при появлении антител в первые недели после инфицирования. Это гипериммунная реакция в ответ на фульминантную форму гепатита В. Воспалительно-некротический процесс в паренхиме развивается стремительно, что ведет к смертельному исходу.

Количественный анализ

Это более подробное определение антигенов и антител, образующихся в инфекционном, постинфекционном или поствакцинальном периоде. Количество специфических маркеров выражается в мМЕ/мл. В норме концентрация IgM и IgG не превышает 10 мМЕ/мл, вирусных антигенов в крови нет.

При инфицировании из-за биохимических особенностей подтипов поверхностного антигена к каждому из них вырабатываются свойственные антитела. Количественный анализ назначается для:

• установления эффективности вакцинации;
• выявления первичного ВГВ;
• контроля противовирусного лечения;
• диагностики микст-гепатитов;
• отбора лиц к повторной иммунизации вследствие исчезновения защитных антител.

Расшифровка результатов

В лабораторных исследованиях диагноз не указывается. Расшифровкой занимается терапевт, врач-инфекционист или гепатолог. Положительный ответ перепроверяют путем перестановки анализа в двух параллельных пробах. Если хотя бы в одном образце сыворотки присутствует вирусный антиген, первичный результат подтверждается.

При дополнительном подтверждении позитивного анализа крови на HBsAg, сведения о пациенте передаются в региональный Отдел учета и регистрации инфекционных заболеваний центра санэпиднадзора. Информация об анонимных обследованиях не отсылается в госорганы. Но в таком случае инфицированный человек не имеет право на госпитализацию и противовирусную терапию.

HBsAg положительный

При определении поверхностного антигена положительный ответ в анализе крови на HBsAg может свидетельствовать о:

• HBV-инфекции в острой форме;
• завершении клинических проявлений и нарастании титра суммарных антител;
• длительном хроническом процессе, протекающем с поражением печеночной ткани;
• носительстве без вреда здоровью.

У «здоровых» носителей антигенного белка симптомов нет. Но при попадании их биологических жидкостей в кровоток другого человека вирус может активизироваться и привести к развитию острой инфекции.

HBsAg отрицательный

При расшифровке в анализе ИФА отсутствие антигена S указывает на:

• стадию выздоровления и формирование иммунного ответа;
• хроническую форму с латентным течением;
• фульминантный гепатит;
• сформировавшийся иммунитет к спонтанному типу гепатита В;
• отсутствие HBV-инфекции.

HBsAg бывает не обнаружен при редких и неизученных подтипах вируса, к которым тест-система не чувствительна.

Ложноположительный HBsAg: причины и повторная диагностика

Положительные результаты анализов HBsAg не всегда являются истинными. Доля сомнительных и ошибочных результатов по статистике составляет один случай из 20. Поэтому при получении отметки «HBsAg обнаружен» не стоит паниковать.

Причинами ложноположительного исследования могут быть:

• технические ошибки в лаборатории;
• непригодность системы тестирования;
• аутоиммунные заболевания, присутствие ревматоидного фактора;
• онкологический процесс;
• беременность;
• прием препаратов, нарушающих обмен веществ;
• конкуренция IgM ребенка c IgG матери;
• субфебрильная температура тела на момент взятия биоматериала.

При получении первичного положительного ответа обязательно проводится подтверждающий тест на HBsAg через 2-3 недели.

Серологические исследования на выявление специфических маркеров HBV-инфекции не всегда информативны. Это связано с высокой изменчивостью поверхностного HBsAg. В таких случаях требуется проведение диагностики методом ПЦР, который с максимальной точностью определяет присутствие ДНК вируса гепатита В в крови.

( 3 оценки, среднее 5 из 5 )