Анализа крови на антитела вируса бешенства
Статус ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»)
ФГБУ «ВНИИЗЖ» с 2000 года является диагностическим центром РФ по бешенству (Приказ № 32 Департамента ветеринарии МСХ РФ от 19.10.2000 г.). В 2009 г ФГБУ «ВНИИЗЖ» успешно прошел квалификационный тест Французского управления по безопасности пищевых продуктов (AFSSA) в Нанси, Франция и с 2010 г. имеет международную аккредитацию на право определения антител к вирусу бешенства. Ссылка на международную аккредитацию ФГБУ «ВНИИЗЖ» находится на сайте Евросоюза по адресу https://ec.europa.eu/food/animal/liveanimals/pets/approval_en.htm#russia
Сведения для владельцев животных
Для разных стран могут быть разные условия ввоза животных, которые могут меняться, поэтому владельцам необходимо самим выяснять условия ввоза животных в страну на тематических ресурсах.
Метод исследования, сроки исполнения анализа
Титр антирабических вируснейтрализующих антител в сыворотке крови животного определяют в реакции нейтрализации на культуре клеток.
Длительность анализа c оформлением результатов исследования составляет 10 рабочих дней с момента получения подтверждения оплаты исследований.
Требования, предъявляемые к сывороткам крови животных
Для определения антител к вирусу бешенства у животных используют только сыворотку крови. Кровь берут в лицензированной ветеринарной клинике / лаборатории / СББЖ не ранее чем через 30 дней после последней антирабической вакцинации.
Для получения сыворотки крови проводят забор венозной крови при помощи инъекционной иглы в сухую чистую пластиковую пробирку в объеме не менее 2 мл. Антикоагулянты не добавлять! После забора крови ее выдерживают при 37°С в течение 30 минут для формирования сгустка крови. Далее осторожно отделяют сформировавшийся сгусток крови от стенок и помещают пробирку на 4°С на 30-60 минут. После этого пробу центрифугируют при 189 – 335 g (1500 – 2000 оборотов в минуту). По окончании центрифугирования осторожно, не захватывая осадок, отбирают надосадочную жидкость – сыворотку крови. Сыворотка крови должна быть прозрачная, с цветом от светлого до соломенно-желтого. Допускается легкая степень гемолиза (розоватый цвет). Необходимый объем сыворотки крови для исследования составляет 1,0 мл.
Не принимаются к исследованию цельная кровь или образцы с примесью форменных элементов крови, сыворотки крови с сильным гемолизом (темно-красного цвета), с осадком, мутные, с гнилостным запахом.
Пробирка для сыворотки крови должна быть пластиковая, герметично закрытая, крышка дополнительно герметизирована (парафильм, скотч) промаркирована устойчивым маркером и опечатана печатью ветеринарного учреждения, в котором проводили забор крови на исследование.
Правила транспортировки образцов сыворотки крови
В зависимости от длительности транспортировки пробы необходимо направлять в замороженном либо охлажденном состоянии в термоконтейнере. Пробирку с сывороткой максимально обезопасить от проливания образца или попадания в него влаги. Для примера: использовать 2 пакета со льдом, первый положить на дно контейнера, затем положить сыворотку в пластиковой, герметично закрытой, промаркированной пробирке и завернутую в целофановый пакет, второй пакет со льдом положить сверху. К контейнеру приложить (прикрепить, например скотчем) пакет документов. Все это упаковать в тару (пакет).
До отправки в ФГБУ «ВНИИЗЖ» сыворотку крови хранят при 4°С не более 2 дней. Если сыворотку крови необходимо хранить более длительный срок, то ее помещают при минус 20°С. Замороженную сыворотку крови для отправки в ФГБУ «ВНИИЗЖ» упаковывают, как описано выше. Не допускается замораживание и оттаивание сыворотки крови более 2 раз. Если отбирают пробы от нескольких животных, принадлежащих одному владельцу, то каждую пробу (пробирку) необходимо маркировать. Посылку нужно отправить на адрес ФГБУ «ВНИИЗЖ», дополнительно указать «Пункт приема патологических материалов».
