Анализ резус плода по крови матери в волгограде

Метод определения
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени.

Исследуемый материал
Плазма крови (ЭДТА)

Обнаружение гена RHD плода в крови беременной женщины с отрицательным резус-фактором применяют с целью прогнозирования риска развития резус-конфликта и гемолитической болезни плода и новорожденного.

Резус (Rh) – одна из важнейших систем эритроцитарных антигенов (наряду с системой АВ0), клинически значимая при оценке возможности возникновения резус-конфликта и риска развития гемолитической болезни плода и новорожденного.

В системе резус различают пять антигенов. Наиболее иммуногенным является антиген D, аминокислотная последовательность которого кодируется геном RHD. Присутствие антигена D на поверхности эритроцитов определяет положительный резус-фактор (Rh+). Доля резус-положительных лиц, носителей антигена D, в популяции составляет около 86%, а резус-отрицательных лиц (Rh-), не имеющих антигена D – около 14%.

Течение беременности резус-положительным плодом у резус-отрицательных женщин* часто осложняется развитием гемолитической болезни плода, связанной с трансплацентарным переносом эритроцитов плода в кровоток матери. 98% случаев гемолитической болезни новорожденных связаны с D-резус-антигеном. Попадая в кровь резус-отрицательной матери, он вызывает образование специфических антител, которые проникают через плаценту и разрушают эритроциты плода. Это влечет за собой развитие гемолитической болезни плода и новорожденного. При раннем проявлении резус-конфликт может послужить причиной самопроизвольного прерывания беременности или преждевременных родов. Сенсибилизация матери к D-антигену и риск развития резус-конфликта возрастают с каждой последующей беременностью резус-положительным плодом независимо от того, прервалась ли беременность или завершилась родоразрешением.

В настоящее время при выявлении резус-конфликта назначают следующий комплекс исследований:

измерение уровня специфичных антител матери к D-антигену плода;
получение плодного материала при хорион- и плацентобиопсии в ходе амнио- и кордоцентеза, что относится к инвазивным методам;
допплерометрическое исследование скорости кровотока в аорте и средней мозговой артерии плода.

Риск самопроизвольного прерывания беременности при применении инвазивных методов исследования составляет 2-3%, а отсутствие антител не гарантирует, что плод резус-отрицательный, т. к. даже при положительном резусе у плода антитела у матери могут не вырабатываться по причине целостности плаценты в момент обследования или слабого иммунного ответа. Ситуация осложняется тем, что резус-конфликт может возникнуть на любом сроке беременности. Кроме того, возможна сенсибилизация матери. Выявление ДНК плода (фетальной фракции, свободно циркулирующей ДНК, фетДНК) в крови матери обладает рядом преимуществ:

относится к неинвазивным для плода процедурам, не несет угрозы течению беременности, не вызывает осложнений;
исследование фетДНК возможно, начиная со срока 10 акушерских недель беременности;
точность результата 96 – 100%**
позволяет оценить целесообразность назначения терапии иммуноглобулином при отсутствии в крови беременной женщины анти-резусных антител на сроке 20 недель.

Аналитические показатели метода

Определяемые участки ДНК: 7-й и 10-й экзоны гена RHD. Диагностическая чувствительность: 92-100%. Диагностическая специфичность: 90-100%. Чувствительность метода составляет 150 копий геномной ДНК (суммарной ДНК матери и плода), что соответствует 400 копиям гена RHD плода в 1,0 мл исследуемого образца плазмы.

Ограничения метода

У 1% серологически резус-отрицательных женщин определяется наличие гена RHD. Это происходит в следующих случаях:

Ген RHD присутствует и генотипически резус-фактор будет положительным, но в результате мутаций D-антиген не синтезируется и серологическим методом определяется как отрицательный;
Ген RHD присутствует полностью или частично, и генотипически резус-фактор будет положительным; из-за мутаций синтезируется измененный D-антиген. Серологически это определяется или как слабый резус-фактор, или как нестабильно положительный.

По крови таких пациенток определить резус-фактор плода методом ПЦР невозможно. Чаще всего отрицательный резус-фактор обусловлен полным отсутствием гена RHD. В таких случаях применяют серологический метод вместе с ПЦР. Резус-фактор определяется как отрицательный при совпадении отрицательных результатов тестов.

* У беременных женщин, имеющих резус-положительную принадлежность, проблем совместимости по резус-фактору с плодом не возникает.

