Анализы на хламидии кровь или пцр
От точности и скорости диагностики напрямую зависит, как быстро можно будет начать лечение хламидиоза. Это заболевание не дает специфичных симптомов, поэтому лабораторные методы диагностики выходят на первый план для определения возбудителя.
Метод полимеразной цепной реакции — один из самых современных методов диагностирования. Врачи оценили его точность и скорость получения результатов, поэтому часто назначают этот тип анализа в ходе детального обследования и выявления хламидиоза.
Что представляет собой анализ
Данный тип исследования используют для всех возрастных категорий, его можно назначать даже новорожденным детям, не говоря о взрослых мужчинах и женщинах.
Объектом исследования при анализе является хламидия трахоматис — патогенный микроорганизм, присутствие которого в организме вызывает развитие хламидиоза.
По международной системе классификации заболеваний МКБ-10, которую используют медики всего мира, хламидийной инфекции присвоен код А74.
Болезнь может давать различные симптомы, а может протекать абсолютно бессимптомно, но ПЦР-исследование способно выявить бактерию даже в этом случае, чем не могут похвастаться остальные инструментально-клинические методы.
Суть анализа заключается в том, чтобы точно скопировать и быстро размножить фрагменты цепочки ДНК того микроорганизма, который стал причиной заболевания. Чтобы ускорить этот процесс, в лаборатории применяют специальные ферменты, способные активизировать постройку новых генетических цепочек.
Результатом таких воспроизведений становится увеличение генетического материала в пробе, доходящее до миллиона раз, что значительно облегчает его выявление. После того, как ДНК микроорганизма обнаружено, его тщательно исследуют под микроскопом и безошибочно определяют. Определение выполняет лаборант, сравнивая полученный образец с эталонными, имеющимися в лаборатории, которые заказывают в исследовательских институтах.
Нередко ПЦР используется при поиске причин бесплодия или неспособности к вынашиванию плода или осложнениях в ходе беременности. Также человек может пожелать провести диагностику после незащищенного полового акта с партнером, в здоровье которого не уверен.
Плюсы и минусы метода ПЦР
Среди неоспоримых преимуществ анализа выделяются такие:
- высокая чувствительность методики (не менее 95%);
- возможность применения в инкубационном, латентном или хроническом периоде хламидиоза, а также при носительстве;
- перечень материала для исследования строго не определяется, поэтому при невозможности использовать, к примеру, кровь можно легко заменить ее мокротой или слизью с половых органов;
- скорость получения данных после анализа (в среднем протокол выдают на руки на следующий день, но при острой необходимости возможно получить его и в день взятия пробы);
- анализ является прямым и позволяет выявить саму бактерию хламидии трахоматис, а не косвенные показатели ее присутствия — антитела.
Немаловажным фактором является то что полимеразная цепная реакция во время обследования позволяет одновременно выявлять некоторые сопутствующие заболевания, имеющие общую симптоматику с хламидиозом. Такими инфекциями являются практически все урогенитальные инфекции, многие вирусные и бактериальные болезни (уреаплазмоз, кандидоз, микоплазмоз, цитомегалия и пр.).
К недостаткам относятся:
- высокие требования по санитарным нормам к лаборатории паолимеразной цепной реакции, которые необходимо соблюдать, чтобы не получить ложноположительных результатов из-за загрязнения пробы;
- незначительная вероятность ложноотрицательного результата (для того, чтобы избежать этого явления необходимо тестирование сразу нескольких видов биоматериала);
- сложность интерпретации результатов, которые должен оценивать квалифицированный специалист, учитывая динамику хламидиоза и обладая достаточными знаниями в сфере иммунологии и инфекционных болезней;
- высокая стоимость исследования, что объясняется особыми требованиями к оснащению лаборатории и квалификацией персонала.
Несмотря на наличие недостатков, в настоящее время ПЦР признан самым удачным в плане диагностики хламидиоза.