Если Вы сами не можете привезти пробу, то ее можно доставить в ФГБУ «ВНИИЗЖ» любой экспресс-почтой, которая пересылает биологический материал, по России, например, SPSR, Pony-express, Major-express, Dimex, DHL (компания работает только с юридическими лицами) и т.п. Правила упаковки пробы такие же.
Контакты, адрес, схема проезда для доставки сыворотки курьерской службой здесь: https://www.arriah.ru/main/about/contacts
Сопроводительное письмо в ФГБУ «ВНИИЗЖ»
Вместе с образцами сывороток крови направляют сопроводительное письмо (Приложение 1) для исследований на наличие антител к вирусу бешенства, заверенное подписью ветеринарного врача и печатью ветеринарной клиники, где проводился отбор образцов.
К сопроводительному письму необходимо приложить:
1. копию ветеринарного паспорта животного (страница с данными о животном и владельце, страница с последней вакцинацией против бешенства), заверенную подписью ветврача и печатью ветеринарной клиники;
2. копию российского паспорта владельца для выписывания счета на оплату (данные о владельце, адрес проживания, электронный адрес);
3. копию заграничного паспорта владельца для оформления документов на вывоз.
Если в ветеринарном паспорте в графе «владелец» написан один человек, а вывозить будет другой человек, то от владельца нужна доверенность на имя того человека, который будет вывозить животное. Доверенность нужна на границе, в ветеринарном пункте. Правила ее оформления, пожалуйста, уточняйте в посольстве той страны, в которую Вы вывозите животное. Для постановки анализа данная доверенность не нужна.
Важный момент!
В ряде случаев у молодых и старых животных, если они прививались впервые, может оказаться, что уровень антител ниже требуемой нормы в 0,5 международных единиц/мл. Это может быть обусловлено индивидуальными, породными особенностями животного, его физиологическим состоянием на момент вакцинации, качеством вакцины. В этом случае, мы рекомендуем пройти повторную вакцинацию и провести повторный анализ. Поэтому планируйте проведение анализа не накануне вылета.
Прием материала для исследования
Сыворотку крови для исследования на антитела к вирусу бешенства передают в «Пункт приема патологических материалов» ФГБУ «ВНИИЗЖ». Время работы пункта с 8:00 до 15:30. Необходимо заключить договор на проведение исследования в коммерческом отделе ФГБУ «ВНИИЗЖ» (отдел реализации). Результаты Вам могут быть отправлены «Почтой России» или курьерской службой.
Получить консультацию по вопросам проведения исследования на антитела к вирусу бешенства можно в лаборатории бешенства и BSE по телефону 8 (4922) 26-19-88, 26-15-12, 26-17-65, добавочный 23-33, Чернышова Елена Владимировна, либо по эл. почте chernishova@arriah.ru. Всю необходимую информацию для заключения договора, получения счета и результата можно уточнить в отделе реализации по телефонам: (4922) 26-15-51, 26-15-25, Рябова Юлия, либо по эл. почте ryabova@arriah.ru.
Приложение 1
в ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных»
референтную лабораторию по бешенству и BSE
600901, г. Владимир, мкр. Юрьевец
Сопроводительное письмо
Направляется сыворотка крови для исследования на наличие антител к вирусу бешенства от:
вид животного_____________________________________________________,
порода____________________________________________________________,
пол________________________, дата рождения_________________________,
кличка____________________________________________________________
индивидуальный идентификационный номер (чип)_______________________
последняя дата вакцинации против бешенства «____» «___________» 20___г.
наименование вакцины______________________________________________
серия и номер______________________________________________________
дата взятия крови для анализа ________________________________________
ФИО владельца ____________________________________________________
Адрес, индекс владельца_____________________________________________
__________________________________________________________________
Телефон, E-mail владельца___________________________________________
Прилагаются следующие документы: 1. копия рос. паспорта владельца (стр. 2-3, 5-6);
2. копия загран. паспорта владельца (стр. с фотографией); 3. копия паспорта животного.
