Анализы на пцр кровь с вены
Кровь методом ПЦР чаще всего проверяют на вирусные инфекции.
Значительно реже там определяются бактерии: стафилококки, стрептококки, туберкулезные палочки.
Анализ крови методом ПЦР позволяет установить, есть ли инфекция в организме.
Тест очень чувствительный.
Он выявляет инфекционные заболевания на ранней стадии, когда антитела к возбудителям ещё не образуются.
Основные болезни, которые выявляют в крови:
- ВИЧ
- гепатиты В и С
- различные типы герпеса (возбудители генитального, лабиального герпеса, опоясывающего лишая, цитомегаловируса и инфекционного мононуклеоза)
При необходимости возможна количественная молекулярная диагностика методом ПЦР кровь.
Она позволяет понять, требуется ли пациенту лечение, какие нужны дозы и длительность курса терапии, приносят ли результат проводимые терапевтические мероприятия.
ПЦР крови на инфекции используется для лабораторного контроля их излеченности.
Рассмотрим основные заболевания, при которых используется исследование крови ПЦР.
Анализ крови методом ПЦР на туберкулез
ПЦР – один из методов диагностики туберкулеза.
С помощью лабораторного теста возможно выявление любых форм заболевания.
В том числе ранних, некультивируемых, с нетипичной локализацией возбудителя.
Методика имеет более высокую чувствительность, чем бактериологическое исследование.
Она очень информативна, так как позволяет проводить дифференциальную диагностику, отличая туберкулезные и нетуберкулезные микобактерии.
ПЦР обеспечивает их видовую и штаммовую идентификацию.
Особую ценность методика имеет при выявлении внелегочных форм туберкулеза.
Благодаря определению вида микобактерий, она дает возможность подобрать эффективную терапию.
Использование ПЦР для диагностики туберкулеза рекомендовано Министерством здравоохранения РФ, приказом №64 от 21 февраля 2000 года.
Для диагностики туберкулеза может использоваться любой биоматериал.
Это мокрота, кровь, пунктат лимфоузла, моча и т.д.
Кровь из вены для ПЦР сдают для дифференциальной диагностики ограниченных и диссеминированных форм туберкулеза.
Проще говоря, метод позволяет понять, находятся бактерии в ограниченном очаге, или уже проникли в кровь и разносятся по всему организму.
Часто ПЦР крови на микобактерии применяют у детей.
В том числе при отрицательных результатах бактериологического исследования.
Тем не менее, ПЦР крови имеет не очень высокую чувствительность.
Поэтому в клинической практике используется нечасто.
Наибольшая вероятность обнаружения ДНК в крови – у пациентов с ВИЧ или на фоне приема иммуносупрессивных препаратов.
У многих ПЦР дает отрицательные результаты даже в случае диссеминированных форм.
У женщин ДНК микобактерий определяют в менструальной крови.
Исследование проводится для диагностики туберкулеза половых органов.
Анализ делают на такие виды бактерий:
- tuberculosis
- bovis
- bovis BCG
- microti
- africanum
ПЦР крови на герпес
Для диагностики герпетической инфекции ПЦР крови применяется нечасто.
Обычно берут материал с поверхности высыпаний.
Но иногда их нет.
В таком случае исследование крови остаётся информативным методом диагностики заболевания.
Показания к проведению теста:
- ультразвуковые признаки внутриутробной инфекции
- фетоплацентарная недостаточность
- обследование детей, родившихся от женщин-носителей герпеса
- увеличение печени, длительная лихорадка на фоне беременности
- иммунодефицитные состояния и ВИЧ
- подозрение на осложнения герпеса
Однажды заразившись, человек навсегда становится носителем герпеса.
Но ДНК определяется в крови только в активную фазу инфекции.
При бессимптомном течении ПЦР дает отрицательные результаты.
Анализ крови на ВИЧ методом ПЦР
ПЦР – в большей мере уточняющий метод при ВИЧ, нежели подтверждающий.
Для первичной диагностики обычно применяются серологические исследования.
В крови выявляют антитела и антигены к ВИЧ.