Какой материал необходимо сдать для анализа
Для того, чтобы успешно провести тестирование образца при помощи полимеразной цепной реакции на хламидии, достаточно небольшого объема материала, что является еще одним преимуществом. Для диагностики подходит большинство биологических жидкостей, кровь и образцы мягких тканей.
У мужчин для определения хламидий берут:
- мазок из уретры;
- мазок из конъюнктивы;
- сперму;
- мочу;
- жидкость из предстательной железы;
- синовиальную жидкость.
Материалом, который берут для исследования у женщин, является:
- соскоб из уретры;
- эпителий из цервикального канала;
- моча;
- мазок из конъюнктивы;
- синовиальная жидкость.
Кровь берется из локтевой вены на руке, достаточно 10-15 мл. В современных лабораториях для этого используют специальные вакуумные системы, которые предотвращают попадание посторонних микробов в образец, увеличивая тем самым точность результатов.
Если необходим образец синовиальной жидкости, то делают пункцию суставного аппарата специальной толстой иглой с диаметром 0,8 мм. Введение этой иглы проходит болезненно, поэтому иногда перед введением применяют местное обезболивание.
Биоматериал могут отобрать в лаборатории, а могут делать отбор проб непосредственно в поликлинике или больнице, после чего направлять его на тестирование в ПЦР лабораторию. Некоторые частные диагностические центры за дополнительную плату берут образцы для исследования на дому у пациента.
Для оценки заражения околоплодных вод хламидиями во время беременности отбирают небольшое количество амниотической жидкости. Делают это только при острой необходимости, так как методика несет небольшую опасность для протекания беременности. Для этого производят прокол брюшной полости и под контролем УЗИ отбирают необходимое количество околоплодных вод.
Для всех беременных при постановке на учет в женскую консультацию назначают обследование на наличие хламидий в крови, для чего проводят ПЦР-тестирование, поскольку хламидиоз является тяжелой TORCH-инфекцией, способной нарушить ход беременности и осложнить развитие плода. Для такого типа обследования всегда используют кровь из вены.
Подготовка к анализу ПЦР
Правильная подготовка к обследованию на хламидии — одно из основных требований для получения корректных и точных результатов.
Для каждого типа биоматериала предусматривается специфичная подготовка. О всех требованиях, необходимых в процессе подготовки к ПЦР тестированию, пациенту должен подробно рассказать специалист, который выдает направление.
Перед сдачей мазков или мочи женщинам запрещено:
- на протяжении 3 суток пользоваться внутривагинальными свечами;
- применять вагинальные спринцевания, орошения или тампоны, пропитанные любыми настоями или отварами трав.
Сдавать мазок для ПЦР анализа на хламидиоз во время месячных нельзя.
Перед сдачей мазков или мочи как мужчинам, так и женщинам запрещается:
- ходить в туалет меньше, чем за 3 часа до отбора;
- выполнять гигиенические процедуры с применением дезинфицирующих или антибактериальных средств;
- заниматься сексом на протяжении 3-х предшествующих суток.
Для девочек возрастом до 14 лет мазок могут брать не из влагалища, а из слизистой оболочки преддверия влагалища, чтобы не повредить девственную плеву.
Перед сдачей крови для ПЦР на хламидии нужно не употреблять спиртные напитки, несколько дней не есть жирную пищу и жареные блюда, а также не курить за несколько часов до манипуляции.
Сдавая мочу, необходимо помнить, что показательнее всего — первая утренняя порция, первые и последние капли отбрасываются. Контейнер обязательно должен быть стерильным. Для исследования нужно предоставить около 50 миллилитров мочи.
Перед отбором материала любого типа для определения хламидий нельзя принимать антибиотики или уросептики. Это возможно только в том случае, если исследование проводится для определения эффективности лечения, в остальных случаях применять такие препараты на протяжении двух недель перед ПЦР-диагностикой запрещено.