Подпись,
ФИО владельца ____________________________________________________
Подпись,
ФИО вет. врача ____________________________________________________
«____» «__________» 20____г. М.П.
название организации (вет. клиника / лаборатория / СББЖ), адрес, телефон
____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Источник
Тест на антитела к бешенству для животных
Собираетесь со своим питомцем на международную выставку животных? А, может быть, решили провести со своим четвероногим другом заграничный отпуск? Вам следует заранее задуматься о подготовке документации, разрешающей вывоз животных за границу.
Первым пунктом в списке документов будет наличие сертификата, подтверждающего эффективность вакцинации против бешенства. Список стран, для которых нужен сертификат (ссылка).
Для получения сертификата на вывоз животных за границу, необходимо сделать тест на титр антител к вирусу бешенства, который осуществляет антирабическая лаборатория компании ООО «НовиСтем».
Наша компания включена в список лабораторий, аккредитованных AFSSA, что дает право нашей организации выдавать данный сертификат.
Список аккредитованных лабораторий на сайте European Commission Вы можете посмотреть здесь.
В вашем городе нет клиники-партнера
(требуется отправлять пробу самостоятельно)
Обратиться в ветеринарную клинику Вашего города
Получить сыворотку крови животного
Отправить пробу (транспортной компанией или доставить самостоятельно в пункт приема)
Получить сертификат (14 рабочих дней обычный анализ, 3-6 рабочих дней — срочный)
- 1Требования к проведению теста
- Анализ проводят не ранее, чем через 30 дней после последней вакцинации от бешенства и не позднее, чем за 2 месяца до истечения срока действия вакцины;
- Животное должно быть чипировано в обязательном порядке;
- Возраст питомца должен быть не менее 4-х месяцев;
- Обязательно наличие ветеринарного паспорта международного образца (ФИО владельца и кличка животного должны быть заполнены на английском языке).
- Титр антител в сыворотке крови животного должен быть не менее 0.5 МЕ/мл. При более низком показателе титра антител к вирусу бешенства необходимо сделать повторную вакцинацию животному, после которой, не менее чем через 30 дней, повторить тест.
- 2Требования к пробе
- На исследование берется сыворотка (объем не менее 1 мл), которую получают после взятия крови в одноразовые пробирки без антикоагулянта;
- Сыворотка крови должна быть прозрачной, цвет от светлого до соломенно-желтого;
- Материал пробирки – пластик, с герметично закрывающейся крышкой;
- На пробирке должна быть указана кличка животного.
- 3Требования к сопроводительным документам
- Направление на исследование (на английском и русском языках, в напечатанном виде или от руки печатными буквами) заполняет врач (либо владелец животного) на основании ветеринарного паспорта;
- Копии всех заполненных страниц паспорта животного;
- Копию загранпаспорта владельца.
- 4Требования к хранению и транспортировке
- Максимальный срок хранения сыворотки при температуре +4°С…+8°С не более 2х суток;
- При необходимости хранения более 2х суток, сыворотку замораживают при температуре – 20°С;
- Сыворотка крови не должна подвергаться размораживанию при хранении и транспортировке.
- 5К исследованию НЕ ПРИНИМАЕТСЯ
- Цельная кровь или образцы с примесью форменных элементов крови;
- Сыворотка крови с сильным гемолизом (темно-красного цвета);
- Мутная сыворотка крови,с осадком и гнилостным запахом.
В вашем городе есть клиника-партнер
(доставку проб организует клиника-партнер)
Обратиться в клинику-партнер с питомцем
Сделать забор и получить сыворотку крови животного в клинике
Получить сертификат (14 рабочих дней обычный анализ, 3-6 рабочих дней — срочный)
- 1Требования к проведению теста
- Анализ проводят не ранее, чем через 30 дней после последней вакцинации от бешенства и не позднее, чем за 2 месяца до истечения срока действия вакцины;
- Животное должно быть чипировано в обязательном порядке;
- Возраст питомца должен быть не менее 4-х месяцев;
- Обязательно наличие ветеринарного паспорта международного образца.