Иногда ПЦР применяют для установления диагноза.
Области применения метода:
- Тестирование донорской крови.
Вполне вероятно, что она была сдана человеком в период, когда антитела ещё не образовались.
Поэтому выявление РНК может дать положительные результаты при отрицательных серологических исследованиях.
- Диагностика новорожденных.
Если ребенок родился от матери, страдающей ВИЧ, его всегда обследуют.
В том числе если была проведена необходимая профилактика.
Но выявлять вирус серологическими методами нецелесообразно.
Потому что ребенок первых лет жизни содержит в крови материнские антитела.
Соответственно, они обязательно будут определены в ходе анализа, и не важно, болен ребенок или нет.
Серологические тесты всегда дадут положительный результат.
В такой ситуации на помощь приходит ПЦР.
Если РНК отсутствует, то ребёнок здоров.
- Подозрение на острую ВИЧ инфекцию в ранний период после заражения.
На антитела кровь сдают только через 3 месяца после заражения.
Есть есть необходимость ранней диагностики, используют только ПЦР.
Такая необходимость возникает, если есть основания полагать, что человек инфицирован.
По симптомам этого обычно понять нельзя.
Потому что клинические проявления ВИЧ не специфичны: они такие же, как у множества респираторных вирусных инфекций.
Но бывает так, что симптомы появляются на фоне данных анамнеза, указывающих на высокий риск инфицирования.
Например, медицинский работник имел контакт с кровью ВИЧ-инфицированного.
Если через несколько недель у него появились симптомы инфекции, это повод для обследования крови на РНК ретровируса методом ПЦР.
- Уточнение спорных результатов серологического исследования.
ПЦР может применяться только вместе с анализом крови на антитела, но не вместо него.
Проблема этого исследования состоит в том, что оно может дать ложноотрицательные результаты, пусть и в небольшом количестве случаев.
Причины их следующие:
- в большинстве случаев ПЦР делают только на ВИЧ 1 типа, но около 0,5% случаев болезни вызывает ВИЧ 2 типа
- не выявляются мутантные штаммы вируса, в то время как антитела к ним образуются и могут быть выявлены в крови
- около 1% людей способны силами собственного иммунитета сдерживать репликацию вируса, у них есть в крови антитела, но не определяется РНК
При этом ПЦР играет важнейшую роль в лечебном процессе.
Методика позволяет оценить вирусную нагрузку.
Она позволяет врачу понять, когда стоит назначать лечение, эффективно ли оно или нужно менять схему.
На фоне удачной терапии ПЦР крови на ВИЧ становится отрицательной.
При этом антитела по-прежнему сохраняются и могут выявляться в анализах.
Поэтому серологические методы малоинформативны в оценке эффективности терапии и не используются с этой целью.
Анализ крови на стафилококковую и стрептококковую инфекцию методом ПЦР
Исследование крови на бактерии методом ПЦР проводят при тяжелых инфекциях:
- пневмониях
- менингитах
- сепсисе
Этиологическая диагностика позволяет врачу не только подтвердить бактериальную этиологию процесса.
Она дает возможность подобрать наиболее эффективные препараты для лечения.
Потому что при разных патологиях назначаются разные антибиотики.
Если стрептококковая инфекция чувствительна к большинству препаратов, в том числе бета-лактамным антибиотикам, то стафилококк часто резистентный ко многим лекарственным средствам.
ПЦР обычно делают качественную.
Оценивается факт присутствия бактерий в крови, а не их количество.
Анализ крови на паразитов методом ПЦР
В крови определяют ДНК листерий и токсоплазм.
Это одноклеточные паразиты.
Листериозом чаще всего заражаются через еду.
Болезнь может давать осложнения, вызывать воспаление структур центральной нервной системы.
В группе риска – беременные, пожилые, лица с иммунодефицитом или онкозаболеваниями.
В большинстве же случаев листериоз протекает как кишечная инфекция.
Септическая его форма очень опасна и часто приводит к летальному исходу.
Токсоплазма – распространенная, не столь опасная инфекция.
Она представляет наибольшую угрозу для беременных.