** Величина обусловлена состоянием плаценты, особенностью течения беременности и возрастает с увеличением срока беременности.

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

Противопоказания к проведению исследования:

Трансплантации органов и тканей в анамнезе у пациентки

Литература

Costa J.M., Giovangrandi Y., Ernault P., Lohmann L., Nataf V., El Halali N., Gautier E. Fetal RHD genotyping in maternal serum during the first trimester of pregnancy. British journal of haematology. 2002;119:255-260.
Finning K.M., Martin P.G., Soothill P.W., Avent N.D. Prediction of fetal D status from maternal plasma: introduction of a new noninvasive fetal RHD genotyping service. Transfusion. 2002;42:1079-1085.
Freeman K., Osipenko L., Clay D., Hyde J., Szczepura A. A Review of Evidence on Non-invasive Prenatal Diagnosis (NIPD): Tests for Fetal RHD Genotype. Workpackage 6, SAFE Network of Excellence Warwick Medical School, UK. 2006.
Wagner F.F., Frohmajer A., Flegel W.A. RHD positive haplotypes in D negative Europeans. BioMed Central genetics. 2001;15:10.
Минеева П.В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии. – СПб. 2004:188.
Инструкция по применению набора реагентов для выявления гена RHD плода в крови матери методом ПЦР в режиме реального времени Резус-фактор плода ООО «ДНК-технология». Регистрационное удостоверение № ФСР 2017/5310.

Источник

Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме реального времени.

Исследуемый материал
Плазма крови (ЭДТА)

Обнаружение фрагмента Y-хромосомы плода в крови беременной методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени, с целью определение пола плода.

В акушерско-гинекологической практике часто возникает необходимость определения генотипа плода на ранних сроках беременности. До недавнего времени материал для таких исследований получали инвазивно, при хорион- и плацентобиопсиии в ходе амнио- и кордоцентеза. Риск самопроизвольного прерывания беременности в этом случае составляет 2-3%. Открытие наличия фетальных ДНК и РНК в материнской крови послужило основой для развития неинвазивной пренатальной диагностики, которая в отличие от упоминаемых методов, не представляет угрозы течению беременности, т. к. материалом для исследования служит кровь матери. Фетальные клетки, т. е. клетки плода, обнаруживаются в крови женщины, их количество возрастает с увеличением срока беременности, зависит от состояния плаценты и особенностей течения беременности. Выяснение пола плода в первом – начале второго триместра может предотвратить случаи рождения больных детей в семьях с отягощенной наследственностью. Возможно прерывание беременности по медицинским показаниям при наличии у родителей носительства генов заболеваний, сцепленных с полом (например, гемофилии или прогрессирующей мышечной дистрофии Дюшенна/Беккера у матери). Вопрос о прерывании беременности и неблагоприятном прогнозе для жизни плода должен решаться индивидуально перинатальным консилиумом врачей.

Также врачу важно знать пол плода для принятия решения о возможности гормональной терапии беременной в случае наличия у пациентки гиперандрогении надпочечникового генеза (врожденная дисплазия коры надпочечников, ВДКН) или других маскулинизирующих эндокринных заболеваний.

Основным методом пренатального установления пола будущего ребенка является ультразвуковая диагностика, однако на ранних сроках беременности УЗИ не имеет необходимой точности и часто субъективно.

Лабораторный тест, выполняемый для определения пола плода, направлен на обнаружение в крови беременной мультикопийного фрагмента Y хромосомы плода* методом ПЦР в режиме реального времени, что с высокой достоверностью свидетельствует о беременности плодом мужского пола.

Метод, включающий исследование ДНК плода в крови матери, обладает рядом преимуществ:

относится к неинвазивным для плода процедурам, не несет угрозы течению беременности и не вызывает осложнений;
исследование фетДНК возможно проводить, начиная со срока 10 акушерских недель беременности;
точность результата составляет 96-100% и зависит от количества ДНК плода, обнаруживаемой в материнской плазме. **

Аналитические показатели метода

Определяемый участок ДНК – мультикопийный фрагмент Y-хромосомы.

Диагностическая чувствительность: 92-100%.

Диагностическая специфичность: 90-100%.

Чувствительность метода составляет 150 копий геномной ДНК (суммарной ДНК матери и плода) в 1,0 мл исследуемого образца плазмы крови.

*Пол определяется парой половых хромосом: у женщин – ХХ, у мужчин – XY.