- Титр антител в сыворотке крови животного должен быть не менее 0.5 МЕ/мл. При более низком показателе титра антител к вирусу бешенства необходимо сделать повторную вакцинацию животному, после которой, не менее чем через 30 дней, повторить тест.
Стоимость теста по определению титра антител к вирусу бешенства
Для г. Москва и г. Санкт-Петербург
При отправке в пункт приема проб (самостоятельно)
Обычный
5.500 руб./проба.
14 раб. дней
При обращении в организацию-партнер
Срочный
10.000 руб./проба.
3-6 раб. дней
Обычный
5.200 руб./проба.
14 раб. дней
Для регионов РФ (при отправке проб в г. Белгород)
При отправке в пункт приема проб (самостоятельно)
Срочный
10.000 руб./проба.
3-6 раб. дней
Обычный
5.000 руб./проба.
14 раб. дней
При обращении в организацию-партнер
Срочный
10.000 руб./проба.
3-6 раб. дней
Обычный
5.000 руб./проба.
14 раб. дней
Как получить сертификат?
Сертификат, подтверждающий эффективность вакцинации животного против вируса бешенства, Вы можете получить:
- Почтой России (в ближайшем по месту жительства отделении почты);
- Экспресс-доставка курьерской службой (за счет получателя);
- В пункте приема проб либо в клинике-партнере Вашего города.
Узнать результат исследования:
*Титр антител в сыворотке крови животного должен быть не менее 0.5 МЕ/мл. При более низком показателе титра антител к вирусу бешенства необходимо сделать повторную вакцинацию животному, после которой, не менее чем через 30 дней, повторить тест.
Источник
Бешенство – это крайне опасное вирусное заболевание, характеризующееся тяжелым поражением головного и спинного мозга. Оно часто заканчивается летальным исходом.
Бешенство встречается у всех млекопитающих и передается с биологическими жидкостями, в основном со слюной. Человек, как правило, заражается им в результате укуса инфицированного животного, чаще всего собаки, кошки, кролика, хорька, лисицы, волка, енота, летучей мыши и др.
На начальном этапе заболевание проявляется усиленным слюноотделением и боязнью воды, а также угнетенным состоянием, которое сменяется приступами агрессии и возбуждения.
Людям, входящим в группу риска развития бешенства, необходимо проходить вакцинацию.
К сожалению, появление симптомов заболевания неизбежно заканчивается летальным исходом, так что лечение предполагает лишь облегчение состояния больного.
Синонимы русские
Рабиес, гидрофобия, водобоязнь.
Синонимы английские
Rabies, Hydrophobia, Canine madness, Lyssa, Madnessan.
Симптомы
Обычно бешенство не вызывает никаких симптомов вплоть до последней стадии заболевания, когда лечение уже невозможно. Инкубационный период (от заражения до появления симптомов) составляет от 7 дней до 1 года, в среднем 20-90 дней. Признаки заболевания часто появляются за несколько дней до смерти больного:
- перед появлением основных симптомов на месте укуса может возникать припухлость, покраснение, зуд,
- лихорадка,
- головная боль, недомогание,
- потеря аппетита, тошнота, рвота, понос,
- беспокойство, нарушения сна,
- депрессия,
- повышенная чувствительность к слуховым, зрительным раздражителям,
- угнетенное состояние сознания, тревожность, апатия сменяются приступами возбуждения, беспокойства, агрессии. Приступы возбуждения при этом сопровождаются учащением дыхания и сердцебиения,
- расстройства дыхания и глотания,
- гидрофобия – боязнь воды (при разговоре о ней или при попытке попить больной испытывает ужас, у него возникают болезненные спазмы глотки и гортани),
- чрезмерное слюноотделение,
- галлюцинации,
- судороги,
- частичный паралич.