Анализ назначается при:
- привычном невынашивании беременности
- длительной лихорадке неясного происхождения
- ВИЧ
- увеличении печени и селезенки
Все беременные сдают анализ на токсоплазму.
Хотя обследуют их обычно при помощи серологических методов.
Болезнь часто манифестирует на фоне иммунодефицита.
Анализ крови на ПЦР гепатит С количественный
ПЦР применяется с целью подтверждения диагноза.
При появлении клинических признаков или наличии анамнестических данных, указывающих на высокую вероятность этого заболевания, доктор назначает определение в крови РНК вируса.
Исследование очень чувствительно.
Поэтому может выявлять гепатит С в бессимптомной стадии.
Показания к назначению:
- выявление в крови HCV Ab
- негативные результаты HCV Ab на фоне иммунодефицита при имеющихся признаках поражения печени
- начало лечения гепатита С при подтвержденном диагнозе
Количественная ПЦР проводится при:
- принятии решения о необходимости противовирусной терапии
- перед началом противовирусного лечения, для определения исходной вирусной нагрузки
- в процессе лечения, для отслеживания эффективности проводимой терапии
- в конце курса, для подтверждения излеченности или определения показаний для повторной терапии
До начала лечения ПЦР делают всем пациентам.
Знать исходную вирусную нагрузку врачу необходимо, чтобы:
- определиться с дозами препаратов, длительностью лечения
- оценить ожидаемую эффективность
- в ходе дальнейших количественных исследований сравнить новые результаты с предыдущими, чтобы понять, есть ли положительная динамика
Раньше для первичной диагностики заболевания применялись качественные тесты.
Дополнительно использовались количественные, которые делали перед началом лечения и в процессе проведения терапии.
Но сегодня количественная ПЦР имеет столь же высокую чувствительность, что и качественная.
Она позволяет определять вирус гепатита С в крови с нижним порогом чувствительности 10-15 МЕ/мл.
Благодаря внедрению ПЦР в разы уменьшилось количество биопсий печени, проводимых с диагностической целью.
Методика позволяет врачу наблюдать за течением заболевания и эффективностью терапии.
Оценивать вирусологическую нагрузку в динамике ВОЗ рекомендует одним и тем же выбранным методом.
Как правило, врач направляет одного пациента в одну и ту же лабораторию для проведения одного и того же теста.
Такой подход обеспечивает точность результата.
В том числе при определении устойчивого вирусологического ответа, свидетельствующего об эффективности проводимой терапии.
Анализ крови ПЦР на гепатит В количественный
ПЦР позволяет выявить ДНК вируса гепатита В в различном биоматериале:
- крови
- лимфоцитах
- биоптате печени
В рутинной практике используется анализ крови ПЦР на гепатит В.
Этот метод обладает самой высокой чувствительностью.
Иногда он незаменим в первичной диагностике.
Для установления диагноза гепатита В достаточно определения в крови антигенов и антител.
Но иногда инфекция протекает в скрытой форме.
Традиционно проводимые для установления первичного диагноза исследования могут давать отрицательные результаты.
При этом с помощью ПЦР удается выявить вирус.
Кроме того, ДНК возбудителя гепатита В является самым ранним маркером этого заболевания.
Она начинает определяться в крови раньше, чем антитела и антигены.
Благодаря ПЦР можно выявить форму заболевания, вызванную мутантными штаммами вируса.
Определение ДНК позволяет не только констатировать инфекцию.
Метод также дает возможность определять репликативную активность HBV.
ПЦР становится положительной ещё в инкубационный период.
В острый период заболевания количественные показатели увеличиваются.
ПЦР становится негативной уже в период ранней реконвалесценции.
Это позволяет врачу подтвердить излеченность с помощью данного метода.
Таким образом, области применения этого исследования следующие:
- первичная диагностика заболевания в раннем периоде после заражения
- проверка донорской крови
- выявление форм заболевания, которые не обнаруживаются при помощи анализа крови на антигены и антитела к вирусу гепатита В (субклинические формы, мутантные штаммы вируса)
- принятие решение о необходимости назначения терапии (вирусологическая нагрузка)
- определение тактики лечения
- оценка его эффективности
Анализ могут назначить пациентам, которые ранее переболели вирусным гепатитом В, а сейчас получают иммуносупрессивную терапию.