Расшифровка результатов
Исследование на наличие хламидий при помощи полимеразной цепной реакции является качественным методом, то есть он показывает не количество бактерий в пробе, а их присутствие или отсутствие.
В протоколе ПЦР анализа указывается фамилия пациента, дата исследования, название бактерии (Chlamydia trachomatis) и полученный результат: положительный («обнаружено») или отрицательный («не обнаружено»). Иногда их описывают при помощи значков «+» или «-».
Если получен положительный результат, то это означает, что в организме присутствует острый процесс, или пациент является носителем заболевания.
В норме отрицательный результат означает, что в пробе не обнаружены такие бактерии, то есть, он здоров.
Если у взрослого человека обнаружена бактерия хламидия трахоматис, это означает, что половому партнеру обязательно нужно обследоваться даже в том случае, если клинических проявлений хламидиоза у него нет. Отсутствие симптомов не гарантирует отсутствие болезни, у него может быть бессимптомная форма, которая не исключает осложнений и возможности заразить других людей.
В завершение следует отметить, что ПЦР является одним из основных средств выявления хламидиоза в настоящее время, тогда как другие методы преимущественно используют в качестве дополнительных методов.
Об особенностях диагностики хламидиоза методом ПЦР на данном видео рассказывает врач-венеролог.
Источник
Анализы на хламидию трахоматис необходимы, чтобы подтвердить наличие этой инфекции организме.
В случае положительных результатов врач назначает лечение. После завершения терапии лабораторная диагностика проводится для подтверждения излеченности.
Какие анализы на хламидии существуют
Есть три группы анализов на хламидии:
1. Иммунологические.
Направлены на выявление антигенов и антител. Используются ПИФ или ИФА.
2. Культуральный метод.
Проводится посев хламидий для их последующей идентификации.
Высеиваются эти бактерии только на среды, включающие живые клетки. Это клеточные линии L-929, McCoy, HeLa.
3. Молекулярно-биологические.
Используют ПЦР для выявления в мазке хламидий.
Проводится идентификация фрагмента ДНК бактерий.
Кому требуется анализ на хламидии
В основном мазки берут на хламидиоз, если имеются клинические признаки, указывающие на воспалительный процесс нижних отделов мочеполовой системы. Сдать анализы на хламидии также необходимо, если был незащищенный половой акт с носителем хламидиоза.
Если нет ни медицинских, ни эпидемиологических показаний, то на хламидии женщины анализы могут сдавать в таких случаях:
- невынашивание беременности
- предстоящие внутриматочные манипуляции (кюретаж, гистероскопия, гистеросальпингография и другие)
- перед ЭКО
- предстоящий амниоцентез или биопсия ворсин хориона
- сексуальное насилие
Мужчины анализ на хламидии могут сдавать при обследовании на ИППП при планировании беременности, для диагностики бесплодия.
У новорожденных исследование проводится в случае конъюнктивита или пневмонии.
Подготовка к анализам на хламидии
Соблюдение подготовительных рекомендаций позволяет получить более точные результаты анализов на хламидиоз.
Пациентам рекомендуют:
- не использовать системные антибиотики в течение минимум одной, а лучше – двух недель
- не применять местное лечение (кремы, вагинальные таблетки) в течение 3 дней
- отказаться от интимной жизни на 2 дня
- не мочиться за 3 часа до забора урогенитальных мазков
- женщинам 2 дня не пользоваться тампонами
У женщин берут анализ на хламидиоз по возможности в первой фазе цикла. Но нужно дождаться окончания менструальных кровотечений.
Как берут анализ на хламидии
На хламидии могут брать любой биоматериал, если используется ПЦР.
Это может быть:
- соскоб из уретры
- моча
- секрет простаты
- слюна
- мазок из заднего прохода
- отделяемое глаза
- орофарингеальный мазок
Чаще всего берут мазки из уретры.