Общая информация о заболевании
Бешенство – это опасное вирусное заболевание, которое характеризуется тяжелым поражением центральной нервной системы (головного и спинного мозга). На начальном этапе оно протекает бессимптомно, симптомы появляются на поздней стадии, когда лечение уже невозможно.
Распространенность бешенства зависит от степени вакцинированности домашних животных. Наиболее распространено оно в сельской местности и чаще возникает в летний период.
Бешенство может поражать всех млекопитающих и передается с биологическими жидкостями, в основном со слюной. У человека заражение бешенством, как правило, происходит в результате укуса зараженным животным, попадания слюны зараженного животного на поврежденную кожу, слизистую оболочку рта, носа, глаз. Значительно реже бешенство передается при употреблении инфицированного мяса. От человека к человеку заболевание не переходит, крайне редко может встречаться заражение через пересадку органов от инфицированных доноров.
Чаще всего человек заражается от домашних животных – от собак, кошек, кроликов, лошадей, хорьков, реже – от диких – лисиц, енотовидных собак, волков, енотов, летучих мышей и др. Дикие животные, в свою очередь, заражают бешенством домашних.
После того как вирус попадает в организм через кожу или слизистую оболочку, он по нервным волокнам достигает спинного и головного мозга, где фиксируется и начинает делиться. Возникает энцефалит – воспаление головного мозга. Это приводит к повышению рефлекторной возбудимости и к развитию параличей. Затем вирус распространяется по нервным волокнам в обратном направлении, попадая в печень, почки, надпочечники, кожу, сердце, слюнные железы, скелет, вызывая нарушение деятельности нервной системы и нарушение функций различных органов.
Скорость распространения вируса зависит от расположения укуса (при укусах головы, рук она будет высокой), его глубины, от количества возбудителей, попавших в рану, от активности микроорганизмов, от иммунного статуса инфицированного человека.
Инкубационный период заболевания в среднем составляет 20-90 дней, однако может варьироваться от недели до одного года. При появлении симптомов летальный исход, как правило, неизбежен.
Смерть обычно наступает в результате поражения дыхательного центра, что влечет за собой остановку дыхания.
Кто в группе риска?
- Подвергшиеся укусам домашних или диких животных.
- Жители сельской местности, держащие дома животных, не вакцинированных от бешенства.
- Путешествующие по развивающимся странам (по Африке, Юго-Восточной Азии).
- Выезжающие на природу и контактирующие с дикими животными (лисицами, енотами, летучими мышами и др.)
- Охотники, звероловы.
- Служащие зоопарков, питомников, приютов для животных.
- Ветеринары.
- Работающие с вирусом бешенства в лаборатории.
Диагностика
Диагноз «бешенство» предполагается при наличии симптомов заболевания после укуса животного и подтверждается исследованием образца кожи с затылка, выделением вируса из слюны, слезной и спинномозговой жидкости.
Лабораторные исследования
- Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ). Уровень лейкоцитов может быть повышен.
- Общий анализ мочи. При бешенстве может отмечаться значительное увеличение числа лейкоцитов в моче при отсутствии бактериального воспаления.
- Исследование крови, направленное на определение антител к возбудителю бешенства. В ходе анализа с помощью специального иммунофлюоресцентного окрашивания выявляется наличие в крови молекул, вырабатываемых иммунной системой в ответ на попадание в организм вируса бешенства. Диагноз подтверждается при значительном (4 и более раза) повышении количества (титра) антител к вирусу бешенства у больных, которые не подвергались вакцинации.
- Определение возбудителя бешенства в биологических жидкостях и тканях организма.
- Исследование биоптатов (фрагментов тканей) кожи затылка, отпечатков роговицы. В полученный материал добавляются меченые антитела (молекулы, специфически связывающиеся с молекулой вируса бешенства). Под воздействием ультрафиолетового излучения комплекс из вирусов, «склеенных» с антителами, дает характерное зеленоватое свечение, что говорит о присутствии вируса бешенства во взятом материале. Данный анализ является наиболее достоверным в течение первой недели заболевания.