Потому что это фактор риска повторного возникновения заболевания.
Расшифровка результатов:
- положительная ПЦР при любом количественном результате – устанавливается диагноз гепатита В
- уровень ДНК больше 10 в 5 степени копий ДНК в мл – требуется лечение
- уровень ДНК меньше 10 в 3 степени – лечение было эффективным, болезнь перешла в стадию ремиссии, прогноз благоприятный (хотя возможна реинфекция)
Если анализ отрицательный, это говорит о том, что человек здоров и не встречался с вирусом, либо излечен от гепатита В.
В результате успешной терапии ДНК полностью исчезает из крови и не определяется в ней при помощи ПЦР.
ПЦР на герпес зостер
Вирус варицелла зостер является возбудителем ветрянки и опоясывающего лишая.
Его ДНК появляется в крови только в острую фазу инфекции.
Ветрянка обычно диагностируется клиническим методом.
Потому что она имеет достаточно характерные симптомы.
В то время как при опоясывающем герпесе происхождение болезни не всегда очевидно.
Высыпания появляются не сразу.
А если появляются, то клиника может быть атипичной.
Для подтверждения диагноза может быть использована диагностика крови методом ПЦР.
Такая диагностика применяется нечасто.
Но иногда в ней возникает необходимость в спорных клинических ситуациях.
Где сдать кровь ПЦР?
Если вам нужно сдать анализ крови методом ПЦР, приходите в нашу клинику.
Здесь работают опытные врачи-венерологи.
Мы специализируемся в первую очередь на диагностике и лечении заболеваний с половым путем передачи.
У нас можно сдать кровь на:
- ВИЧ
- различные виды герпеса
- вирусные гепатиты В и С
При необходимости мы также можем обследовать вас на туберкулез, стафилококк и многие другие инфекции.
К нам стоит обращаться в таких ситуациях:
- планирование беременности
- 1 триместр беременности (профилактическое обследование)
- контакт (половой или любой другой) с источником инфекции – ВИЧ, гепатита и других опасных заболеваний
- появление подозрительных симптомов, указывающих на возможное заражение вирусными инфекциями (пузыри на коже, увеличение печени и селезенки, очень тяжелые гриппоподобные симптомы)
- положительный анализ других исследований (антитела, антигены)
- рождение детей от инфицированных матерей
Мы также обследуем пациентов с уже установленным диагнозом.
Это необходимо для контроля лечения.
Наши преимущества:
- работаем с лучшими лабораториями Москвы
- мы сотрудничаем сразу с несколькими лабораториями, поэтому предлагаем широчайший спектр различных анализов, в том числе тех, которые используются редко, например, для выявления генерализованных форм инфекций
- идеальное соблюдение правил забора биоматериала позволяет обеспечить точные результаты;
- возможность анонимного обследования
- доступные цены
- аккуратный, безболезненный забор крови из вены без боли, ран, синяков и воспалений
После диагностики в нашей клинике можно пройти лечение, если в нём возникнет необходимость.
Для сдачи анализов крови методом ПЦР обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.
Источник
3 апреля 2019774,1 тыс.
Полимеразная цепная реакция известна уже 30 лет. Ее широко используют во многих областях, начиная с археологии и заканчивая генетикой.
Именно метод пцр помогает установить отцовство, но наиболее часто его используют для выявления различных инфекционных болезней в организме человека.
Как проводят анализ методом пцр, и что это такое? На эти вопросы мы постараемся детально ответить.
Анализ ПЦР — что это такое?
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того, как заболевание может себя проявить.
Метод ПЦР — абсолютно специфичен и выполненный правильно не может дать ложноположительный результат. То есть, если инфекции нет, то анализ никогда не покажет, что она есть. Поэтому сейчас очень часто для утверждения диагноза дополнительно сдают анализ ПЦР, чтобы определить возбудителя и его природу.