У мужчин это делают так:
1. Помещают в мочеиспускательный канал тампон на глубину около 3 см.
2. Вращают его внутри мочеиспускательного канала.
3. Вынимают и помещают в пробирку.
Точно так же берут материал у женщин. Но у них вводится тампон до 1-2 см.
При наличии большого количества выделений их вначале удаляют, а только после этого берут мазок. После этого берется цервикальная проба.
Наружное отверстие канала шейки матки очищают от влагалищных выделений. Затем тампон вводится в канал. Его вращают несколько секунд. После этого вынимают и помещают в пробирку.
Влагалищные мазки берут без использования гинекологических зеркал.
Тампон вводят во влагалище и берут мазок с задней его стенки.
При получении анального мазка тампон вводят в прямую кишку на 2-3 см.
Материал врач должен собрать со всех стенок. При этом двигаются по направлению кнаружи и совершают круговые движения.
При заборе орофарингеальных мазков их берут из глотки и миндалин.
Из конъюнктивы берут гнойное отделяемое в случае его наличия. В ином случае необходимо отвести нижнее веко и провести тампоном по слизистой оболочке в направлении к медиальном углу глаза.
Больно ли сдавать мазки на хламидии
Сдавать мазки бывает больно мужчинам. Особенно если это соскоб для проведения ПЦР.
Но в нашей клинике применяется местное обезболивание. Благодаря нанесению специального геля происходит потеря чувствительности и той зоне, где будет браться мазок.
Мужчина ничего не чувствует во время процедуры. Анестезирующий гель также содержит антисептики.
Они необходимы для исключения риска занесения инфекции в урогенитальный тракт.
Посев на хламидии
Метод основан на выделении бактерий на культуре живых клеток.
Хламидии лишены возможности накапливать энергию в виде АТФ. Они являются энергетическими паразитами. Поэтому должны находиться только внутри клетки. На искусственных питательных средах эти бактерии не растут.
До восьмидесятых годов прошлого века посев был основным анализом на хламидиоз. Основное преимущество – близкая к 100% специфичность. Но сегодня метод применяется редко. Его не используют в рутинной практике.
Назначают в таких ситуациях:
1. Судебно-медицинская экспертиза.
2. Диагностика хламидиоза у лиц, подвергшихся сексуальному насилию.
3. Необходимость оценки чувствительности к антибиотикам.
Недостатком культуральной диагностики является недостаточно высокая чувствительность метода. Она составляет всего 50-70%. Это связано с тем, что хламидия – очень неустойчива во внешней среде. Она погибает при неправильной транспортировке или хранения материала. А также в случаях, если пациент использовал до забора биоматериала местные антибактериальные средства.
После получения материала его транспортируют при температуре не более 6 градусов. Затем помещают в лунки планшетов, содержащие слой клеток. Инкубация длится от 2 до 3 суток.
Затем полученный препарат обрабатывают флуоресцирующими антихламидийными антителами и просматривают в люминесцентный микроскоп. Результат считают положительным при обнаружении по крайней мере одного внутриклеточного хламидийного включения.
ПИФ на хламидии
Выявляются хламидийные антигены.
Препарат обрабатывают меченными флюоресцеином антителами. Они окрашивают цитоплазму в красный.
Под микроскопом хламидии визуализируются в виде зеленоватых включений. Они представляют собой элементарные тельца.
Преимущества ПИФ:
- исследование проводится быстро
- простой в исполнении
- высокая специфичность – 98%
Минус – маленькая чувствительность в сравнении с ПЦР. Она составляет лишь 55-75%.
Процесс диагностики проходит вручную, его нельзя автоматизировать. Исследоваться могут только мазки из уретры или цервикального канала.
Любой другой материал исследованию не подлежит. Потому что при малых концентрациях зараженных хламидиями клеток ПИФ даст ложноотрицательный результат.
Определение антигенов хламидий при помощи ИФА
ИФА-АГ основан на обнаружении антигенов путем их взаимодействия с моноклональными антителами.