Литература

Инструкция по применению набора реагентов для выявления фрагмента Y хромосомы плода в крови матери методом ПЦР в режиме реального времени. Пол плода. ДНК-технология». Регистрационное удостоверение № РЗН 2017/6242.
Избранные клинические рекомендации по неонатологии. Под ред. Е.Н. Байбариной, Д.Н. Дегтярева. — М.: Изд. «ГЕОТАР-Медиа». 2016. 237.
Ресурс для специалистов в области молекулярной биологии и клинической диагностики: https://www.dna-technology.ru/information..

Источник

Располагая штатом специалистов с 15-летним опытом в сфере исследования человеческого генома, а также передовым материально-техническим обеспечением для проведения лабораторных анализов, ДНК-центр «ИнЛаб Генетикс» предлагает сдать тест и установить резус фактор плода по крови матери. Генетическая экспертиза позволит установить группу крови эмбриона на ранних сроках беременности.

Зачем необходимо узнавать резус-фактор плода?

Определение резуса (Rh) необходимо для оценки возможности конфликта и риска развития гемолитического заболевания у новорожденного. Процедура подразумевает:

Инвазивное вмешательство, с забором материалов посредством биопсии;
Неинвазивный анализ на основе крови, содержащей генетическую информацию будущего ребенка.

При своевременном выявлении отклонений, врач сможет предпринять комплекс профилактических мер, способствующих нормальному развитию и дальнейшему рождению ребенка.

Неинвазивное определение резус-фактора ребенка в генетическом центре «INLABgenetics»

Работать с нами выгодно, ведь мы предлагаем:

Бесплатные консультации от экспертов;
Оперативность проведения анализов;
Высокую (до 99,99999%) точность исследований;
Документальное оформление полученных результатов;
Доступные цены.

Менеджеры «ИнЛаб Генетикс» готовы ответить каждому. Свяжитесь с нами по телефону, с помощью e-mail, либо посетите офис нашей лаборатории в Волгограде!

ПРЕИМУЩЕСТВА ЛАБОРАТОРИИ

Точность

Скорость

Конфиденциальность

Сертификация

Гарантия низкой цены

Для суда

Выезд по городу

КАК СДЕЛАТЬ АНАЛИЗ

Выберите удобную форму оформления заказа

Изучите рекомендации по подготовке

Сдайте необходимый биоматериал

Получите результаты анализов

Инструкция предназначена для самостоятельного забора ДНК образцов. Все материалы можно бесплатно получить лично или по почте у нашей лаборатории. Внимательно следуйте инструкции, соблюдая следующие ограничения:

— За час до забора не есть, не курить и не жевать жевательную резинку;

— Грудных детей не кормить за два часа до забора, промыт рот ребенка теплой водой.

Инструкция:

Вымойте тщательно руки с мылом или наденьте резиновые перчатки перед началом процедуры;
На одного участника теста возьмите один конверт для забора образцов. Заранее подпишите конверт, заполнив все поля на лицевой стороне конверта, чтобы не проткнуть ручкой конверт после взятия образцов;
На одного участника возьмите одну упаковку с зондами (2 зонда в упаковке);
Аккуратно откройте упаковку с зондами и возьмите один зонд за пластиковый конец;
Введите зонд в ротовую полость. Плотно прижмите зонд к внутренней стороне щеки и проведите зондом вверх — вниз по щеке 8-12 раз. При этом пальцами немного проворачивайте зонд;
Подсушите зонд 20-30 секунд на воздухе и уберите в заранее подписанный конверт для образцов;
Повторите пункты 5-6 со вторым зондом и второй щекой;
Запечатайте, используя специальную клейкую полосу конверт с образцами;
Передайте образцы в пункт приема ДНК образцов или отправьте почтой на адрес ДНК лаборатории, который можно увидеть в разделе Контакты.

Храните конверт с образцами при комнатной температуре в сухом месте. Образец может храниться до трех месяцев.

ВИДЫ НЕСТАНДАРТНЫХ ОБРАЗЦОВ ДЛЯ АНАЛИЗА

Женские гигиенические тампоны
Детские соски-пустышки
Костные останки, зубы
Срезанные ногти
Сперма на ткани
Презерватив
Жвачка

Питьевые трубочки-соломинки
Ушная сера на ватной палочке
Волосы с корешками
Носовой платок
Кровь на ткани
Зубные щетки
Окурки

Заказать ДНК тест в лаборатории «ИнЛаб Генетикс» можно:

Связавшись со специалистами по телефону 8 (800) 333-62-90
Написав нам через форму обратной связи
Придя лично в пункт приема образцов по адресу, указанному в разделе Контакты.