Полимеразную цепную реакцию (ПЦР) в 1983 году разработал Кэри Мюллис (США), за что в 1993 году он удостоен Нобелевской премии в области химии.
В чем преимущество данного метода?
Диагностика этим методом позволяет найти возбудителя непосредственно в гене, который содержится в исследуемых материалах. Это самый точный анализ на половые инфекции, скрытые инфекции, различные венерические заболевания.
Отличия ПЦР-диагностики от других методов лабораторного исследования заключаются в следующем:
- метод нацелен на выявление самого возбудителя;
- диагностика методом ПЦР отличается универсальностью: для обнаружения возбудителей нескольких;
- заболеваний достаточно только одного биологического образца больного;
- метод обладает высокой чувствительностью и не сопровождается другими перекрестными реакциями.
Кроме этого, преимуществом ПЦР-диагностики является то, что для анализа пригоден любой биологический материал пациента: кровь, выделения из половых органов, моча, сперма.
Какие инфекции позволяет выявить мазок на ПЦР?
В организме может присутствовать большое количество возбудителей инфекций, сюда относятся и «скрытые», которые длительное время никак себя не проявляют.
Анализ мазка на ПЦР позволяет выявить такие инфекции:
- гепатит;
- уреплазмоз половых органов;
- кандидоз (молочница);
- хламидиоз половых путей;
- папиллома вирусная инфекция;
- герпес;
- наличие раковых клеток;
- микоплазмоз;
- бактериальный вагиноз;
- инфекционный мононуклеоз;
- трихомониаз;
- оценить гормональное состояние;
- СПИД (ВИЧ).
Исследуемым материалом для ПЦР обычно являются мокрота, слюна, моча, кровь. Перед проведением анализа необходимо тщательно подготовиться к нему, получив предварительную консультацию у врача.
Кровь для ПЦР обычно сдается натощак. Хорошие результаты показывает проведение анализа, когда материал для исследования взят из цервикального канала или уретры. В этом случае лучше всего провести ПЦР-диагностику не позже, чем через сутки после полового акта.
Разновидности ПЦР
ПЦР используется во многих областях для проведения анализов и в научных экспериментах. Существуют разные методики проведения анализа:
- ПЦР с обратной транскрипцией (Reverse Transcription PCR, RT-PCR (англ.)) — используется для амплификации, выделения или идентификации известной последовательности из библиотеки РНК.
- Инвертированная ПЦР (Inverse PCR (англ.)) — используется в том случае, если известен лишь небольшой участок внутри нужной последовательности. Этот метод особенно полезен, когда нужно определить соседние последовательности после вставки ДНК в геном.
- Вложенная ПЦР (Nested PCR (англ.)) — применяется для уменьшения числа побочных продуктов реакции. Используют две пары праймеров и проводят две последовательные реакции.
- Асимметричная ПЦР (англ. Asymmetric PCR) — проводится тогда, когда нужно амплифицировать преимущественно одну из цепей исходной ДНК. Используется в некоторых методиках секвенирования и гибридизационного анализа.
- Количественная ПЦР (Quantitative PCR, Q-PCR (англ.)) или ПЦР в реальном времени — используется для непосредственного наблюдения за измерением количества конкретного ПЦР продукта в каждом цикле реакции.
- Ступенчатая ПЦР (Touchdown PCR (англ.)) — с помощью этого подхода уменьшают влияние неспецифического связывания праймеров.
- Групп-специфическая ПЦР (англ. group-specific PCR) — ПЦР для родственных последовательностях внутри одного или между разными видами, используя консервативные праймеры к этим последовательностям.
Если нуклеотидная последовательность матрицы известна частично или неизвестна вовсе, можно использовать вырожденные праймеры, последовательность которых содержит вырожденные позиции, в которых могут располагаться любые основания. Например, последовательность праймера может быть такой: …ATH…, где Н — А, Т или С.
Какие биологические материалы исследуются?
Материалом для ПЦР-исследования, в котором можно выявить чужеродную ДНК бактерии или ДНК или РНК вируса могут служить различные биологические среды и жидкости человека:
- Моча. Может использоваться при инфекционном поражении мочеполового тракта у мужчин и мочевыделительных органов у женщин (у мужчин использование в качестве материала мочи заменяет эпителиальный соскоб).