- Исследование генетического материала вируса методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Может использоваться слюна, кровь, спинномозговая жидкость, а также пораженные ткани. Достоверность результатов приближается к 100 %.
- Исследование тканей мозга в ходе электронной микроскопии. Производится взятие участка ткани мозга (биопсия), который затем подвергается специальному окрашиванию и изучается под электронным микроскопом, который позволяет достичь очень высокой степени увеличения. При этом в пораженных вирусом бешенства клетках нервной ткани выделяются специальные включения или обнаруживается сам вирус.
Другие методы исследования
- Электроэнцефалография (ЭЭГ) – это метод, оценивающий электрические потенциалы головного мозга.
Лечение
Специфического лечения бешенства не существует. Как правило, заболевание неизлечимо и приводит к летальному исходу.
При укусе дикого животного проводится промывание, тщательный осмотр на предмет инородных тел (например, сломанных зубов) и хирургическая обработка раны. Затем срочно вводятся иммуноглобулины – специальные клетки иммунной системы. Далее в течение двух недель проводится вакцинирование пациента (всего применяется 5 вакцин). Только этот способ позволяет предотвратить заболевание.
После укуса за домашним животным необходимо наблюдать в течение примерно 10 дней и при появлении симптомов бешенства срочно обратиться к врачу для принятия мер по иммунизации пациента. Источник бешенства – больное животное – необходимо изолировать.
Лечение бешенства направлено на облегчение его симптомов – снятие судорог, уменьшение боли. Для этого применяются, соответственно, противосудорожные, обезболивающие, успокаивающие лекарственные препараты.
Для уменьшения контакта с потенциальными раздражителями больной помещается в специальную палату.
Восполняются потери жидкости, минеральных веществ; проводится искусственная вентиляция легких.
Профилактика
- Людям, входящим в группу риска развития бешенства, следует обязательно пройти вакцинацию.
- После укуса дикого животного необходимо тщательно промыть рану водой с мылом и срочно обратиться к врачу, чтобы пройти курс иммунизации и вакцинации против бешенства.
- Профилактическая вакцинация домашних животных.
- Домашних животных следует держать дома и контролировать их при нахождении на улице. Для этого могут применяться клетки и закрытые загоны. Это поможет избежать заражения домашних животных от диких. Следует уделить особое внимание кроликам, морским свинкам, хомякам и другим мелким питомцам, так как они не могут быть вакцинированы против бешенства. Нередко домашнее животное заражается за городом, где у него есть возможность контактировать с дикими, например коты, собаки могут убегать в лес и контактировать там с инфицированными грызунами, лисицами.
- Следует соблюдать правила общения при встрече с бродячими животными – не трогать их, не гладить во избежание укуса.
- Необходимо избегать контакта с дикими животными (например, лисами, енотами). Здоровые дикие животные сами избегают людей, поэтому зверь, который не боится людей и не пытается убежать, должен вызвать подозрение.
- Поводом для обращения к врачу может стать и укус домашнего животного, например в случае если вы не знаете, может ли быть оно заражено бешенством, и тем более если животное в течение нескольких дней после укуса погибло.
Рекомендуемые анализы
- Общий анализ крови
- Общий анализ мочи
Литература
- Dan L. Longo, Dennis L. Kasper, J. Larry Jameson, Anthony S. Fauci, Harrison’s principles of internal medicine (18th ed.). New York: McGraw-Hill Medical Publishing Division, 2011.
- Manning SE, Rupprecht CE, Fishbein D, et al. Human rabies prevention—United States, 2008: recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices. MMWR Recomm Rep. May 23 2008;57:1-28.
- Hemachudha T. Human rabies: clinical aspects, pathogenesis, and potential therapy. Curr Top Microbiol Immunol. 1994;187:121-43.
- Gerald L. Mandell. Mandell, Douglas, and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases: Expert Consult Premium Edition. Churchill Livingstone, 2009.
Источник