Оплатить ДНК тест можно после получения и проверти Ваших образцов специалистами лаборатории:

Наличными или банковской картой нашим специалистам в пункте приема образцов;
На нашем сайте в разделе Как оплатить ДНК тест;
В любом городе в отделении Сбербанка или любого другого Банка по квитанции;
Нашим выездным специалистам наличными или картой при передаче им образцов ДНК;
По расчетному счету для юридических лиц и ИП, с предоставлением всех лицензий, сертификатов и бухгалтерских документов.

Способы получения результата исследования смотрите в разделе Как получить заключение лаборатории.

О лаборатории

«InLab Genetics» является ведущей специализированной ДНК лабораторией в России. Основана специалистами с мировым именем, посвятивших генетике более 15 лет. Оснащение лаборатории высокоточным и современным оборудованием позволяет нам гарантировать точность и надежность всех проводимых исследований и со всей ответственностью утверждать, что качество – это основа любого теста, который мы делаем.

Нами проведено более 1 млн. ДНК анализов;
С нами сотрудничает более 500 партнеров по всей России;
Работаем со всеми судами Российской Федерации;
Нами постоянно проводятся автоматизация и совершенствование всех процессов;
Лаборатория имеет все необходимые лицензии и сертификаты.

(1 голос, в среднем: 5 из 5)

Источник

Метод определения
магнитизация эритроцитов, метод гель-фильтрации с использованием моноклональных антител. Автоматические анализаторы QWALYS (Diagast), IH-1000 (Bio-Rad).

Исследуемый материал
Цельная кровь (с ЭДТА)

Тест предназначен для определения резус-принадлежности потенциальных реципиентов (обследование перед госпитализацией) и беременных или планирующих беременность женщин.

Резус (Rh) – одна из важнейших систем эритроцитарных антигенов (наряду с системой АВ0), клинически значимая не только для безопасного переливания крови, но и при ведении беременности (при оценке возможности возникновения резус-конфликта и риска развития гемолитической болезни плода и новорожденного).

Антиген RhD является наиболее иммуногенным* из антигенов системы резус, его наличие на поверхности эритроцитов обуславливает положительную резус-принадлежность. Наличие этого структурного белка мембраны эритроцитов является генетически наследуемым признаком. В составе антигена RhD выделяют структурные единицы – эпитопы (в настоящий момент определены 36 структурных единиц).

Резус-отрицательные пациенты развивают иммунный ответ, сопровождаемый выработкой антирезусных антител, при переливании им резус-положительной крови. Наличие анти-резус антител ведет к разрушению эритроцитов, несущих резус-антиген, и к тяжелым пост-гемотрансфузионным реакциям при повторных переливаниях резус-положительной крови резус-отрицательным реципиентам.

Аналогичный иммунный ответ может развивать резус-отрицательная женщина при беременности резус-положительным плодом. Несмотря на то, что обычно при беременности кровь плода не смешивается с кровью матери, в некоторых ситуациях (не первая по счету беременность, патологические состояния, связанные с изменением проницаемости плаценты, сенсибилизация после предшествующего переливания резус-положительной крови) иммунная система матери вырабатывает антитела к антигенам эритроцитов плода. Антитела разрушают резус-положительные эритроциты, что приводит к различным клиническим проявлениям (ранней потере плода, хроническому невынашиванию беременности) и к гемолитической болезни плода и новорожденных**.

У беременных женщин, имеющих резус-положительную принадлежность, проблем совместимости по резус-фактору с ребенком не возникает.

*Иммуногенность ‒ потенциальная способность антигена вызывать иммунный ответ (образование антител) у лиц, не имеющих этого антигена.

**Гемолитическая болезнь плода и новорожденных ‒ патологическое состояние плода или новорожденного, сопровождаемое гемолитической желтухой, анемией, нарушением рефлексов. Обусловлено иммунологическим конфликтом между матерью и плодом из-за несовместимости по эритроцитарным антигенам и связано с разрушением эритроцитов плода под действием антиэритроцитарных антител, поступающих через плаценту из крови матери в кровь ребенка. В большинстве случаев гемолитическая болезнь новорожденных обусловлена конфликтом по D-антигену. Но следует учесть, что возникновение данной патологии может быть обусловлено реакциями по АВ0-антигенам, а также несовместимостью по другим антигенам системы резус (С, Е, с, d, e) или М-, N-, Kell-, Duffy-, Kidd-антигенам (см. тест №15RH Rh (C, E, c, e), Kell – фенотипирование).