- Мокрота. Применяется для диагностики туберкулеза и реже для диагностики респираторных форм хламидиоза и микоплазмоза. Мокроту в количестве 15-20 мл собирают в стерильный (одноразовый) флакон.
- Биологические жидкости. Сок простаты, плевральная, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж, слюна забираются по показаниям.
- Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек. Обычно используются для диагностики заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП), таких как гонорея, хламидиоз, микоплазмоз, уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез, герпетическая и другие инфекции, поражающие слизистые оболочки.
- Биоптаты. Чаще всего используют биоптаты желудка и двенадцатиперстной кишки для выявления хеликобактерной инфекции.
- Кровь, плазма, сыворотка. Используются для ПЦР анализа вирусов гепатитов B, C, D, G, герпеса, ЦМВ, ВИЧ, исследования генов человека.
Как подготовиться к сдаче анализа?
Достоверность результата ПЦР напрямую зависит от правильности сдачи материала на обследование. Материал не должен быть загрязнен, иначе результат исследования не будет объективен. К наиболее важным рекомендациям перед сдачей анализа ПЦР относятся следующие требования:
- Моча сдается утром в стерильный контейнер.
- Анализ крови на инфекции необходимо сдавать на голодный желудок в утреннее время.
- Не стоит проявлять половую активность за сутки до проведения анализа.
Результат анализа будет готов через 1,5-2 суток после проведения рассматриваемой процедуры. Встречаются такие ситуации, когда результат может быть подготовлен в тот же день.
Расшифровка анализа ПРЦ
Процесс интерпретации представленного исследования отличается своей простотой. Результаты пцр анализа можно получить через 1,5-2х суток после сдачи материала. В некоторых случаях результат готов в первый же день, и вот что они могут означать:
- Отрицательный результат показывает, что в диагностируемом материале отсутствует искомый инфекционный возбудитель.
- Пцр положительный обозначает, что в организме человека присутствует ДНК или РНК возбудителя.
В некоторых случаях производят количественное определение микроорганизмов. Это особенно актуально при заболеваниях, вызванных условно-патогенными микроорганизмами. Так как данные бактерии проявляют свое негативное воздействие лишь при избыточном количестве.
Также количественный анализ ПЦР важен для выбора терапевтической тактики и с целью контроля над лечением таких вирусных инфекций, как ВИЧ и вирусы гепатита.
Насколько точна ПЦР диагностика инфекций?
Метод ПЦР отличается высокой точностью, специфичностью и чувствительностью. Это означает, что данный анализ способен:
- точно определить наличие или отсутствие инфекции;
- точно указать, что именно это за инфекция (специфичность);
- обнаружить инфекцию даже при очень низком содержании ДНК микробов в биологическом материале,
- который был подвергнут исследованию (чувствительность).
ПЦР анализ: цена и сроки
Цена конкретного анализа будет зависеть от того, на какую инфекцию вы будете проверяться. Примерные цены и сроки:
- ИППП: 300-500 руб, сроки – 1 день;
- Вирус Эпштейна-Барра, вирус папилломы человека, герпеса, цитомегаловирус: 300-500 руб, сроки – 1 день;
- Гепатит A, B, C, D, G: качественный анализ 650 руб, количественный анализ 2000 руб. Сроки – до 5 дней;
- Антитела к вирусу гепатита С, суммарные ( Anti-HCV ) – 420 руб;
- Антитела к вирусу гепатита C, IgM ( Anti-HCV IgM ) – 420 руб;
- Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori): 300-400 руб, сроки – 1 день;
- ВИЧ (антитела и антигены) – 380 руб;
- РНК ВИЧ, качественно – 3 500 руб;
- РНК ВИЧ, количественно – 11 000 руб.
Чтобы сэкономить средства, можно выбирать фиксированный пакет анализов. Такую услугу предоставляет большинство клиник где можно сдать анализ методом ПРЦ (инвитро, онклиник и т.д).
Источник