Методы тестирования могут быть разными. Это прямое обнаружение антигена.
Дополнительно может использоваться ферментная аппликация, повышающая чувствительность ИФА-АГ.
Преимущества:
- процесс автоматизирован, можно исследовать много образцов за короткое время
- низкая стоимость
Недостатки:
- низкая специфичность
- чувствительность 20-85% (показатели зависят от применяемой тест-системы)
- могут использоваться только уретральные и цервикальные мазки
Часто ИФА-АГ дает ложноположительные результаты. Потому что определяются липополисахариды хламидий. Поэтому возможны перекрестные реакции с ЛПС других бактерий.
Анализ крови на хламидию
ИФА применяется для исследования крови на хламидиоз.
Определяются иммуноглобулины IgG, IgА, IgМ. Их наличие говорит о том, что организм человека контактировал с хламидиями.
Если обнаруживаются IgА и IgМ, то имеет место недавнее заражение. Это острая инфекция.
Если присутствуют IgG, это говорит о том, что заражение произошло не меньше 2-3 недель назад.
Если при этом не обнаруживаются иммуноглобулины А и М, это указывает на давность инфекции свыше 2 месяцев. Потому что эти антитела быстро пропадают из крови.
В то время как IgG сохраняются в ней длительное время. Они могут остаться даже после излечения хламидиоза.
ИФА – недостаточно точный метод диагностики. Поэтому он используется исключительно для скрининга, но не для подтверждения диагноза. Анализ применяют совместно с другими методиками. Проблема состоит в том, что у разных людей наблюдается разный иммунный ответ. У некоторых отмечается отсроченное реагирование. Антитела появляются значительно позже. У других они и вовсе не вырабатываются, несмотря на активную инфекцию.
Бывают случаи, когда анализ показывает положительный результат на хламидию, но на самом деле инфекция давно вылечена. В крови же выявляются антитела, которые сохранились после перенесенного заболевания.
ПЦР на хламидии
Лучшим методом диагностики хламидиоза остается ПЦР.
Достоинства метода:
- хорошая чувствительность и специфичность
- проведение анализа одновременно на несколько инфекций
- автоматизация процесса
- возможность исследовать цервикальные образцы, полученные для онкоцитологического скрининга
- можно использовать материал, взятый неинвазивно (моча, сперма и т.д.)
Есть и недостатки.
Из-за слишком большой чувствительности присутствует риск контаминации биоматериала. То есть, его загрязнения с попаданием других бактерий. Ложноотрицательные результаты при проведении ПЦР на хламидии встречаются редко.
Их причины:
- разрушение ДНК хламидий при неправильной транспортировке материала
- наличие мутантных штаммов хламидий (встречаются очень редко)
Причиной ложноположительного результата может быть загрязнение исследуемого материала.
Анализ на хламидии при беременности
Часто назначается обследование на хламидиоз на этапе планирования беременности. Или после её наступления на ранних сроках. Потому что хламидии опасны для плода.
Ещё на этапе планирования женщина может столкнуться с проблемами при попытке забеременеть. Потому что хламидия провоцирует рубцовые процессы в матке и фаллопиевых трубах. Она нарушает миграцию плодного яйца в маточную полость и препятствует его внедрению в эндометрий.
Если беременность наступила, то хламидия повышает риск бластопатии в первые 2 недели развития эмбриона. Результатом становится его внутриутробная гибель. До 12 недели возможны эмбриопатии. Они ведут к трубным порокам развития.
После 12 недели возможны такие осложнения беременности:
- фетопатии
- хориоамнионит
- преждевременные роды
Во время родов мать может заразить хламидиозом ребенка. У него может развиться воспаление глаз или респираторных органов.
У самой женщины возможен послеродовый эндометрит, вызванный хламидиями. Поэтому положительный анализ во время беременности – основание для проведения лечения.