Оценка резус-принадлежности при беременности или подготовке к беременности, а также контроль наличия аллоиммунных антиэритроцитарных антител, включая антитела к RhD-антигену (см. тест № 140 Аллоиммунные антитела), важны для правильного ведения беременности резус-отрицательных женщин. Риск развития гемолитической болезни плода и новорожденного при повторных беременностях можно предотвратить своевременным введением Rh-иммуноглобулина.

Наследование резус-фактора

Генотип индивида состоит из двух гаплотипов, полученных по наследству: один от отца, другой от матери. Каждый гаплотип может обуславливать наличие антигенной детерминаты (D) или ее отсутствие (d). Доминантным является наличие антигенной детерминанты, следовательно:

Генотип	Резус-принадлежность
DD	Rh-положительный
Dd	Rh-положительный
dd	Rh-отрицательный

Таким образом, у родителей с положительной резус-принадлежностью могут рождаться дети с отрицательной резус-принадлежностью:

В случае когда резус-принадлежность будущего ребенка требует определения, необходимо использовать генеалогический или генетический метод (см. тест №7207 Определение генотипа резус-фактора).

Проблемы в определении резус-принадлежности

Большая часть резус-положительных лиц экспрессируют достаточное количество антигенных детерминант, содержащих все эпитопы. В этом случае при определении резус-принадлежности, вне зависимости от используемых тест-систем, проблем не возникает, и резус-принадлежность четко определяется как положительная. Однако у ряда лиц (не более 1% в европейской популяции) при определении резус-принадлежности могут возникать сложности по следующим причинам:

Количество антигенных детерминант снижено в 3-10 раз, но структурно они не изменены. Такой вариант антигена называется слабым, D weak. Степень снижения количества детерминант разная, поэтому реакция агглютинации у таких пациентов может проходить с разной степенью выраженности.
Количество антигенных детерминант может быть обычным, но они структурно изменены. На детерминантах антигена D отсутствуют некоторые эпитопы (одновременно может отсутствовать до 5 эпитопов). Такой вариант антигена называется неполным, вариантным или частичным, D partial. У человека выявлено более 10 таких форм антигена D. Наиболее часто встречаемым является вариант антигена DVI (встречаемость не более 0,1% в европейской популяции).
Вариант резус-антигена D el характерен для азиатской популяции, встречаемость составляет до 30%. Проявляется очень низкой экспрессией антигена D на поверхности эритроцитов. Чаще всего обычными методами определяется как резус-отрицательный. С клинической точки зрения эти варианты важно отличать, особенно у женщин детородного возраста и при планировании переливания крови. При «неполном» варианте (D partial) возможно формирование антител к «полному» D антигену при переливании резус-положительной крови или гемокомпонентов. При «слабом» варианте (D weak) образование резус-антител маловероятно. Подход к выполнению исследования и к интерпретации результатов резус-принадлежности потенциальных реципиентов и потенциальных доноров отличается.

Вариант антигена	Интерпретация для реципиента	Интерпретация для донора
D weak	Резус-принадлежность положительная, но при гемотрансфузии рекомендуется использовать резус-отрицательные эритроциты	Резус-принадлежность положительная
D partial (в том числе DVI)	Резус-принадлежность отрицательная	Резус-принадлежность положительная
D el	Резус-принадлежность отрицательная	Резус-принадлежность положительная

Обратите внимание, что лаборатория ИНВИТРО исследует биоматериал только потенциальных реципиентов. Обследование потенциальных и действующих доноров требует применения принципиально других тест-систем и производится только на станциях переливания крови.

Литература

Минеева П.В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии. — СПб. 2004:188.
Оловникова Н.И., Николаева Т.Л., Митерев Г. Ю. Иммуногематологическое обследование больных перед трансфузией донорских эритроцитов: пути оптимизации и улучшения качества тестирования. Справочник заведующего КДЛ. — М: Изд. МЦФЭР. 2014;6:33-46.
Rizzo C. et al. Weak D and partial D: our experience in daily activity. Blood Transfusion. 2012;10:235-236.
Westhoff С.М. The Structure and Function of the Rh antigen Complex. Seminars in Hematology. 2007;44(1):42-50.

Источник