Вовремя гестации не используют доксициклин и фторхинолоны.
Препаратом выбора остается джозамицин. Может использоваться азитромицин.
Что делать, если в анализе обнаружены хламидии
При положительном анализе на хламидию требуется лечение. Это патогенный микроорганизм.
В норме он должен отсутствовать в урогенитальном тракте. Поэтому при подтверждении диагноза проводится лечение.
Однако следует учитывать, что диагноз не может быть подтвержден с помощью ИФА. Потому что этот тест недостаточно специфичен.
Лечение можно начинать после установления наличия хламидиоза при проведении ПЦР или культурального исследования. Терапия проводится антибактериальными препаратами. Их выбирает врач.
При этом могут учитываться данные чувствительности к антибиотикам. Они будут у врача, если подтверждение диагноза осуществлялось культуральным методом.
Повторный анализ на хламидии
Лабораторные исследования проводят не только для первичной диагностики инфекций. Анализы на хламидиоз делают и для того, чтобы проверить, излечился ли человек.
После курса лечения диагностика проводится через месяц. Используют ПЦР.
Возможно также применение культурального метода спустя 14 дней после терапевтического курса.
По анализам можно понять, вылечился ли человек от хламидиоза. Если анализ отрицательный, то дальнейшая терапия ему не нужна. Если нет, проводится повторный курс. Препарат обычно меняют.
Предполагается, что если первый курс терапии не сработал, то у хламидии низкая чувствительность к использовавшемуся антибиотику.
Какой анализ сдавать на хламидии
Только врач решает, какие пациенту лучше сдавать анализы. Чаще всего выбор делается в пользу ПЦР. Потому что этот тест самый чувствительный среди всех.
К тому же, вместе с хламидиозом часто пациента обследуют и на другие инфекции. И ПЦР позволяет это сделать при однократном заборе клинического материала.
Реже назначается культуральная диагностика. Анализы крови на антитела применяются только для скрининга. Например, при подготовке к беременности.
Анализ крови на антитела к хламидиям положительный, а мазок ПЦР отрицательный
Бывают случаи, когда исследования дают противоречивые результаты. Например, мазок на хламидии положительный, а кровь отрицательная.
Или, наоборот, присутствуют антитела, но не выявляется хламидиоз методом ПЦР.
О чем это может говорить?
При положительной ПЦР и отрицательном ИФА причина расхождений, скорее всего, в отсроченном иммунном ответе. Антитела не успели выработаться на момент взятия мазка.
Вероятно, с инфицирования прошло слишком мало времени. Иммуноглобулины появятся позже. Хотя ПЦР уже позволят выявить хламидий в урогенитальном тракте. Даже если они содержатся в малом количестве.
В обратной ситуации, когда ПЦР не выявляет бактерий, а антитела есть, причины могут быть следующими:
1. Перенесенное в прошлом заболевание.
Антитела могли сохраниться, потому что они долго остаются в крови после излечения.
2. Мазок взят не из зоны воспаления.
Например, у женщины поражен только цервикальный канал.
А исследовался мазок из уретры. Или инфекция локализуется в прямой кишке, а мазок взят изо рта.
ПЦР может выявить хламидию, только если правильно взят клинический материал. То есть, именно из того места, где имеет место воспаление.
Что же касается ИФА, то он обнаруживает антитела в крови в любом случае, где бы ни находилась инфекция.
Где сдать анализ на хламидии
Для сдачи анализов на хламидии обращайтесь в нашу клинику.
Мы предоставляем такие услуги:
- осмотр пациента и оценка клинических симптомов
- безболезненное взятие мазков
- проведение самых точных анализов на хламидии
- расшифровка результатов
- при необходимости – назначение лечения
- выполнение контрольных анализов
В нашей клинике можно обследоваться на любые половые инфекции. А при их обнаружении – пролечиться у высококвалифицированных врачей.
Для сдачи анализа на хламидии обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.
Источник